6,9-діаміно-2-етоксіакридинію 3,5-динітро-n-(4′-етоксифеніл)-антранілат, що проявляє антимікробну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність та потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніциліну натрієвої солі

6,9-діамшо-2-етоксіакридинію 3,5-динггро-г\І(4'-етоксифеніл)антранілат за формулою (21)2001117699 ( 2 2 ) 1 2 11 2001 ( 2 4 ) 1 5 08 2002 (46) 15 08 2002, Бюл № 8, 2002 р (72) Ісаєв Сергій Григорович, Зупанець Ігор Альбертович, Ярцева Леся Всеволодівна, Яременко Віталій Дмитрович, Свєчнікова Олена Миколаївна, Павлій Олександр Іванович, Ханін Вадим Андрійович, Дикий Ігор Леонідович, Місюрьова Світлана Вікторівна, Костіна Тетяна Анатоліївна (73) НАЦІОНАЛЬНА ФАРМАЦЕВТИЧНА АКАДЕМІЯ УКРАЇНИ Даний винахід відноситься до ХІМІКОфармацевтичної промисловості, зокрема, до синтезу нової хімічної сполуки за формулою NH2 і ,ОС)ЇІ; COO ^ H,N н яка проявляє антимікробну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність та потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніцілину натрієвої солі Пошук нових антимікробних, протизапальних, анальгетичних та діуретичних засобів є актуальною проблемою сучасної медицини В якості сполук порівняння використовували етакридину лактат, вольтарен, анальгін, ппотіазид (Машковский М Д Лекарственные средства - М Медицина, 1997 - Т 1 - С 161, 172, Т 2 - С 420) За прототип вибраний 2-етокси-6,9діаміноакридинію 2-М-(3'-нггрофеніл)антранілат (Деклараційний патент на винахід № 29 047 А (Україна) МПК С 07 Д219/08, А 61 К 31/435 Заявлено 23 12 97 Опубліковано 16 10 2000 Бюлетень №5-11) Головним недоліком препаратів порівняння є мононаправленість їх фармакологічної дм Так, головною дією етакридину лактату є антимікробна, CO O" який проявляє антимікробну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність, потенціює дію бензилпеніциліну натрієвої солі у суббактерюстатичніи КІЛЬКОСТІ вольтарену - протизапальна, анальгіну - анальгетична, ппотіазиду-діуретична Запропонована сполука 6,9-діамшо-2етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(4'етоксифеніл)антранілат перевищує антимікробну активність етакридину лактат та прототип у відношенні тест-мікроорганізмів, а також проявляє протизапальну, анальгетичну та діуретичну дію сильніше ніж препарати (вольтарен, анальгін, ппотіазид) та прототип, який анальгетичного та діуретичного ефекту не проявляє В основу винаходу поставлене завдання по створенню нової хімічної сполуки, що проявляє високу антимікробну, протизапальну, анальгетичну, діуретичну активність та потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніціліну натрієвої солі Речовина, яка заявляється, утворена взаємодією 6,9-діамшо-2-етоксиакридина та 3,5-динітрог\І-(4'-етоксифеніл)антраніловоі кислоти у етанольному середовищі 6,9-діамшо-2-етоксиакридиній 3,5-динггро-г\І(4'-етоксифеніл) антранілат жовтого кольору, розчинний у воді (1 80), етанолі, ДМСО, ДМФА Будова сполуки підтверджена за допомогою елементного аналізу та ІЧ-спектроскопм, а індивідуальність - методом тонкошарової хроматографії Винахід ілюструється наступним прикладом Приклад № 1_ 2,53г (0,01моль) 6,9-діамшо-2 00 (О 00 48689 етоксиакридину розчиняють при нагріванні у 15мл етанолу (розчин №1), 3,47г (0,01моль) 3,5динітро-г\І-(4'-етоксифеніл)антранілову кислоту розчиняють у Юмл етанолу (розчин №2) Потім розчин № 1 та № 2 змішують Осад, випав відфільтровують, промивають водою та сушать Вихід 5,64Г (94%), Тр03кп 143-146°С, М м 600,588 Бруто-формула C30H28N6O8 Розраховано С, % 60,00, N, % 14,06, Н, % 4,72 ІЧ-спектр у КВг, см 1 3384, 3288, 3224, 3000, 2976, 1636, 1560, 1512, 1460, 1436, 1376, 1320, 1256, 1236, 1168, 1128, 1112, 1064, 1044, 920, 816, 744 Rf 0,47 (етанол-хлороформ-гексан 2 11) Приклад № 2_ Визначення антимікробної активності проводилося за методом двократних серій них розведень у рідких харчових середовищах (Навашин С И , Фомина И П Рациональная антибиотикотерапия М Медицина, 1982 - С 40-42) Для культивування бактерій використовувався амінопептид, попередньо розведений у два рази дистильованою водою, рН 7,2 Мікробне навантаження склало 105-10б мікробних тіл в 1мл середовища Для випробування використовувалися 8 штамів мікроорганізмів Результати вивчення антимікробної активності та токсичності 6,9-діамшо-2етоксиакридинію 3,5-динітро-г\І-(4'етоксифеніл)антранілату (сполука № 1), 6,9діаміано-2-етоксиакридинію 2-N-(3'нітрофеніл)антранілату - прототипу та етакридину лактату описані у таблиці 1 2 3i5 3, 5 3 9 3,9 3 3£ 3 , 0 3 9 3, 9 31 15,6 31,2 со со №1 Прототип Етакридину лактат 1 3JD 0 3 9 to Сполука CO Таблиця 1 Бактеріостатична активність і токсичність сполуки № 1, прототипу та етакридину лактату МПК (м кг/мл)* 4 5 4J3 4,0 15,6 5JD5, 0 — 62,5 125 * - Штами мікроорганізмів 1 Staphylococcus aureus, шт АТСС 25923, 2 Echenchia coll, шт АТСС 7241, 3 Bacfflus subtihs, шт АТСС 25922, 4 Pseudomonas aerugmosa, шт АТСС 27853, 5 Salmonella choleraesuis, 6 Salmonella thyphimunum, 7 Salmonella thyphisuis, 8 Salmonella dublm Як видно за даними таблиці 1, сполука №1 активніше етакридину лактату у відношенні до стафілококу та сінної палички у 10,4 рази, у відношенні до кишкової палички у 6,24 рази, у відношенні до палички сине-зеленого гною у 15,62 рази та у відношенні до мікроорганізмів роду Salmonella у 8-16 разів Сполука № 1 проявляє також бакте 6 31,2 — 7 15,6 — 8 15,6 — 250 125 250 >4500 4300 21* рицидний ефект у відношенні золотистого стафілококу, сінної, кишкової, синьогнійної паличок (МБК = 3,0-4,5) Сполука № 1 також перевищує подібні характеристики прототипу Приклад № 3 Вивчення протизапальної активності проводилося на моделі каррагеншового набряку (Яковлева Л В , Зупанец И А Использование модели каррагенинового отека у мышей при поиске противовоспалительных средств // Деп в УкрНИИНТИ 07 07 87 -№1908 - Ук 87) Результати вивчення протизапальної активності та токсичності 6,9-діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(4'-етоксифеніл)антранілату (сполука № 1), прототипу та вольтарену наведені в таблиці 2 Протизапальна активність сполуки № 1, прототипу та вольтарену Сполука DE50, МТ/КГ DI_50, МТ/КГ Сполука № 1 Прототип Вольтарен 7,0 >4700 9,0 4300 8,0 360 Як видно за даними таблиці 2, сполука № 1 має виражену протизапальну дію, а по широті терапевтичного ефекту перевищує вольтарен у 14,9 рази, а прототип у 1,4 рази Приклад №4 Вивчення анальгетичної активності 6,9-діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-г\І(4'-етоксифеніл)антранілату (сполука №1) проводилося за методом «оцтових корчей» у білих лабораторних щурів масою 150-180 г Корчі були DI_50, МТ/КГ Терапевтичний індекс (ТІ) 671,4 477,8 45 Таблиця 2 Відносний ТІ ПО вольтарену 14,9 10,62 1 викликані внутрішньобрюшиним введенням 0,75% оцтової кислоти у дозі 1мл на 100г маси тіла тварини Підрахунок КІЛЬКОСТІ корчей проводили через 15 хвилин після введення розчину оцтової кислоти протягом ЗО хвилин Результати вивчення анальгетичної активності та токсичності сполуки № 1 у порівнянні з прототипом та анальгіном наведені в таблиці З 48689 Таблиця З Анальгетична активність та токсичність сполуки № 1, прототипу та анальгіну Сполука DE50, мт/кг Сполука № 1 Прототип Анальгін 24,3 55 Терапевтичний індекс (ТІ) >4700 220,66 Анальгетичну активність не виявляє 1197 21,8 DI_50, МТ/КГ Відносний ТІ ПО анальгіну 10,12 1 Як видно за даними таблиці 3, сполука № 1 по ширині терапевтичної дії перевищує анальгін в 10,12 рази Прототип подібну дію не виявляє зовсім Приклад №5 Вивчення діуретичної активності проводили за методою Е Б Берхіна (Методы изучения действия новых химических соединений на функцию почек / Хим -фармац журн - 1 9 7 7 - Т 11, № 5 - С 3-11) на білих щурах лінії Вістар масою 120-160г Кожна серія складала з 7 тварин Сполуки вводили у дозі 50мг/кг у водному розчині із розрахунку Змл води на кожні 100г ваги тварини Сечу збирали кожну годину протягом 4 годин Результати вивчення діуретичної дії сполуки № 1, прототипу та ппотіазиду приведені у таблиці 4 Таблиця 4 Діуретична активність сполуки № 1, прототипу та ппотіазиду Сполука Сполука №1 Прототип Гіпотіазид Діуретична активність, в % к контролю 230 Діуретичну активність не виявляє 200 Як видно за даними таблиці 4, сполука № 1 за діуретичною дією перевищує гіпотіазид на 30%, а прототип подібну дію не виявляє Приклад №6_ Визначення потенціюючої дії 6,9діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-данггро-М-(4'етоксифеніл)антранілату (сполука № 1) проводилося у суббактерюстатичній концентрації у якості мікродобавки до бензилпеніціліну натрієвої солі Тест-моделлю були серійні двократні розведення в рідкому живильному середовищі Як розчинник використовувалася вода для ІН'ЄКЦІЙ Результати описаного мікробіологічного дослідження наведені в таблиці 5 Таблиця 5 Потенціююча дія сполуки №1 у відношенні до бензилпеніціліну натрієвої солі Штам мікроорганізмів, МПк (мкг/мл) — .і і Синьогнійна паличка Золотистий стафілокок Сполука Бензилпеніціліну натрієва сіль (БПН) (БПН) + сполука № 1 0,9 0,50 Як видно за даними таблиці 5, сполука № 1 в суббактерюстатичній концентрації підвищує активність антибіотика у відношенні до золотистого стафілококу в 1,8 рази, у відношенні до синьогнійноі палички в 5,2 рази Таким чином 6,9-діамшо-2-етоксиакридинію 3,5-динггро-М-(4'-етокси-феніл)антранілат проявляє комплексну біологічну дію (антимікробну, про 15,6 3,0 тизапальну, анальгетичну, діуретичну), за активністю перевищує етакридину лактат, вольтарен, анальгін, гіпотіазид та виявляє потенціюючу дію у відношенні до бензилпеніціліну натрієвої солі Заявлена сполука може знайти застосування у медичній практиці при лікування інфекційних та запальних процесів різної етіології, а також середньої сили больових синдромів ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71