Спосіб контролю ефективності призначення пентоксифіліну

1 Спосіб контролю ефективності призначення пентоксифіліну, який полягає у дослідженні біологічного матеріалу і визначенні показників перекисного окислення, який відрізняється тим, що як біологічний матеріал використовують сироватку крові людей або гомогенати тканин щурів, як контрольні показники перекисного окислення визначають рівень загальних пдроперекисів та основ Шифа, останні визначають окремо в нейтральних ліпідах та фосфоліпідах, судять про ефективність призначення пентоксифіліну за підвищеними рівнями контрольних показників у біологічному матеріалі, про неефективність призначення пентоксифіліну судять по відсутності відмінностей від контролю вказаних показників у біологічному матеріалі 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що у щурів про ефективність призначення пентоксифіліну судять за підвищеними рівнями загальних пдроперекисів в печінці, нирках, легенях, основ Шифа - в нейтральних ліпідах серця та нирок і в фосфоліпідах легень, про неефективність призначення пентоксифіліну судять по відсутності відмінностей від контролю загальних пдроперекисів у серці, основ Шифа в нейтральних ліпідах легень, в фосфоліпідах серця та нирок Винахід відноситься до галузі біохімії та може бути використаний в експериментальній біологи, медицині та ветеринари, зокрема для контролю ефективності призначення пентоксифіліну, крім того, у людей для профілактики розвитку стресової реакції організму, виникнення ускладнень при захворюваннях внутрішніх органів сумісного характеру Відомий спосіб застосування пентоксифіліну для захисту від респіраторного вибуху у пацієнтів зі стабільною стенокардією (Kowalski J , Kosmider M.PasnikJ et al Pettoxifylhne decreases neutrophil respiratory bursts in patients with stable angina // Fundam Clm Pharmacol — 1999 — 13, N 2 — P 237 - 247) - прототип, який полягає у досліджені крові з коронарного синусу та периферичних вен людей, визначенні рівня фактору некрозу пухлин та інтенсивності хемілюмінісценцп (показника підвищеного рівня продуктів перекисного окислення), оцінюють ефективність впливу пентоксифіліну за зниженням вказаних показників В основу винаходу поставлена задача вибору об'єктивних і специфічних критеріїв контролю ефективності призначення пентоксифіліну за умов сумісної патології внутрішніх органів Ця задача вирішується тим, що у способі контролю ефективності призначення пентоксифіліну досліджують біологічний матеріал і визначають показники перекисного окислення ВІДМІННИМИ ознаками згідно винаходу є - у якості біологічного матеріалу використовують сироватку крові людей або гомогенати тканин щурів, - у якості контрольних показників перекисного окислення визначають рівень загальних пдроперекисів (ЗГП) та основ Шифа (ОШ), останні визначають окремо в нейтральних ліпідах (НЛ) та фосфоліпідах (ФЛ), - судять про ефективність призначення пентоксифіліну за підвищеними рівнями контрольних показників у біологічному матеріалі, - про неефективність призначення пентоксифіліну судять по відсутності відмінностей від контролю вказаних показників у біологічному матеріалі Додатковими ознаками винаходу є те, що - у щурів про ефективність призначення пентоксифіліну судять за підвищеними рівнями ЗГП в Недоліком відомого рішення є те, що цей спосіб не передбачає контроль ефективності призначення пентоксифіліну та не розрахований для використання за умов сумісної патології внутрішніх органів о ю 52021 печінці, нирках, легенях, ОШ в НЛ серця та нирок і в дозі 15мг на 100г ваги за умов активації окислюв ФЛ легень, вального стресу призводить до покрашення показників ПОЛ (зниження до контрольного рівня), а за - про неефективність призначення пентоксиумов відсутності їх відмінностей від контролю -до філіну судять по відсутності відмінностей від контпогіршення (підвищення порівняно з контролем) ролю ЗГП у серці, ОШ в НЛ легень, в ФЛ серця та нирок Відтвореність - ступінь вірогідності відмінностей не перевищує 5% Вибір у якості критеріїв контролю ефективності призначення пентоксифіліну показників перекисноЗапропонований спосіб здійснюють у такій ПОго окислення ЛІПІДІВ (ПОЛ) обумовлено тим, що СЛІДОВНОСТІ активність ПОЛ є неспецифічним показником 1 Досліджують біологічний матеріал, напристресової реакції, наслідком якого є розвиток паклад сироватку крові людини або гомогенати петологічних процесів Активація ПОЛ у концепції чінки, серця, легень та нирок щурів і визначають Ф 3 Меєрсона розглядається як чинник ушкопоказники перешеного окислення дження, деструкції бюмембран і загибелі клітин за Згідно винаходу у якості контрольних показниумов тривалого стресу ків перекисного окислення визначають рівень ЗШ та ОШ, останні визначають окремо в НЛ та ФЛ у В усіх без винятку біологічних системах існулюдей в сироватці крові, у щурів - в тканинах ють об'єктивні передумови розвитку неферментативних реакцій вільно-радикального окислення у Визначення рівнів цих показників ПОЛ провозв'язку з присутністю в їхній структурі органічних дять відомим методом, наприклад спектрофотосполук, що легко окислюються Вони акумулюють метричним у своїх молекулах запас потенційної енергії При - ЗГП за методом Захарія Е А и др (див кн цьому ареною розгортання реакцій ПОЛ є область "Лабораторная диагностика ишемической болезни контакту кисню з ліпідами мембран, останнє винисердца" — 1989 — 192 с), який засновано на кає постійно в ході життя, завдяки присутності кисможливості пдропероксидів вступати в реакцію з ню у біологічних рідинах тюбарбитуровою кислотою Вибір у якості одного з критеріїв контролю - ОШ за методом, принцип якого полягає в виефективності призначення пентоксифіліну ЗГП значенні вмісту ОШ в гептановій та ізопропанольобумовлено тим, що пдроперекиси, які утворюній фазах екстрактів тканин за інтенсивністю їх ються внаслідок ПОЛ, входять до складу фосфопоглинання при довжині хвиль 400нм При викориЛІПІДІВ, тригліцеридів, ефірів холестерину ліпопростанні цієї методики вдається окремо отримати теїдів низької густини (ЛПНГ) Відомо також, що фракції нейтральних ЛІПІДІВ, ЯКІ екстрагують в геппдроперекиси можуть реагувати з ІЧНг-групою танову фазу, та фосфоліпідів, що опиняються в апоВ білків Це призводить до зниження заряду ізопропанолі (описано Львовскою Е И , ВолчегорЛПНГ, спорідненості до рецепторів фібробластів ским И А , Шемяковым С Е , Лифшицем Р И // ВоРозпад пдроперекисей жирних кислот при дії ІОНІВ просы мед хим —1991 — 37, №1 — С 92-93) 2-х валентних металів до моноальдепдів веде до 2 Судять про ефективність призначення пензбільшення поглинання їх макрофагами та сприяє токсифіліну за підвищеними рівнями контрольних зниженню зв'язування з В/Е-рецепторами, що є показників в сироватці крові людей, а у щурів за фактором розвитку патологічного стану організму рівнями ЗГП в печінці, нирках, легенях, ОШ в НЛ серця та нирок і в ФЛ легень Продукти ПОЛ, у свою чергу, можуть утворювати продукти біологічно інертні, наприклад - не3 Судять про неефективність призначення насичені альдегіди Ці альдегіди при взаємодії з пентоксифіліну за відсутністю відмінностей вказааміногрупами утворюють шифові основи У цьому них показників в порівнянні з контролем, а саме у процесі виявляється захисна реакція на локальне людей за рівнями ЗГП, ОШ в НЛ і ФЛ сироватки утворення надлишку альдегідів Крім того, рівень крові, у щурів - ЗГП у серці, ОШ в НЛ легень, в ФЛ кінцевих продуктів ПОЛ є показником довгострокосерця та нирок вої напруги окислювального-відновленого баланМожливість здійснення запропонованого спосу, тобто розвитку окислювального стресу собу підтверджується прикладами Таким чином, показники, які використовуються Приклад 1 Спосіб контролю ефективності для контролю ефективності призначення пентокпризначення пентоксифіліну у щурів за умов окиссифіліну, можуть дати уявлення про розвиток окилювального стресу, що викликано введенням хлослювального стресу та порушень функціонування риду ртуті внутрішніх органів і відображають різни ланки одОдній групі тварин вводили хлорид ртуті ного процесу, що надає можливість достовірно (НдСЬ) у дозі 0,7мг на 100г ваги тіла свідчити про стан біологічної системи Згідно винаходу другій групі за 2 год до ін'єкції Дослідження по запропонованому способу, які хлориду ртуті вводили пентоксифілін у дозі 15мг були проведені на експериментальних тваринах, а на 100г ваги тіла саме на щурах-самцях лінії Вістар в Інституті теКонтрольній групі тварин вводили фізіологічрапії АМН України показали, що окислювальний ний розчин у ВІДПОВІДНІЙ дозі стрес, який викликано дією хлориду ртуті призвоЩурів декапітували через 2 год після ін'єкції дить до активації показників ПОЛ, а саме ЗГП пехлориду ртуті Печінку перфузували охолодженим чінки, легень та нирок, ОШ в НЛ серця та нирок і в фізіологічним розчином Тканини легень, серця, ФЛ легень Введення хлориду ртуті не викликало печінки і нирок (500мг) гомогенизировали в мл підвищення рівнів таких показників ПОЛ, як ОШ в фізіологічного розчину НЛ легень та в ФЛ серця і нирок, ЗГП в серці Досліджували показники ПОЛ (рівні ЗГП, ОШ в Встановлено, що введення пентоксифіліну щурам НЛ і ФЛ) відомими спектрофотометричними мето 52021 дами Результати дослідження - за умов введення хлориду ртуті рівень ЗГП становить у легенях - 78,74 ± 3,78мкмоль/г тканини (12,47 ± 1,13 у контролі) - вище порівняно з контролем, у печінці - 42,29 ± 1,20мкмоль/г тканини (14,29 ± 1,25 у контролі) - вище порівняно з контролем, у нирках - 48,63 ± 2,69мкмоль/г тканини (15,02 ± 1,62 у контролі) - вище порівняно з контролем у серці - 16,53 ± 1,43мкмоль/г тканини (13,86 ± 1,41 у контролі) - не змінюється порівняно з контролем, рівень ОШ становить у НЛ серця - 5,82 ± 0,24ДЕ/г тканини (3,25 ± 0,16ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем, у НЛ нирок - 6,35 ± 0,57ДЕ/г тканини (4,29 ± 0,27ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем, у НЛ легень - 5,05 ± 0,15ДЕ/г тканини (4,97 ± 0,19ДЕ/г у контролі) - не змінюється порівняно з контролем, у ФЛ легень - 3,97 ± 0,31ДЕ/г тканини (2,05 ± 0,19ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем, у ФЛ серця - 1,38 ± 0,30ДЕ/г тканини (1,07 ± О.ОЗДЕ/г у контролі) - не змінюється порівняно з контролем, у ФЛ нирок - 2,87 ± 0,36ДЕ/г тканини (2,50 ± 0,25ДЕ/г у контролі) - не змінюється порівняно з контролем - за умов введення пентоксифіліну при активації окислювальних процесів рівень ЗГП становить у серці - 23,30 ± 2,04мкмоль/г тканини (13,86 ± 1,41 у контролі) - не змінюється порівняно з контролем, у легенях - 11,72 ± 1,09мкмоль/г тканини (12,47 ± 1,13 у контролі) - вище порівняно з контролем, у печінці - 25,04 ± 0,81мкмоль/г тканини (14,29 ± 1,25 у контролі) - вище порівняно з контролем, у нирках - 48,63 ± 2,69мкмоль/г тканини (22,95 ± 2,37 у контролі) - вище порівняно з контролем рівень ОШ становить у НЛ серця - 4,39 ± 0,40ДЕ/г тканини (3,25 ± 0,16ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем, у НЛ нирок - 4,93 ± 0,30ДЕ/г тканини (4,29 ± 0,27ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем, у ФЛ легень - 1,35 ± 0,13ДЕ/г тканини (2,05 ± 0,19ДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем у НЛ легень - 6,85 ± 0,30ДЕ/г тканини (4,97 ± 0,19ДЕ/г у контролі) - не змінюється порівняно з контролем, у ФЛ серця - 4,67 ± 0,41 ДЕ/г тканини (1,07 ± О.ОЗДЕ/г у контролі)) - не змінюється порівняно з контролем, у ФЛ нирок - 3,91 ± 0,41ДЕ/г тканини (2,50 ± 0,25ДЕ/г у контролі)) - не змінюється порівняно з контролем Результати дослідження дозволяють визначити одночасно ефективність і неефективність призначення пентоксифіліну за умов введення хлориду ртуті Висновок Судять про ефективність призначення пентоксифіліну за умов введення хлориду ртуті по під вищенню рівня ЗГП в печінці, нирках, легенях, ОШ в НЛ серця та нирок і в ФЛ легень у порівнянні з контролем Судять про неефективність призначення пентоксифіліну за умов введення хлориду ртуті по відсутності змін ЗГП у серці, ОШ в НЛ легень, в ФЛ серця та нирок у порівнянні з контролем Крім того, можна прогнозувати розвиток патології серця, легень, нирок Для повної нормалізації показників перекисного окислення призначають додаткове введення пентоксифіліну або рекомендують ІНШІ дозування Приклад 2 Спосіб контролю призначення ефективності пентоксифіліну у людей з серцевосудинною патологією Хвора К , 54 роки, історія хвороби № 452 Потрапила до КЛІНІКИ Інституту терапії АМН України з діагнозом ІХС Стабільна стенокардія, II функціональний клас Атеросклероз аорті, коронарних артерій Атеросклеротичний кардіосклероз ГХ II стадії Скарги на періодичний біль за грудиною давлючого характеру, з іррадіацією в ліву руку та міжлопаткову зону, відчуття нехватки повітря при фізичному навантаженні, головний біль, головокружіння Анамнез Вважає себе хворою ГХ 5 років, вперше - на фоні підвищеного AT до 180/100мм рт ст Лікувалась у стаціонарі та амбулаторно Об'єктивно Загальний стан задовільний Тони серця глухі, ритмічні, акцент 2-го тону на аорті, систолічний шум на верхівці AT 180/100мм рт ст , частота серцевих скорочень (ЧСС) - 86 на хв За запропонованим способом до лікування проводять біохімічне дослідження сироватки крові, яке включає визначення показників ПОЛ (рівнів ЗГП, ОШ в НЛ і ФЛ) відомими спектрофотометричними методами Результати дослідження Рівень ЗГП - 2,30 ± 0,24нмоль/мг білка (1,86 ± 0,16 у контролі) - вище порівняно з контролем, Рівень ОШ в НЛ - 0,035 ± 0,001 ДЕ/мл крові (0,025 ± 0,001 ДЕ/мл крові у контролі) - вище порівняно з контролем, Рівень ОШ в ФЛ - 0,055 ± 0,002ДЕ/мл крові (0,065 ± 0,001 бДЕ/г у контролі) - вище порівняно з контролем Висновок Судять про ефективність призначення пентоксифіліну за підвищенням рівня ЗГП, ОШ в НЛ і в ФЛ у порівнянні з контролем Приклад 3 Спосіб контролю ефективності призначення пентоксифіліну у людей з сумісною патологією серця та печінки Хворий В , 67 роки, історія хвороби № 2267 Потрапив до КЛІНІКИ Інституту терапії АМН України з діагнозом ІХС Стабільна стенокардія, 111-й функціональний клас Атеросклероз аорти, коронарних артерій, судин головного мозку Атеросклеротичний кардіосклероз ГХ II стадії Ускладнення рецидив серцевої астми Цироз печінки Скарги на періодичний біль за грудиною, задуху при незначному фізичному навантаженні, у положенні лежачи, набряки нижніх КІНЦІВОК, слабкість Анамнез Вважає себе хворим ГХ ЗО років з AT 52021 максимально 220/120мм рт ст Лікувався у стаціонарі Об'єктивно Загальний стан тяжкий Тони серця аритмічні, тони приглушені, акцент 2 тону на аорті AT 150/110мм рт ст , ЧСС - 100 на хв Печінка на 6см виступає з-під краю реберної дуги За запропонованим способом до лікування проводять біохімічне дослідження сироватки крові, яке включає визначення показників ПОЛ (рівні ЗГП, ОШ в НЛ і ФЛ) відомими спектрофотометричними методами Результати дослідження Рівень ЗГП - 1,80 ± 0,14нмоль/мг білка (1,86 ± 0,16 у контролі) - не відрізняється від контролю Рівень ОШ в НЛ - 0,026 ± 0,001 ДЕ/мл крові (0,025 ± 0,001 ДЕ/мл крові у контролі) - не відрізняється в порівнянні з контролем, Рівень ОШ в ФЛ - 0,066 ± 0,002ДЕ/мл крові (0,065 ± 0,001 бДЕ/г у контролі) - не відрізняється в порівнянні з контролем Висновок Судять про неефективність призначення пентоксифіліну по відсутності змін ЗГП, ОШ в НЛ, в ФЛ у порівнянні з контролем, що може бути обумовлено наявністю сумісної патології серця та печінки Приклад 4 Спосіб контролю призначення пентоксифіліну у людей з сумісною патологією серця та нирок Хворий Ц , 60 роки, історія хвороби № 365 Потрапив до КЛІНІКИ Інституту терапії АМН України з діагнозом ІХС Стабільна стенокардія, III функціональний клас Атеросклеротичний та постінфарктний кардіосклероз ГХ III стадії Дисметаболічна нефропатія Скарги на періодичний біль за грудиною давлючого характеру з іррадіацією в ліву руку та міжлопаткову зону, відчуття нехватки повітря при фізичному навантаженні, головний біль, 8 головокружіння Анамнез Вважає себе хворим ГХ 10 років, коли вперше на фоні підвищеного AT до 180/100мм рт ст у хворого виник ангінозний біль при фізичному навантаженні, головний біль, головокружіння Лікувався епізодично у стаціонарі та амбулаторне Об'єктивно Загальний стан середньої тяжкості Тони серця глухі, ритмічні, акцент 2-го тону на аорті, систолічний шум на верхівці AT 160/100мм рт ст , ЧСС - 86 на хв За запропонованим способом до лікування проводять біохімічне дослідження сироватки крові, яке включає визначення показників ПОЛ (рівні ЗГП, ОШ в НЛ і ФЛ) відомими спектрофотометричними методами Результати дослідження Рівень ЗГП - 2,13 ± 0,12нмоль/мг білка (1,86 ± 0,16 у контролі) - не відрізняється від контролю, Рівень ОШ в НЛ - 0,024 ± 0,001 ДЕ/мл крові (0,025 ± 0,001 ДЕ/мл крові у контролі) - не відрізняється в порівнянні з контролем, Рівень ОШ в ФЛ - 0,064 ± 0,001 ДЕ/мл крові (0,065 ± 0,001 бДЕ/г у контролі) - не відрізняється в порівнянні з контролем Висновок Судять про неефективність призначення пентоксифіліну по відсутності змін ЗГП, ОШ в НЛ, в ФЛ у порівнянні з контролем, що може бути обумовлено наявністю сумісної патології серця та нирок Технічний результат Використання запропонованого способу в експериментальній біологи, медичній практиці дозволяє забезпечити контроль ефективності призначень пентоксифіліну, сприяє профілактиці розвитку стресової реакції організму, виникнення захворювань внутрішніх органів, прогнозу виникнення ускладнень ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71