Спосіб прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд

1 Спосіб прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд, що включає проведення імунологічного аналізу крові з подальшою інтерпретацією отриманих даних, який відрізняється тим, що досліджують реакцію розеткоутворення лімфоцитів, та підраховують Винахід відноситься до галузі медицини, а саме до способів прогнозування перебігу інфекційних хвороб Актуальність проблеми винаходу пов'язана зі значним рівнем захворюваності на еризипелоїд, особливо серед робітників м'ясокомбінатів та інших осіб, які професійно пов'язані з тваринами, або переробкою м'яса, причому у 25 - 40% хворих на еризипелоїд виникають ураження суглобів, які нерідко мають тривалий або хронічний перебіг Тому прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд має значне практичне значення У сучасних умовах для прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд застосовують переважно імунологічні способи, які найбільш чутливі та ефективні Відомий спосіб прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд шляхом імунологічного аналізу крові з подальшою інтерпретацією отриманих даних, що включає вивчення співвідношення теофілінчутливих (ТФЧ) та теофілінрезистентних (ТФР) лімфоцитів, а саме ТФР/ТФЧ, рівню циркулюючих імунних комплексів (ЦІК) та КІЛЬКОСТІ пстамінчутливих розеткоутворюючих клітин (ГЧ-РУК) При зниженні індексу ТФР/ТФЧ до 1,4 та ще нижче, підвищенні концентрації ЦІК до 3,6г/л та більш і КІЛЬКОСТІ ГЧ-РУК до 12% та більш прогнозують розвиток уражень суглобів у хворих на еризипелоїд (Фролов В М , Бакланова А В Диагностика, лечение и профилактика эризипелоида Методич рекомендации —Харьков, Луганск, 1993 — 2 6 с ) Однак цей спосіб прогнозування уражень суглобів має інформативність лише біля 60 ± 5% і тому потребує подальшого удосконалення Тому був запропонований спосіб прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд шляхом імунологічного аналізу крові, який включає вивчення КІЛЬКОСТІ аутоантитілоутворюючих клітин (АУК) та показника реакції гальмування міграції лейкоцитів (РГМЛ) - міграційного індексу (МІ) при постановці реакції з аутоантигеном з тканини суглобової сумки людини і при КІЛЬКОСТІ АУК 15% та більше, при одночасному зниженні МІ а) РГМЛ до 0,4 та ще нижче, прогнозують розвиток ураження суглобів з вірогідністю 86,8 ± 4% (Деклараційний патент України на винахід № 46660 "Спосіб прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд" — Фролов В М / Бюл № 5 15 05 2002 з пріоритетом від 05 12 2001) Цей спосіб найбільш інформативний з існуючих і тому обрано в якості прототипу КІЛЬКІСТЬ багаторецепторних та малорецепторних розеткоутворюючих клітин (РУК) 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що при наявності в крові 60% і більше малорецепторних РУК, та 10 % і менше багаторецепторних РУК з ймовірністю 86,3±4,2 % прогнозують розвиток запальних уражень суглобів (еризипелоідних артритів) До недоліків прототипу відноситься потреба готовити самостійно тканинний аутоантиген, який має незначний термін зберігання та недостатньо стандартизований, що незручно для більшості лабораторій лікувально-профілактичних установ Тому ми вивчили можливість використання інших імунологічних реакцій для прогнозування уражень суглобів у хворих на еризипелоїд Задачею винаходу було спрощення способу прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих на еризипелоїд при збереженні високої її формативності способу, що дало б можливість для його поширеного використання в умовах лабораторій лікувально-профілактичних закладів (О (О со Ю 57366 еритроцитами барана) та багаторецепторних (з 9 12 еритроцитами барана) РУК При превалюванні малорецепторних РУК (60 - 80% та більш) та низькому рівні багаторецепторних РУК (менш 10%) у хворого прогнозують розвиток уражень суглобів Якщо КІЛЬКІСТЬ багаторецепторних РУК перевищує 50%, ймовірність розвитку уражень суглобів у хворого менш 10% Запропонований спосіб базується на вперше встановленій автором заявки закономірності, яка полягає в тому, що ураження суглобів у хворих на еризипелоїд виникають переважно при низькому (менш 10%) ВМІСТІ багаторецепторних РУК у крові хворих, то превалюванні в крові малорецепторних РУК, КІЛЬКІСТЬ яких складає 60 - 80% та більше Запропонований спосіб здійснюється таким Навпаки, при значній КІЛЬКОСТІ багаторецепторних чином При встановлені діагнозу еризипелоїду у РУК у крові, особливо коли їхня КІЛЬКІСТЬ перевихворого беруть кров з вени в КІЛЬКОСТІ 2 - Змл, з щує 50%, ймовірність розвитку уражень суглобів у якої виділяють фракцію мононуклеарів у градієнті хворих на еризипелоїд менше 10%, що підтверЩІЛЬНОСТІ фікол-верографіну (1,076) Потім готуджено проведенням КЛІНІЧНОГО обстеження хворих ють 0,5% суспензію з еритроцитів барана на розчині Хенкса, 0,1мл цієї суспензії змішують з такою При розробці запропонованого способу прож КІЛЬКІСТЮ суспензії лімфоцитів хворого, потім гнозування розвитку уражень суглобів у хворих на додають 0,1мл фосфатного буферного розчину, еризипелоїд, нами було обстежено дві групи хвошкубують при температурі 37°С у термостаті прорих з даною патологією - перша (65 осіб), у яких тягом 5 хв, центрифугують при 1000оборотів/хв ще ураження суглобів були відсутні, та друга (ЗО осіб), 5 хвилин, потім зберігають у холодильнику протяу яких вони потім виникли У хворих обох груп був гом 1 години та потім фіксують за допомогою досередньотяжкий перебіг еризипелоїду В обох грудавання 0,05мл глютаральдепду, готують мазки на пах паралельно проводили імунологічні обстеженпредметних скельцях, підсушують, фарбують за ня за допомогою існуючого (прототип) та запропометодом Романовського-Тімза та проводять підранованого способів Отримані при лабораторному хування розеток за допомогою мікроскопу Окремо обстеженні дані наведені в таблиці 1 підраховують КІЛЬКІСТЬ малорецепторних (з 3 - 5 Вказана задача реалізується шляхом вивчення імунологічних показників у крові хворих на еризипелоїд, а саме реакцій розеткоутворення лімфоцитів (Е-РУК) з вивченням КІЛЬКОСТІ Е-РУК З малою (З - 5) та великою (9 -12 та більше) КІЛЬКІСТЮ еритроцитів барана при формуванні так званих "розеток" Нами вперше експериментальним шляхом було встановлено, що при переважному виявленні в крові хворих на еризипелоїд так званих мало рецепторних РУК (з 3 - 5 еритроцитами барана), ймовірність розвитку уражень суглобів значна, а при тривалості багато рецепторних РУК (з 9 -12 та більш еритроцитами барана) ймовірність розвитку уражень суглобів менше ніж 10% Таблиця 1 Порівняльна характеристика використання запропонованого та існуючого способів прогнозування уражень суглобів у обстежених хворих на еризипелоїд Ефективність прогнозування а) існуючий спосіб збіг прогнозу Групи обстежених хворих Перша (= 65) Друга (= ЗО) 49 23 75,4 + 3,8 76,7+4,1 Р >0,1 розбіжність прогнозу 16 24,6+2,0 7 23,3 + 2,0 >0,1 б)запропонований спосіб збіг прогнозу 56 86,2 + 4,0 26 86,7 + 4,5 >0,1 розбіжність прогнозу 9 13,8 + 1,5 4 13,3 + 1,6 >0,1 Примітка в чисельнику - КІЛЬКІСТЬ хворих, в знаменнику -% (М±т) З таблиці 1 видно, що при використанні існуючого способу - прототипу збіг прогнозу в першій групі склав 75,4 ± 3,8%, в другій - 76,4 ± 4,1%, по обох групах у середньому 75,8 ± 4,0% Розбіжність прогнозу склала в першій групі 24,6 ± 2,0%, в другій групі - 23,3 ± 2,0%, у цілому у всіх обстежених хворих-24,2 ±2,0% При використанні запропонованого способу збіг прогнозу в першій групі склав 86,2 ± 4,0%, у другій групі - 86,7 ± 4,5%, у цілому 86,3 ± 4,2% Розбіжність прогнозу в першій групі склала 13,8 ± 1,5%, у другій групі -13,3 ± 1,6%, у цілому по обох групах - 13,7 ± 1,5% Отже, отримані дані свідчать, що використання запропонованого способу забезпечує збіг прогнозу в 86,3 ± 4,2%, існуючого способу - прототипу - в 75,8 ± 4,0% Таким чином, за інформативністю запропонований спосіб не поступається існуючому Оскільки ВІН більш простий та доступний для використання в умовах лабораторій клініко-профілактичних закладів, він може бути рекомендований для практики В таблиці 2 наведені конкретні значення вивчених показників (багаторецепторних та малорецепторних РУК) при практичному використанні запропонованого спо 5 57366 собу прогнозування уражень суглобів у хворих на еризипелоїд Таблиця 2 Дані імунологічного обстеження хворих при використанні запропонованого способу Групи хворих КІЛЬКІСТЬ малорецепторних РУК, % Перша (п = 65) Друга (п = ЗО) 60-80 80 0 10 10-19 20-29 0 26 0 4 1 0 1 18 50-59 40-49 30-39 20-29 8 0 47 0 30-39 40-49 50 и > 2 0 6 0 56 0 3 6 2 0 КІЛЬКІСТЬ багаторецепторних РУК, % З таблиці 2 видно, що у хворих першої групи (з відсутністю уражень суглобів), 86,2% пацієнтів мають КІЛЬКІСТЬ багаторецепторних РУК у крові 50% і більше, та 84,6% хворих - КІЛЬКІСТЬ малорецепторних РУК 30% та менш У другій групі хворих (з розвитком уражень суглобів) 93,3% хворих мають КІЛЬКІСТЬ малорецепторних Е-РУК 60% та більше, а багаторецепторних Е-РУК < 19%, у тому числі 86,7% - менше 10% Отримані дані дозволяють підтвердити високу інформативність запропонованого способу прогнозування запропонованого способу уражень суглобів у хворих на еризипелоїд та перспективність його використання в КЛІНІЧНІЙ практиці лоїдного артриту міжфалангового суглобу 1 пальця лівої КІСТІ Діагноз підтверджено також при рентгенологічному обстеженні, оскільки на рентгенограмі відмічене потовщення м'яких тканин 1 пальця лівої КІСТІ, переважно в ДІЛЯНЦІ середнього міжфалангового суглоба Отже, з даного прикладу видно, що прогноз розвитку уражень суглобів у хворого С , створений на підставі аналізу даних імунологічного обстеження, ВІДПОВІДНО до запропонованого способу, цілком підтвердився Дійсно, у хворого С завився еризипелоідний артрит міжфалангового суглобу 1 пальця лівої кисті, що потребувало в подальшому проведення тривалого лікування Наводимо конкретні приклади використання запропонованого способу Приклад 1 Хворий С , 40 років, робітник м'ясокомбінату, захворів після травми лівої кисті, яку отримав на роботі при обробці туші свині Скаржився на біль у ЛІВІЙ кисті, почервоніння та помірний набряк у ДІЛЯНЦІ 1 - 2 пальців При огляді - на шкірі тильної поверхні лівої кисті між 1 і 2 пальцями відмічається ділянка рожево-червоного кольору з чіткими межами розмірами 4 x 6 см, болісна при пальпації Температура тіла 37,6°С Встановлено діагноз "Еризипелоїд лівої кисті, середньотяжкий перебіг хвороби" Призначені антибактеріальні препарати (ампіокс), дімедрол, аскорутин, аспірин Для проведення прогнозування можливості розвитку уражень суглобів проведено імунологічне обстеження крові Отримані такі результати малорецепторних Е-РУК - 62%, багаторецепторних Е-РУК - 6% У зв'язку з характерними змінами імунологічних показників дане заключения про високу ймовірність розвитку уражень суглобів у обстеженого хворого Дійсно, на третю добу від початку лікування у С заявилася значна біль у 1 пальці лівої кисті При повторному огляді відмічена наявність припухлості, болісності 1 пальця, поява значної болісності та тугорухливості в міжфаланговому суглобі 1 пальця лівої КІСТІ Через 3 доби 1 палець лівої кисті значно припухлий з веретеноподібним потовщенням міжфалангового суглоба Цей суглоб знаходиться в положенні згинальної контрактури, активна рухомість у ньому відсутня, пасивна - значно обмежена у зв'язку з наявністю больового синдрому При тиску на уражений суглоб виникає значний біль Був встановлений діагноз еризипе Приклад 2 Хвора Е , 32 років, робітниця м'ясокомбінату, поранила на роботі кисть правої руки при переробці м'яса Через 4 доби в неї виник озноб, підвищилася температура тіла до 38,1 °С, заявилось почервоніння та свербіж шкіри в ДІЛЯНЦІ МІЖ 1 та 2 пальцями правої кисті, незначний набряк шкіри у вогнищі ураження Лікувалася тетрацикліном та стрептоцидом усередину та ІХТІОЛОВОЮ маззю місцево, однак без достатнього ефекту У зв'язку з недостатнім ефектом лікування госпіталізована до інфекційного стаціонару, встановлений діагноз еризипелоїду, шкіряної форми, середньотяжкий перебіг Для прогнозування ймовірності розвитку уражень суглобів у хворої Е була забрана кров із вени, виділена фракція лімфоцитів у градієнті ЩІЛЬНОСТІ фікол-верографіну та вивчені імунологічні показники ВІДПОВІДНО до запропонованого способу Отримані такі результати багаторецепторних ЕРУК - 52%, малорецепторних Е-РУК - 22% Виходячи із змін імунологічних показників, дано заключения про малу ймовірність розвитку уражень суглобів у обстеженої хворої Проведено лікування антибіотиками широкого спектру дії (ампюкс) та протизапальними препаратами (мефенамова кислота), місцевоіндометациновою маззю Результати лікування добрі, хвора виписана до дому в задовільному стані, КЛІНІЧНО здоровою, на 10-ту добу лікування Уражень суглобів у неї не було Отже з приклада видно, що при негативному прогнозі ймовірності уражень суглобів у хворої Е , який був створений на підставі даних імунологічного аналізу ВІДПОВІДНО до запропонованого способу в подальшому цей прогноз повністю підтвердився 7 57366 8 Проведені КЛІНІЧНІ спостереження та лабораристання в умовах клініко-діагностичних лабораторні імунологічні обстеження свідчать про достаторій лікувально-профілактичних закладів, не потню інформативність запропонованого способу требує коштовних або дефіцитних реактивів і прогнозування розвитку уражень суглобів у хворих обладнання Тому розроблений нами спосіб може на еризипелоїд та його перевагу відносно існуючобути рекомендований для поширеного викорисго способу-прототипу тання в КЛІНІЧНІЙ практиці Спосіб легко доступний для практичного вико Комп'ютерна верстка А Крулевський Підписано до друку 05 07 2003 Тираж 39 при м Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна