Спосіб біохімічної оцінки кісткового метастазування

1 Спосіб біохімічної оцінки кісткового метастазування шляхом визначення рівня добової ек Винахід належить до медицини, а саме радіологи та онкологи, і може бути використаний для ранньої експрес-діагностики кісткового метастазування ЗЛОЯКІСНІ новоутворення складають одну з найважливіших медико-бюлопчних та соціальноекономічних проблем в Україні У зв'язку з чим спостерігається тенденція до почастішання метастатичних новоутворень у різних органах та системах У кістки метастазують практично усі ВІДОМІ ЗЛОЯКІСНІ пухлини, незалежно від локалізації та гістологічної структури Нині у медичній практиці застосовують способи променевої діагностики, які залишаються єдиними у прижиттєвому виявленні метастатичних змін кістяка взагалі та хребта зокрема 3 метою діагностики його метастатичних уражень використовуються різні методи променевої діагностики, такі як звичайна рентгенографія, рентгенівська томографія, радіонуклідні дослідження, комп'ютерна та магнітнорезонансна томографія [Спузяк Р М Променева діагностика метастатичних уражень хребта // Укр радіол журн — 1999 — Т 7, віп 3 — С 304 - 308 ] Встановлено, що при метастазах у кістки різних пухлин, остеосцинтиграфія дозволяє виявити до 95% уражених ділянок кістяка та у 30% випадків дає можливість встановити ураження, які не визначалися при звичайному рентгенологічному обстеженні Безперечною перевагою остеосцитиграфп [Науменко A 3 и др Остеотропные радиофармпрепараты в оценке лечения метастатического поражения скелета, Тез докл Всесоюзн симпоз «Радиоизотопная скреції з сечею метаболітів кісткової тканини, який відрізняється тим, що визначають рівень гідрокси проліну і вміст неорганічного фосфору у сечі, вміст загального кальцію у крові, встановлюють їх конкретні значення і констатують наявність кісткових метастазів 2 Спосіб по п 1, який відрізняється тим, що значення пдроксипроліну складає не менше ніж 448,0 мкмоль/доб , фосфору - 57,6 - 80,0 ммоль/доб , загального кальцію у крові - 3,4 - 4,0 ммоль/л диагностика опухолей» — Л , 1982 — С 54 - 56] є можливість раннього визначення метастатичних змін (на 1-6-12 МІСЯЦІВ, а ІНОДІ на 3 роки раніше, порівняно із рентгенографією) У якості недоліків цього методу слід визначити його неспецифічність остетропні радюфармпрепарати можуть накопичуватися у місцях активного метаболічного процесу при різних станах - пухлинних, запальних, дистрофічних При цьому, остеосцинтиграфія дозволяє отримати інформацію тільки про зміни органічного матриксу кісток, не стосуючись мінеральної фази Разом з цим відомо, що радіологічні фіксовані порушення в структурі кістки є вже наслідком змін у метаболізмі основних компонентів органічного матриксу і мінеральної фази, які виникають при наявності метастазів БІЛЬШІСТЬ ЗЛОЯКІСНИХ пухлин, особливо епіте ліального походження, вибірково активують остеокласти, викликаючи СТІЙКІ ЛІТИЧНІ ЗМІНИ у КІСТЦІ [Seibel M J Calcium Regulating Hormones and Markers of Bone Metabolism Measurement and Interpretation — Heidelberg, 1997 — P 157 - 170] Ураховуючи специфічність змін кісткової тканини, виникаючих при розвитку пухлинного процесу, фахівці намагаються розробити чутливі способи їх виявлення, використовуючи найбільш специфічні показники кісткового метаболізму Найближчим до способу, що заявляється, за технічною суттю та ефектом, який досягають, є спосіб біохімічної оцінки кісткового метастазування в онкологічних хворих за допомогою визначення біохімічних показників екскреції із сечею структур 00 О (О 60184 них компонентів колагену І типу пірідшоліна та тканини і дає можливість на ранній стадії прогнодезоксипірідшоліна і вмісту у сироватці крові кістзувати ризик розвитку кісткових метастазів кового ізоферменту лужної фосфатази, як специСуттєвою ВІДМІНОЮ способу, що заявляється, є фічних показників резорбції кістки [Любимова Н В , те, що оцінка рівня кісткового метаболізму провоТрапезникова М Ф и др Значение биохимических диться комплексно, з урахуванням показників міпоказателей сыворотки крови и мочи в качестве нерального матриксу Відомо, ЩО метаболізм комаркеров костного метастазирования // Клин лаб лагену тісно пов'язаний з рівнем мінерального, диагност — 2000 — № 5 — С 9-13] зокрема кальцієво-фосфорного обміну, тому що існує унікальна властивість колагенових структур Проте, визначення вільних пірідшових зв'язків спілкуватися з кристалами кальцієво-фосфорних колагену, тобто показників пірідшоліна та дезоксисолей, у першу чергу, в органічному матриксі кістпірідіноліна у сечі, потребує використання трудокової тканини Взагалі метаболізм колагену і мінемістких і дорогих методів імуноферментного та ральних компонентів характеризують тип функціоімунохемолюмінесцентного аналізу, що не завжди нування та ступінь реактивності кісткових структур доступно для будь-якої лабораторії Таким чином, необхідною умовою для виріСпосіб здійснюють таким чином при надхошення проблеми забезпечення ранньої діагностидженні до стаціонару в онкологічного хворого збики метастатичних ушкоджень кісток є вибір інфоррають добову сечу, вимірюють її об'єм, потім бемативних показників, які відображують порушення руть із вени кров у КІЛЬКОСТІ Змл В 2 - Змл добової метаболізму кісткової тканини при ризику виниксечі за допомогою уніфікованих біохімічних метонення метастазів дів [Медицинские лабораторные технологии / Под ред А И Карнищенко — С-Пб Інтермедтехника, В основу винаходу поставлене завдання роз1999 — Т II — С 228 - 229] визначають добову робити такий спосіб біохімічної оцінки кісткового екскрецію пдроксипроліну і фосфору та рівень метастазування, в якому при визначають рівень загального кальцію у крові добової екскреції пдроксипроліну, неорганічного фосфору (Рн) у сечі, загального кальцію (Са) у Якщо значення показників відповідають таким крові встановлюють їх конкретні значення і констазгідно способу, що заявляється, тобто пдроксиптують наявність кісткових метастазів Реалізація роліну на добу не менше 448,0мкмоль/доб , фосспособу дасть можливість у 1,2 рази збільшити фору у межах - 57,6 - 80,0ммоль/доб , кальцію у його чутливість, скоротити термін отримання ремежах 3,4 - 4,0ммоль/л, то встановлюють наявзультатів дослідження до доби, зменшити трудоність поодиноких або множинних метастазів у кістмісткість способу, в 4 рази знизити фінансові викову систему У 84,4% випадків встановлюють натрати на закупівлю реактивів явність процесу метастазування Результати встановлення наявності процесу метастазування Поставлене завдання вирішують так у відоабо ризику виникнення підтверджується проведемому способі біохімічної оцінки кісткового метастаними радіологічними обстеженнями онкологічного зування шляхом оцінки рівня добової екскреції з хворого (табл 1) січею метаболітів кісткової тканини визначають рівень добової екскреції пдроксипроліну з наступНижче наводимо конкретні приклади реалізації ним встановленням вмісту у крові і сечі мінеральспособу біохімічної оцінки кісткового метастазуних компонентів кісткової тканини - неорганічного вання, який пропонується фосфору і загального кальцію, та при значенні Приклад 1 Хвора Б , І х № 25826, рак грудної екскреції з сечею пдроксипроліну у добу не менше залози Знаходячись на плановому лікуванні у ніж 448,0мкмоль/доб , рівня загального Са у крові КЛІНІЦІ IMP АМНУ на момент обстеження мала в межах 3,4 - 4,0ммоль/л, Рн у добовій сечі - 57,6 скарги на біль у спині При проведенні біохімічного 80,0ммоль/доб констатують наявність кісткових аналізу стану метаболізму кісткової тканини у хвометастазів рої виявлено рівень виведення пдроксипроліну із сечею 629,2мкмоль/доб, фосфору Використання показника рівня пдроксипроліну 74,2ммоль/доб і вміст загального кальцію в крові як прогнозного фактору можливо лише при встаскладав 3,67ммоль/л, що дозволило передбачити новленні рівня кальцію і фосфору (у певних менаявність жах), що дозволяє забезпечити високий рівень діагностичної оцінки стану метаболізму кісткової Таблица 1 Результати підтвердження наявності метастазів, встановлених згідно способу, що заявляється Показник Кіл-сть хворих Результати виявлення метастазів способом, що заявляється є Гідроксипролін сечі (мг/доб) Са крові (ммоль/л) Рн Сечі (мг/доб) 58 62 62 є 448,4-815,3 (675,0 ± 45,3) 3,4-4,0 (3,6 ± 0,08) 57,6 - 80,0 (76,8 ± 5,2) 194,6-418,5 (274,6 ± 33,0) 2,2-3,2 (3,2 ± 0,07) 25,6-51,2 (44,8 ± 3,8) Результати верифікації радіологічним методом є немає Чутливість (%) 49 9 84,4 -" -" 79,0 -" -" 79,0 60184 метастазів у кісткову систему Проведення рентгенографи і КТ дослідження підтвердило наявність множинного метастатичного ураження хребта у ДІЛЯНЦІ L1-S1 Приклад 2 Хворий Р , І х № 26293, рак передміхурової залози При первинному обстеженні і визначенні комплексу біохімічних показників були виявлені значення екскреції гідрокси проліну 579,2мкмоль/доб, фосфору - 70,4ммоль/доб і вмісту кальцію в крові - 3,6ммоль/л При проведенні через 3,5-й МІСЯЦІ остеосцинтиграфм було виявлено осередок метастазування у тазові кістки Приклад 3 Хвора Т, І х № 34628, мієломна хвороба Надійшла до КЛІНІКИ ДЛЯ обстеження і лікування При біохімічному дослідженні виявлено значення рівня кальцію в крові - 3,8ммоль/л, екскреції фосфору з сечею -73,6ммоль/доб - і пдроксипроліну - 530,7мкмоль/доб Проведення остеосцинтиграфм з 9 9 т Тс пірофосфатом виявило осередок підвищеного накопичення радіофармпрепарату у проекції поперекового відділу хребта І_і 51 було зроблено висновок про наявність метастатичного ураження хребта Приклад 4 Хвора М, І х № 28082, рак грудної залози Знаходилася у КЛІНІЦІ IMP АМНУ під час проведення курсів променевої і хемотерапм після радикальної мастектомм При первинному біохімічному обстеженні виявлені значення показників кальцію в крові - 3,4ммоль/л, фосфору 67,2ммоль/доб і загальної екскреції пдроксипроліну з сечею - 533,0мкмоль/доб Незважаючи на підвищені значення біохімічних показників при проведенні рентгенографії осередкового ураження кісткової системи не було виявлено При повтор ному знаходженні хворої у КЛІНІЦІ ДЛЯ продовження курсу лікування через 4,5-й місяця значення біохімічних показників складали ВІДПОВІДНО ВМІСТ кальцію в крові - 3,7ммоль/д, фосфору у сечі 70,5ммоль/доб і виведення пдроксипроліну 640,5мкмоль/доб , що свідчить про наявність метастазування При проведенні остеосцинтиграфм було підтверджено осередок метастазування у верхній третині стегнової кістки Приклад 5 Хвора К , І х № 24165, рак грудної залози Знаходилася у КЛІТЦІ IMP з приводу проведення курсів променевої і хемотерапм після радикальної мастектомм Значення біохімічних показників при обстеженні складали Са крові 2,9ммоль/доб, гідрокси пролін сечі 321,0мкмоль/доб, фосфор сечі 42,0ммоль/доб При проведенні рентгенографії і остеосцинтиграфм ознак осередкового ураження кісткової системи не було виявлено Спосіб, що заявляється, дозволяє здійснювати ранню діагностику порушень кісткового метаболізму, які передують деструктивним метастатичним змінам (табл 2) Як свідчать дані, наведені у таблиці 2, з 49 первинно обстежених хворих з високими значеннями біохімічних показників, наявність метастазів у кістку при повторному обстеженні через 3 МІСЯЦІ констатували у 43 хворих проти 35 за даними рентгенологічного обстеження Взагалі, у 8 хворих (від загальної КІЛЬКОСТІ обстежених), діагноз метастатичного ураження кістяка за результатами інструментального обстеження виставлено, в середньому, на 3,5 - 5,5 МІСЯЦІВ пізніше Таблиця 2 Можливості раннього виявлення метастазів способом, що заявляється, та рентгенологічним Термін обстеження хворого Через 3 МІСЯЦІ після первинного обстеження (п = 49) Через 6 МІСЯЦІВ піс ля первинного обстеження (п = 49) Кіл-сть хворих з метастазами у кісткову систему згідно способу, що заявляється раннє виявє немає лення, % 43 6 Кіл-сть хворих з метастазами у кісткову систему, виявленими рентгенологічно раннє виявленє немає ня, % 35 14 87,7% 49 Для доказу переваг способу біохімічної оцінки кісткового метастазування, що заявляється, було проведено порівняльний аналіз даного способу (58 71,4% 49 хворих) з прототипом (96 хворих), який виявив ряд переваг першого (табл 3) 60184 Таблиця З Порівняльний аналіз ефективності способу, що заявляється, і прототипу Найменування показника Чутливість (КІЛЬКІСТЬ ПОЗИТИВНИХ результатів), % Вартість наборів реактивів, грн імуноферментного та імунохемолюмінесцентного аналізу в 96 пробах загальна вартість реактивів для проведення 100 досліджень Наявність дорогого обладнання Трудомісткість способу Термін проведення реалізації способу, доби Як свідчать дані, наведені у таблиці 3, впровадження способу біохімічної оцінки кісткового метастазування, що заявляється, у практику біохімічних лабораторій онкологічних та радіологічних закладів дозволить - забезпечити можливість встановлення метастатичних процесів у кісткову тканину на 4 місяця Комп'ютерна верстка А Крулевський Спосіб біохімічної оцінки кісткового метастазування за прототипом п = 96 що заявляється, п = 58 73,4 84,4 1200,00 грн 250,00 - 300,00 так так 2-3 НІ НІ 1 раніше, - у 1,2 рази збільшити чутливість способу, - скоротити термін одержання результату досліджень до доби, - знизити трудомісткість способу, - у 4 рази знизити фінансові витрати на закупівлю реактивів Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна