Спосіб визначення ступеня опікового стресу

Спосіб визначення ступеня опікового стресу при опіках очей, що полягає в заборі 0,1-0,2 мл периферичної крові хворого, виділенні лейкоцита рно-лімфоцитарної суміші клітин і визначенні функціональної активності імунокомпетентних клітин, який відрізняється тим, що запроваджується постановка розробленого навантажувального тесту "активних" Е-РУЛ in vitro з додаванням адреналіну і за рівнем адренорецепцм Т-лімфоцитів визначається ступінь опікового стресу при збільшенні інверсії % "активних" Е-РУЛ в дослідних пробах до 5 % визначається легкий ступінь, від 6 % до 19 % середній ступінь, а понад 12 % - тяжкий ступінь опікового стресу Винахід відноситься до медицини, патофізіології і, зокрема, до офтальмокомбустюлопі і може бути використано для визначення ступеня прояву стресової реакції організму на опікову травму, в тому разі на опікову травму очей Гомеостатичні порушення, які виникають внаслідок опікової травми, призводять до дисфункцій в ДІЯЛЬНОСТІ таких основних гомеостатичних систем організму як нервова, ендокринна та імунна, що відбувається на всіх рівнях нейрон-імуноєндокринної регуляції від молекулярно-клітинного до організменного (Т В Дегтяренко, Р Ф Макулькин Биогенные стимуляторы и иммунореактивность Одесса 1997, Ю I Бажора, В М Запорожан, В Й Кресюн, І М Годзіева Клінічна імунологія Одеса, - 2000, Ославська Т М Стан прооксидантно-антиоксидантних процесів головного мозку і еритроцитів та їх значення у патогенезі опікової травми Автореф дис К м н - Одеса 2002 - 1 7 с ) лімфоідних органах під впливом стресорних чинників різної природи, фізичних та психічних перевантаженнях, під впливом токсичних речовин, а також при опіках (Горго Ю П Психофизиология Киев - 1999, Сапин М Р , Никитюк Д Б Имунная система, стресе и иммунодефицит- М -2000, Кресюн В В Механизмы стрес - індукованих уражень печінки Автореф дисс К м н - Одеса - 2002 18с, Рожковський Я В Патогенетичні механізми порушення імунологічної резистентності організму за умов формування стрес-синдрому та шляхи їх фармакологічної корекції Автореф дис Д м н Одеса 2002 - 34 с ) Встановлено, що вплив стресових агентів на розвиток імунної ВІДПОВІДІ залежить не тільки від виду стресора (його характеристик), але й від чутливості до нейромедіаторів і гормонів (зокрема до катехоламшів) тих клітинних елементів нервової та імунної систем, які безпосередньо приймають участь в реалізації імунної реакції організму на дію стресового чинника (Корнева Е А, Шхинек Э К Физиологические механизмы влияния стресса на иммунную систему //Вестник Академии Медицинских наук СССР-1985 - № 8 с 44 - 50, Т В Дегтяренко, Р Ф Макулькин Биогенные стимуляторы и иммунореактивность Одесса 1997) Нейро-імуно-ендокринні порушення при опіковому стресі слід розглядати, як прояв стресіндукованих реакцій організму і це має місце зокрема при ОПІКОВІЙ травмі очей (Ваничкин А А , Шульгина Н С Стресс-индуцированная иммунологическая недостаточность при ожоговой травме органа зрения различной тяжести //Тез Докл Всес Конф «Стресс и иммунитет» - Л - 1989 с 10, Мирошник Д М , Дегтяренко Т В , Якименко С А , // Офтальмол Журн -1992 - №4 - С 26-229) В дійсний час визначено, які зміни відбуваються в нейроструктурах ЦНС і в Загальновизначною в теперішній час є нейроімуно-ендокринна теорія виникнення, розвитку та регуляції стресової реакції організму на дію стресового подразника будь-якого генезу Стресор через активізацію функціонування нейроструктур емоційного мозку (ппокампово-ппоталамічне (О (О 62262 збудження) сигналізує нейроструктурам кори вебезпосередньо не репструє, а від так не дає змогу ликих півкуль мозку про небезпеку, яка виникла і оцінити ступінь тяжкості опікового стресу Вищезаце обумовлює мобілізацію норадреналіну у нейрозначений засіб визначав наявність стресорної реструктурах неокортексу, (асоціативних та проакції організму на опікову травму за ступенем проекцюнних зонах кори), елементах лімбікояву надбаного імунодефіциту, але він не включав ретикулярної системі, підкоркових морфопрямого тесту (методики) який б дозволяв функцюнальних утворень мозку, що призводе до оцінювати залучення симпато-адреналової систезбудження центрів симпатичної нервової системи і ми, як основного патогенетичного ланцюга ревнаслідок цього підсилюється ДІЯЛЬНІСТЬ симпатоалізації стресових реакцій в організмі до розвитку адреналової системи і відбувається збагачення опікового стресу у хворих на опіки очей крові сумішшю норадреналіну та адреналіну з Основним завданням винаходу є розробка замозкового шару надниркових залоз Кров збагасобу визначення ступеню прояву опікового стресу чується на 80-90 % норадреналіном та адрена підставі визначення рівня адренорецепцм Тналіном, що передумовлює подальшій розвиток лімфоцитів стресової реакції організму (Горго Ю П ПсихофиОб'єктивна пропозиція, яка вноситься до виназиология - Киев - 1999) Враховуючи встановлену ходу, полягає в тому, що ступінь прояву опікового СПІЛЬНІСТЬ ліганд-рецепторних взаємодій на мемстресу визначається на підставі розробленого набранах таких спеціалізованих клітин, як нейроцити вантажувального тесту in vitro з нейромедіатором і імуноцити, зокрема по відношенню до нейроадреналіном завдяки репстрацм проценту інверсії медіаторів ЦНС і до медіаторів імуної системи КІЛЬКОСТІ "активних" Е-РУК ("активних" Т(ЦИТОКІНІВ) є всі підстави припустити, що характер лімфоцитів) по відношенню до контрольної проби впливу стресових чинників на імунну ВІДПОВІДЬ без додавання адреналіну (Т В Дегтяренко, Р Ф організму в умовах розгортання стресової реакції Макулькин Биогенные стимуляторы и иммунореаорганізму на опікову травму буде залежати від ктивность Одесса 1 9 9 7 - Т П - с 25-26) чутливості імунокомпетентних клітин (лімфоцитів), Оцінку наявності і ступеню порушень імунореякі безпосередньо приймають участь в розгортанні активності організму при опіках здійснюють шляімунологічних реакцій, до катехоламшів (адрехом з краплі периферічної крові виділяється лейналіну та норадреналіну) коцитарне - лімфоцитарна суміш клітин, визначається функціональна активність ТРезультати експериментальних досліджень, лімфоцитів, фагоцитів, запроваджується постаноякі були проведені вНДІ ОХ і ТТ їм В П Філатова вка тесту "активних" Е-РУЛ in vitro з додаванням в на моделі стрес-індукованої імуносупресм, дозводослідну пробу нейромедіатора адреналіну, а в лили визначити, що в динамиці розвитку стресової контрольну - фізіологічного розчину реакції організму відбувається підвищення рівня адренорецепцм тимус-залежних лімфоцітів - ТСтупінь опікового стресу визначають за рівнем лімфоцитів (Т В Дегтяренко, Р Ф Макулькин Биоадренорецепцм "активних" Т-лімфоцитів збільгенные стимуляторы и иммунореактивность Одесшення інверсії % "активних "Е-РУЛ в ДОСЛІДНІЙ са 1997) Ці дослідження показали, що розвиток пробі у порівнянні з контрольною пробою і при йоадреналін - індукованої імуносупресм починається го значенні до 5 % визначається як легка ступінь, вже після трьох внутрішньовенних ІН'ЄКЦІЙ адренавід 6% до 12 % - як середня, понад 12 % - як тяжка ліну і м прояв позначається на зниженні вмісту ступінь опікового стресу абсолютної КІЛЬКОСТІ лімфоцитів, зниженні КІЛЬКОССпосіб визначення ступеню опікового стресу ТІ Т-, В-лімфоцитів і фагоцитарної активності нейтпри опіках очей тяжких ступенів на підставі запророфилів (більш ніж в 3 рази знижувався вміст Тпонованого імунологічного тесту проводять таким хелперів і Т-супресорів, більш ніж у 2 рази знижучином валась КІЛЬКІСТЬ В-лімфоцитів і фагоцитувальних Вранці натще у хворого беруть 0,1-0,2мл пеклітин) риферічної крові з пальця і виділяють лейкоцитарно-лімфоцитарну суміш клітин До дійсного часу не має об'єктивної методики, яка б надала змогу оцінювати ступінь прояву стреРозкапують лейкоцитарно-лімфоцитарну сової реакції організму на опікову травму, що опосуміш клітин по 0 05мл у лунки імунологічних середковується активізацією симпато-адреналової планшет системи та розвитком стрес-індукованого імуноДодають в ДОСЛІДНІ лунки 0 05мл адреналіну дефіциту (1 1000), а в контрольні лунки -0 05мл фізіологічного розчину Найбільш близьким до пропонуємого засобу є метод визначення ступеню прояву стресорної реПроводять інкубацію лейкоцитарноакції організму на опікову травму, який засновано лімфоцитарної суміші клітин в імунологічних на підставі оцінки вияву імунодефіцитного стану планшетах у термостаті на протязі ЗО хвилин при організму за загальноприйнятими показниками t°=37°C імунограми (Ваничкин А А , Шульгина Н С СтрессДодають у лунки імунологічної планшет до всіх индуцированная иммунологическая недостаточпроб 0,05мл ерітроцитів барана (ЕБ) в стандартній ность при ожоговой травме органа зрения различконцентрації 0,02% ной тяжести //Тез Докл Всес Конф «Стресс и Проводять інкубацію 5 хвилин при кімнатній иммунитет» - Л - 1989 - с 10) Цей метод дозвотемпературі, відразу готують мазки та забарвлюляє тільки опосредковано оцінювати ступінь проють їх за Романовським-Гімзою яву опікового стресу на підставі виявлення Лічать відносну КІЛЬКІСТЬ "активних" Е-РУЛ на імунопатолопчних зрушень, але функціональний 100 клітин лімфоідного ряду в контрольних і дослістан симпато-адренолової системи цей метод дних зразках, різниця у відсотку "активних" Т 62262 клітин в контрольних і дослідних зразках визначає ступінь опікового стресу Результати вираховують на підставі порівняння % інверсії "активних" Е-РУЛ в дослідних і контрольних пробах, збільшення % інверсії "активних" Е-РУЛ у ДОСЛІДНІЙ пробі і при його значенні до 5% визначають як легку ступінь опікового стресу, від 6% до 12% - як середню, а понад 12% - як тяжку ступінь опікового стресу Кпініко-імунолопчні дослідження проведені в Інституті очних хвороб і тканинної терапії їм В П Філатова АМН України на 86 хворих з опіками очей тяжких ступенів Ці хворі за ступенем важкості опікового ушкодження очей розподілились на 2 групи першу групу (43 хворих) зіставили пацієнти з III ступенем опіку очей, другу групу (43 хворих) пацієнти з IV ступенем опіку очей Результати імунологічного обстеження хворих надано в Табл 1 Як можно бачити з даних т а б л і , у хворих першої групі з меньшою важкістю опікової травми (III ступінь) очей виявляється менш значні за проявом порушення імунореактивності у порівнянні з пацієнтами з важким IV ступенем опікової травми очей В гострому періоді опікової травми у хворих з опіками очей визначається вірогідне по відношенню до норми зменшення загальної КІЛЬКОСТІ лімфоцитів, збільшення Т-лімфоцитів, Т-хелперів, та зниження функціональної активності нейтрофілів На тлі лімфопенм та Т-лімфоцитозу спостерігається підвищення чутливості організму до аутоантигенів рогівки (табл 1) Якщо за показниками референтної норми (74 здорових особи) чутливість до антигенів рогівки зіставляє 5,92±0,30 (%), то в І групі хворих з III ступенем важкості опіку очей цей показник зіставив 8,34±1,03 (%), а у хворих з опіками очей IV ступеню важкості рівень ауто сенсибілізації до антигенів рогівки 12,00±0,98 (%) (Р