Спосіб передопераційної підготовки консервованих ксенодермотрансплантатів та пристрій для його здійснення

Винахід відноситься до медицини, зокрема, до клінічної трансплантології, і може бути використаний для направленої корекції біотичних процесів в тканинах консервованих біотрансплантатів в передопераційному періоді. Відомий спосіб передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів, наприклад шкіри, який включає зволоження сухи х клаптів тканини шляхом занурення на певний період часу, наприклад 10-15 хвилин, у стерильні водні середовища [1, 2]. Недоліком відомого способу є недостатня ефективність приживлення трансплантованих клаптів тканини, зумовлена недостатньою активністю біотичних процесів в клітинах консервованого сухого біотрансплантату. До недоліків відомого способу слід також віднести високу ймовірність інфікування трансплантованого клаптя біотрансплантату із-за відсутності в те хнології його передопераційної підготовки етапу знезараження консервованої тканини. В основу винаходу поставлено завдання удосконалити спосіб передопераційної підготовки консервованих сухи х біотрансплантатів, в якому шляхом зволоження консервованих біотрансплантатів з одночасним їх ультрафіолетовим опроміненням досягають прискорення біотичних процесів в клітинах консервованих тканин, ефективного їх знезараження та підвищення ефективності приживлення трансплантованих клаптів до тканин організму. Поставлене завдання вирішують тим, що у відомому способі передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів, який включає зволоження сухих клаптів тканини стерильним водним середовищем, у відповідності до винаходу зволоження здійснюють шляхом періодичного занурення тканинних клаптів у ізотонічний розчин солей або/і поживних речовин з одночасним ультрафіолетовим опроміненням при температурі водного розчину 4¸25°С. При розгляді технічного завдання було враховано те, що під впливом ультрафіолетових променів з молекул води (водяної пари) утворюються активні алоформи кисню, зокрема, атомарний (О) і синглетний збуджений (О2*) та озон (О3). Активні форми кисню утворюються також внаслідок реакції фотополімеризації молекулярного кисню: 2О2+ hv ® O 2* + O 2® О 3+ О Крім відомого бактерицидного ефекту внаслідок прямої оксидної дії на патогенні мікроорганізми і опосередкованої - за рахунок бактерицидної дії утворених іонів гіпохлориту (ОСІ-) - зазначені алоформи набагато активніше, ніж молекулярний кисень, ініціюють так званий метаболічний (респіраторний) внутрішньоклітинний "вибух". Саме цей процес є чинником прискореного переходу клітин консервованого біотрансплантату від анабіозу до біотичного процесу принаймні на рівні гіпобіозу. Слід зазначити, що з огляду на вкрай обмежені умови забезпечення клітин пересадженого біотрансплантату поживними речовинами й киснем з боку макроорганізму (відсутність нейроваскулярного забезпечення - перш за все), гіпобіоз як рівень біоенергетики в клітинах біотрансплантату був би найбільш доцільним. Враховуючи ж, що біоенергетика ізольованих клітин консервованої біотканини в значній мірі визначається температурою інкубаційного середовища, необхідно передбачити можливість регулювання температури під час процесу зволоження в межах, достатніх для забезпечення мінімального рівня обмінних процесів в ізольованій біотканині. Для здійснення запропонованого способу передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів потрібен пристрій, конструкцією якого було б передбачено дотримання зазначених вище технологічних умов. Відомий пристрій для проведення передопераційної підготовки консервованих сухи х біотрансплантатів, який виконано у вигляді відкритої посудини - кювети, наповненої водним середовищем, наприклад ізотонічним розчином хлориду натрію, з компонентами поживних і/або антисептичних речовин, у якому проводять зволоження консервованого біотрансплантату [3]. Недоліком відомого пристрою є відсутність джерела активних форм кисню, необхідних як для ефективної стерилізації консервованих клаптів, так і мобілізації в них внутрішньоклітинних метаболічних процесів. До недоліків слід віднести неможливість здійснення періодичних занурювань клаптів біотрансплантатів, а також відсутність можливості термостатування середовища в зволожувальній кюветі, що суттєво обмежує те хнологічність способу та здатність клаптів до приживлення. В основу винаходу поставлено завдання удосконалити пристрій для передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів, в якому шляхом введення пристосування для періодичного занурювання клаптів консервованих біоірансплантатів у водне середовище в кюветі, індуктора активного кисню у вигляді джерела ультрафіолетових променів та пристрою для термостабілізацїї середовища в кюветі досягають прискорення біотичних процесів в клітинах консервованих тканин, ефективного знезараження їх та підвищення ефективності приживлення трансплантованих клаптів до тканин макроорганізму. Поставлене завдання вирішують тим, що у відомому пристрої для передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів, який має зволожувальну кювету, у відповідності до винаходу кювета виконана у вигляді ізольованого відсіку в корпусі з листової нержавіючої сталі і має площину для періодичного занурення у водне середовище прикріплених до неї клаптів консервованих біотрансплантатів, виконану у вигляді решітки з нержавіючого дроту, жорстко прикріпленої до вісі обертання, яка співвісно насаджена на вал ротора електричного двигуна, а кювета має кришку, на якій встановлено індуктор активного кисню, виконаний у вигляді газорозрядної лампи низького тиску з випромінюванням в ділянці спектру з l max 254нм, причому розрядна лампа має захисний кожух, виконаний з непрозорого для ультрафіолетових променів матеріалу у ви гляді засуву, а пристрій має ізольовану герметичну ємність, виконану з листової нержавіючої сталі з вхідним і вихідним штуцерами для під'єднання до контуру термостатуючої системи і принаймні одна із стінок ємності межує із зволожувальною кюветою. Перелік фігур креслень. Фіг.1. Блок-схема пристрою для передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів. Фіг.2. Загальний вигляд пристрою. Фіг.3. Загальний вигляд опеченої рани хворої (ІІ-ІІІ А ст., опікова поверхня 28%), закритої консервованими ксенодермотрансилантатами, підготовленими заропопонованим способом безпосередньо перед пластикою. Фіг.4. Епітелізація рани після відшарування ксенодермотрансплантатів. Конструктивно пристрій для передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів, складається з блоку живлення і керування 1І (Фіг.1), електричного двигуна 2 з обертальною решіткою 3 та джерела 4 ультрафіолетових променів. Пристрій виконано в єдиному корпусі з листової нержавіючої сталі, відкритий відсік якого відведено під зволожувальну кювету 5, в якій на горизонтальній вісі жорстко закріплена решітка 3, надіта на вісь ротора електродвигуна 2, встановленого у відсіку 6. Дно зволожувальної кювети 5 межує з герметичною ємністю 8, яка мас вхідний та вихідний штуцери (на креслені не позначені) для поєднання до контуру зовнішньої термостатуючої системи (на кресленні не позначена). На верхній кришці 7 корпусу встановлена розрядна лампа 4 низького тиску, потік ультрафіолетового випромінювання якої спрямований всередину кювети 5. Для запобігання пошкоджуючого впливу ультрафіолетови х променів на органи зору медперсоналу джерело 4 має захисний кожух (на кресленні не позначений), виконаний із непрозорого для ультрафіолетового випромінювання матеріалу у вигляді заслінки. Спосіб передопераційної підготовки консервованих біотрансплантатів з використанням запропонованого пристрою здійснюють таким чином. Попередньо закриту заслінкою розрядну лампу 4 включають для стабілізації газового розряду в колбі й виходу на робочий режим, на що затрачається, як правило, 6¸8 хвилин. Цей відтинок часу використовують для проведення підготовчих заходів. При допомозі магістральних шлангів герметичну кювету 8 через штуцери під'єднують до термостатуючої системи і встановлюють потрібний рівень температури. Відібрані для пересадки консервовані клапті біотрансплантату розміщують у один шар і закріплюю на решітці 3 та заливають у зволожувальну кювету стерильне середовище - ізотонічний сольовий розчин, наприклад, натрію хлориду, з домішками поживних речовин, до рівня вісі решітки 3 й включають електродвигун 2 для періодичного занурення клаптів під чає обертання решітки. Після попереднього зволоження клаптів консервованих біотрансплантатів на протязі 1¸3 хвилин відкривають захисну заслінку й спрямовують потік ультрафіолетового випромінювання на зволожені тканинні клапті в кюветі, продовжуючи процес обробки біотрансплантатів ще протягом 5¸10 хвилин. Після цього послідовно вимикають лампу 4, електричний двигун 2 та систему термостатування, а оброблені клапті біотрансплантатів відразу використовують для пересадки на підготовлену рану. Приклад 1. Клапті ксенодермотрансплантату розмістили і закріпили в один шар на решітці пристрою. Зволожувальну кювету наповнили стерильним ізотонічним розчином хлориду натрію в суміші з 5%-ним розчином глюкози у співвідношенні 9:1. Увімкнули перемішування й зволожували тканинні клапті протягом 3 хвилин, після чого процес зволоження продовжували ще 7 хвилин у потоці ультрафіолетових променів. Контролем були клапті ксенодермотрансплантатів, які зволожували протягом 10 хвилин у розчині зазначеного складу, але без ультрафіолетового опромінення. З дослідного і контрольного клаптів готували мкропрепарати на предметних скельцях з фарбуванням шляхом нанесення на них по 0,05мл водного розчину флюорохрому акридину оранжового у розведенні 1:20000 при рН 6,8 та наступним аналізом характеру світіння в полі зору люмінесцентного мікроскопу. Порівнювали контрольний і дослідний взірці за яскравістю вторинної люмінесценції. Інтенсивність світіння досліджували методом фотометрії почорніння емульсійного шару фо топлівки від експонування люмінесціюючих тканинних мікропрератів. Результати дослідження наведені в таблиці (n=14) Таблиця Показники Яскравість, переважаючий Інтенсивність люмінес. (ум.од.) Контрольний препарат ++ зелений 22,4±1,7 Дослідний препарат ++++ зелений 30,7±2,4 Ρ