Спосіб визначення низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій

Реферат: Спосіб визначення низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій, що індукує клітинно-опосередковану імунну реакцію, при якому специфічність та активність пептиду визначають in vivo на морських свинках при встановленні гіперчутливості сповільненого типу до ППД-туберкуліну для ссавців. UA 70791 U (12) UA 70791 U UA 70791 U 5 10 15 20 25 30 Корисна модель, спосіб визначення низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій, належить до галузі сільського господарства, зокрема ветеринарної медицини. Прототипом корисної моделі може слугувати спосіб (Пат. № 16938, МПК А61К 35/28, опубл. 15.09.2006, бюл. № 9. Спосіб отримання пухлиноспецифічного фактора переносу. Фільчаков Ф.В., Бобро Л.І., Шуміліна К.С., Гріневич Ю.Я.), згідно з яким, здатність специфічного низькомолекулярного пептиду відтворювати клітинно-опосередковану імунну реакцію гіперчутливості сповільненого типу, підтверджують за допомогою тесту інгібіції прилипання макрофагів. Недоліком прототипу є оцінка специфічності низькомолекулярного пептиду in vitro та складність постановки тесту інгібіції прилипання макрофагів. В основу пропонованої корисної моделі поставлено задачу розробити спосіб визначення специфічності низькомолекулярного пептиду щодо хвороботворних мікобактерій на біологічному об'єкті, а саме в організмі тварин-реципієнтів. Поставлена задача вирішується тим, що для підтвердження специфічності низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій, як тест-об'єкт використовують лабораторних морських свинок, у яких гіперчутливість сповільненого типу визначають за допомогою ППД-туберкуліну для ссавців. З цією метою морським свинкам вводять низькомолекулярний пептид специфічний щодо хвороботворних мікобактерій підшкірно 3 в дозі 0,5 см двічі, з інтервалом 3 доби. В подальшому через 7 діб проводять внутрішньошкірний туберкуліновий тест із використанням ППД-туберкуліну для ссавців. Для 3 цього вводять внутрішньошкірно в ділянці боку 0,1 см розчину ППД-туберкуліну для ссавців з подальшим визначенням результату реакції гіперчутливості сповільненого типу через 24, 48 та 72 години. Реакція в місці введення туберкуліну у тварин виявляється у вигляді почервоніння, розлитого набряку тістуватої або м'якої консистенції, яка не має, як правило, чітких меж із прилеглою тканиною. У морських свинок після індукції клітинно-опосередкованого імунітету за допомогою низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій виникає тимчасова гіперчутливість сповільненого типу, що вказує на специфічну активність низькомолекулярного пептиду до хвороботворних мікобактерій та виключає інфікування біологічного об'єкту патогенними мікобактеріями (табл.). Таблиця Показники гіперчутливості сповільненого типу до ППД-туберкуліну для ссавців у морських свинок (n=3) Доба досліду 6 10 18 32 52 62 72 Година, на яку проводили чітку реакцію після введення туберкуліну 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. 24 год. 72 год. Назва препарату, що вводили морським свинкам Низькомолекулярний пептид специфічний щодо хвороботворних Ізотонічний розчин натрію мікобактерій, розмір алергічної реакції хлориду (контроль) (см) Дослідні тварини Дослідні тварини 1 2 3 1 2 3 1,0×0,3 1,0×1,5 0,3×0,3 нег* нег нег 0,8×0,5 0,3×1,6 0,2×0,3 нег нег нег 0,8×0,9 1,2×1,4 0,5×0,3 нег нег нег 1,0×1,0 0,2×0,2 нег нег нег нег 0,8×0,3 1,0×1,0 1,0×1,0 нег нег нег нег 0,5×0,4 нег нег нег нег 0,5×0,6 1,5×1,0 0,8×0,8 нег нег нег нег 0,6×0,6 нег нег нег нег 0,4×0,4 1,1×1,2 0,5×0,4 нег нег нег нег 0,4×0,6 нег нег нег нег 0,2×0,2 0,9×1,0 0,4×0,2 нег нег нег нег 0,6×0,5 нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег нег *нег - негативна реакція 1 UA 70791 U 5 Запропонований спосіб дає можливість визначити індукцію клітинно-опосередкованої імунної відповіді in vivo за допомогою алергічної реакції сповільненого типу та диференціювати її від інфекційного процесу, що дозволяє встановити специфічність та безпечність використання низькомолекулярного пептиду з метою профілактики хвороб, які викликають хвороботворні мікобактерії. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 Спосіб визначення низькомолекулярного пептиду специфічного щодо хвороботворних мікобактерій, що індукує клітинно-опосередковану імунну реакцію, який відрізняється тим, що специфічність та активність пептиду визначають in vivo на морських свинках при встановленні гіперчутливості сповільненого типу до ППД-туберкуліну для ссавців. Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2