Спосіб отримання трансфер-фактора “гексаканіс – тф”, специфічного щодо збудників лептоспірозу, аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвовірусної інфекції та чуми м`ясоїдних

Спосіб отримання трансфер-фактора, специфічного щодо збудників лептоспірозу, аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвовірусної інфекції та чуми м'ясоїдних, що включає попередню сенсибілізацію донорів відповідними антигенами, який відрізняє ться тим, що для імунізації свині-донора породи українська біла вагою 80-90 кг як антиген використовують полівалентну вакцину Гексаканівак фірми "Ветзвероцентр", 5 мл якої внутрішньом'язово одноразово вводять за 7-8 днів до планового забою, під час забою від піддослідної свині відбирають лімфоїдні органи: селезінку, лімфовузли, кров, підшлункову залозу, у стерильні скляні банки, поліетиленові пакети або термоси, охолоджують при температурі від 4 до 6 °С або заморожують і транспортують до місця переробки не пізніше як через 24 години після відбору, тканину органів дезагрегують у гомогенізаторі, додаючи рівний об'єм 0,15 М розчину натрію хлориду з 1%м натрію цитрату, суспензію фільтрують через стерильну марлю і центрифугують при 1000 об/хв, U 2 (11) 1 3 36156 4 тусу щеплених тварин. Використання вакцинних ють при 1500об/хв протягом 40-60хв, супернатант препаратів для профілактики цих захворювань не обережно декантують у стерильний посуд і піддазавжди призводить до очікуваного ефекту. І тоді не ють ультрафільтрації або діалізу, відсікають макобійтися без кваліфікованої і невідкладної допоморомолекули з молекулярною масою вище 10кД, ги ветеринарного лікаря. Незважаючи на інтенсивультрафільтрат або діалізат збирають у стерильну терапію, тварини нерідко гинуть. Сказане аргуний скляний посуд стерилізують фільтруванням ментує необхідність пошуку більш надійних під тиском 0,2-0,4 атмосфери через пластинки СФзасобів профілактики та терапії. 1, СФ-3, мембрани мікропористі з діаметром пор Відомий спосіб отримання трансфер-фактору 0,2мкм., препарат розфасовують в асептичних (фірма «4 Life», США), що широко рекламується та умовах у стерильні флакони ємністю 10см 3. використовується для лікування багатьох захвоПрепарат "Гексаканіс-Ф" (трансфер фактор акрювань у людей і тварин базується на отриманні тивного імунітету щодо збудників лептоспірозу, цього препарату із молозива здорових корів. аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвовірусної Недоліком відомого способу є те, що цей преінфекції та чуми м'я соїдних) для собак являє сопарат не є специфічним щодо конкретних збуднибою діалізат або адекватний йому ультрафільтрат ків захворювань тварин та має досить високу варводного екстракту клітин лімфоїдних органів доротість. слих свиней, що містить фактор переносу проти Корисною моделлю ставиться завдання ствосенсибілізуючих агентів та здатний переносити рення простого та ефективного способу отриманспецифічно гіперчутливість сповільненого типу від ня препарату "Гексаканіс-ТФ" (трансфер-фактору імунного організму до неімунного чи імунодефіциактивного імунітету щодо збудників лептоспірозу, тного, стимулюючи специфічно систему імунітету, аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвовірусної зокрема її Т-залежну гілку. інфекції та чуми м'ясоїдних). Зовнішній вигляд препарату - прозора рідина Поставлене корисною моделлю завдання добезбарвна або світло-жовтого кольору, ліофільно сягається тим, що у способі отримання трансфервисушений препарат являє собою пористу масу фактора "Гексаканіс-ТФ", специфічного щодо збубілого або світло-жовтого кольору; препарат недників лептоспірозу, аденовірозу, інфекційного шкідливий, стерильний може бути застосований з гепатиту, парвірусної інфекції та чуми м'ясоїдних, іншими традиційними ліками. що включає попередню сенсибілізацію донорів Спосіб отримання трансфер-фактора "Гексавідповідними антигенами, згідно корисній моделі каніс-ТФ" специфічного щодо збудників лептоспідля імунізації свині-донора породи українська біла розу, аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвірувагою 80-90кг як антиген використовують полівасної інфекції та чуми м'ясоїдних, реалізується лентну вакцину Гексаканівак фірми "Ветзверостадійно: центр", 5мл якої внутрішньом'язово, одноразово - 1 стадія - Сенсибілізація тварин – донорів. вводять за 7-8 днів до планового забою, під час - 2 стадія - Відбір сировини. забою від піддослідної свині відбирають лімфоїдні - 3 стадія - Первинна обробка сировини. органи: селезінку, лімфовузли, кров, підшлункову - 4 стадія - Отримання клітинного субстрату. залозу, у стерильні скляні банки, поліетиленові - 5 стадія - Виділення ДЕЛ. пакети або термоси, охолоджують при температурі - 6 стадія - Стерилізація. від 4° до 6°С, або заморожують і транспортують до - 7 стадія - Фасування. місця переробки не пізніше як через 24 години Технологічний процес реалізації способу після відбору, тканину органів дезагрегують у гоотримання трансфер-фактора "Гексаканіс-ТФ" могенізаторі, додаючи рівний об'єм 0,15М розчину специфічного щодо збудників лептоспірозу, аденатрію хлориду з 1% -м натрію цитрату, суспензію новірозу, інфекційного гепатиту, парвірусної інфефільтрують через стерильну марлю і центрифугукції та чуми м'ясоїдних. ють при 1000об/хв, супернатант зливають, кров І стадія. Сенсибілізація тварин - донорів первідстоюють у холодильнику протягом 24 годин, винного матеріалу. декантують шар лейкоцитів і додають до клітин Для отримання серії препарату з господарстцентрифуга ту, лейкоцитарну масу розводять фізва, що благополучне по інфекційних захворюванрозчином, чи розчином Хенкса у співвідношенні нях свиней, відбирають 10-15 голів клінічно здоро1:2-1:5, відбирають пробу 2-5см 3, концентрацію вих свиней вагою 60-90кг заводської вгодованості, лейкоцитів в 1см 3 лейкоцитарної суспензії підраізолюють в окремому приміщенні, створюють для ховують в камері Горяєва далі лейкоцитарну суних комфортні умови годівлі і утримання і витриспензію переносять у стерильні поліетиленові памують 10 днів для адаптації та спостереження за кети, заморожують у рідкому азоті або в клінічним станом. Всім клінічно здоровим тварихолодильнику при температурі від - 10° до - 80°С і нам вводять вакцину "Гексаканіс" (Росія) в дозі розморожують у термостаті при температурі не 5мл на голову. Через 7-8 днів після введення ваквище 37°С, процедуру заморожування - розмороцини тварин забивають на бойні. жування повторюють 8-10 разів, після руйнування 2 стадія. Відбір сировини. клітин масу розводять стерильною дистильованою Від щойно забитих свиней відбирають селезінводою, розведення проводять так, щоб розбавлеку, лімфовузли, кров, підшлункову залозу у стерина клітинна маса відповідала концентрації 5x108 льні скляні банки, поліетиленові пакети або термоклітин в 1см 3 рідини, далі вносять гомогенізовану си, охолоджують при температурі від 4° до 6°С, підшлункову залозу здорових свиней з розрахунку або заморожують і транспортують до місця пере5г/дм суспензії, ретельно перемішують і залишаробки не пізніше як через 24 години після відбору. ють при 4°С на 24 години, суспензію центрифугу3 стадія. Первинна обробка сировини. 5 36156 6 З поверхні селезінки та лімфовузлів ножицями масою вище 10кД, ультрафільтрат або діалізат видаляють рештки жиру, тканину органів дезагрезбирають у стерильний скляний посуд. гують у гомогенізаторі, додаючи рівний об'єм 6 стадія. Стерилізація. 0,15М розчину натрію хлориду з 1%-м натрію цитУльтрафільтрат стерилізують фільтруванням рату. Суспензію фільтрують через стерильну марпід тиском 0,2-0,4атмосфери через пластинки СФлю і центрифугують при 1000об/хв, супернатант 1, СФ-3, мембрани мікропористі з діаметром пор зливають. Кров відстоюють у холодильнику протя0,2мкм. Стерильний фільтрат збирають у стерильгом 24 годин, декантують шар лейкоцитів і доданий скляний посуд. ють до клітин центрифугата. Лейкоцитарну масу 7 стадія. Фасування. розводять фізрозчином, чи розчином Хенкса у Препарат розфасовують в асептичних умовах співвідношенні 1:2-1:5, відбирають пробу 2-5см 3. у стерильні флакони ємністю 10см 3. Концентрацію лейкоцитів в 1см 3 лейкоцитарної Препарат "Гексаканіс-ТФ" (трансфер фактор суспензії підраховують в камері Горяєва по загаактивного імунітету щодо збудників лептоспірозу, льно прийнятій методиці і записують результат. аденовірозу, інфекційного гепатиту, парвовірусної 4 стадія. Отримання клітинного субстрату. інфекції та чуми м'я соїдних) для собак являє соЛейкоцитарну суспензію переносять у стерильні бою діалізат або адекватний йому ультрафільтрат поліетиленові пакети, заморожують у рідкому азоті водного екстракту клітин лімфоїдних органів дороабо в холодильнику при температурі від -10° до слих свиней, що містить фактор переносу проти 80°С і розморожують у термостаті при температурі сенсибілізуючих агентів та здатний переносити не вище 37°С Процедуру заморожування - розмоспецифічно гіперчутливість сповільненого типу від рожування повторюють 8-10 разів. Після руйнуімунного організму до неімунного чи імунодефіцивання клітин масу розводять стерильною диститного, стимулюючи специфічно систему імунітету, льованою водою. Розведення проводять так, щоб зокрема її Т-залежну гілку. Відноситься до ветерирозбавлена клітинна маса відповідала концентранарної медицини, зокрема, як лікувальноції клітин 5x108 клітин в 1см рідини. Далі вносять профілактичний засіб у практиці ветеринарної мегомогенізовану підшлункову залозу здорових свидицини. ней з розрахунку 5г/дм суспензії, ретельно переЗапропонований спосіб отримання препарату мішують і залишають при 4°С на 24 години. "Гексаканіс-ТФ" може знайти широке застосування Суспензію центрифугують при 1500об/хв продля профілактики і терапії лептоспірозу, аденовітягом 40-60хв, супернатант обережно декантують розу, інфекційного гепатиту, парвовірусної інфекції у стерильний посуд. та чуми м'ясоїдних в державних підприємствах 5 стадія. Виділення ДЕЛ. ветеринарної медицини, приватних клініках, пракСупернатант піддають ультрафільтрації або тикуючими лікарями ветеринарної медицин. діалізу, відсікають макромолекули з молекулярною Комп’ютерна в ерстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство осв іт и і науки України Держав ний департамент інтелектуальної в ласності, вул. Урицького, 45, м. Київ , МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислов ої в ласності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601