Спосіб отримання похідних птерідіна

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных птеридина общей фор-лы (I) где R и R3 ~ замещенная в положении 2 или I Ы N N 3 в положениях 2 и 6 мерилом морфолиногруппа; NRi R2 - N-зтилэтаноламино-, N Изобретение относится к способу получения новых азотсодержащих гетероциклических соединений, имеющих ценные фармакологические свойства, в частности к способу получения производных птеридина общей формулы ( О R N N где R и R3 - замещенная в положении 2 или в положениях 2 и 6 метилом морфолиногруппа; этил-изопропэноламино-, этамол-изопропаноламкно- Ы-[2-окси-2-мртил'П-пропил]зтзноламиноіруппа, R4 - Н или СНз, п ~- 0 или 1, обладающих способностью сенсибилизации опухолей и имеющих первичную или вторичную резистентное^ ь к химиотерапеатическим средствам Цель - создание новых активных веществ указанного класса, Синтез ведут реакцией соединений ф-л (II) и (III) III) HX, где Rr R4 указзно выше; один из Z или Zi нуклеофильная заменяемая группа, а другой - значения для R или Rj или также нуклеофильнозаменяемая группа; X = R или Рз, • с последующим выделением целевого продукта. Новые вещества обладают сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и являются малотоксичными соединениями. 1 табл. Rt и R2 - вместе с находящимся между ними атомом азота образуют N зтил-этаноламино, N-зтия-изопропаноламино, этанолизопропанол-амино,М-(2~окс^-2-метил-н-пропилУэтаноламмно; R - атом водорода ил^і метил, п = 0 или 1, которые могут находить применение в качестве средства для сенсибилизации опухолей, отличающихся первичной пли вторичной резистентностью к химиотерапевтическим средствам. Цель изобретения - поиск способа получения новых соединений в ряду производных птеридина, обладающих сенсибилизирую і 720491 щим действием на устойчивые к адриакицину саркомные клетки. Предлагаемый способ заключается в том, что соединение общей формулы 5 10 где R1, R2, НА И п имеют указанные значения, один мз радикалов Z или Zi означает нуклеофильно заменяемую группу, такую как этом галогена, например атом хлора или брома, а другой радикал Z или Z\ имеет 15 указанные для R или Рз значения, или означает нуклеофильно заменяемую группу, такую как атом галогена, например атом хлора или брома, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы 20 Н-Х, (ІІІ) где X имеет указанные значения радикала R или R3Реакцию целесообразно осуществлять в среде растворителя, такого как тетрагид- 25 рофуран, диоксан, бензол, толуол, диметилсульфоксид или простой диметилгликолевый эфир, при 0~150°С, предпочтительно между комнатной температурой и температурой кипения используемого растворителя или в 30 расплаве. При этом можно использовать акцептор кислоты, например карбонат натрия, тризтиламин или пиридин. Исходные соединения общих формул (И) и (!!!) известны или могут быть получены 35 известными методами. П р и м е р 1.4-{Ы-(2-Окси-2-метил-н-пропил)-этаноламино]-2,7-бис-2,6-диметил-морфолино)-6-фенил-птеридин. а) 2,7-дихлор-4-[іМ-(2-окси-2-метил-п- 40 пролил)-этанолзмино]-6-фенил-птеридин. 15,5 г (0,005 моль) 2,4,7-трихлор-б-феиил-птеридина растворяют в 100 мл ацетона и затем добавляют 13,3 г (0,1 моль) !Ч-(2~окси-2-метил-н-пропил)-этаноламина. 45 Перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре и к образовавшейся суспензии прибавляют 200 мл воды. Выделившийся продукт отсасывают, промывают водой іл кристаллизуют из метанола - воды 50 в соответствии 95:5. Выход 19,9 г (97% от теоритеческого), точка плавления 145-147°С б) 4-[1>|-(2-окси-2-метил-н-пропил}*эт8ноламино]-2,7-бис-{2,6-диметил-морфолин- 55 о)-6-фєнил-птеридин. 2,0 г (0.005 моль) 2,7~дихлор-4-[М-{2-окси-2-метил~п-прогн*л)-этаноламино}-6-фенил-птермдима растворяют в 20 мл дмоксана и вместе t 3,5 г (0,08 моль) 2 6-диметил - а наї ревают с обратным холо> дильник о*, н течение 30 мин. Затем раствор впивают в й1»ду. выделившийся осадок отсасывают, промывают водой и перекристаллизовывают из этилового эфира уксусной кислоты. Выход 2,4 г (84% от теоретического), точка плавления 191-194°С. П р и м э р 2. 4-(Ы-Этил-этаноламино)2,7-бис-{2,6 диметил-морфолино)-6-фенилптеридин получают из 4-(Ы-этил-этаноламино)-2,7-дихлор 6-фенил-птеридина и 2,6-диметил-морфолина знаїюгілчно примеру 1. Выход 31% от теоретического, точка плэвления !28-138°С (этанол). П р и м е р 3. 4-(Этанол-мзопропаноламино)-2,7-бис-2,6-диметил~морфолино)-6фенил-птеридин получают из 4-(этанол-изопропэноламино)-2,7-дихлор~б-фенил-птеридина и 2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1. Выход 60% от теоретического, точка плавления 192-193°С (метанол - вода в соотношении 4:1). Пример4.4-[Ы-(2-Окси-2-метил-н-пропмл)-этаноламино]-2,7-бис-(2~метил-морфолино)-6-фенил-птеридин получают из 4-{N(2-окси-2-метил-п-пропил-зтаноламино}-2,7дихлор-6-фенил-птеридинз и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1. Выход 74% от теоретического, точка плавления 143-147°С (этиловый эфир уксусной кислоты - петролейный эфир). ТІ р и м е р 5. 4-(Этзнол-изолропаноламико)-2,7-бис-{2-метил-морфолино}-6-бенЗил-птеридин получают из 4-(зтанол-изопропаноламино)-2,7-дихлор-6-бензилптеридина и 2-метил-морфолинэ аналогично примеру 1. Выход 55% от теоретического, точка плавления 100-105°С. П р и м е р 6. 4-(Этанол-изопропаноламино)-2,7-бис-(2-метил-морфолино)-6-(отолил)-птеридин получают из 4-(этанол-изопропанолзмкно)-2,7-дихлор-6-(о-толил)птеридина и 2-метил-морфолина аналогично примеру 1. Выход 85% от теоретического, точка плавления. 105-110°С (переосаждение из 0,1 н. соляной кислоты). П р и м е р 7.4-[1\!-{2-Окси-2-метил-н-пропил)-этаноламино}-2,7-бис-{цис-2,6-диметилморфолино)-6-фенил-птеридин получают из 4-£ЬІ-{2-окси-2-мєтил-н-пропил)-зтаноламиноЗ-2,7-дихлор-6-фенил-птеридинэ и цис2,6-диметил-морфолина аналогично примеру 1. Выход 60% от теоретического, точка плйвления 206-209°С (изопропанол). 720491 Применение соединений примеров 1-7 в качестве средства для се^сибьтпизацгм опухолей с первичной или вторичной устойчивостью к химиотерапевтичесшм средствам. 5 В качестве сравнения применялся 7бензиламмно-4-(І\І-метілл-2 -оксиэтиламино)2-пиперазино-птеридин. Действия указанных соединений исследовались на примере резистентных клеток 10 следующим образом. Пролиферирующие, резистентные к адриамицину саркомные клетки S180, выделившиеся из мышей, культивировались s течение 6 дней в присутствии разных кон- 15 центраций испытуемых веществ. Индикатором цитотоксичного или цитостати.ческого действия концентраций испытуемых веществ является уменьшение роста клеток или отмирание клеток. По окончании опыта 20 косвенно определялось количество жизнеспособных клеток на культуру за счет установления способности жизнеспособных клеток к восстановлению красителя МТТ (бромид 3~(4,5-диметил-тиазол-2-ил}-2,5-ди- 25 фенилтетрэзолия) до соответствующего формазана. Определялась концентрация испытуемого вещества, способная к уменьшению количества контроля (далее КУзо). Испытуемые вещества исследовались как в 30 отсутствие эдриамицина, так и а присутстРИИ количества адриамицина (АДР), не задерживающего лолиферацию в условиях культивации. Поэтому для каждого испытуемого вещества получались значения КУБО 35 (первое - в присутствии АДР, т.е. КУБОАДР, второе - в отсутствие АДР, т.е. КУЙО. Разница десятичных логарифмов обоих значений КУбО А= fog КУБОАДР является мерой повышенной цитотоксичности испытуемого зеществэ, вызываемой присутствием 40 адриамицина. Кроме того, резистентность клеток к воздействию АДР устраняется. ниє о дней культ'вгции пипеткою подавали в каждое углубление 50 мкл раствора тетразолиевой соли [5 >-лг бромида 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил) 2,Б дифечилтетраэолия на солевой раствор с фосфатным буфером рззбзвленный до использований средой RPM11640 в объемном гоотношени 15]. После 4-часовой инкубации культурная среда осторожно отсасывалась и образовавшийся внутри клеток формазан солюбилизііровался добавлением 150 мкл диметилсульфоксида/углубление. Пластинки кратковременно встряхивались и измерялась оптическая плотность при 570 нм с помощью фотометра (Д^нзтех MR-600). Образование формаззна путем восстановление 'етразолиевой соли пропорционально количес гву жизнеспособных клеток. Полученные в результате трехKpaTHOfO анализа средние значения использовались для подсчета значений KVsa (степень разбавления 1:2). Результаты опыта приведены в таблице Данные таблицы подтверждают, что птеридины общей формулы (!) отличаются ярковыраженным сенсибилизирующим действием на устойчивые к адриамицину саркомные клетки и поэтому в комбинации с элкглоидами из VltoCA, эгшподофиллотоксинзми или антибиотиками, такими как даунорубицин доксорубицин, блеомицин, митрймицин или митомицин годятся для лечения неопластичиык заболеваний для того, чтобы устранить их устойчивость к соответствующей химиотерапии и таким образом обеспечить ослабление опухолей, устойчивых к этим веществам. Птеридины Формулы (Ї) совместно с химиотерэпевтическим средством предотвращают то, что устойчивые к терапии субпопуляции опухолей могут пережгвать терапию и таким образом вызывать рецидив. Производные птеридина формулы (I) относятся к категории малотоксичних веществ, Экспоненциально растущие, устойчиФормула изобретения вые к адрисмицину или чувствительные к 45 Способ получения производных птериадриамицину клетки S180 помещались в дина общей формулы плоскодонные микротитровые пластинки с 96 углублениями (2000 клеток/углубление), каждое из которых содержало 100 мкл питательной среды (RPIVH-1640 с содержанием 50 10% эмбриональной сыворогки крови крупного рогатого ската). Пластинки инкубирогде R и Кз - замещенная а положении 2 или вались в термостате при 3?°С и относительной влажности воздуха 100% в положениях 2 и 6 метилом морфолиногв присутствии 5% двуокиси углерода, По 55 рулпа; истечении 24 ч добавлялось на углублеRi и R? вместе с находящимся между ние 50 мкл питательной среды, содержаними атомом азота образуют N-зтил-зтанощей разные концентрации испытуемого ламино, N-этил-изопропаноламино. этанолвещества, и 50 мкл питательном среды без адриаммцина или с адриамицином В течен-пропилгэтаноламинс, 1^20491 R4 - водород или метил, п - 0 мли 1. один РЗ радмкзпов / или Zi - "нуклеофильне заменяемая 'руппа а другой радикал Z мли 7\ йме*» і указанные для R или R3 с т л и ч а ю'щ и й с я тем, что соединение знгчения или означает также иуклеофильобщей формулы чую заменяемую группу, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы Н-Х, где X имеет указанные значения R или R3, с последующим выделением целевого прогде Ri, Яг. R4 м л имеют указанные значения; 10 дукта. Соединение примера КУ50 ,мкг/мл Адриамицин, нг/мл ° ь 11.1 ку5й КУ 50 100 нг адриамицинл 100 1 2 3 k 5 6 7 Сравнение 20,69 >3ї,60 12,85 **6,79 70,63 69,0 е 7, У 1,6 1,20 0,60 0,28 0,8*1 1,88 100 Нет активное^ л даже < концент^ ции = 100 мкг/мл. Редактор Т, Лаэоренко Составитель Д Пл\гтицкий Техред М Моргентзл Корректор О Крявцова Заказ 779 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретения г* и окрытиям при гкнт ГС( 113035 Москва, Ж-35, Раушская ь^б V-. Производственно-издательский комбинат "Пате г '*юрод ул Гагарина 101