Спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сканівному електронному мікроскопі (сем)

Реферат: Спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасному сканівному електронному мікроскопі включає етапи фіксації, висушування об'єктів при кімнатній температурі, їх розміщення на плівках-підкладинках, напилення тонким електропровідним шаром вуглецю. UA 80296 U (54) СПОСІБ ОТРИМАННЯ ПРЕПАРАТІВ З БАЗИДІАЛЬНИХ ГРИБІВ ДЛЯ ДОСЛІДЖЕННЯ НА СКАНІВНОМУ ЕЛЕКТРОННОМУ МІКРОСКОПІ (СЕМ) UA 80296 U UA 80296 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до мікології і може бути використана для отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасному сканівному електронному мікроскопі (СЕМ) у мікологічних і виробничих лабораторіях навчальних закладів, науково-дослідних установ та грибівницьких підприємств. Відомий спосіб вивчення морфологічних особливостей поверхонь біологічних об'єктів, а саме: спороутворюючих мікроскопічних організмів, за допомогою СЕМ [1]. Найбільш близьким аналогом за технічною суттю і результатом, що досягається, є спосіб отримання препаратів з грибів, в тому числі і базидіальних, для дослідження на СЕМ з використанням попередньої фіксації формаліном чи осмієм при кімнатній температурі та зневоднення при t=26-28 °C об'єктів в етанолі з концентрацією, яка збільшується аж до абсолютного спирту, їх розміщення на плівках-підкладинках, напилення тонким шаром важких або коштовних металів [2]. Недоліком способу отримання препаратів з грибів для дослідження на СЕМ через використання попередньої фіксації та зневоднення об'єктів, їх розміщення на плівкахпідкладинках, напилення для підвищення контрастності зображення тонким шаром важких металів є те, що він потребує використання для фіксації ректифікованого етанолу у великих кількостях, а для етапу напилення необхідні важкі чи коштовні метали з обмеженим доступом, зокрема хром, золото, платина, паладій, уран та ін. [2]. В основу корисної моделі поставлено задачу пошуку способу отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ шляхом зменшення дороговизни та підвищення безпеки реагентів етапів підготовки. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на СЕМ, що містить етапи фіксації, висушування об'єктів при кімнатній температурі, їх розміщення на плівках-підкладинках, напилення тонким шаром металів, згідно з корисною моделлю, стадію фіксації проводять лише конвекційним висушуванням об'єктів при кімнатній температурі 18-24 °C, а для розміщення об'єктів як плівок-підкладинок використовують струмопровідний двосторонній вуглецевий скотч та напилення здійснюють тонким електропровідним шаром вуглецю товщиною до 50 нм. Запропонований спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ дозволяє значно зменшити кількість етапів з чотирьох до трьох, собівартість реагентів і підвищити ступінь безпеки препарувальних та дослідницьких робіт. Перевага запропонованого способу отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ у порівнянні з найближчим аналогом полягає в тому, що його виконання потребує меншої кількості етапів та використання дешевого та небезпечного напилювача. Виключення з технологічного процесу необхідності використання дуже небезпечних формаліну чи осмію, дорогого ректифікованого етанолу та коштовних або небезпечних напилювачів, зокрема хрому, золота, платини, паладію, урану та ін., та їх заміна на більш дешевий вуглець графітів та зменшення кількості операцій дає можливість значного зниження собівартості та підвищення рівня доступності способу отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ. Таким чином, запропонований спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ виключає застосування дефіцитних компонентів та дорогих складових, необхідних для приготування зразків. Приклад конкретного виконання. Для дослідження спор базидіального гриба Pleurotus ostreatus (Jacq.: Fr.) Kummer готують споровий відбиток, залишаючи шапинку плодового тіла в стерильній чашці Петрі протягом доби. Споровий порошок конвекційно висушують при кімнатній температурі 18-24 °C. Висушені спори розміщують на електропровідній плівці-підкладинці з струмопровідного двостороннього вуглецевого скотча і для отримання зображення при мікроскопічному дослідженні на СЕМ напилюють тонким шаром вуглецю товщиною до 50 нм. Саме тонкий шар вуглецю до 50 нм є оптимальним, тому що забезпечує максимальні якість та контрастність зображень препаратів з базидіальних грибів. Отриманий препарат зі спор базидіального гриба P. ostreatus використовували для досліджень на мікроскопі типу JSM 6490 LV при збільшенні до 30000 разів для визначення морфологічних ознак, а саме: їх розмірів, форми, штамових відмінностей. Якість та контрастність зображень препаратів з базидіальних грибів, отриманих в такий спосіб, не відрізняються від зображень препаратів, отриманих способом прототипу. За запропонованою корисною моделлю спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасних СЕМ має значні переваги, а саме: зменшення дороговизни, кількості етапів, доступності складових та підвищення безпеки роботи порівняно з прототипом. 60 1 UA 80296 U 5 Джерела інформації:, використані при складанні заявки. 1. Смирнова Т.А. Характеристика спор и кристаллов Brevibacillus laterosporus / Т.А. Смирнова, Н.В. Шевлягина, М.А. Николаенко, B.В. Сорокин, М.В. Зубашева, Р.Р. Азизбекян // Биотехнол.-2011. - № 6. - C. 29-37. 2. Методы экспериментальной микологии / [И.А. Дудка, С.П. Вассер, И.А. Элланская]; под ред. В.И. Билай. - К.: Наукова думка, 1982.-550 с. (найближчий аналог). ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 10 15 Спосіб отримання препаратів з базидіальних грибів для дослідження на сучасному сканівному електронному мікроскопі (СЕМ), що містить етапи фіксації, висушування об'єктів при кімнатній температурі, їх розміщення на плівках-підкладинках, напилення тонким шаром металів, який відрізняється тим, що стадію фіксації проводять лише конвекційним висушуванням об'єктів при кімнатній температурі 18 - 24 °C, а для розміщення об'єктів як плівок-підкладинок використовують струмопровідний двосторонній вуглецевий скотч та напилення здійснюють тонким електропровідним шаром вуглецю товщиною до 50 нм. Комп’ютерна верстка М. Ломалова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2