Церебропротекторний засіб

Церебропротекторний засіб для відновлення фізичних і інтелектуальних функцій, що містить як активний інгредієнт гідрохлорид-β-феніл-γаміномасляну кислоту, який відрізняється тим, що додатково містить 3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіонату дигідрат при такому співвідношенні активних інгредієнтів, г: гідрохлорид-β-феніл-γ-аміномасляна кислота 0,1-1,0 3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіонату дигідрат 0,1-2,0. (19) (21) a200605026 (22) 06.05.2006 (24) 11.02.2008 (72) ДУДКО ОЛЕНА ТАРАСІВНА, UA (73) ТОВАРИСТВО З ОБМЕЖЕНОЮ ВІДПОВІДАЛЬНІСТЮ "ОЛФА", UA, ДУДКО ОЛЕНА ТАРАСІВНА, UA (56) UA A 58149 15.07.2003 UA U 4678 17.01.2005 UA U 9224 15.09.2005 UA A 69231 16.08.2004 3 ішемізовані зони [Реєстраційне посвідчення №П.07.00/02.120 від 29.05.02]. Однак, препарат має побічну дію - можливі виникнення диспепсичних явищ, збудження, свербіжу. Також відомий і психотропний препарат ноофен - гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота (синоніми - фенібут, нообут ІC), який має елементи ноотропної активності - пришвидшує процеси навчання, покращує пам'ять, мнестичні здібності, підвищує стійкість мозку до гіпоксії, інтоксикації тощо [Реєстраційне посвідчення №П. 10.00/02315, №ПА/3773/01/01 від 09.11.05]. Проте, для досягнення позитивного ефекту, потрібно використовувати великі дози препарату та приймати його тривалий час. В основу винаходу поставлено задачу розробити церебропротекторний засіб для відновлення фізичних і інтелектуальних функцій шляхом поєднання двох активних інгредієнтів і підбору певного співвідношення між інгредієнтами, що дозволить покращити ефективність церебропротекторної дії - кровопостачання мозку, поліпшити антигіпоксичну дію і метаболізм та активізувати біоенергетичні процеси. За рахунок цього покращиться відновлення фізичних і когнітивних функцій та якість життя пацієнтів. Розробка препарату дозволить розширити арсенал даних лікарських засобів. Поставлена задача досягається тим, що в засобі, який включає в якості активного інгредієнта гідрохлорид β феніл - γ аміномасляну кислоту, згідно з даним винаходом, новим є те, що додатково містить 3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат) при наступному співвідношенні активних інгредієнтів, г: гідрохлорид β феніл- γ аміномасляна кислота - 0.1 1.0; 3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат) - 0.1- 2.0. Між сукупністю суттєвих ознак винаходу, що заявляється і позитивним ефектом, який досягається, є наступний причино-наслідковий зв'язок. Експериментально доведено, що такий підбір інгредієнтів та їх співвідношення у даному засобі має виражену церебропротекторну дію, яка пов'язана з антиішемічним ефектом і переважає гідрохлорид β феніл- γ аміномасляну кислоту за рівнем ефективних доз; дана комбінація препаратів ефективно впливає на процесинги пам'яті полегшуючи процеси обробки інформації, її фіксації, консолідації та відтворення; має анксиолітичну дію, седативну, антигіпоксичну, відновлює показники енергетичного обміну порушеного у тварин при гострому порушенні мозкового кровообігу, що перевищує ефект кожного окремо взятого препарату; викликає потенціювання дії. Відхилення від вищевказаних співвідношень інгредієнтів, а саме зменшення дози у співвідношеннях, призводить до зменшення ефективності через недостатнє потенціювання властивостей, збільшення дози може викликати ускладнення або ж небажані ефекти чи надмірну дію. 81849 4 Поєднання в якості активних інгредієнтів гідрохлорид β феніл- γ аміномасляної кислоти та (3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрата в складі лікарського засобу при даному співвідношенні виключає виникнення ускладнень або ж небажаних алергічних реакцій. Лікарський засіб одержують таким чином: Активні інгредієнти змішують між собою в співвідношенні, яке є оптимальним, до одержання однорідної суміші. Готують різні лікарські форми - розчини для перорального застосування, розчини для інфузій та ін'єкцій; сиропи, краплі, емульсії, порошки, гранули, таблетки, капсули, драже, спансули, каплети, супозиторії. Для цього приготовлену в оптимальному співвідношенні активних інгредієнтів суміш змішують в спеціалізованих мішалках з відповідним фармацевтично прийнятним наповнювачем чи носієм в кількості, яка забезпечує досягнення технологічних якостей лікарської форми згідно з вимогами сертифікату "Належної виробничої практики лікарських засобів" (2004). Оскільки реабілітаційна терапія в основному направлена на попередження та лікування гіпоксії та поліпшення кровообігу головного мозку, то і дослідження фармакологічної активності комплексного препарату з активними інгредієнтами гідрохлорид β фенілγ аміномасляна кислота та (3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат направлені на вивчення протиішемічної, антигіпоксичної дії, показників енергетичного обміну. Протиішемічну дію комбінованого препарату вивчали на білих безпородних щурах, масою 140170г. Гостре порушення мозкового кровотоку (ГПМК) моделювали одностороннім перев'язуванням загальної сонної артерії. Після введення препаратів на 2, 3, 4 день реєстрували неврологічний дефіцит за шкалою stroke-index. Щоденно тварини тестувались у "відкритому полі" для вияснення основних ознак: рухової активності, стереотипних рухів, птозу, парезів і паралічу кінцівок, клонічних судом, стану свідомості, можливості утримуватись на стержні, який обертається. Враховували виживання тварин. На 4 добу тварин виводили із досліду, обезкровлювали, окривали черепну коробку, виділяли ліву ішемізовану півкулю мозку, заморожували та підготовлювали для оцінки показників енергетичного обміну мозку - АТФ, лактату, пірувату і малату. В сироватці крові визначили активність церебрального ізоензиму креатинфосфокінази (ВВ-КФК). Досліди показали, що одностороннє перев'язування загальної сонної артерії призводило до загибелі 50% тварин в перші 3 доби. В групі тварин, яким вводився комплексний препарат гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота та (3-(2,2,2-триметилгідразиній) пропіоната дигідрат, загинув на другу добу тільки 1 щур (табл. 1). Спостерігалась позитивна динаміка неврологічного дефіциту (табл.2), ГПМК 5 супроводжувалось гальмуванням циклу Кребса з переключенням енергетичного обміну на гліколітичний шлях, зниженням вмісту АТФ, пірувату, малату та підвищенням лактата в ішемізованій тканині головного мозку. Відбувалась гіперферментамія ВВ-КФК, що свідчить про порушення функціонально структурної цілісності мембран нейронів. Введення комплексного препарату гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота та (3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат протягом 4 діб призводило до відновлення вмісту всіх показників енергетичного обміну. Достовірний лікувальний ефект мали на гіперактивність ВВКФК (табл. 3). Отримані результати свідчать про потенціювання дії комплексного препарату, який заявляється, яка значно перевищує дію кожного із взятих інгредієнтів. Антигіпоксичний ефект препарату, який пропонується вивчали на двох експериментальних моделях: гіпобаричної гіпоксії і гіпоксії замкнутого простору. Протигіпоксичну дію в обох дослідних моделях гіпоксії оцінювали за продовженням життя тварин (табл. 4, 5). Отримані результати дослідів показали, що введення даного препарату подовжує термін життя тварин, тоді як кожен із окремо взятих препаратів не значно впливали на виживання. Спостерігається взаємне потенціювання антигіпоксичної дії. Таким чином комплексний препарат з активними інгредієнтами-гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота та (3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат має протиішемічний ефект, який пов'язаний з впливом на енергетичний обмін в ішемізованій тканині та антигіпоксичну активність. При цьому цей ефект є вираженим - взаємно потенціювальним. Стандартизованими методиками доведений і транквілізуючий ефект дії цього препарату за показниками анксиолітичної активності, агресивної поведінки тварин, протисудомний та міорелаксаційний вплив. Досліджуючи гостру токсичність комбінованого препарату доведено, що цей препарат не викликає паталогічних змін внутрішніх органів і відноситься до IV класу токсичності (малотоксичні речовини). Препарат не володіє місцево-подразнюючою дією та не викликає алергічної реакції. Отримані результати дають можливість стверджувати, що даний церебропротекторний препарат значно покращує метаболічні процеси і відновлює фізичні та інтелектуальні функції організму. 81849 6 Контрольна група Контроль, тварини з ГПМК(не ліковані) гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота + 3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат гідрохлорид β феніл - γ аміномасляна кислота 3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат 100 75 87 75 75 Динаміка неврологічного дефіциту (за шкалою С.Me Grow) у тва Середня кількість б Твар Тварини з ГПМК (гідрохлорид Доба ГПМК(гід β феніл - γ аміномасляна спостереження Тварини 3 β фе кислота ± 3-(2,2,2ГПМК аміном триметилгідразиній)пропіоната кисл дигідрат) 2 6.85±1.0 5.98±0.9 6.38 3 7.26±0.8 5.12±0.4* 6.88 4 7.84±0.9 4.06±0.5* 5.24 *- достовірність в порівнянні з ГПМК, які не ліковані Активність ізоензима креатинфосфокінази (ВВ-КФК) в сироватці кровітварин з ГПМК дані на 4добу лікування Групи тварин Показники Інтактна група (контроль) Твариниз ГПМК Тварини з ГПМК гідрохлорид β феніл – γ аміномасляна кислота +3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіонат дигідрат ВВ-КФК 0.038±0.004 0.117±0.003 моль/л/год 0.032±0.005* *- достовірна різниця по відношенню до ГПМК Таблиця 4 Антигіпоксичний ефект дії комбінованого препарату з активними інгредієнтами гідрохлорид β феніл – γ аміномасляна кислота + 3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат в умовах гіпобаричної гіпоксії Препарати n Продовження життя, хв 14.6±3.4 Контроль 6 гідрохлорид β феніл – γ аміномасляна кислота + 36 34.1±4.6* (2,2,2триметилгідразиній)пропіонат Таблиця 1 а дигідрат гідрохлорид β феніл – γ Виживання тварин, які не лікувались та лікувались препаратом з активними інгредієнтами 6 гідрохлорид β 24.7±4.3* аміномасляна кислота феніл - γ аміномасляна кислота +(3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат; гідрохлорид β феніл 3-(2,2,2γ аміномасляну кислоту (ноофен); (3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат (мілдронат) триметилгідразиній)пропіонат 6 21.1±6.2 а дигідратВідсоток виживання Групи тварин Час спостереження, доба порівнянні з контролем 2*- достовірність в 3 4 7 81849 Таблиця 5 Антигіпоксичний ефект дії комбінованого препарату гідрохлорид β феніл – γ аміномасляна кислота і 3-(2,2,2-триметилгідразиній)пропіоната дигідрат а в умовах гіпоксії замкнутого простору. Препарати n Продовження життя, хв. 6 9.1+2.0 Контроль гідрохлорид β феніл – γ аміномаслянакислота +(36 (2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат гідрохлорид β феніл – γ 6 аміномасляна кислота 6 (3-(2,2,2триметилгідразиній)пропіоната дигідрат 24.8+3.4.* 11.3±3.1 17.4±1.8* *- достовірність в порівнянні з контролем 8