Спосіб стимуляції росту пилкових трубок in vitro

Реферат: UA 84842 U UA 84842 U 5 10 15 20 25 Корисна модель належить до фізіології та біохімії рослин, біотехнології і може знайти застосування в лабораторних дослідженнях біологічних об'єктів, ембріології, генетичних та селекційних програмах. Відомий спосіб одержання пилкових трубок in vitro, у різних покритонасінних рослинах, шляхом пророщування їх пилку в краплях, що висять з нижнього боку чашки Петрі, на дистильованій воді (Голубинский И.Н. Биология прорастания пыльцы. - К.: Наукова думка, 1974. - 352 с.). Незважаючи на простоту, зручність та результативність відомого способу, він має важливий недолік - при його використанні не вдається отримати пилкові трубки, які б за своєю довжиною відповідали їх розмірам in vivo. Задача корисної моделі полягає в створенні in vitro умов, за якими можна було б отримувати пилкові трубки максимальної довжини. Поставлена задача вирішується за рахунок того, що у середовище, у якому пророщується пилок додається екстракт листя ехінацеї пурпурової -3 -5 концентрацією 10 -10 %. В таблиці наведені результати обліку, з яких можна зробити висновок, що пропонований спосіб дає змогу отримувати in vitro більші за довжиною пилкові трубки, ніж відомий спосіб. При -3 -5 використанні екстракту ехінацеї концентрацією 10 -10 % довжина пилкових трубок становила 800-1360 мк., що на 170-730 мк. перевищувала найближчий аналог. Спосіб здійснюється наступним чином. Свіжозібраний пилок пророщується in vitro у краплях, що висять з нижнього боку чашки Петрі, контролем слугує дистильована вода. У дослідних варіантах середовищем є водні екстракти повітряно-сухого листя ехінацеї пурпурової різної -3 -5 концентрації від 10 % до 10 %. Повторність досліду - триразова. Для цього на скло чашки Петрі наносять краплі живильного середовища, висівають пилок. Пророщування ведеться на розсіяному світлі при кімнатній температурі. Визначення довжини пилкових трубок здійснюють шляхом їх зарисовування приладом Аббе у трьох полях зору через 24 години після початку пророщування пилку; фотографують за х допомогою цифрової камери ТС А 3.0 та мікроскопа«Ломо» при збільшені у 100 . Таблиця Дистильована вода -1 Екстракти у концентрації; 10 % -2 10 % -3 10 % -4 10 % -5 10 % -6 10 % -7 10 % -8 10 % -9 10 % -10 10 °% 30 35 40 Максимальна Довжина пилкових трубок, мк ± до найближчого аналога 630 530 -100 800 + 170 1000 + 370* 800 + 170* 1360 + 730* 700 + 70 1200 + 570 610 -20 680 +50 470 -160 * достовірно на рівні t0,05 Приклад. В 2012 році було проведено пророщування in vitro пилкових зерен тютюну крилатого (Nicotiana alata Link, et Otto) з метою отримання пилкових трубок максимальної довжини. Для цього були підготовлені різні середовища - дистильована вода (найближчий -5 аналог) та екстракт листя ехінацеї пурпурової концентрацією 10 % (запропонований спосіб). Визначення довжини пилкових трубок вели у трьох полях зору через 24 години після початку пророщування пилку. Вимірюванням довжини пилкових трубок довелося встановити, що максимальної довжини - 1300 мк. вони досягли на середовищі з екстрактом ехінацеї пурпурової -5 10 %; тоді як у контролі - дистильована вода, їх максимальна довжина становила 680 мк., тобто за пропонованим способом вони були довшими на 620 мк., що підтверджується статистично. 1 UA 84842 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб стимуляції росту пилкових трубок in vitro, що включає пророщування пилку на живильному середовищі, який відрізняється тим, що середовище містить екстракт листя -3 -5 ехінацеї пурпурової концентрацією 10 -10 %. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2