Спосіб одержання білково-вітамінного продукту на основі грибів fusarium sambucinum імв f-100011 і mycelia sterilia (white) імв f-100014

1. Спосіб одержання білково-вітамінного продукту на основі грибів шляхом одержання іноку C2 2 (19) 1 3 кормового продукту, незначний вміст водорозчинних і жиророзчинних вітамінів, відсутність каротиноїдів, убіхінону та інших біологічно активних речовин, у тому числі хітину та його похідних, а також досить значна тривалість процесу ферментації (до 72 годин) та значні енергетичні витрати за рахунок використання в способі термофільного продуцента. Відомо штам - Fusarium sambucinum ВКПМ F867 - продуцент комплексу біологічно активних речовин, для одержання яких рекомендовано використовувати поживне середовище, яке містить молочну сироватку [RU, 2259209, 20.08.2004]. Недоліком цього способу є використання дефіцитної в харчовій промисловості молочної сироватки, витрати на її попередній гідроліз, тривалість процесу вирощування посівного матеріалу. В отриманому продукті низький вміст білка та деяких вітамінів, відсутність ряду коферментів, у тому числі убіхінону Q10, хітину та його похідних, а також інших важливих біологічно активних речовин. Найбільш близьким аналогом до способу, що заявляється, є спосіб одержання хітинвмісного вітамінного препарату на основі грибів шляхом спільного культивування двох штамів грибів Fusarium sambucinum ВКПМ F-139 - продуцента вітамінів з високим вмістом тіаміну, біотину, нікотинової кислоти та хітину (12-14,3%) та Реnісіllium sclerotiorum lMB F-100015 - продуцента каротиноїдів (1-2мг/г) [UA, 49548 15.12.2004]. Процес культивування передбачає одержання посівного матеріалу (1 стадія) і ферментації (2 стадія), яку ведуть на середовищі Чапека, що містить як джерело вуглецю відходи цукрового виробництва (1%-ну мелясу), в умовах аерації при температурі 24-26°С з одночасним засівом двох штамів грибів Fusarium sambucinum ВКПМ F-139 та РепісіШит sclerotiorum lMB F-100015, (при співвідношенні 1:1), протягом 48-60 годин. Після закінчення ферментації проводять термічну обробку отриманої суміші протягом 50-55 хвилин і в подальшому розділяють на рідку та тверду фазу шляхом фільтрації. В рідкому або висушеному стані отримана хітинвмісна вітамінна добавка може бути використана як кормова. Недоліком цього способу є невисока біологічна цінність одержуваного препарату, який характеризується незначним вмістом водорозчинних та жиророзчинних вітамінів, відсутністю ряду найбільш важливих вітамінів (фолієвої кислоти (В9), Ε та В12), похідних нікотинової кислоти (НАД), а також коензиму А, мікроелементів, ессенціальних жирних кислот, низьким вмістом білка (36,4%), тривалістю процесу ферментації (2-стадія до - 60 годин). В основу винаходу поставлено задачу розробки способу для одержання високоякісного білкововітамінного продукту на основі нових штамів грибів з високим вмістом вітамінів та скороченням тривалості процесу ферментації. Поставлена задача вирішена тим, що в способі, який заявляється, застосовується сумісне культивування двох нових видів штамів-продуцентів: Fusarium sambucinum lMB F-100011 - білкововітамінного продуцента з широким спектром вітамінів, у тому числі з високим вмістом нікотинової 90403 4 кислоти (вітаміну В3) та її похідних, біотину (вітаміну В7), убіхінону (Q10), каротиноїдів і штаму Mycelia sterilia (white) lMB F 100014 - білково-ферментного продуценту, з високим вмістом білка [Свідоцтво про первісне депонування штаму мікроорганізму в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології НАН України, реєстраційний номер - Fusarium sambucinum lMB F-100011 від 04.06.1998. Свідоцтво про первісне депонування штаму мікроорганізму в Депозитарії Інституту мікробіології і вірусології НАН України, реєстраційний номер - Mycelia sterilia (white) lMB F 100014 від 08.07.2001]. У результаті сумісного і культивування штамівпродуцентів Fusarium sambucinum 1MB F-100011 і Mycelia sterilia (white) lMB F 100014 забезпечується значне збагачення одержуваного білкововітамінного продукту біологічно активними речовинами, в тому числі вітамінами, білком, ненасиченими жирними кислотами, мікроелементами. Отриманий заявленим способом продукт характеризується високим вмістом білка (52,054,0%), ліпідів (4,4-4,6%), вітамінів (у мкг/г: тіаміну (В1) -25,0-30,0, В3 - 800,0-1200,0, пантотенової кислоти (В5) - 1250,0-1400,0, В7 - 18,0-20,5, В9 - 17,017,5, каротиноїдів - 9700-12000, коферменту НАД (НАД) - 450-600, Ε - 38,0-40,0, Q10 - 28,0-32,0), хітину - 7,2-7,8% (Таблиця), а також містить есенціальні жирні кислоти й мікроелементи. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 (Anamorphic fungi, Tuberculariales, Tuberculariaceae), використаний у способі, що заявляється, має наступну морфологічну та фізіологічну характеристики. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 - атоксигений, має швидкий ріст, слабке спороношєння. Конідієносці прості, типу фіалід, макроконідії з 2-3 перегородками, серповидної форми розміром 16-40×3,0-4,0мкм. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 утворює хламідоспори, Гіфи міцелію потовщені - 4,5-5,0мк, зібрані в тяжі, заповнені жировими вкрапленнями. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 утворює хламідоспори. Штам Fusarium sambucinum lMB F100011 росте добре на природних і синтетичних середовищах, засвоює широкий спектр вуглеводів: сахарозу, мальтозу, інозит, маніт, этанол, метанол, сорбіт, лактозу та органічні кислоти. Із джерел азоту добре засвоює: нітратний, амонійний азот, сечовину. Штам Fusarium sambucinum lMB F100011 росте в широких межах рН - 3,5-8,5. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 мезофільний, оптимальна температура 26-28°С, при температурі понад 37°С не росте. Ознаки штаму Fusarium sambucinum lMB F-100011 стійкі. Штам Fusarium sambucinum lMB F-100011 - продуцент комплексу вітамінів, коферменту НАД, Q10, містить: білок 38,0-40,0%, амінний азот - 4,0-4,2%, ліпіди - 4,34,5%, вітаміни (в мкг/г: В1 - 8,0-12,0, В3 - 850,01000,0, піридоксин (В6) - 18-20, В7 - 15,5-18,0; В9 15,5-16,5, каротиноїди 9000-10000, НАД - 400-450, Ε - 25-30, Q10 - 20-30), есенціальні жирні кислоти, незамінні амінокислоти, з перевагою лізину, триптофану. Штам Mycelia sierilia (white) lMB F-100014, {Anamorphic fungi, Agonomycetales. Agonomycetaceae) використаний у способі, що 5 90403 заявляється, відноситься до мезофільних штамів, характеризується добрим ростом, відсутністю спороношення. Росте добре як на штучному, так і на синтетичному середовищах. Гіфи міцелію розділені перегородками, тонкі 2-3мк у діаметрі. При глибинному культивуванні на рідкому середовищі Чапека гриб утворює характерні сплетення гіф пелети розміром з горошину білого кольору. Засвоює широкий спектр вуглеводів: глюкозу, сахаразу, мальтозу, лактозу, органічні кислоти. Легко засвоює нітратний, амонійний азот, сечовину, амінокислоти та інші органічні джерела азоту. Штам 6 росте в широких межах рН - 3,0-9,0 при оптимальній температурі (26±2)°С. Штам Mycelia sterilia (white) IMF-100014 - білково-ферментний продуцент, містить білок -50,0-53,0%, незамінні амінокислоти, з перевагою лізину, триптофану, треоніну, вітаміни (в мкг/г: В1 - 13,0-15,0, В5 - 750,0-800,0, В7 - 18,5-19,0, В9 - 10,0-12,0, убіхінони (в тому числі Q10 - 8,5-10,0), Ε - 30,0-35,0), хітин - 6,6-6,8%. Має сприятливий склад ліпідної фракції з високим вмістом ненасичених жирних кислот, загальний вміст ліпідів - 3,3-3,5%. Характеризується високою целюлозолітичною активністю. Таблиця Характеристика білково-вітамінного продукту, отриманого шляхом спільного культивування грибів за способом, що заявляється (n=5) Варіанти спо- Білок, Ліпіди, Хітин, собу % % % B1 В3 За найближчим аналогом: Fusarium sambncinum 36,4 6,2 BKM F-139 + Penicillium sclerotiorum lMB F-100015 За заявленим способом: Fusarium sambucinum F100011 + 52,0- 4,47,2- 25,0- 850Mycelia sterilia 54,0* 4,6* 7,8 30,0* 1200* (white) IMB F100014 B5 B6 Вітаміни, мкг/г B7 B9 Каротиноїди НАД 16,018,0 10000,020000,0 Ε Q10 1250- 18,0- 18,0- 17,01400* 24,0 20,5 17,5* 9700,012000,0 500,0- 38,0- 28,0600,0 40,0* 32,0* Монокультура Fusarium 38,0sambucinum 40,0* lMB F-100011 4,34,5* 5,6- 8,0- 850,0- 850,0- 18,0- 15,5- 15,55,8 12,0* 1000,0* 1200,0* 20,0 18,0 16,5* 9000,010000,0 400,0- 25,0- 20,0450,0 30,0* 30,0* Монокультура Mycelia sterilia 50,0(white) lMB F- 53,0* 100014 3,33,5* 6,6- 13,0- 500,0- 750,0- 18,5- 18,5- 10,06,8 15,0* 600,0* 800,0* 21,0 19,0 12,0* 6000,06500,0 510,0- 30,0- 8,5560,0 35,0* 10,0* * - дані ймовірні (р