Проведення серологічної реакції проби росту з кров’ю на фільтрувальному папері

Реферат: Проведення серологічної реакції проби росту з кров'ю на фільтрувальному папері полягає в тому, що для проведення серологічної реакції використовують розчин сироватки крові тварин, попередньо екстрагований з повітряно-сухого зразка крові на фільтрувальному папері, який стерилізують методом фільтрації з використанням шприцевих фільтрів з розмірами пор < 0,2 μm. UA 91322 U (12) UA 91322 U UA 91322 U 5 10 15 20 25 30 35 40 Корисна модель належить до способів лабораторної діагностики інфекційних хвороб і може знайти застосування в практичній та науковій діяльності для встановлення хронічних та латентних форм перебігу хвороб, визначення імунологічного статусу, антитілоутворення, а також вивчення особливостей екологічних взаємодій домашніх, сільськогосподарських та диких тварин з патогенними мікроорганізмами. Відомий спосіб серологічної діагностики інфекційних хвороб - проба росту [Воронин Е.С. Рожа свиней: профилактика и меры борьбы /B.C. Воронин, М.В. Воронина. - М.: ВНИИТЭНагропром, 1987. - 46 с.]. Зазначений спосіб базується на здатності аглютинуючих протибактеріальних антитіл, що містяться у сироватці крові хворих, перехворівших чи вакцинованих тварин, аглютинувати та осаджувати патогенні бактерії, що вирощуються на поживному середовищі. Недоліками цього методу є необхідність використання сироватки крові тварин, що одержана в стерильних умовах. В основу корисної моделі поставлено задачу знайти спосіб проведення серологічної реакції проби росту з використанням зразків крові на фільтрувальному папері одержаних в нестерильних умовах. Для вирішення поставленої задачі були використані стерильні шприцеві фільтри з розмірами пор < 0,2 μm. Проведення серологічної реакції проби росту з кров'ю на фільтрувальному папері полягає у наступному: 1. Фільтрувальний папір із плямою повітряно-сухої крові (об'єм крові при нанесенні на 3 3 фільтрувальний папір має становити близько 1,2 см , в якому міститься 0,4 см сироватки) подрібнюється ножицями і вкладається у пробірку. 3 2. Для одержання основного (10 %) вмісту сироватки крові у пробірку вносять 3,6 см поживного середовища для бактерій і залишають при кімнатній температурі на 1,5 години для екстрагування. 3. Фільтрувальний папір віджимають пінцетом, а одержаний розчин сироватки крові стерилізують за допомогою шприцевих фільтрів з розмірами пор < 0.2 μm, відповідно до інструкції щодо їх застосування. 3 4. Методом послідовних розведень готують зразки об'ємом 2,0 см поживного середовища, що містять сироватку крові у концентрації - 5,0 %, 2,5 %, 1,3 %, 0,6 %, 0,3 %. 3 5. У кожен зразок як антиген вноситься 0,05 см добової культури патогенних бактерій. 6. Облік результатів проводять через 22-24 години. Використання запропонованого способу проведення серологічної реакції проби росту з кров'ю на фільтрувальному папері у порівнянні з існуючим способом забезпечує наступні переваги: для проведення аналізу зразки крові можна відбирати за відсутності стерильного посуду (пробірок), що особливо важливо при роботі в експедиційних умовах; відібрані зразки для зберігання не потребують охолодження чи заморожування; проби крові на фільтрувальному папері легко перевозити чи пересилати у лабораторію поштою у конвертах. Для порівняння результатів реакції проби росту з використанням сироваток крові одержаних в стерильних умовах та проб крові на фільтрувальному папері були проведені серологічні дослідження тварин (свині, n=30) на бешиху. Від кожної з тварин одночасно відбирались порівнювальні пари проб. Результати досліджень наведені у таблиці. Вміст сироватки крові у зразках, % 5,0 2,5 1,3 0,6 0,3 45 50 Результати серологічної реакції проби росту Проби сироватки крові одержані в Проби крові на фільтрувальному папері стерильних умовах позитивно негативно позитивно негативно 11 19 11 19 10 20 10 20 8 22 8 22 3 27 3 27 0 30 0 30 З даних, викладених у таблиці видно, що результати серологічної реакції проби росту проведеної за "класичною" (з використанням сироватки крові одержаної в стерильних умовах) та пропонованого способу (проба крові на фільтрувальному папері) аналогічні. Таким чином, проведення серологічної реакції проби росту з кров'ю на фільтрувальному папері дає можливість значно спростити процес відбору, підготовки, транспортування, зберігання зразків крові із повним збереженням чутливості цієї діагностичної проби. 1 UA 91322 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Проведення серологічної реакції проби росту з кров'ю на фільтрувальному папері, яке відрізняється тим, що для проведення серологічної реакції використовують розчин сироватки крові тварин, попередньо екстрагований з повітряно-сухого зразка крові на фільтрувальному папері, який стерилізують методом фільтрації з використанням шприцевих фільтрів з розмірами пор < 0,2 μm. Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 2