Комплексна сіль са-альдонової та амінокарбонової кислот, що виявляє протипухлинну дію, та спосіб її одержання

1. Комплексна сіль Са-альдонової та амінокарбонової кислот, що виявляє протипухлинну дію, формули (І): 2 3 92303 4 - складність синтезу; зв'язків в ДНК та між ДНК та кальцій-зв'язуючими - недостатня протипухлинна активність; внутрішньоядерними протеїнами, експресією онко- надлишкова насиченість організму лужнозегенів, втратою кальцію в ДНП. Для підтримки момельним металом. лекулярної архітектоніки та стабільності біохімічПри ретельному аналізі результатів синтезу них мембран особливо важливою є здібність іонів хімічної речовини згідно прототипу було встановСа наближувати молекули за рахунок сил електлено, що лужноземельні метали були використані ростатичного тяжіння. Автором була встановлена для синтезу в зв'язку з даними літератури про те необхідна кількість і форма певного лужноземельщо вони, а саме магній, у кількості до одної третиного металу у певній комплексній солі. ни від вмісту кальцію стимулюють протипроліфеДля одержання активної речовини за формуративну дію останнього, а при більшої концентралою (І), яка в силу присутності властивостей його ції ці метали гальмують антипроліфіративну дію окремих складових може бути засобом для лікукальцію (Чекман І.С. Магний в медицине - Кишевання злоякісних пухлин, здійснюють синтез комнею, 1992, 101 а). У результаті остаточного синтеплексної сполуки. зу згідно прототипу отримали хімічну речовину із Синтез здійснювали шляхом змішування при значно більшим вмістом лужноземельного металу, нагріванні розчинів солей альдонової та амінокара саме магнію. Про це свідчать дані хімічного анабонової кислот. Дослідницьким шляхом встановлізу солі М1,М2 альдонової і амінокарбонових кислено оптимальне молярне співвідношення інгреділот випробувальної аналітичної лабораторії. (Проєнтів у 100 мл розчину, при якому молекула солі токол № 25 від 2006р. Київського національного амінокарбонової кислоти повністю поєднується з університету). Було встановлено, що в речовині молекулою солі альдонової кислоти, при цьому міститься 6,2% магнію і лише 5,2% кальцію. Застодосягається оптимальний протипухлинний ефект сування відомої комплексної солі лужноземельних та зникають токсичні прояви розчину. Таке оптиметалів показало недостатню її ефективність для мальне співвідношення досягається при наявності профілактики та лікування хворих з онкологічних у суміші 0,026 моля Са-солі альдонової кислоти та хвороб. 0,013 моля солі амінокарбонової килоти. При зросЗадачею винаходу є створення активної речотанні молярності Са - солі альдонової кислоти до вини з більшою протипухлинною дією на злоякісні 0,027 моля і більш відносно молярності солі аміноклітини, яка забезпечує високу ефективність прокарбонової кислоти знижується розчинність суміші філактики та лікування онкологічних хвороб на всіх та протипухлинний ефект. При зростанні молярностадіях ракової прогресії. сті солі амінокарбонової кислоти до 0,014 і більш Задачею винаходу є також створення ефектизменшується протипухлинний ефект, виникають вного способу одержання речовини з високою пропрояви токсичності розчину. Дослідним шляхом типухлинною дією на злоякісні клітини. також встановлено, що максимальний протипухПоставлена задача вирішується запропоновалинний ефект досягається при рН 6,2-6,5.При зменою комплексною сіллю Са-альдонової та аміноншенні рН до 6,1 і менші , а також зростанні більш карбонової кислот, що виявляє протипухлинну дію, 6,6 розчин стає нестабільним, а ефект лікування формули (І): ненадійним. OH Після висушування комплексна сіль, що видіO лена, має наступний кількісний склад(% мас): C CH2OH C C C:H:N:Ca=27:9:12:18. Індивідуальність нової речоO O CH2 n вини підтверджена спектроскопічно, методами O C H CH2 рентгенівського фазового аналізу та інфрачервоної спектроскопії. Склад речовини доведено метоO N CH 2 дом елементного аналізу на основні компоненти. CH2 Ca Приклад реального синтезу, що не обмежує N винахід, запропонованої комплексної солі: 50,0 мл O OH 0,026 моля водного розчину Са-глюконата змішуC CH2 ють при нагріванні із 50 мл 0,013 моля водного O O CH2 CH2OH C розчину динатрію едетата, рН суміші доводять до C C n 6,5. Отримують комплексну сіль Са-глюконата із O O H динатрієм едетатом. , (I), Розроблена комплексна сполука (винахідниде n = 4. ком названа як Геносан) формули (І) є засновниХімічна формула: С22Н34N2СаО20. ком нового класу комплексних препаратів з альдоПоставлена задача вирішується також запроновою та амінокарбоновою кислотами. Вона є понованою технологією: способом одержання закомплексонатом (лігандом), сіллю Са-альдонової значеної комплексної солі Са-альдонової та амінота амінокарбонової кислот. Геносан виявився макарбонової кислот, що виявляє протипухлинну дію, лотоксичним на живі здорові клітини. Нами була формули (І), наведеною вище, в якому 0.026 Моля визначена його хімічна формула: С22Н34N2СаО20. альдоната та 0,013 Моля амінокарбонату змішуВстановлено, що це зовсім нова сполука, яка зають при нагріванні, рН суміші доводять до 6,2-6,5. безпечує протипухлинний (антипроліферативний) Передумовою для його створення стала конефект на злоякісні клітини в експерименті на кульцепція Суслова Є.І про металобілковозалежну турі клітин недрібноклітинного раку легень шляхом регуляцію детермінації диференціювання клітин, блокування процесу їх проліферації. згідно з якою ракова прогресія під впливом канцерогенів пов'язана із дестабілізацією молекулярних 5 92303 6 Комплексна сіль Геносан за фізичними власздійснювали при застосуванні дози 200 мг/кг. Під тивостями є білою дрібнокристалічною речовиною впливом засобу в пухлинних клітинах А-549 визнау вигляді порошку солоного смаку, без запаху, чено зменшення від'ємного та збільшення позитидобре розчиняється у воді при нагріванні, при доввного потенціалу відносно контролю. гостроковому збереженні не змінює колір. СкладоПротипухлинна дія розробленого засобу була ві частини Геносану є ключовими метаболітами перевірена в експерименті на 100 мишах лінії окислювально-відновлювальних внутрішньокліC57BL з моделями карциноми Л'юіс і меланоми Втинних ферментативних реакцій. Так, компонент 16, які метастазують в легені. 20 тварин були кональдози - альдонова кислота приймає участь у трольними (не лікованими). 80 мишей були проліциклі Кребсу, є метаболітом багатьох біохімічних ковані розробленим засобом прототипу і Геносан в реакцій у ядрі та в цитоплазми клітин; Са+2 входозах 200 мг/кг ваги тіла тварини, який вводився дить до структури білків ДНП, зв'язує нуклеотиди внутрішньочеревно. ДНК. Здорові клітини не потребують молекулярної Приклад 3 корекції. Ракові клітини мають дефіцит Са+2, обуПри лікуванні мишей препаратом згідно протомовлений дисбалансом геному, спрямованого на типу у дозі 200 мг/кг ваги тіла, який вводився 10 синтез атипових злоякісних клітин. Розроблений разів на протязі 21 доби з перервою на добу після протипухлинний засіб Геносан є донатором Са+2 в кожного введення засобу, спостерігалося зменДНП пухлинних клітин шляхом їхніх носіїв - комшення розмірів первинної пухлини в середньому плексонів, а саме залишків альдоновової та амінона 64,0% в порівнянні з контролем - нелікованими карбонової кислот, які сприяють внутрішньоядермишами. ній інкорпорації Са+2, безпосередньо впливаючи Приклад 4 на процес гальмування клітинного циклу пухлинПри лікуванні мишей Геносаном в дозі 200 них клітин та їхньої проліферації з перепрофілюмг/кг, який вводився 10 разів на протязі 21 доби з ванням проліферації на апоптоз. перервою на одну добу після кожного введення На 100 нелінейних мишах досліджені парамезасобу. Спостерігалося зменшення первинної пухтри гострої токсичності Геносану. Засіб вводили лини в середньому на 95,0 % в порівнянні з контвнутрішньочеревинно в дозі від 1000,0мг/кг до ролем - нелікованими мишами. 10000,0мг/кг маси тварин. Встановлено, що сереПриклад 5 дньосмертельна доза Геносану (LD-50) дорівнюПри лікуванні мишей препаратом згідно з провала 8000 мг/кг. тотипом у дозі 200 мг/кг ваги тіла, який вводили 10 Вивчення протипухлинної активності Геносану разів протягом 21 доби з перервою на добу після проводили на культурі пухлинних клітин А-549, кожного введення засобу. Апоптичний індекс доріотриманих з недрібноклітинного раку легені людивнював 16,5 %. ни. Для порівняння використовували 10 % розчин Приклад 6 препарату-прототипу протипухлинного засобу [за При лікуванні мишей препаратом Геносан у патентом UA №77371]. Одночасно в одну частину дозі 200 мг/кг ваги тіла, який вводили 10 разів прокультури пухлинних клітин вносили засіб Геносан, тягом 21 доби з перервою на добу після кожного в другу - засіб-прототип в розведенні від 10-1 до введення засобу. Апоптичний індекс дорівнював 10-4. Результат реєстрували через 24, 48 і 72 годи35,5 %. ни. При аналітичному порівнянні антипроліфераПриклад 1 тивних (протипухлинних) можливостей запропоноЗасіб-прототип вводили в культуру пухлинних ваного та засобу-прототипу встановлено: у Геноклітин недрібноклітинного раку в розведенні від сану антипроліферативна дія відносно ракових 10-1 до 10-4, і на 24, 48 та 72 годину, ураховували клітин на 10,0 % ефективніша. Дія нового запропорезультат дослідження. Максимальне блокування нованого препарату ще більш значна на зменшенпроліферації ракових клітин спостерігалось на 48 ня розмірів первинної пухлини і при цьому зменгодину і досягало 90,0 % від загалу клітин культушення розмірів останньої після дії Геносану ри. відносно прототипу досягає 31,0 %, що пов'язано Приклад 2 із зростанням активності апоптозу у два рази. Запропонований протипухлинний засіб ГеноТаким чином, створена і забезпечено синтез сан, вводили у культуру пухлинних клітин недрібнової активної речовини з оптимально можливою ноклітинного раку легені в розведенні від 10-1 до протипухлинною ефективністю, усунена надлиш10-4. Результат реєстрували через 24, 48 і 72 годикова насиченість організму пацієнта лужноземельни. Максимальне блокування проліферації раконим металом. У зв'язку з спрощенням процедури вих клітин Геносаном спостерігалось на 48 годину синтезу препарату зменшена його собівартість. Це і сягало до 100,0 % свідчить про велику перспективу розробленого Виражений протипухлинний ефект Геносану протипухлинного засобу особливо для лікування був підтверджений також шляхом визначенням Zнедрібноклітинного раку легень людини, для терапотенціалу культури пухлинних клітин методом пії якого до теперішнього часу немає надійних хіелектрофорезу в поліакриламідному гелі. Метод міотерапевтичних препаратів. 7 Комп’ютерна верстка В. Мацело 92303 8 Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601