Лікарський засіб для терапії злоякісних пухлин та спосіб лікування злоякісних пухлин з його використанням

1. Лікарський засіб для терапії злоякісних пухлин, що містить антипроліферативну речовину у вигляді комплексної солі Са-альдонової та амінокарбонової кислоти, який відрізняється тим, що як комплексну сіль Са-альдонової та амінокарбонової кислоти містить сполуку формули (І) OH O 3 92302 Винахід відноситься до медицини, а саме до онкотерапії, в якості лікарської форми використовується водний розчин комплексної солі Саальдонової та аміно карбонової кислот. Його формула(1): OH O CH2OH C H C CH2 C O n C O O CH2 N O Ca CH2 N O OH CH2OH C C C n H CH2 O CH2 O O CH2 C O , (I) n=4 Хімічна формула: С22Н34N2СаО20 Серед відомих протипухлинних засобів для лікування злоякісних пухлин у людей, в патентній літературі знайдено комплексно-хімічне поєднання - оксалиплатина ["Лекарственный препарат оксалиплатина в виде стабильного водного раствора, способ его получения и применение», патент RU № 2207857]. Однак цьому засобу притаманні наступні недоліки: - висока токсичність; - наявність чужорідного металу (платини) у складі препарату; Найбільш близьким до рішення, що заявляється, є ["СІЛЬ М1М2 АЛЬДОНОВОЇ ТА АМІНОКАРБОНОВОЇ КИСЛОТ, ЩО ВИЯВЛЯЄ ПРОТИПУХЛИННУ ДІЮ», патент UА № 77371] (2) OH O CH2OH C H C n O M2 CH2 C O O Ca N C OH CH2OH C H C n O O M2 O CH2 O CH2OH C H C C O O CH2 C O n CH2 N O C N CH2 N O - Необґрунтована насиченість організму лужноземельним металом. При ретельному аналізі результатів хімічної речовини згідно прототипу, було встановлено, що лужноземельні метали були використані для синтезу в зв'язку з даними літератури про те, що вони у невеликій кількості, до одної третини відносно кальцію стимулюють протипроліферативну дію кальцію [Чекман І.С. Магний в медицине. - Кишинев, 1992. - 101 с.]. Однак, у результаті остаточного синтезу отримали хімічну речовину із значно більшим вмістом лужноземельного металу,а саме магнію (протокол №25 від 2006 р. аналітичної лабораторії Київського національного університету), що гальмує антипроліферативну дію кальцію (формула 2). Внаслідок цього при синтезі нового препарату лужно-земельний метал магній був вилучений. Задачею цього винаходу було поставлено створення покращеного засобу для протипухлинного впливу на злоякісні клітини, який би усував вищевказані недоліки засобу-прототипу, та забезпечував би високу ефективність профілактики та лікування онкологічних хвороб на всіх стадіях ракової прогресії. Поставлена задача вирішується запропонованим лікарським засобом для терапії злоякісних пухлин, що включає антипроліферативну речовину у вигляді комплексної солі Са-альдонової та амінокарбонової кислоти, який як комплексну сіль Саальдонової та амінокарбонової кислоти містить сполуку формули (І) OH O Ca O C O 4 CH2 CH2 O , (II) n = 4. M1 M2 - лужно-земельні метали. Хімічна формула С22Н34N2[M1][М2]2О20 Однак цьому засобу (формула 2) притаманні наступні недоліки: - Складність синтезу, який потребує для його здійснення лужно-земельного металу - неможливість досягти оптимальної протипухлинної дії. CH2OH C H C C n CH2 O OH CH2 CH2 O O CH2 O C O CH2 , (I) де n = 4. Запропонований лікарський засіб виконаний у вигляді 15% водного розчину комплексної солі Саальдонової та амінокарбонової кислоти формули (І). Поставлена задача вирішується також запропонованим способом лікування злоякісних пухлин, що включає введення пацієнту комплексної солі Са-альдонової та амінокарбонової кислоти, в якому як комплексну сіль Са-альдонової та амінокарбонової кислоти вводять зазначену сполуку формули (І) у вигляді 15% водного розчину у дозі 200300мг/кг ваги тіла пацієнта. Передумовою для його створення стала концепція Суслова Є.І про металобілковозалежну регуляцію детермінації диференціювання клітин, згідно з якою ракова прогресія під впливом канце 5 92302 6 рогенів пов'язана із дестабілізацією молекулярних дньосмертельна доза геносану (LD-50) дорівнюзв'язків в ДНК та між ДНК та кальцій-зв'язуючими вала 8000мг/кг. внутрішньоядерними протеїнами, експресією онкоВивчення протипухлинної активності геносану генів, втратою кальцію в ДНП. Для підтримки мопроводили на культурі пухлинних клітин А-549. лекулярної архітектоніки та стабільності біохімічотриманих з недрібноклітинного раку легені людиних мембран особливо важливою є здібність іонів ни. Для порівняння використовували 10% розчин Са наближувати молекули за рахунок сил електпрепарату-прототипу протипухлинного засобу [за ростатичного тяжіння. патентом UA № 77371] . Одночасно в одну частину Для одержання засобу за формулою 1, яка в культури пухлинних клітин вносили засіб геносан, силу присутності властивостей його окремих склав другу - засіб-прототип в розведеннівід 10-1до10-4 дових може бути засобом для лікування злоякісРезультат реєстрували через 24, 48 і 72 години. них пухлин, здійснюють синтез комплексної сполуПриклад 1 ки. Засіб-прототип вводили в культуру пухлинних Приклад синтезу комплексної сполуки Солі Саклітин недрібноклітинного раку в розведенні від 101 альдонової та амінокарбонової кислоти. 0.026 модо 10-4, і на 24, 48 та 72 годину, ураховували реля альдоната та 0,013 моля амінокарбонату змізультат дослідження. Максимальне блокування шують при нагріванні, рН суміші доводять до 6,5. проліферації ракових клітин спостерігалось на 48 Після висушування сполуки що виділена має годину і досягало 90,0% від загалу клітин культури. наступній кількісний склад (% мас.): Приклад 2 C:H:N:Ca=27:9:12:18. Запропонований протипухлинний засіб геноІндивідуальність нової речовини підтверджена сан, вводили у культуру пухлинних клітин недрібспектроскопічно методами рентгенівського фазоноклітинного раку легені в розведенні від 10-1 до вого аналізу та інфрачервоної спектроскопії. 10-4. Результат реєстрували через 24, 48 і 72 годиСклад речовини доведено методом елементного ни. Максимальне блокування проліферації ракоаналізу на основні компоненти. вих клітин геносаном спостерігалось на 48 годину і Розроблена сполука (Геносан) формули (І) є досягало до 100,0% засновником нового класу комплексних препаратів Виражений протипухлинний ефект геносану з альдоновою та амінокарбоновою кислотами. був підтверджений також шляхом визначенням ZВона є комллексонатом (лігандом), сіллю Сапотенціалу культури пухлинних клітин методом альдонової та амінокарбонової кислот. Геносан електрофорезу в поліакриламідному гелі. Метод виявився малотоксичним на здорові клітини. Нами здійснювали при застосуванні дози 200мг/кг. Під була визначена його молекулярна формула. Вставпливом засобу в пухлинних клітинах А-549 визнановлено, що це зовсім нова сполука, яка забезпечено зменшення від'ємного та збільшення позитичує протипухлинний (антипроліферативний) ефект вного потенціалу відносно контролю. на злоякісні клітини в експерименті на культурі Протипухлинна дія розробленого засобу була клітин недрібноклітинного раку легень шляхом перевірена в експерименті на 100 мишах лінії блокування процесу їх проліферації. C57BL з моделями карциноми Л'юіс і меланоми ВСполука Геносан за фізичними властивостями 16, які метастазують в легені. 20 тварин були конє білою дрібнокристалічною речовиною у вигляді трольними (не лікованими). 80 мишей були проліпорошку солоного смаку, без запаху, добре розчиковані розробленим засобом прототипу і Геносан в няється у воді при нагріванні, при довгостроковому дозах 200мг/кг маси тварини, який вводився внутзбереженні не змінює колір. Складові частини герішньочеревно. носану є ключовими метаболітами окислювальноПриклад 3 . При лікуванні мишей препаратом відновлювальних внутрішньоклітинних ферментазгідно прототипу у дозі 200мг/кг вагі тіла, який ввотивних реакцій. Так, компонент альдози - альдонодився 10 разів на протязі 21 доби з перервою на ва кислота приймає участь у циклі Кребсу, є метадобу після кожного введення засобу, спостерігаболітом багатьох біохімічних реакцій у ядрі та в лося зменшення розмірів первинної пухлини в сецитоплазми клітин; Са+2 входять до структури білредньому на 64% в порівнянні з контролем - неліків ДНП, зв'язують нуклеотиди ДНК. Здорові клітикованими мишами. ни не потребують молекулярної корекції. Ракові Приклад 4. При лікуванні мишей геносаном в клітини мають дефіцит Са+2, обумовлений дисбадозі 200мг/кг, який вводився 10 разів на протязі 21 лансом геному, спрямованого на синтез атипових доби з перервою на одну добу після кожного ввезлоякісних клітин. Розроблений протипухлинний дення засобу. Спостерігалося зменшення первинзасіб - геносан є донатором Са+2 в ДНП пухлинних ної пухлини в середньому на 95% в порівнянні з клітин шляхом їхніх носіїв - комплексонів, а саме контролем - нелікованими мишами. залишків альдоновової та амінокарбонової кислот, Приклад 5. При лікуванні мишей препаратом які сприяють внутрішньоядерній інкорпорації Са+2, згідно з прототипом у дозі 200мг/кг ваги тіла, який безпосередньо впливаючи на процес гальмування вводили 10 разів протягом 21 доби з перервою на клітинного циклу пухлинних клітин та їхньої пролідобу після кожного введення засобу. Апоптичний ферації з перепрофілюванням проліферації на індекс дорівнював 16,5%. апоптоз. Приклад 6. При лікуванні мишей препаратом На 100 нелінейних мишах досліджені парамеГеносан у дозі 200мг/кг ваги тіла, який вводили 10 три гострої токсичності геносану. Засіб вводили разів протягом 21 доби з перервою на добу після внутрішньочеревинно в дозі від 1000,0мг/кг до кожного введення засобу. Апоптичний індекс дорі10000,0мг/кг маси тварин. Встановлено, що серевнював 35,5%. 7 92302 8 При аналітичному порівнянні антипроліферанів. Тривалий час безрезультатно лікувалась у тивних (протипухлинних) можливостей запропонообласному онкодиспансері як вітчизняними, так і ваного та засобу-прототипу встановлено: у генозакордонними сильнодіючими хіміопрепаратами. сану антипроліферативна дія відносно ракових Прийняла 3 курси препарату 15% розчину геносан клітин на 10,0% ефективніша. Дія нового запропов дозі 250мг/кг. Після проведення 3-х курсів лікунованого препарату ще більш значна на зменшенвання, на рентгенограмах легень пухлина зникла, ня розмірів первинної пухлини і досягає 31,1% виражене рубцювання. Рубцювання метастазу у приросту протипухлинного ефекту відносно протохребті призвело до відновлення опорно-рушійної типу. При цьому активність апоптозу зростала в функції. два рази. Після лікування, хвора протягом п'ятирічного Крім того запропонований новий засіб був виспостереження залишалась працездатною. пробуваний на хворих волонтерах Приклад 11 Приклад 7 Хворий волонтер Д-й 70 років. ДіагХвора волонтер Т-о 40 років. Діагноз рак моноз не дрібноклітинний рак легенів, звернувся для лочної залози, якій підтверджений при пункціонній лікування до Національного Інституту раку. При біопсії, після операції виникли метастази, які не пункційній біопсії був отриманий діагноз - аденокапіддавалися лікуванню сучасними хіміопрепарарцинома легенів та бронху, в зв'язку зі значним тами. Пройшла 5 курсів лікування 15% розчину розпадом легенів та кровотечею, хворий був випрепарату геносан у дозі 200мг/кг. Після лікування, знаним неоперабельним і в лікуванні йому було контрольне обстеження метастазів не виявило. відмовлено. За його згодою, йому був проведений Таким чином, при аналітичному порівнянні анкурс лікування 15% розчином препарату геносан в типроліферативних (протипухлинних) можливосдозі 300мг/кг. Наступне обстеження (комп'ютерна тей запропонованого засобу-прототипу встановтомограма) показала зникнення пухлини. лено: у геносану антипроліферативна дія відносно Приклад 8 ракових клітин на 10,0% ефективніша, ще більш Хворий волонтер М-а 60 років. Діагноз аденозначна дія геносану на первинну пухлину в порівкарцинома товстої кишки з метастазами в печінку нянні з прототипом, розміри якої на 31,0% ефекти(6 штук за даними КТ). Пройшов 3 курси лікування вніше зменшуються, що пов'язано із зростанням препаратом 15% розчину препарату геносан в дозі активності апоптозу при дії Геносана у два рази. 200мг/кг. По закінченню курсів лікування, на комРазом з цим, спрощена процедура синтезу препап'ютерній томограмі печінки, 5 метастазів не вияврату, що в свою чергу зменшує собівартість готолено, один зарубцювався. Спостерігався протягом вого препарату геносан. Це свідчить про велику 5 років, рецидивів не виявлено, працездатний. перспективу розробленого протипухлинного засоПриклад 9 бу для лікування недрібноклітинного раку легень Хворий волонтер Ц-ч 59 років. Діагноз рак людини, для терапії якого до теперішнього часу прямої кишки з метастазами у печінку (7 штук) та з немає надійних хіміотерапевтичних препаратів. великім метастазом у сальник. Хворому, в одному Застосування 15% розчину препарату геносан у з державних закладів, була проведена хіміотерадозі 200-300мг/кг, у порівнянні із існуючими вітчизпія, в тому числі оксоплатиною, але позитивних няними та закордонними хіміопрепаратами, більш результатів не було досягнуто. Після першого курефективно припиняла ріст злоякісних пухлин (лесу лікування 15% розчином препарату геносан в генів, молочної залози, печінки та кішківника), крім дозі 250мг/кг, було проведене обстеження УЗД та того препарат геносан майже при всіх різновидах КТ які виявили зникнення 4-ох метастазів у печінці раку призводить до апоптозу ракових клітин у мета великого метастазу у сальнику. Разом з тим, тастазах (особливо на метастази у кістках). Разом зменшилось кровопостачання метастазів, що заз тим препарат геносан не є токсичним у порівнянлишилися. Показник СОЄ зменшився із 80мм/г до ні із існуючими вітчизняними та закордонними хі9мм/г. міопрепаратами. Механізм дії препарату полягає Приклад 10 не в некротичному знищенні ракової клітини, а Хвора волонтер Г-ц 80 років. Діагноз рак легеліквідації її шляхом апоптозу (фізіологічної смерті) нів з метастазами у хребет, ребра, печінку. Гістов наслідок дії наїї генетичний апарат, не пошкологічно була встановлена аденокарцинома легеджуючи при цьому здорові клітини. Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Підписне Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601