2-гідрокси-n-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3н-індол-3-іліден)ацетамід, який проявляє протизапальну і антимікробну дію

Реферат: Винахід належить до хіміко-фармацевтичної галузі, а саме до нових індивідуальних хімічних сполук з біологічною активністю, зокрема до 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду, який проявляє протизапальну і антимікробну дію. В основу винаходу поставлена задача створення нової хімічної сполуки, що проявляє високу протизапальну і антимікробну активність при низькій токсичності і може використовуватись як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. Задача вирішується шляхом синтезу індивідуальної хімічної сполуки 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду загальної формули: OH O C N C H N O H який проявляє високу протизапальну і антимікробну активність. OH , UA 100597 C2 (12) UA 100597 C2 OH O C N H O C H N OH UA 100597 C2 5 10 Винахід належить до хіміко-фармацевтичної галузі, а саме до нових індивідуальних хімічних сполук з біологічною активністю, зокрема до 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду, який проявляє протизапальну і антимікробну дію. Існує широкий перелік захворювань різної етіології, лікування яких потребує застосування фармацевтичних препаратів з протизапальною та антимікробною дією. Тому пошук нових ефективних та нетоксичних препаратів з комплексною дією для лікування різних захворювань, у тому числі такої поширеної хвороби, як простатит, є актуальною проблемою сучасної фармакології. В основу винаходу поставлена задача створення нової хімічної сполуки, що проявляє високу протизапальну і антимікробну активність при низькій токсичності, і може використовуватись як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. Задача вирішується шляхом синтезу індивідуальної хімічної сполуки 2-гідрокси-N-(5гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду загальної формули: OH O C N 15 20 25 30 35 40 45 H O C H N OH , який проявляє високу протизапальну і антимікробну активність. Сполука, яка заявляється, утворена взаємодією етилового естеру (2-оксоіндолініліден-3)-2оксіоцтової кислоти і 5-гідрокси-1-амінонафтиламіну в еквімолярних співвідношеннях у середовищі диметилформаміду. Одержують 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3іліден)ацетамід - кристалічну речовину з температурою плавлення 236-238 °C. Брутто-формула C20H14N2O4. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1 До розчину 1,16 г (0,005 моль) етилового естеру (2-оксоіндолініліден-3)-2-оксіоцтової кислоти у 3 мл диметилформаміду додають 0,79 г 5-гідрокси-1-амінонафтиламіну (0,005 моль). Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 40 хвилин. Реакційну масу охолоджують, виливають у воду, а осад, який утворився, відфільтровують, промивають водою 1 та кристалізують із етанолу. Вихід: 1,66 г (96 %). Т пл. = 236-238 °C. ЯМР Н, δ, м. д., (J, Гц):16,01 (1Н, с, ОН-єнол), 11,89 (1Н, с, NH-індол), 10,91 (1Н, с, NH-амід), 10,35 (1Н, с, ОН), 8,01-6,79 (10Н, м, Н-аром.). Знайдено, %: С - 69,47; Н - 4,18; N - 8,20. C20H14N2O4. Вирахувано, %: С 69,36; Н - 4,07; N - 8,09. Приклад 2 Вивчення протизапальної дії 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Ніндол-3-іліден)ацетаміду проводили на моделі ексудативного карагенінового запалення задньої лапки на білих нелінійних щурах масою 200±20 г за допомогою онкометру (Простой специфический скрининг химических веществ: Метод. рекомендации/ Под ред. Ф.П. Тринуса. К., 1985. - 78 с.). Досліджувану сполуку вводили внутрішньошлунково за 1 годину до введення карагеніну у вигляді тонкодисперсної суспензії, стабілізованої Твіном-80, у дозі 18 мг/кг. Протизапальну активність оцінювали за антиексудативним ефектом, тобто здатністю заявленої сполуки зменшувати набряк задньої лапки дослідних тварин на момент максимального його прояву (через 3 години після субплантарного уведення 0,1 мл 1 % водного розчину карагеніну). Результати вивчення протизапальної активності 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду та препарату порівняння вольтарену наведені у табл. 1. 1 UA 100597 C2 Таблиця 1 Вивчення протизапальної активності 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил) -2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду (І) у порівнянні з вольтареном Сполука І вольтарен 5 10 15 20 25 30 ЕД50, мг/кг 18,0 8,0 Приріст об'єму лапки через 3 год., мм 0,8±0,05 1,07±0,1 Протизапальна активність, % 66,1 54,7 ДЛ50, мг/кг 3500 112 Як видно з табл. 1, 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3іліден)ацетамід має виражену протизапальну активність. При попередньому одноразовому внутрішньошлунковому введенні у дозі 18,0 мг/кг заявлена сполука вірогідно зменшує запальний набряк і має набагато нижчу токсичність, ніж вольтарен. Приклад 3 Антимікробну активність 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3іліден)ацетаміду, приготованого у вигляді 10 % розчину у диметилсульфоксиді, вивчали методом дифузії субстанції в агар (метод "колодязів"). Для дослідження використовували агар Мюллера-Хінтона (Дагестанський НДІ живильних середовищ; термін придатності середовища до XII 2011 р.). Згідно з рекомендаціями ВООЗ для оцінки активності субстанції використовували тест-штами Staphylococcus aureus ATCC 26923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Bacillus subtilis ATCC 6633, Proteus vulgaris ATCC 7 4636,Candida ablicans ATCC 885/653. Мікробне навантаження становило 10 мікробних клітин на 1 мл середовища і встановлювалося за стандартом McFarland. Для роботи використовували 1824-годинну культуру мікроорганізмів (Волянський Ю.Л. Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів / Ю.Л. Волянський, В.П. Широбоков, С.В. Бірюкова та ін. // Методичні рекомендації. - Київ.-2004. - 38 с.). Про рівень антимікробної активності судили за діаметром зони затримки росту мікроорганізмів навколо лунки з субстанцією, використовуючи наступні критерії: - відсутність зон затримки росту мікроорганізмів навколо лунки, а також зони затримки до 10 мм вказує на те, що мікроорганізм не чутливий до внесеної в лунку субстанції; - зони затримки росту діаметром 10-15 мм вказують на малу чутливість культури відносно досліджуваної субстанції; - зони затримки росту діаметром 15-25 мм розцінюються як показник чутливості мікроорганізму відносно досліджуваної субстанції; - зони затримки росту, діаметр яких перевищує 25 мм, свідчить про високу чутливість мікроорганізмів відносно досліджуваної субстанції. Результати вивчення антимікробної активності 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду та препарату порівняння диметилсульфоксиду наведені у табл. 2. Таблиця 2 Вивчення антимікробної активності 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетаміду у порівнянні з диметилсульфоксидом Діаметр зони затримки росту мікроорганізмів, мм Proteus Bacillus Staphylococcus Escherichia Pseudomonas Препарат vulgaris subtilis aureus ATCC coli АТСС aeraginosa АТСС АТСС 26923 25922 АТСС 27853 4636 6633 (І), 10 % 22±0,3 21±0,2 20±0,3 18±0,3 21±0,1 Диметилсульфоксид 13±0,5 15±0,9 12±0,6 13±0,4 19±0,4 35 Candida ablicans ATCC 885/653 12±0,3 0 Результати, отримані в ході дослідження, показали, що 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетамід проявляє антимікробну дію відносно штамів Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Proteus vulgaris, Candida ablicans і перевищує активність препарату порівняння (диметилсульфоксид). 2 UA 100597 C2 5 Заявлена сполука 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3іліден)ацетамід проявляє виражену протизапальну і антимікробну активність при низькій токсичності, може бути одержаною за доступною технологією і синтезованою у промислових умовах з використанням стандартного обладнання, доступних екологічно-безпечних реактивів, має 96 % вихід. У синтезі 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3іліден)ацетаміду використовуються вітчизняні реактиви. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 10 2-гідрокси-N-(5-гідрокси-1-нафтил)-2-(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-3-іліден)ацетамід формули OH O C N O C H N OH H , який проявляє протизапальну і антимікробну активність. Комп’ютерна верстка В. Мацело Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3 загальної