N-r,r1-аміди (2z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3н-індол-3-іліден)оцтової кислоти, що мають ноотропну активність

Реферат: Винахід стосується хіміко-фармацевтичної галузі, а саме індивідуальних хімічних сполук з 1 біологічною активністю, зокрема N-R,R -амідів (2Z)-(бензоїламіно)(2-окco-1,2-дигідро-3H-індол3-іліден)оцтової кислоти з ноотропною дією. В основу винаходу поставлене завдання створення хімічних сполук, що проявляють високу ноотропну активність при низькій токсичності і можуть використовуватись як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. 1 Завдання вирішується шляхом синтезу індивідуальних хімічних сполук N-R,R -амідів (2Z)(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3-іліден)оцтової кислоти загальної формули: UA 98525 C2 (12) UA 98525 C2 O C NH C C O N R R1 O N H R N N H R R1 N де або що мають ноотропну активність. N R1 H R N N або R1 H2C COOC2H5 , UA 98525 C2 5 10 15 20 25 30 35 Винахід стосується хіміко-фармацевтичної галузі, а саме індивідуальних хімічних сполук з 1 біологічною активністю, зокрема N-R,R -амідів (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол3-іліден)оцтової кислоти з ноотропною дією. Церебральний інсульт є однією з частих причин інвалідності та смертності. За даними ВООЗ кожного року реєструється 100-300 випадків захворювань на кожні 100 тисяч населення. Часто після перенесеного інсульту залишається стійкий неврологічний дефіцит, що знижує якість життя не тільки хворих, а також і членів їх родин, що лягає важким тягарем на суспільство в цілому. За даними досліджень на кожні 100 тис. населення є 600 хворих з наслідками інсульту, з яких 60 % залишаються інвалідами. Разом з тим активна реабілітація в постінсультному періоді дозволяє повернути до праці і знизити ступінь інвалідності хворих, які перенесли церебральний інсульт. З'ясовано, що у гострому періоді ішемічного інсульту необхідно використовувати ноотропи. Сьогодні існують ноотропні препарати, які активно використовують і у постінсультному періоді. Одним з найбільш вживаних засобів даної групи є пірацетам [1]. Пірацетам покращує пластичний та енергетичний обмін, оптимізує гемодинаміку в головному мозку. Проте цей препарат може викликати несприятливе збудження центральної нервової системи, підвищену дратівливість, порушення сну, диспепсичні явища; він здатний також загострювати перебіг коронарної недостатності, ініціювати алергічні реакції та збільшувати масу тіла. Його заборонено застосовувати для хворих на гостру ниркову недостатність та для дітей до 1 року. Відомим препаратом, який також широко застосовується при порушеннях пам'яті, є мексидол [2]. Він проявляє антигіпоксичну, ноотропну та анксіолітичну дію, є інгібітором вільнорадикальних процесів та мембранопротектором. Мексидол підвищує резистентність до порушення мозкового кровообігу. Недоліком препарату є розвиток алергічних реакцій, блювання, сухість слизової оболонки ротової порожнини. Мексидол протипоказаний при нирковій і печінковій недостатності. Крім того, номенклатура вітчизняних ноотропних препаратів значно менша, ніж номенклатура цієї групи лікарських засобів на закордонному ринку медикаментів, і часто недостатня для задоволення потреб медичної практики. Тому пошук нових ноотропних засобів є актуальним завданням. В основу винаходу поставлена задача створення нових хімічних сполук, що проявляють високу ноотропну активність при низькій токсичності і можуть використовуватись як діюча речовина у складі фармацевтичних препаратів різних лікарських форм. 1 Задача вирішується шляхом синтезу індивідуальних хімічних сполук N-R,R -амідів (2Z)(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3-іліден)оцтової кислоти загальної формули: O C NH C C O N R R1 O N H R N N H R R1 N де 40 45 або H R N N R1 N або R1 H2C COOC2H5 , які проявляють ноотропну активність. Сполуки, які заявляються, утворені взаємодією 2-феніл-4-(2-оксоіндолініліден-3)-5оксазолону і відповідних амінів в еквімолекулярних співвідношеннях у середовищі етанолу при нагріванні. Одержують N-(1-нафтил)амід (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3іліден)оцтової кислоти (сполука І), піперидид (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3іліден)оцтової кислоти (сполука II), етил N-[(2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3іліден)ацетил]гліцинату (сполука III) - кристалічні речовини жовтого кольору з високими температурами плавлення, розчинні в 1,4-діоксані, ДМФА та нерозчинні у воді. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. 1 UA 98525 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 До розчину 1,45 г (0,005 моль) 2-феніл-4-(2-оксоіндолініліден-3)-5-оксазолону в 15 мл етанолу додають 0,72 г (0,005 моль) 1-нафтиламіну. Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 40 хвилин, потім охолоджують. Осад відфільтровують, висушують та кристалізують із діоксану. Одержують N-(1-нафтил)амід (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро3H-індол-3-іліден)оцтової кислоти (сполука І). Вихід 2,01 г (92%). Т пл. = 284-286°С. Спектр ЯМР 1 H 13,08 (1H, с, NH-індол), 11,21 (1H, с, NHCO), 11,03 (1Н, с, CONH), 8,21-6,58 (16Н, м, Н-аром.). Знайдено, %: С 74,76; Н 4,58; N 9,75. С27Н19N3О3. Вирахувано, %: С 74,81; Н 4,42; N 9,69. Приклад 2. До розчину 1,45 г (0,005 моль) 2-феніл-4-(2-оксоіндолініліден-3)-5-оксазолону в 15 мл етанолу додають 0,49 мл (0,005 моль) піперидину. Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 40 хвилин, потім охолоджують. Осад відфільтровують, висушують та кристалізують із діоксану. Одержують піперидид (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H1 індол-3-іліден)оцтової кислоти (сполука II). Вихід 1,65 г (88,2%). Тпл. = 272-274°С. Спектр ЯМР Н 12,95 (1H, с, NH-індол), 11,12 (1Н, с, NHCO), 8,07-6,86 (9Н, м, Н-аром.), 3,41 (4Н, м, 2-СН2), 1,58 (6Н, м, 3СН2). Знайдено, %: С 70,46; Н 5,54; N 11,27. С22H21N3O3. Вирахувано, %: С 70,38; Н 5,64; N11,19. Приклад 3. До розчину 1,45 г (0,005 моль) 2-феніл-4-(2-оксоіндолініліден-3)-5-оксазолону в 15 мл етанолу додають 0,7 г (0,005 моль) гідрохлориду етилового ефіру амінооцтової кислоти та 0,7 мл (0,005 моль) триетиламіну. Реакційну суміш кип'ятять зі зворотним холодильником протягом 40 хвилин, охолоджують і переносять у воду, підкислену хлористоводневою кислотою до рН 3-4. Осад, який утворився, відфільтровують, промивають водою до рН 7 та кристалізують із діоксану. Одержують етил N-[(2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3Н-індол-31 іліден)ацетил]гліцинату (сполука III). Вихід 1,8 г (91,6%). Тпл. = 248-250°С. Спектр ЯМР Н 12,91 (1Н, с, NH-індол), 11,11 (1Н, с, NHCO), 9,31 (1Н, т, CONH), 8,01-6,79 (9Н, м, Н-аром.), 4,15 (4Н, м, NHCH2+OCH2CH3), 1,21 (3Н, т, СН3). Знайдено, %: С 64,22; Н 4,78; N 10,75. C21H19N3O5. Вирахувано, %: С 64,12; Н 4,87; N10,68. Приклад 4. 1 Вивчення ноотропної дії N-R,R -амідів (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3іліден)оцтової кислоти (сполук І, II, III) проводили у зіставності з препаратом порівняння пірацетамом за загальновживаним тестом умовної реакції пасивного уникнення (УРПУ) на білих мишах самцях масою 15-20 г на моделі антероградної амнезії, що викликана скополаміном (1,5 мг/кг внутрішньоочеревинно [3]). 1 Для вивчення ноотропної дії використано режим профілактичного введення N-R,R -амідів (2Z)-(бензоїламіно)(2-оксо-1,2-дигідро-3H-індол-3-іліден)оцтової кислоти. Їх вводили внутрішньошлунково протягом 3 діб у вигляді тонкодисперсної суспензії у персиковій олії, стабілізованій Твіном-80, у дозі 12 мг/кг. Подібні дози, за даними літератури, забезпечують антиоксидантну та антигіпоксичну дію [4-6]. Препарат порівняння пірацетам вводили внутрішньошлунково у дозі 200 мг/кг протягом 3 діб. Контрольна група отримувала відповідну кількість персикової олії з Твіном-80. Лабораторних тварин розподілили на 6 груп відповідно до препарату, що вони одержували, та його дози: 1. Інтактний контроль, n=7. 2. Контрольна патологія (модель амнезії) - скополамін, 1,5 мг/кг внутрішньоочеревинно, n=7. 3. Сполука І + скополамін, n=7. 4. Сполука II + скополамін, n=7. 5. Сполука III + скополамін, n=6. 6. Пірацетам (200 мг/кг внутрішньошлунково) + скополамін, n=6. У мишей групи інтактного контролю виробляли УРПУ без амнезуючого впливу скополаміну. Порушення пам'яті моделювали за допомогою скополаміну через 30 хв. після останнього введення досліджуваних субстанцій або пірацетаму. Тварин розміщували на освітленій платформі приладу та реєстрували латентний період безумовного рефлексу - входу до темної камери, де мишей піддавали впливу електричним струмом 0,5-0,6 мА через електродну підлогу. Через 24 години вдруге визначали латентний період входу до темної камери. Мишей, які не відвідували її протягом 3 хв. (латентний період 180 с), вважали такими, що досягли критерію навченості. Як показники ноотропної дії вибрано збільшення латентного періоду входу до темної камери, антиамнестична активність та кількість мишей, що досягли критерію навченості через 24 години після амнезуючого впливу скополаміну. У разі обліку результатів у вигляді середнє±стандартна помилка статистичну достовірність міжгрупових відмінностей 2 UA 98525 C2 5 розраховували за критерієм t Стьюдента, результати, зареєстровані в альтернативній формі, за кутовим перетворенням Фішера. Антиамнестичну активність сполук оцінювали за модифікованою формулою Butler: АА = (ЛПд-ЛПск / ЛПік-ЛПск)  100%, де АА - антиамнестична активність, ЛПск і ЛПд - середній латентний період тварин, яким уводили відповідно тільки скополамін і скополамін на тлі досліджуваної сполуки, ЛПік латентний період інтактного контролю. Результати дослідження наведені в таблиці 1. Таблиця 1 1 Вплив N-R,R -амідів (2Z)-(бeнзoїлaмiнo)(2-oкco-1,2-дигiдpo-3H-iндoл-3-іліден)оцтової кислоти у порівнянні з пірацетамом на пам'ять за тестом УРПУ № п/п Група, кількість тварин Латентний період входу Антиамнестична до темної камери, сек. активність, % 17,2±5,0 20,7±7,19 Через 24 год 148±21,1*** 30,8±15,1 29,7±9,6 Вихідний Інтактний контроль n=7 Модельна патологія (контроль амнезії), n=7 3 Сполука І, 12 мг/кг + скополамін, n=7 4 Сполука II, 12 мг/кг + скополамін, n=7 5 Сполука III, 12 мг/кг + скополамін, n=6 6 Пірацетам, 200 мг/кг + скополамін, n=6 Достовірні відмінності між групами 1 2 Кількість мишей, що досягли критерію навченості Абс. % 5 0 71,4 0 111,9±26,6* 69 3 42,9 30,3±13,4 120,3±27* 76 4 57,1 15±3,1 153±29,6** 93 5 83,3 15,8±5,5 89,0±30,0* 58,2 1 16,7 немає P1-2