Застосування 4-((3-(децилтіо)-4-феніл-4н-1,2,4-триазол-5-іл)метилен)морфоліну гідрохлориду як протимікробного засобу щодо штаму s. aureus

Реферат: 1. Об’єкт винаходу: застосування 4-((3-(децилтіо)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5іл)метилен)морфоліну гідрохлориду як протимікробного засобу щодо штаму S. Aureus. 2. Галузь застосування: фармація, медицина та ветеринарія. 3. Суть винаходу: 4-((3-(децилтіо)4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5-іл)метилен)морфоліну гідрохлорид, який містить морфолінометиленовий замісник за С5-положенням ядра 1,2,4-триазолу, фенільний радикал за N4-положенням ядра 1,2,4-триазолу та децильний фрагмент, зв’язаний з ядром 1,2,4-триазолу UA 114775 C2 (12) UA 114775 C2 атомом двовалентного сульфуру, виділена у формі гідрохлориду. 5. Технічний результат: Здатність до прояву протимікробної дії відносно штаму Staphyllococcus aureus ATCC 25923 та доступна методика синтезу. UA 114775 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 Винахід стосується фармації, медицини та ветеринарії і може бути використаний при створенні нових лікарських засобів в ряду тіопохідних 1,2,4-триазолу та може бути використаним при лікуванні патологічних станів, викликаних патогенними штамами мікроорганізмів Staphyllococcus aureus ATCC 25923. За даними Всесвітньої організації охорони здоров'я (ВООЗ) летальні випадки, викликані патогенними мікроорганізмами, займають одне з провідних місць. Особливо гостро дана проблема поставлена в країнах, де економічні можливості не дозволяють утримувати спалахи інфекційних захворювань під повним контролем. Тому, необхідність в нових, доступних та високоактивних бактерицидних препаратах є доцільною та обґрунтованою. Зважене та доцільне використання антибіотиків звичайно зменшує ризик розвитку антибіотикорезистентності бактерій, але не відкидає необхідності заміни застарілих препаратів на нові, більш ефективні та менш токсичні. В даному аспекті досить перспективним класом сполук є азотовмісні системи. Похідні триазолу вже давно ввійшли в світову медичну практику як високоактивні протигрибкові, нейролептичні, гіпотензивні та спазмолітичні препарати. Особливу увагу в даному питанні заслуговують похідні 1,2,4-триазолу. Яскравим прикладом є позаконазол, вориконазол, ітраконазол, які вже встигли зарекомендувати себе як досить ефективні протигрибкові засоби. Прототипом речовин, що заявляються, є препарат Триметоприм (CAS 738-70-5, Ivy Fine Chemicals, United States), формули: . Даний препарат використовується як антимікробний засіб (Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М.: "Новая волна", 2002. - Т. 2. - 608 с. (С. 282)). Проте, суттєвим недоліком прототипу є ряд побічних ефектів: висипання на шкірі, синдром Стівенса-Джонсона, діарея, нудота, блювота, погіршення апетиту, болі у животі, нефропатія, головний біль, асептичний менінгіт, метгемоглобінемія, агранулоцитоз, лейкопенія, тромбоцитопенія, анемія. Суттєві ознаки прототипу і винаходу, що збігаються, є такі: - в структурі прототипу і винаходу є азотовмісні гетероцикли; - наявність в структурах циклічних ароматичних фрагментів (фенільних та ядра 1,2,4триазолу), Проте, в результаті проведеного дослідження встановлено, що сполука яка заявляється, має більш виражений антимікробний ефект стосовно штаму Staphyllococcus aureus, і за силою ефекту значно перевищує прототип. В основу винаходу поставлено задачу створення нової біологічно активної сполуки, яка може застосовуватись при створенні лікарських засобів та композицій на основі похідного 1,2,4триазолу з вираженими протимікробними властивостями відносно штаму Staphyllococcus aureus. Поставлена задача вирішується тим, що створено нову сполуку, похідну 1,2,4-триазолу, яка проявляє протимікробну дію відносно штаму Staphyllococcus aureus. 4-((3-(Децилтіо)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5-іл)метилен)морфоліну гідрохлорид, який містить морфолінометиленовий замісник за С5-положенням ядра 1,2,4-триазолу, фенільний радикал за N4-положенням ядра 1,2,4-триазолу та децильний фрагмент, зв'язаний з ядром 1,2,4-триазолу атомом двовалентного сульфуру, виділений у формі гідрохлориду і має формулу: 1 UA 114775 C2 5 10 15 20 25 30 35 . Сполуку, що заявляється, отримують шляхом взаємодії 3-(морфолінометилен)-4-феніл-4H1,2,4-триазол-5-тіолу з 1-бромдеканом в середовищі і-пропанолу та присутності еквіваленту калій гідроксиду. Приклад До розчину 0,01 моль 3-(морфолінометилен)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5-тіолу у 50 мл іпропанолу додають 0,01 моль калію гідроксиду, попередньо розчиненого в мінімальній кількості дистильованої води. Нагрівають до повного розчинення тіолу та додають 0,01 моль 1бромдекану. Нагрівають до кипіння на водяному нагрівнику до pH=7. Отриманий розчин фільтрують, фільтрат випаровують. Додають надлишок і-пропанолу, насиченого хлороводнем, залишають при кімнатній температурі для кристалізації. Для аналізу сполуку перекристалізовують із і-пропанолу. Кристалічна речовина сірого кольору з Т пл. 151-153 °C, розчинна воді, метанолі, етанолі, іпропанолі та малорозчинна неполярних розчинниках. Вихід 4-((3-(децилтіо)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5-іл)метилен)морфоліну гідрохлориду складає 88 %. Вирахувано, %: С - 60,97, Н - 8,23, N-12,37, S-7,08. Знайдено, %: С - 61,15, Н - 8,25, N-12,39, S-7,10. -1 В ІЧ-спектрі сполуки, що заявляється, наявні смуги поглинання -С=N-групи при 1566 см , -1 ножичні смуги при 1465 см , що вказують на наявність в структурі молекули метиленових груп, -1 а також відсутні смуги при 2350-2300 см , що можуть спричинятися SН-групами. Дослідження протимікробної активності проводилося згідно до методичних вказівок "Визначення чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів" та методичних рекомендацій "Вивчення специфічної активності протимікробних лікарських засобів". Дослідження проведене з використанням стандартних тест-штамів: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomоnas aeruginosa ATCC 27853. Всі тест-штами отримано з бактеріологічної лабораторії Державної установи "Запорізький обласний лабораторний Центр державної санітарно-епідеміологічної служби України". В подальшому, з початкової концентрації речовини 1 мг/мл, готували ряд дворазових серійних розведень сполук у бульйоні Мюллер-Хінтона в об'ємі 1 мл, після чого у кожну пробірку додавали по 0,1 мл 6 мікробної суспензії (10 мікробних клітин/мл). При проведенні дослідження визначали мінімальну інгібуючу концентрацію (МІК) та мінімальну бактерицидну/фунгіцидну концентрацію (МБцК/МФцК). МІК визначалася за відсутністю видимого росту в пробірці з мінімальною концентрацією речовини. МБцК/МФцК визначалася за відсутністю росту на агарі після висіву в прозорих пробірках. Розчинником сполук слугував диметилсульфоксид (99,80 %). Додатково проведено контроль поживних середовищ та розчинника за допомогою загальноприйнятих методик. Результати наведені в таблиці. 2 UA 114775 C2 Таблиця Результати протимікробної дії Протимікробна активність Сполука 4-((3-(децилтіо)-4-феніл-4H1,2,4-триазол-5іл)метилен)морфоліну гідрохлорид Триметоприм 5 E. coli АТСС 25922 МІК, МБцК мкг/мл мкг/мл S. aureus АТСС 25923 МІК, МБцК мкг/мл мкг/мл P. aeruginosae АТСС 27853 МІК, МБцК, мкг/мл мкг/мл 125 250 1,95 3,9 125 250 62,5 125 62,5 125 31,25 62,5 Таким чином, з таблиці видно, що 4-((3-(децилтіо)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5іл)метилен)морфоліну гідрохлорид за показниками протимікробної дії відносно штаму Staphyllococcus aureus ATCC 25923 значно перевищує дію прототипу "Триметоприму". ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 10 4-((3-(Децилтіо)-4-феніл-4H-1,2,4-триазол-5-іл)метилен)морфоліну гідрохлорид , який може бути застосований як протимікробний засіб стосовно штаму Staphyllococcus aureus. 15 Комп’ютерна верстка О. Гергіль Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3