Спосіб морфологічної діагностики пошкоджуючої дії хронічної внутрішньоутробної гіпоксії на кору наднирників плода

Реферат: Винахід належить до медицини, а саме до патологічної анатомії, і може бути використаний для морфологічної діагностики пошкоджуючої дії хронічної внутрішньоутробної гіпоксії (ХВГ) на кору наднирників плода, яка полягає у визначенні в плода щура на 21 добу гестації ширини клубочкової, пучкової й фетальної зон кори наднирників, кількості аденоцитів у них, площі даних клітин та їх ядер. UA 115178 C2 (12) UA 115178 C2 UA 115178 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини, а саме до патологічної анатомії, і може бути використаний для морфологічної діагностики пошкоджуючої дії хронічної внутрішньоутробної гіпоксії (ХВГ) па кору наднирників плода. Актуальність предмету винаходу пов'язана зі значною поширеністю ХВГ у вагітних, яка викликає серйозні розлади, зокрема в корі наднирників плода, і служить причиною ускладнень постнатального періоду потім у новонародженого. Тому вельми важливими є спроби розробки способів оцінки ступеню й характеру пошкоджуючої дії ХВГ, у тому числі й на морфологічному рівні, на тканини цих залоз плода, особливості яких, при необхідності, можуть бути використані як маркери дії саме цього фактора. Відомий спосіб морфологічної діагностики пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода людини шляхом констатації її при середніх значеннях діаметра аденоцитів та їх ядер у пучковій зоні кори них залоз, які становлять 7,27±0,29 і 5,47±0,17 мкм відповідно терміну гестації ≤ 20 тижнів, 10,66±0,37 і 5,95±0,19 мкм - 21-25 тижнів, 12,45±0,44 і 6,49±0,20 мкм - 26-30 тижнів, 10,15±0,35 і 5,51±0,18 мкм - 31-35 тижнів, 8,73±0,32 і 5,37±0,15 мкм - ≥ 36 тижнів [Патент України (на 20 р.) № 108808. Спосіб морфологічної діагностики пошкоджуючої дії на гіпофізарнонадниркову систему плода та новонародженого хронічної внутрішньоутробної гіпоксії. МПК А61В 10/00, G01N 33/48. Опубл. 10.06.2015, бюл. № 11]. Цей спосіб морфологічної діагностики пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода виявився єдиним, що виявлений нами в результаті аналізу патентної й науково-медичної інформації, а тому є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю й результатом, який може бути досягнутий, тому його вибрано за прототип. До недоліків прототипу відноситься те, що в ньому як морфологічні маркери пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода враховується обмежене число морфометричних клітинних параметрів, причому не в усіх зонах кори цих залоз. Крім того, у прототипі чомусь навіть не вказано в яких одиницях довжини представлений діаметр клітин та їх ядер. В основу винаходу поставлено задачу розширення арсеналу морфометричних клітинних параметрів констатації пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода, до того ж, характерних для всіх зон кори даних залоз, тобто підвищення ефективності прототипу. Задачу, яку поставлено в основу винаходу, вирішують тим, що у відомому способі морфологічної діагностики пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода людини, який включає дослідження діаметра аденоцитів та їх ядер у пучковій зоні кори цих залоз на певний термін гестації, згідно з заявленим способом, у плода щура на 21 добу гестації визначають ширину клубочкової, пучкової й фетальної зон кори наднирників в абсолютних числах і в процентному співвідношенні, щільність клітин у них (кількість на одиниці площі - у полі зору), площу останніх та їх ядер. Технічний ефект способу морфологічної діагностики пошкоджуючої дії ХВГ на кору наднирників плода обумовлений більш високою інформативною ефективністю комплексу морфометричних клітинних параметрів, який заявляється й характерний для всіх зон даних залоз, а також відсутністю будь-яких незручностей, пов'язаних з його використанням. Що ж стосується можливих сумнівів відносно інтеркаляції результатів заявленого способу, то при моделюванні ХВГ найбільш часто використовуються саме щури, що пов'язано зі схожістю гістологічної будови їх органів і людини, зокрема кори надниркових залоз, тому отримані нами дані в значній мірі можуть відповідати таким у плодів і вагітних жінок. Спосіб виконують наступним чином. Пошкоджуючу дію ХВГ на кору наднирників плода діагностують шляхом визначення ширини (в абсолютних числах і в процентному співвідношенні) її клубочкової, пучкової й фетальної зон, кількості клітин у них, площу останніх та їх ядер, а також констатації цієї дії при змінах середніх величин вищезазначених морфометричних клітинних параметрів на термін гестації 21 доба в порівнянні з такими в контрольній групі. При цьому, пошкоджуючу дію ХВГ на наднирники діагностують при виявленні: зменшення ширини їх клубочкової зони в абсолютних числах від 25,54 до 24,54 мкм і кількості аденоцитів у ній від 81,89 до 71,11 у полі зору, у той же час, збільшення ширини даної зони в процентному 2 співвідношенні від 17,09 до 18,01 %, площі клітин у ній від 34,75 до 35,81 мкм та ядер останніх 2 від 11,69 до 12,00 мкм ; збільшення ширини пучкової зони кори залоз в абсолютних числах від 56,05 до 59,83 мкм і в процентному співвідношенні від 39,50 до 41,40 %, площі ядер аденоцитів 2 у ній від 23,17 до 23,75 мкм , а також зменшення кількості цих клітин від 214,49 до 213,48 у полі 2 зору й їх площі від 63,27 до 62,21 мкм ; зменшення ширини фетальної зони кори наднирників в абсолютних числах від 60,88 до 59,12 мкм і в процентному співвідношенні від 42,62 до 41,38 %, 2 2 площі аденоцитів у ній від 72,11 до 71,85 мкм та ядер останніх від 22,16 до 21,92 мкм , а також збільшення кількості клітин від 133,52 до 144,68 у полі зору (табл.). 1 UA 115178 C2 5 Дослідження проведене на 10 випадках аутопсій плодів щурів, виношених в умовах ХВГ і загиблих внаслідок виведення з експерименту вагітних щурів-самок популяції WAG на пізній термін гестації (21 доба) шляхом передозування тіопенталу нагрію з наступною їх декапітацією, з метою вилучення плодів для їх подальшого дослідження. Вагітні щури-самки до того протягом усієї вагітності в один і той же час по 20 хв. піддавалися щоденній високогірній гіпоксії в герметичній барокамері, з якої викачували повітря й створювали умови, що відповідають підйому па висоту 7500 м і тиску 287 мм рт. ст. Контрольну групу склали плоди (5 спостережень), виношені в умовах фізіологічно перебігаючої вагітності в щурів-самок, які не піддавалися кисневому голодуванню, і також загиблих від передозування тіопенталом натрію. 10 Таблиця Морфометричні клітинні параметри кори наднирників плодів у результаті пошкоджуючої дії на них ХВГ (М±m) Тканина й параметри Контроль Досліджувана група клубочкова зона: ширина в абсолютних числах, мкм 32,68±0,99 25,04±0,50 у процентному співвідношенні, % 16,04±0,24 17,55±0,46 кількість клітин, у полі зору 113,10±3,76 76,50±5,39 2 площа клітин, мкм 30,59±0,34 35,28±0,53 2 площа ядер, мкм 11,52±0,16 11,79±0,21 пучкова зона: ширина в абсолютних числах, мкм 54,61±1,20 57,94±1,89 у процентному співвідношенні, % 26,85±0,42 40,45±0,95 кількість клітин, у полі зору 218,60±4,10 216,00±2,52 2 площа клітин, мкм 69,87±0,62 62,74±0,53 2 площа ядер, мкм 20,87±0,14 23,46±0,29 фетальна зона: ширина в абсолютних числах, мкм 116,23±2,60 60,00±0,88 у процентному співвідношенні, % 57,11±0,52 42,00±0,62 кількість клітин, у полі зору 131,20±1,24 139,10±5,58 2 площа клітин, мкм 83,11±1,07 71,98±0,13 2 площа ядер, мкм 23,37±0,31 22,04±0,12 Примітка: стовпчик Р - різниця між показниками в досліджуваній групі й контролі. 15 20 25 30 Р