Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю

Реферат: Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю, зокрема з листя первоцвіту (Folia Primulae), включає технологічний етап екстрагування спиртом етиловим 40 % методом мацерації з періодичним перемішування у співвідношенні 1:10. Екстракцію проводять етиловим спиртом 40 % настоюванням протягом доби і згущують до одержання густої витяжки в роторному вакуумному випарнику. UA 116777 U (12) UA 116777 U UA 116777 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Корисна модель належить до фармації і медицини, а саме способів одержання екстракційних препаратів з лікарської рослинної сировини, що проявляють протизапальну активність. Відомий спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю, який включає технологічний етап екстрагування [2]. Недоліком відомого способу є недостатній рівень технологічності, що випливає із водного екстрагування сировини. В силі цього, розчинні в спирті компоненти не потрапляють у витяжку. Наведене вище обумовлює недостатній спектр фармакологічної активності. В основу корисної моделі поставлено задачу розробки технологічних прийомів одержання рослинної субстанції, спрямованих на максимально повне вилучення біологічно активних речовин із рослинної сировини. При вирішенні поставленої задачі було взято до уваги результати попередньо проведених досліджень щодо впливу концентрації етилового спирту в водно-спиртових сумішах на якісний склад і кількісний вміст біологічно активних речовин готової рослинної субстанції. У ході попередніх досліджень екстрагування проводили гарячою водою (80 °C) та водноспиртовою сумішшю 20 %, 40 %, 70 %, спектрофотометричним методом визначали в кожній із одержаних субстанцій кількісний вміст флавоноїдів, гідроксикоричних кислот і фенольних сполук, а також гравіметричним методом - екстрактивних речовин. Шляхом підбору нами було встановлено, що для отримання фітосубстанції з листя первоцвіту (Folia Primulae) з найбільш повним вилученням екстрактивних речовин, флавоноїдів, гідроксикоричних кислот і фенольних сполук оптимальним є використання як екстрагенту етилового спирту 40 % і екстрагування подрібненої рослинної сировини у співвідношенні "сировина: екстрагент" 1:10 методом мацерації з періодичним перемішуванням. Також у ході комплексного фітохімічного дослідження з листя первоцвіту (Folia Primulae) нами був встановлений якісний склад і кількісний вміст біологічно активних речовин - макро- і мікроелементів, органічних кислот, жирних кислот, флавоноїдів, гідроксикоричних кислот, аскорбінової кислоти, полісахаридів, що можуть здійснювати вплив на організм людини, а одержана рослинна субстанція у вигляді згущеної витяжки є перспективною для застосування як протизапальний засіб [3]. Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю, зокрема з листя первоцвіту (Folia Primulae), включає технологічний етап екстрагування етиловим спиртом 40 % методом мацерації з періодичним перемішуванням, причому подрібнену рослинну сировину попередньо замочують достатньою кількістю екстрагенту протягом 4 год., а потім переносять у мацераційний бак, заливають екстрагентом у співвідношенні 1:10 і настоюють при кімнатній температурі протягом 24 год. при періодичному перемішуванні. Співвідношення "сировина: екстрагент" становить 1:10, що є необхідним і достатнім для здійснення процесу екстракції. Здійснення настоювання при кімнатній температурі сприяє збереженню термолабільних екстрактивних речовин та дозволяє уникнути додаткових витрат енергоносіїв. Спосіб здійснюють наступним чином. Подрібнену до розміру частинок, які проходять крізь сито з діаметром отвору № 11200 (з максимальним допуском для отвору 0,77 мм), рослинну сировину (листя первоцвіту змочують достатньою кількістю (80 мл) етилового спирту 40 %, залишають на 4 год. при кімнатній температурі для набухання. Потім сировину заливають етиловим спиртом 40 % у співвідношенні 1:10, настоюють протягом 24 год. при кімнатній температурі, періодично перемішуючи. Спиртовий витяг зливають, шрот віджимають. Отриману витяжку згущують на роторному вакуумному випарнику до стану густої витяжки з вмістом вологи 7,47 %. При цьому загальне співвідношення "сировина: готовий продукт" становить 4,3: 1 (1 г густого витяжки відповідає 4,3 г рослинної сировини). Приклад 1 100 г подрібнених до розміру частинок, які проходять крізь сито з діаметром отвору № 11200, повітряно-сухих листя первоцвіту (Folia Primulae) змочували достатньою кількістю (80 мл) екстрагенту (етилового спирту 40 %) і залишали на 4 год. при кімнатній температурі для набухання. Потім замочену сировину заливали 1000 мл етилового спирту 40 %, настоювали протягом 24 год. при кімнатній температурі при періодичному перемішуванні. Спиртову витяжку зливали, шрот віджимали. Одержану спиртово-водну витяжку фільтрували крізь паперовий фільтр, згущували шляхом упарювання при температурі 50-60 °C в роторному вакуумному випарнику до одержання густої витяжки. Вихід густої витяжки складав 23,32 %, загальне співвідношення "сировина: готовий продукт" становило 4,3: 1 (1 г густого екстракту відповідає 4,3 г рослинної сировини). 1 UA 116777 U 5 10 15 20 Отриманий готовий продукт - густа витяжка - однорідна в'язка маса темно коричневого кольору, гіркувато-солонувата на смак, зі своєрідним приємним запахом, вологістю 7,47 %, розчинна у воді та нерозчинна у спирті етиловому 96 %. Приклад 2 Дослідження протизапальної активності густої витяжки з листя первоцвіту (Folia Primulae) проводили на 70 білих щурах лінії Вістар на моделі карагенінового набряку кінцівки щурів, яку відтворювали сублантарним введенням 0,1 мл 1 % розчину карагеніну (Sigma) в праву задню кінцівку тварини [1]. На 3-й годині (піку розвитку) набряку порівнювали об'єм здорової та набряклої кінцівок за допомогою лабораторного плетизмометра. Протизапальну активність розраховували за відповідними формулами порівняно до контрольних тварин (яким вводили еквівалентну кількість розчинника). А= 100 %-(Vн-дос - Vзд дос)*100/ (Vн-контр - Vзд контр) % Vн-дос - об'єм набряклої кінцівки в досліді Vзд дос - об'єм здорової кінцівки в досліді Vн-контр - об'єм набряклої кінцівки в контролі Vзд контр - об'єм здорової кінцівки в контролі. Досліджувані густі витяжки вводили внутрішньошлунково за 1 год. до ін'єкції карагеніну в дозах 50-100-150 та 200 мг/кг, відповідно, препарат порівняння (натрію диклофенак) вводили в дозі 8 мг/кг, яка відповідає його ЕД50 на даній моделі патологічного процесу. Групі контролю вводили еквіоб'ємну кількість розчинника. Результати дослідження наведено в таблиці. Таблиця Протизапальна дія густої витяжки з листя первоцвіту та препарату порівняння на моделі карагенінового набряку щурів (М±m, n=7) № 1 2 3 4 5 6 Доза Об'єм набряклої Об'єм здорової Приріст Антиексудативна 3 3 мг/кг кінцівки (мм ) кінцівки (мм ) (%) активність, % Карагенін (контроль) 534,8±27,1 255,5±63,6 121,0 % 0 ГВЛП 50 мг/кг 562,5±34,2 311,0±34,6 82,3 % 9,9 % 100 ГВЛП 547,2±42,9 310,0±31,3 76,9 % 15,1 % мг/кг 150 ГВЛП 539,3±31,9 341,9±31,2 58,4 % 29,3 % мг/кг 200 ГВЛП 462,8±41,7 287,5±22,5 61,0 37,2 % мг/кг Натрію диклофенак 8 мг/кг 502,43±27,9 403,5±21,4 24,6 % 64,6 % Препарат Примітка: ГВЛП - густа витяжка з листя первоцвіту. 25 30 35 Дослідження показали, що найбільший ступінь протинабрякової активності на моделі карагенінового набряку у білих щурів виявився при введенні тваринам густої витяжки з листя первоцвіту в дозі 200 мг/кг. За протизапальною активністю цей рослинний засіб тільки у 1,7 раза поступається дії натрію диклофенаку. Таким чином, запропонований спосіб забезпечує отримання субстанції біологічно активних речовин із сухої сировини - листя первоцвіту - у вигляді густої витяжки із виражено протизапальною активністю. Джерела інформації: 1. Доклінічні дослідження лікарських засобів (методичні рекомендації). За ред. чл.-кор. О.В. Стефанова - К.: Авіцена, 2001.- 528 с. 2. Пат. 34254 U. Україна, МПК С11В 1/10 (2008.01). Спосіб отримання рослинної субстанції з протизапальною активністю /С.М. Марчишин, О.Л. Демидяк, О.Ю. Кошова - № u200800680; заяв. 01.11.2004; опуб. 15.06.2005, бюл. № 6. 3. Shostak L.G. Investigation of phenolic compounds of Primula veris L. /L.G. Shostak, S.M. Marchyshyn, S.S. Kozachok, R.V. Karbovska //Journal of Education, Health and Sport. - 2016. - Vol. 6, № 5. - P. 424-432. 2 UA 116777 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб одержання рослинної субстанції з протизапальною активністю, зокрема з листя первоцвіту (Folia Primulae), який включає технологічний етап екстрагування спиртом етиловим 40 % методом мацерації з періодичним перемішування у співвідношенні 1:10, який відрізняється тим, що екстракцію проводять етиловим спиртом 40 % настоюванням протягом доби і згущують до одержання густої витяжки в роторному вакуумному випарнику. Комп’ютерна верстка Л. Литвиненко Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3