Спосіб комбінованої лікарської профілактики гіпоксичного синдрому

Спосіб комбінованої лікарської профілактики гіпоксичного синдрому за допомогою комбіновано 28771 тканин кисню. Усі хворі за випадковим принципом були розподілені на 2 групи: 1-а група - 20 хворих, 2-а група - 17 хворих. Хворі 1-ої групи одержували лікування відповідно до запропонованого способу, a 2-ої групи - згідно з існуючим способом (прототип). В результаті аналізу вказаних у табл. 1 груп порівняння встановлено, що спосіб, який пропонується для профілактики гіпоксичних порушень, має суттєву перевагу перед прототипом, яка складається у певному зниженні рівня основних компонентів процесу перекисного окислення ліпідів (ПОЛ), яке оцінювали за вмістом диєнових кон'югатів та ТБК-активних продуктів в крові, а також у підвищенні антиоксидантного захисту організму, за рівнем якого судили по вмісту SН-груп в крові та перекисної резистентності еритроцитів. Теоретичним обгрунтуванням практичної доцільності комбінованого застосування кверцетину з ацетилсаліциловою кислотою для профілактики порушень, виникаючих при впливі гіпоксичної гіпоксії на тлі перегріву, є дослідження останніх років [4, 5, 6, 9], в яких показано, що в основі патогенезу гіпоксичного синдрому, який розвивається на тлі перегріву, лежить активація процесів ПОЛ: підвищення вмісту продуктів ПОЛ в тканинах організму та, водночас, зниження кількості і активності компонентів антиоксидантної системи, тому що їх споживання прискорено, а додаткове надходження повільно з-за порушень мікроциркуляції та проникливості клітинних та субклітинних мембран [1, 8, 9]. Крім того, виявлено збільшення вмісту в крові ключового продукту ліпоксигеназного шляху метаболізму арахідонової кислоти - лейкотриєна В4, володіючого здатністю порушувати мембрани лізосом та посилювати вихід лізосомальних ферментів, які є виразними прооксидантами [2]. Таким чином, гіпоксичний синдром характеризується зрушенням прооксидантно-антиоксидантної рівноваги у сторону збільшення продуктів ліпідпереокислення в органах та тканинах, які викликають деструкцію клітинних та субклітинних мембран, порушуючи їх проникливість, функціонування мембранозв'язаних ферментних систем та компартменталізації метаболічних процесів аж до загибелі клітини. У зв'язку зі складностями динаміки порушень, виникаючих при впливі на організм гіпоксії на тлі гіпертермії, зрозуміла необхідність розробки принципів фармакологічної корекції гіпоксичного стану з обліком молекулярних механізмів розвитку даного патологічного стану. Доцільність застосування в цих умовах та перевага в порівнянні з прототипом комбінації кверцетину з АСК обумовлена особливостями їх фармакодинаміки, в тому числі механізмів фармакотерапевтичної дії. Відомо, що біофлавоноїд кверцетин поєднує у собі властивості високоефективного антиоксиданту та інгібітору ліпоксигенази [5]. Однак між циклооксигеназним та ліпоксигеназним шляхами окислення арахідонової кислоти є конкурентні взаємовідносини. Це відображається на вмісті кінцевих продуктів метаболізму, тобто відбувається зменшення утворення лейкотриєнів в результаті інгібірування ліпоксигенази, що приводить до збільшення синтезу продуктів циклооксигеназного шляху метаболізму арахідонової кисло ти - простагландинів, які також виявляються високоагресивними прооксидантами. Використання АСК, препарату, інгібіруючого циклооксигеназу та зменшуючого продукцію простагландинів у комбінації з кверцетином, дозволяє суттєво підвищити ефективність фармакокорекції гіпоксичного синдрому, водночас, зменшити дози лікарських засобів, які застосовуються у комбінації. Дані експериментального підтвердження переваги прототипом ефективності застосування комбінації кверцетину з АСК як антигіпоксантного засобу при гіпоксичному синдромі наведені у табл. 2-4. Досліди проведені на щурах лінії Wistar вагою 160-200 г. Експериментальною моделлю служив патологічний процес, який розвивався у тварин при впливі на організм гострої гіпоксичної гіпоксії (6 об. %) та гіпертермії (44°С). Моделювання проводили в спеціально розробленій авторами камері. Дослідження проводили на 4 групах тварин. 1 група складалася із інтактних тварин. Тварини 2 групи підлягали гострому впливу гіпоксії та гіпертермії терміном 15 хвилин одноразово та служили контролем. Тварини 3 групи за 2 години до посадки у камеру одержували кверцетин у вигляді водно-крохмальної суміші у дозі 100 мг/кг та АСК у вигляді водного розчину у дозі 50 мг/кг. Співвідношення доз виявилося найбільш ефективним, згідно з отриманими раніше даними [7]. Тварини 4 групи за 2 години до посадки у камеру одержували верапаміл у дозі 120 мг/кг. Визначення досліджених показників проводили в динаміці: через 3, 6 та 24 години після впливу гіпоксичної гіпоксії та гіпертермії. Проведені дослідження по вивченню вмісту в крові продуктів ПОЛ дозволили встановити, що застосування з профілактичною метою кверцетину у комбінації з АСК в значному ступені попереджує, а в окремих випадках повністю нормалізує утворення та накопичення первинних продуктів ПОЛ - диєнових кон’югатів (ДК), проміжних - гідроперекиси ліпідів (ГП), кінцевих - продуктів, які реагують з 2-тіобарбітуровою кислотою (ТБК-продукти) у всі строки дослідження. До того ж відмічаються вірогідні розрізнення в дії лікарських засобів, які пропонуються та використовуються у прототипі. У зв'язку з тим, що стан окислювального гомеостазу організму визначається з однієї сторони інтенсивністю протікання реакцій ліпідпереокислення, а з другої - станом антиоксидантної системи організму, вивчені показники стану окремих компонентів антиоксидантної системи організму у вивчаємих умовах експерименту. Встановлено, що застосування кверцетину з АСК при впливі гострої гіпоксичної гіпоксії та гіпертермії попереджає зниження активності одного з основних компонентів антиоксидантної системи каталази у всі строки дослідження. Крім того, вміст в крові загальної кількості сульфгідрильних груп у тварин, які одержували кверцетин у комбінації з АСК з профілактичною метою вірогідно вище, ніж у контрольних тварин. Виявлено також благоприємний вплив вивчаємої комбінації на перекисну резистентність мембран еритроцитів при гіпоксичному синдромі. При порівнянні впливу кверцетину у комбінації з АСК на стан антиоксидантної системи з представником групи блокаторів кальцієвих ка 2 28771 налів - верапамілом встановлена вірогідна перевага способу, який пропонується, що видно з табл. 2 та 3. Крім того, завдяки наявності у комбінації біофлавоноїду кверцетину, помічено значне зменшення кількості лейкотриєнів В4 у плазмі крові тварин, які схильні до впливу гіпоксії на тлі гіпертермії. Таким чином, результати досліджень впливу кверцетину у комбінації з АСК на стан прооксидантно-антиоксидантної рівноваги при гіпоксичному синдромі свідчать про те, що вивчаєма комбінація лікарських засобів має суттєву перевагу в порівнянні з прототипом і володіє виразними антиоксидантними та антиліпоксигеназними властивостями і здібна попереджати порушення окислювального гомеостазу організму. Отримані експериментальні дані, які вказують на високу ефективність вивчаємої комбінації, як антигіпоксанта з виразними антиоксидантними та антиліпоксигеназними властивостями, можуть бути використані у клінічних дослідженнях по оптимізації профілактики та фармакотерапії патологічного стану, виникаючого при впливі на організм гіпоксичної гіпоксії на тлі перегріву. та інф. патології промислового регіону Донбасу. К. - Луганськ, 1994. - С. 43. 3. Лук'янчук В.Д., Плоткін В.Я., Савченкова Л.В., Бурмак Ю.Г., Дзубан К.М. Спосіб підвищення ефективності фармакотерапії гіпоксичного синдрому у робітників вугледобувного та вуглепереробного виробництв. - Ін формаційний лист про нововведення в системі охорони здоров'я. - Луганськ, 1995. – 2 с. 4. Осинская Л.Ф. Мито хондриальные и микросомальные системы ферментативной продукции и детоксикации перекисей липидов при гипоксии и применении антиоксидантов. - Автореф. дис…. канд. биол. наук. - K., 1983. – 22 с. 5. Савченкова Л.В. Фармакологическая регуляция метаболических процессов при сочетанном воздействии на организм гипоксии и гипертермии. - Автореф. дис.... канд. мед. наук. - К., 1991. – 25 с. 6. Савченкова Л.В. Биохимические основы патогенеза гшзоксического синдрома // Укр. биохим. журн. - 1995. - № 6. - С. 108-111. 7. Царевська М.Н., Лук'янчук В.Д., Савченкова Л.В. Фізико-хімічне обгрунтування фармакотерапевтичної дії комбінації кверцетину з ацетилсаліциловою кислотою // Школа акад. О.І. Черкеса: ідеї, розвиток, перспективи. - К., 1994. - С. 77. 8. Halliwell B., Cutteridge J.M.C. Free radicali and antioxidante protection mechanisms and significance in toxicology and disease // Hum. Toxicol. – 1988. – N 1. – P. 7-13. 9. Sinclair A.J., Barnett A.H., Zunee J. Free radicale and antioxidant systeme in heulth and disease // Brit. J. Hosp. Med. – 1990. – № 5. – P. 334-336. Джерела інформації 1. Барабой В.А., Орел В.Э., Карнаух И.М. Перекисное окисление и радиация. - К.: Наук. думка, 1991. – 256 с. 2. Лукьянчук В.Д., Савченкова Л.В. Фармакологическая коррекция эффектов простагландинов и лейкотриенов в условиях экспериментальной шахтной травмы // Акт. проблеми екол. імунології Таблиця 1 Порівняльна оцінка впливу кверцетину в комбінації з ацетилсаліциловою кислотою і прототипу (верапаміл по 120 мг 3 рази на добу) на деякі показники стану ПОЛ і антиоксидантної системи після курсу медикаментозної профілактики гіпоксичного синдрому Досліджуємий показник Диєнові кон'югати (ммоль/л) ТБК-продукти (нмоль/л) SН-групи (ммоль/л) Перекисна резистентність еритроцитів (% гемолізу) Значення показника Кверцетин з ацетилсаліциловою Прототип кислотою до призначення після призначенння до призначення після призначення 1,220±0,080 0,612±0,045 1,193±0,070 0,918±0,082 93,5±4,21 42,3±1,17* 90,1±5,14 72,4±4,32 2,35±0,091 3,04±0,12* 2,11±0,086 2,23±0,097 14,02±0,83 9,32±0,35* 14,21±0,94 13,7±0,86 Примітка: * - різниця вірогідна. 3 28771 Таблиця 2 Порівняльна оцінка впливу кверцетину в комбінації з ацетилсаліциловою кислотою і прототипу на стан ПОЛ при гіпоксичному синдромі Група тварин Стат. показник Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m Вплив гіпоксії гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m Вплив гіпоксії гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК n=8-10 Інтактні Строки дослідження (у годинах) тварини 3 6 24 Диєнові кон'югати 0,366±0,030 0,584*±0,065 1,059*±0,053 0,684*±0,042 М±m 0,518*±0,023 0,911*±0,090 0,571* **±0,042 М±m 0,454***±0,033 0,753* ** ***± ±0,026 0,498* ** ***± ±0,025 Гідроперекиси 5,3±0,35 7,2*±0,40 6,9*±0,50 7,7*±0,40 М±m 6,7*±0,21 6,6*±0,13 6,2* **±0,31 М±m 5,8** ***±0,30 6,1±0,30 5,8**±0,30 М±m ТБК-продукти 77,70±3,36 142,01*±20,57 214,22*±11,63 136,36*±3,98 М±m 135,14*±10,11 192,18*±15,04 129,47*±9,18 М±m 101,70***±8,73 172,34* **±8,33 121,79* **±3,22 Примітка: * - різниця вірогідна у порівнянні з інтактними тваринами, ** - різниця вірогідна у порівнянні з контролем у відповідні строки дослідження, *** - різниця вірогідна у порівнянні з прототипом. Таблиця 3 Порівняльна оцінка впливу кверцетину в комбінації з ацетилсаліциловою кислотою і прототипу на деякі показники стану антиоксидантної системи організмупри гіпоксичному синдромі Група тварин Стат. показник Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу ( прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m n=8-10 Інтактні Строки дослідження (у годинах) тварини 3 6 24 Глутатион 95,94±11,90 54,78*±5,55 48,56*±3,32 35,40*±1,25 М±m Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування верапамілу (прототип) Профілактичне застосування кверцетину з АСК М±m 61,22*±4,70 69,84* **±5,11 61,26* **±5,31 М+m 77,33** ***±6,06 80,11**±3,94 78,33** ***±6,02 Сульфгідрильні групи 4,22±0,28 3,44*±0,17 2,88*±0,17 3,40*±0,13 М±m 3,92±0,21 3,13*±0,19 3,66±0,21 М±m 4,40** ***±0,18 4,76* ** ***±0,18 4,18** ***±0,23 Каталаза 326,53±4,38 281,05*±8,35 293,20*±2,57 317,03±4,28 315,11**±4,18 300,27*±3,00 325,01±2,67 М±m 306,86* **±5,14 313,19** ***±3,78 Перекисна резистентність еритроцитів М±m 6,47±0,42 10,51*±0,31 325,44±3,22 20,81*±1,18 9,91*±0,29 M±m 8,15* **±0,66 11,73* **±1,07 9,86*±0,47 M±m 6,11** ***±0,48 6,65** ***±0,84 9,61*±0,65 Примітка: * - різниця вірогідна в порівнянні з інтактними тваринами, ** - різниця вірогідна в порівнянні з контролем у відповідні строки дослідження, *** - різниця вірогідна в порівнянні з прототипом. 4 28771 Таблиця 4 Вміст лейкотриєну В4 у плазмі крові щурів з гіпоксичним синдромом у динаміці при комбінованому застосуванні кверцетину з АСК Група тварин Вплив гіпоксії і гіпертермії Профілактичне застосування кверцетину з АСК Стат. показник М±m Інтактні тварини 132,0±11,5 М±m n=8-10 Строки дослідження (у годинах) 3 6 24 168,0*±16,5 198,0*±1,5 188,0*±7,4 148,0±11,1 145,0**±12,0 143,2**±6,9 Примітка: * - різниця вірогідна в порівнянні з інтактними тваринами, ** - різниця вірогідна в порівнянні з контролем у відповідні строки дослідження. __________________________________________________________ ДП "Український інститут промислової власності" (Укрпатент) Україна, 01133, Київ-133, бульв. Лесі Українки, 26 (044) 295-81-42, 295-61-97 __________________________________________________________ Підписано до друку ________ 2002 р. Формат 60х84 1/8. Обсяг ______ обл.-вид. арк. Тираж 34 прим. Зам._______ __________________________________________________________ УкрІНТЕІ, 03680, Київ-39 МСП, вул. Горького, 180. (044) 268-25-22 __________________________________________________________ 5