Спосіб діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету у дитини

Спосіб діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету у дитини шляхом визначення рівня лізоциму в пробі її слини, аналізу результатів визначення та діагностування екологічно залежного порушення гуморального імунітету, який відрізняється тим, що додатково в пробі слини дитини визначають рівні імуноглобулінів A, G та секреторного імуноглобуліну А, а екологічно залежне порушення гуморального імунітету у дитини діагностують в разі відхилення від територіальної норми рівня всіх визначених показників. (19) (21) u200814623 (22) 19.12.2008 (24) 25.05.2009 (46) 25.05.2009, Бюл.№ 10, 2009 р. (72) КУЛЯС ВАЛЕНТИНА МИХАЙЛІВНА, UA, ТРУНОВА ОЛЬГА АРНОЛЬДІВНА, UA, ЄРМАЧЕНКО ОЛЕКСАНДР БОРИСОВИЧ, UA, ФУРСОВ ІВАН ВАЛЕНТИНОВИЧ, UA, САДЕКОВ ДМИТРО РИФАТОВИЧ, UA (73) ДОНЕЦЬКИЙ НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ ІМ. М. ГОРЬКОГО, UA 3 екологічних забруднень на імунітет дитини. Відомий спосіб діагностики включає визначення фагоцитарної активності (ФА) поліморфноядерних лейкоцитів (ПЯЛ) в периферичній крові та рівня лізоциму в пробі слини дитини, аналіз результатів дослідження та діагностування екологічно залежного порушення гуморального імунітету у дитини в разі відхилення від норми рівня хоча б одного з визначених показників. Недоліками відомого способу діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету у дитини є низька точність діагностики та інвазивність тестування при визначенні ФА ПЯЛ. Причиною низької точності діагностики за відомим способом - прототипом є односторонність досліджень імунологічного стану організму дитини, а саме: дослідження проводять тільки в нейтрофілах крові, враховують ФА ПЯЛ, яка характеризує лише неспецифічну реактивність імунної системи. В основу корисної моделі поставлено задачу в способі діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету дитини шляхом додаткового визначення специфічних показників імунного статусу забезпечити високу точність діагнозу та неінвазивність тестування. Спосіб, що заявляється, є високоточним (до 100% співпадіння результатів за подальшими клінічними спостереженнями) та безпечним, доступним, економічним, безболісним, неінвазивним, зручним для хворого і лікаря. Поставлена задача вирішується тим, що створено спосіб діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету у дитини шляхом визначення рівня лізоциму в пробі її слини, аналізу результатів визначення та діагностування екологічно залежного порушення гуморального імунітету. Новим в створеному способі є те, що додатково в пробі слини дитини визначають рівні імуноглобулінів A (IgA), G (IgA) та секреторного імуноглобуліну A (s-IgA), а екологічно залежне порушення гуморального імунітету у дитини діагностують в разі відхилення від територіальної норми рівня всіх визначених показників. Між сукупністю ознак корисної моделі і технічним результатом, якого можна досягти при її реалізації, існує причинно-наслідковий зв'язок. Імунітет є тонким індикатором впливу навколишнього середовища на організм незалежно від характеру впливу. У наш час розроблені високоінформативні неінвазивні методи для діагностики ранніх змін у стані здоров'я дитини, що виникають під впливом несприятливих факторів. Дослідження гуморальних факторів захисних реакцій є об'єктивними методиками для визначення рівня неспецифічного імунітету та виявлення пригнічення функцій імунної системи й схильності до розвитку неспецифічних захворювань. Для діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету дитини до відомого способу-прототипу включено визначення рівня лізоциму в пробі слини людини та ФА ПЯЛ в периферичній крові. Саме ФА ПЯЛ в периферичній крові як складова відомої комплексної діагностики знижує точність останньої: дослідження проводять тільки в нейтрофілах крові, враховують ФА ПЯЛ, 41503 4 яка визначає лише неспецифічну реактивність імунної системи, оскільки зміна ФА ПЯЛ може відбуватись не лише під впливом екологічних факторів, а і вірусних чи бактеріальних агентів (Тотолян А.А., Фрейлин И.С. Клетки иммунной системы. СП-б: Наука, т. 1. - 2000. - 340с.). На відміну від відомого способу-прототипу за способом діагностики, що заявляється, проводять визначення специфічного місцевого гуморального імунітету. Визначення імуноглобулінів IgA, IgA, sIgA у слині (безпосередньо те середовище, яке першим контактує з забруднювачами повітря) проводять для визначення характеристик першого місцевого захисту. Визначення рівня лізоциму (фермент класу гідролаз) слини доповнює дані про гуморальнийімунітет, бо також є його складовою. Лізоцим слини руйнує стінки бактеріальної клітини, відіграючи в організмі людини роль неспецифічного бактеріального бар'єра (Химический энциклопедический словарь / Под ред. И.Л. Кнунянц. - М.: «Советская энциклопедия», 1983. - С.300). Заявлена діагностика дозволяє визначати екологічно залежне порушення гуморального імунітету дитини з високою точністю (до 100%) на відміну від прототипу (50%). Окрім того, перевагою способу, що заявляється, є неінвазивність всіх тестувань, в той час, коли за відомим способом-прототипом для визначення ФА ПЯЛ необхідна проба венозної крові. Ця процедура завжди є стресовою для маленького пацієнта та створює можливість інфікування в разі недбальства медперсоналу. Застосування в практичній охороні здоров'я населення способу діагностики екологічно залежного порушення гуморального імунітету дитини, що заявляється, сприятиме поліпшенню якості моніторингу розвитку екологічно залежної патології, яка розвивається під впливом несприятливих факторів навколишнього середовища, підвищенню точності діагностики, скороченню термінів лікування захворювання, викликаного екологічно залежним порушенням імунного статусу. Для клінічної перевірки точності способу діагностики, що заявляється, були відібрані 118 дітей (основна група) у віці 4-8 років - мешканців зони впливу шкідливих викидів промислового підприємства (Донецька область). Всі ці діти відвідували дитячі заклади, розташовані на відстані до 3,0км від теплоелектростанції (ТЕС). Дітей основної групи діагностували як за способом, що заявляється, та і за відомим способом-прототипом. Контрольна група складалася з 92 дітей, що проживали у населеному пункті, де немає джерел забруднення атмосферного повітря. Значення визначених показників у дітей цієї групи вважали територіальною нормою характеристики гуморального імунітету. При проведенні досліджень використовували метод спрямованого відбору однорідних груп, що підвищує вірогідність статистичних даних. Критерієм однорідності груп були час проживання в даному районі, тривалість відвідуваності дошкільної або шкільної установи. Імунологічне обстеження включало визначення рівнів лізоциму в слині відомим нефелометричним методом за ступенем лізису індикаторної 5 41503 культури Micrococcus lysodecticus (Кацнельсон Б.А., Дегтярева Т.Д., Привалова Л.И. Принципы биологической профилактики профессиональной и экологически обусловленной патологии от воздействия неорганических веществ. - Екатеринбург, 1999. - 106с.), а також IgA, IgG i s-IgA у слині відомим методом радіальної імунодифузії в гелі за Манчині (Иммунологические методы /Под ред. Г. Фриммеля. - М: Медицина, 1987. - 472с.). Для перевірки гуморального імунітету за відомим способом-прототипом до досліджень включили і визначення ФА ПЯЛ, для чого у дітей взяли пробу крові з вени та провели дослідження за відомою методикою (Деркачов Е.А., Огір Л.Б., Дрозд Т.Є. та ін. Донозологічна діагностика стану здоров'я насе 6 лення у зв'язку з впливом факторів навколишнього середовища /Метод, рекомендації: МР 2.2.12. – 068 - 2000. - Київ: ДМП «Полімед», 2000.-С.10-11). Середні значення одержаних показників занесли до Табл. 1. Як видно з Табл. 1, порівняно з контрольною групою рівні лізоциму, IgG, s-IgA в слині піддослідних дітей-мешканців екологічно забрудненої території зростають, а концентрація IgA зменшується. Виявлені порушення гуморального імунітету в цих дітей надалі можуть сприяти розвитку різних імунодефіцитних станів на тлі початку дисбалансу механізмів імунорегуляції. Зменшення концентрації IgA і підвищення рівня s-IgA у слині може бути пов'язане з підвищеним синтезом у слизовій оболонці Таблиця 1 Значення показників (М±m) гуморального імунітету груп дітей-мешканців екологічно чистої (контрольна) та забрудненої (основна) територій Показники гуморального імунітету Групи Контрольна Основна Лізоцим, г/л IgG, г/л IgA, г/л s-IgA, г/л 2,6±0,2 4,9±0,5* 0,085±0,007 0,132±0,01* 0,331±0,02 0,112±0,009** 0,23±0,02 0,45±0,06* ФА ПЯЛ, % 4-6 років 7-8 років 23-73 40-95 26-75 47-98 Примітка - вірогідність розходжень щодо контролю: * - р