Спосіб патолого-морфологічної діагностики ступеня пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією

Реферат: Спосіб патолого-морфологічної діагностики ступеня пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена пре еклампсією, належить до паталогічної анатомії. Спосіб можна використовувати у паталого- морфологічній діагностиці. UA 73242 U (54) СПОСІБ ПАТОЛОГО-МОРФОЛОГІЧНОЇ ДІАГНОСТИКИ СТУПЕНЯ ПОШКОДЖЕННЯ ГЕПАТОБІЛІАРНОЇ СИСТЕМИ ПЛОДІВ ТА НОВОНАРОДЖЕНИХ ВІД МАТЕРІВ, ВАГІТНІСТЬ ЯКИХ БУЛА УСКЛАДНЕНА ПРЕЕКЛАМПСІЄЮ UA 73242 U UA 73242 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до патологічної анатомії, і може бути використаною для патолого-морфологічної діагностики ступеня пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією. Відомо, що ембріональний період розвитку найбільш чутливий до внутрішніх та зовнішніх пошкоджуючих факторів. Це, зокрема торкається гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією. Прееклампсія (ПЕ) - грізне ускладнення вагітності, пологів та післяпологового періоду займає одне із ведучих місць в структурі причин материнської та перинатальної захворюваності та смертності. ПЕ супроводжується порушенням плацентації, зменшенням перфузії плаценти, дисфункцією ендотеліальних клітин та системним вазоспазмом. Мікроморфометричні дослідження показали, що ПЕ супроводжується зміною гемоциркуляторного русла плаценти, яке призводить до первинного погіршення васкуляризації та зміни метаболізму. Ускладнення вагітності та пологів приводять до швидкого та суттєвого зриву компенсаторно-пристосувальних реакцій з різким посиленням змін структурних елементів організму, в тому числі гепатобіліарної системи, найважливішим органом якої є печінка [Richter С. Eclampsia complicated abdominal compartment syndrome / С Richter // Am. J. Perinatology.-2009. - Vol. 26, N 10. - P. 751-753]. Печінка дорослої людини є найбільш великою залозою травлення (вага приблизно 1,5 кг). Вона розташована у верхній частині черевної порожнини, більша частина праворуч. Морфоструктурні та морфофункціональні властивості печінки людини закладаються в утробі матері і формуються під впливом особливостей протікання вагітності та пологів. Діагностика результатів цього впливу є важливим розділом патологічної анатомії. Відомі способи паталого-морфологічної діагностики стану органів та систем людини передбачають ряд технологічних операцій, серед яких розтин трупів, витягання органокомплексу, його підготовка до дослідження, дослідження органу, виявлення ознак його відмінності від норми та постановка діагнозу [Струков А.И., Серов В.В. Патологическая анатомия. - М.: Медицина, 1995. - 688 с.]. Даний спосіб патолого-морфологічної оцінки стану органів та систем є найбільш близьким до того, що заявляється, за технічною суттю і результатом, який може бути досягнутим, тому його вибрано за прототип. В основу корисної моделі поставлена задача патолого-морфологічної оцінки стану печінки померлих плодів та новонароджених, які були народжені від матерів з прееклампсією. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі патолого-морфологічної діагностики ступеня пошкодженя гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією, який включає розтин трупа, витягання органокомплексу, підготовку органу до дослідження, дослідження органу, виявлення ознак його відмінності від норми та постановка діагнозу, згідно з корисною моделлю, ступінь пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена ПЕ, оцінюють за станом оптичної щільності імуногістохімічних реакцій в печінці і її пошкодження під впливом ПЕ матері в період ембріонального розвитку плоду ,діагностують при наростанні продукції колагенів І та III типів в інтерстиції печінки, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської ПЕ до важкого, при одночасному виявленні дефіциту колагену IV типу в базальних мембранах судин та протоків, потовщенні базальних мембран судин, достовірному підсиленні продукції фібронектину та експресії ендотеліну-1, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської ПЕ, при цьому І ступінь пошкодження печінки діагностують при 2,101±0,02 ум. од. опт. щільн., II ступінь - при 2,234±0,04 ум. од. опт. щільн. та III ступінь - при 2,321±0,06 ум. од. опт. щільн. фібронектину. Технічний ефект корисної моделі, а саме ефективна патолого-морфологічна діагностика ступеня пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена ПЕ, обумовлений синергізмом технологічний операцій способу, що заявляється. Спосіб виконують наступним чином: труп плоду чи новонародженого від матері, вагітність якої була ускладнена ПЕ, розтинають, витягають печінку і підготовлюють її до дослідження, орган досліджують для виявлення ознак його відмінності від норми та постановка діагнозу. Ступінь пошкодження гепатобіліарної системи оцінюють за станом оптичної щільності імуногістохімічних реакцій в печінці. Пошкодження печінки під впливом ПЕ матері в період ембріонального розвитку плоду діагностують при наростанні продукції колагенів І та III типів в інтерстиції печінки, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської ПЕ до важкого, при одночасному виявленні дефіциту колагену IV типу в базальних мембранах судин та протоків, потовщенні базальних мембран судин, достовірному підсиленні продукції фібронектину та експресії ендотеліну-1, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської ПЕ, при цьому І 1 UA 73242 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ступінь пошкодження печінки діагностують при 2,101±0,02 ум. од. опт. щільн., II ступінь - при 2,234±0,04 ум. од. опт. щільн. та III ступінь - при 2,321±0,06 ум. од. опт. щільн. фібронектину. Постановку імуногістохімічної реакції здійснюють за стандартним протоколом з використанням моноклональних антитіл, системи візуалізації. Використовують позитивні й негативні контролі. Одержують мікрофотографії зразків тканини на збільшенні 200х за допомогою мікроскопу й цифрової камери. Фотозйомку проводять після настроювання освітлення за Келлером, з повним закриттям апертурою діафрагми, при піднятому конденсаторі. Подальше кількісне дослідження проводять за допомогою програми комп'ютерного аналізу зображення. Поширеність експресії досліджуваних маркерів оцінюють за показником відносної площі кадра (відношення площі, зайнятої імунопозитивними структурами, до загальної площі кадру, %); інтенсивність експресії за показником оптичної щільності (А), що розраховується за формулою: А = -In(І/І0), де І інтенсивність світлового потоку, що пройшов через шар світлопоглинаючої речовини в області локалізації імунопозитивних структур; Іо - інтенсивність падаючого світлового потоку (інтенсивність світлового потоку, який пройшов через імунопозитивні ділянки цитоплазми). Оптичну щільність вимірюють при різних довжинах хвиль для вибору оптимальної довжини хвилі для найкращої різниці імунопозитивних і імунонегативних структур, а також імунопозитивних структур різної інтенсивності забарвлення. Статистичну обробку даних проводять з використанням методів описової статистики. Для оцінки між групових розходжень застосовують t - критерій Ст’юдента, критерій Манна - Уітні, ранговий дисперсійний аналіз Краскела - Уолліса й медіанний тест. При порівнянні частотних величин використовують 2-критерій Пірсона й двосторонній точний критерій Фішера. Залежність між кількісними ознаками оцінюють за допомогою рангового коефіцієнта кореляції Спірмена. Статистичну обробку виконують з використанням програми Statistic for Windows, 60. Ефективність способу ілюструють наступні приклади. Приклад 1. Печінка мертвонародженого від матері з прееклампсією легкого ступеня тяжкості при макроскопічному дослідженні має тонку напівпрозору блискучу капсулу, тканина печінки еластична на дотик. На розрізі печінка червоно-коричневого кольору, однорідна, печінкові вени розвинені правильно, нерівномірно повнокровні. Мікроскопічно в печінці виявляється більш виражене (в порівнянні до контролю) повнокров'я центральних вен, портальних вен та синусоїдів. Показники оптичної щільності (в умовних одиницях оптичної щільності) імуногістохімічних реакцій в печінці мертвонародженого наступні: оптична щільність колагенів 1,108 (І тип), 2,066 (III тип), 0,692 (IV тип); оптична щільність світіння ендотеліну-1 1,179; оптична щільність фібронектину 2,121. Співставлення одержаних вимірів з контрольними (аналогічні виміри печінки мертвонародженого від матері, вагітність якої протікала фізіологічно) дає змогу діагностувати пошкодження печінки І ступеня. Приклад 2. Печінка мертвонародженого від матері з прееклампсією середнього ступеня тяжкості при макроскопічному дослідженні має тонку напівпрозору капсулу, тканина печінки щільно-еластична на дотик. На розрізі печінка жовто-коричневого кольору, дрібнозерниста, печінкові вени розвинені правильно, нерівномірно повнокровні. Мікроскопічно в печінці відмічається порушення гістоархітектоніки у вигляді нерівномірної дискомплексації балковорадіарної будови. Показники оптичної щільності (в умовних одиницях оптичної щільності) імуногістохімічних реакцій в печінці мертвонародженого наступні: оптична щільність колагенів 1,174 (І тип), 2,475 (III тип), 0,493 (IV тип); оптична щільність світіння ендотеліну-1 1,218; оптична щільність фібронектину 2,21 А. Співставлення одержаних вимірів з контрольними (аналогічні виміри печінки мертвонародженого від матері, вагітність якої протікала фізіологічно) дає змогу діагностувати пошкодження печінки II ступеня. Приклад 3. Печінка мертвонародженого від матері з прееклампсією важкого ступеня тяжкості при макроскопічному дослідженні має тонку напівпрозору блискучу капсулу, тканина печінки щільнувата на дотик. На розрізі печінка жовтого кольору, зерниста, печінкові вени розвинені правильно, частіше повнокровні. Мікроскопічно в печінці відмічається порушення гістоархітектоніки у вигляді дискомплексації балок та розростання портальної строми. Показники оптичної щільності (в умовних одиницях оптичної щільності) імуногістохімічних реакцій в печінці мертвонародженого наступні: оптична щільність колагенів - 1,364 (І тип), 2,687 (III тип), 0,486 (IV тип); оптична щільність світіння ендотеліну-1 1,209; оптична щільність фібронектину 2,381. 2 UA 73242 U Співставлення одержаних вимірів з контрольними (аналогічні виміри печінки мертвонародженого від матері, вагітність якої протікала фізіологічно) дає змогу діагностувати пошкодження печінки III ступеня. 5 10 15 20 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб патолого-морфологічної діагностики ступеня пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією, який включає розтин трупа, витягання органокомплексу, підготовку органу до дослідження, дослідження органу, виявлення ознак його відмінності від норми та постановку діагнозу, який відрізняється тим, що ступінь пошкодження гепатобіліарної системи плодів та новонароджених від матерів, вагітність яких була ускладнена прееклампсією, оцінюють за станом оптичної щільності імуногістохімічних реакцій в печінці і її пошкодження під впливом прееклампсії матері в період ембріонального розвитку плоду діагностують при наростанні продукції колагенів І та III типів в інтерстиції печінки, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської прееклампсії до важкої, при одночасному виявленні дефіциту колагену IV типу в базальних мембранах судин та протоків, потовщенні базальних мембран судин, достовірному підсиленні продукції фібронектину та експресії ендотеліну-1, починаючи з легкого ступеня тяжкості материнської ПЕ, при цьому І ступінь пошкодження печінки діагностують при 2,101±0,02 ум. од. опт. щільн., II ступінь - при 2,234±0,04 ум. од. опт. щільн. та III ступінь - при 2,321±0,06 ум. од. опт. щільн. фібронектину. Комп’ютерна верстка Д. Шеверун Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3