Спосіб діагностики терміну викидня, що не відбувся

Реферат: UA 73855 U UA 73855 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме до акушерства та гінекології, та може бути використана для діагностики терміну викидня, що не відбувся. Серед акушерських ускладнень, що не мають тенденції до зниження, велику частку займає невиношування (10-26 %), а в його структурі - викидень, який не відбувся (8-12 %), причини якого часто не встановлюються. Невиношування вагітності є актуальною проблемою сучасного акушерства і має не тільки медичне, а й соціальне значення, оскільки бажана вагітність в 15-20 % випадків закінчується її достроковим перериванням. На ембріональний період припадає до 75 % всіх репродуктивних втрат, пов'язаних з невиношуванням [Сидельникова В.М., 2002]. Багаточисельними дослідженнями встановлена залежність частоти успішного виношування вагітності від благополучного стану ендометрію. Ендометрій під впливом гормональних коливань протягом менструального циклу піддається певним змінам, які необхідні для успішної імплантації ембріона та його подальшого розвитку [Diedrich К. А, 2007]. Беручи до уваги поліетилогічність невиношування вагітності, обстеження пацієнток повинно бути спрямовано на виявлення основного (домінуючого) фактора, який обумовив викидень, що не відбувся, тому актуальним є вивчення гістологічного матеріалу зішкребу з порожнини матки при викидні, що не відбувся. На сьогодні можливості морфологічного аналізу зішкребу із порожнини матки поки що обмежені, тому що не розроблені чіткі критерії діагностики причин викидня, що не відбувся. Аналогом корисної моделі є спосіб діагностики невиношування вагітності в першому триместрі, який включає визначення сумарних 17-кетостероїдів та їх окремих фракцій, визначають індекс андрогенності 17-кетостеродів по фракціях андростандіону, андростендіону, андростерону, етіохоланолону, П-оксіандростерону та П-оксі-етіохоланолону, одночасно визначають процентний вміст дегідроепіандростену у складі 17-кетостероїдів і при значенні індексу андрогенності 17-кетостероїдів 0,9-1,2 та процентного вмісту дегідроепіандростерону у складі сумарних П-кетостероїдів 25-29 діагностують загрозу самовільного аборту, а при значенні індексу андрогенності 17-кетостероїдів 1,9 і більше та процентного вмісту дегідроепіандростерону у складі сумарних 17-кетостероїдів менше 20 діагностують аборт, що не відбувся (Спосіб діагностики невиношування вагітності у першому триместрі // Романішин Я.М., Пак О.В., Жемела О.М., Філіпюк І.Т. - Патент № 10260 А від 25.12.1996). Найближчий аналог корисної моделі, що заявляється, має недолік в тому, що жінкам з викиднем, що не відбувся, необхідно проводити додатковий забір крові для визначення рівня кетостероїдів без урахування морфологічних змін в хоріоні. Нами пропонується спосіб, що виключає вищевказані недоліки. В основу корисної моделі, що заявляється, поставлена задача удосконалити спосіб діагностики терміну викидня, що не відбувся, шляхом оцінки співвідношення різних типів вільозних утворень в хоріоні в комплексі загальноприйнятих діагностичних заходів. Поставлена задача вирішується тим, що у жінок з викиднем, що не відбувся проводиться ультразвукове дослідження для верифікації діагнозу з наступним вишкрібанням порожнини матки під внутрішньовенним знеболенням з подальшою оцінкою співвідношення різних типів вільозних утворень. Спільними ознаками найближчого аналога та способу, що заявляється, є включення до комплексу діагностики викидня, що не відбувся, додаткових методів дослідження, що значно підвищує якість діагностики даної патології. Відрізняє корисну модель від найближчого аналога те, що у жінки не потрібно проводити забір крові для визначення рівня кетостероїдів, а достатньо лише більш глибоко провести оцінку морфологічного матеріалу за допомогою імуногістохімічних методів, що в подальшому допоможе встановити причину виникнення викидня, що не відбувся, та в преконцепційній підготовці до наступної вагітності вплинути на етіопатогенетичні ланки в реабілітаційному періоді для забезпечення успішного виношування вагітності та народження здорових нащадків. Виконання способу здійснюють у такій послідовності. У жінок з викиднем, що не відбувся, проводять ультразвукове дослідження для верифікації діагнозу з наступним вишкрібанням порожнини матки під внутрішньовенним знеболенням. Підготовку матеріалу до мікроскопічних досліджень здійснюють диференційовано - залежно від вимог конкретної методики. Частину матеріалу фіксують 48 годин у 10 %-му розчині нейтрального забуференого формаліну, після чого проводять зневоднювання у висхідній батареї спиртів та парафінову заливку при температурі 64 °С. На санному мікротомі роблять серійні гістологічні зрізи товщиною 5 мкм. Після депарафінізації зрізів виконують забарвлення гематоксиліном-еозином (з оглядовою метою), хромотропом-водним блакитним за методикою Н.З. Слинченко (для ідентифікації 1 UA 73855 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 фібрину та волокнистого компонента строми), а також бромфеноловим синім на загальний білок за Бонхегом. Іншу частину матеріалу для збереження цілісності певних антигенів та реактивних груп фіксують протягом 22 годин у 10 %-му розчині нейтрального забуференого формаліну, після чого проводять прискорене зневоднювання у висхідній батареї спиртів та парафінову заливку при температурі 56 °С. На таких зрізах ставлять імуногістохімічні реакції з моноклональними або поліклональними антитілами виробника Dako Cytomation (Denmark-USA). З метою об'єктивізації кількісних досліджень проводили комп'ютерну морфометрію об'єктів у гістологічних та імуногістохімічних препаратах. Для цього спочатку отримували цифрові копії оптичного зображення ділянок мікроскопічних препаратів за допомогою цифрового фотоапарата Olympus C740UZ при використанні різних об'єктивів мікроскопа залежно від цілей аналізу. Потім цифрові копії зображення аналізували за допомогою ліцензійної копії комп'ютерної програми "ВидеоТест - Размер 5,0" (ООО Видеотест, Россия). Зокрема, підраховували кількість певних об'єктів, вимірювали денситометричні параметри (оптична щільність забарвлення - в умовних одиницях оптичної щільності). Корисна модель дозволяє підвищити якість та ефективність діагностики терміну викидня, що не відбувся. Приклад конкретного застосування способу. Даний спосіб застосовувалась на кафедрі акушерства, гінекології та перинатології Буковинського державного медичного університету протягом 2010-2011 років. Морфологічно досліджено 113 ворсинчастих хоріонів у жінок з викиднем, що не відбувся. Слід зазначити, що при викидні, що не відбувся спостерігалися явища дегенерації еритробластів, що морфологічно проявлялося каріорексисом в цих клітинах. В матеріалі, для якого мало місце різниця між гестаційним терміном та даними УЗД 1-4 тижні, встановлено ознаки порушення дозрівання хоріальних ворсинок зі збільшенням приблизно вдвічі відсотка найбільш незрілих елементів хоріального дерева - мезенхімальних ворсинок. З наростанням різниці між гестаційним терміном та даними УЗД відсоток мезенхімальних ворсинок продовжує наростати з наступним їх абсолютним домінуванням. Одночасно кровоносні судини хоріальних ворсинок ще більше спустошуються від формених елементів, причому капіляри часто набувають щілиноподібної форми. При різниці між гестаційним терміном та даними УЗД у 5-8 тижнів у значній кількості з'являються надмірно набряклі хоріальні ворсинки з сильно розширеними стромальними каналами та різким зниженням числа всіх типів стромальних клітин, які до того ж мають ознаки загибелі - каріопікнозу чи каріорексис. При викиднях, що не відбулися, починаючи з різниці 1-4 тижні між терміном гестації та даними УЗД, прогресивно зменшується відсоток васкуляризованих типів хоріальних ворсинок ембріональних, стовбурових, проміжних незрілих, зменшується відсоток попередників хоріальних ворсинок: трофобластичних та вільозних відростків. Це супроводжується змінами у вмісту плацентарних гормонів та білків. Зокрема, починаючи з різниці 1-4 т. знижується концентрація протеїну SP1 у трофобласті, а починаючи з різниці 5-8 т. - плацентарних гормонів (особливо значно хоріонічного гонадотропіну). Концентрація загального білка у цитоплазмі цитотрофобласта при цьому дещо підвищується, що відповідає суті наростання апоптотичних процесів, в ході яких білки піддаються коагуляції, а не гідролізу. Стосовно процесів регуляції чисельності клітин відмічено, що, починаючи з різниці 1-4 т., прогресивно наростають процеси апоптозу трофобласта, що пов'язано із передуючим цьому підвищенням концентрації проапоптотичного протеїну ВАХ та зниженням концентрації протиапоптотичного протеїну Всі-2. При цьому різко знижується проліферативна активність клітин хоріальних ворсинок. Вказані процеси у цілому означають відсутність наростання клітинної маси в хоріоні. На основі вивчення співвідношення різних типів вільозних утворень хоріону за допомогою імуногістохімічних методів, не лише констатується наявність викидня, що не відбувся, а і можна визначити термін припинення розвитку ембріона, що в подальшому допоможе встановити причину виникнення викидня, що не відбувся та в преконцепційній підготовці до наступної вагітності вплинути на етіопатогенетичні ланки в реабілітаційному періоді для забезпечення успішного виношування вагітності та народження здорових нащадків. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ Спосіб діагностики терміну викидня, що не відбувся, шляхом проведення ультразвукового дослідження, визначення рівнів гормонів і білків крові та вишкрібання порожнини матки, який відрізняється тим, що за допомогою імуногістохімічних методів визначають співвідношення різних типів вільозних утворень хоріону. 2 UA 73855 U Комп’ютерна верстка Л.Литвиненко Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3