Застосування натрієвої солі 4-(2-оксо-3-метил-2н-[1,2,4]триазино[2,3-c]-хіназолін-6-іл)бутанової кислоти як церебропротекторного засобу

Реферат: Застосування натрієвої солі 4-(2-оксо-3-метил-2H-[1,2,4]триазино[2,3-с]-хіназолін-6-іл)бутанової кислоти, O N N N DSK-38 ONa N CH3 O як церебропротекторного засобу. UA 84257 U (12) UA 84257 U UA 84257 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до медицини, а саме фармакології, і стосується застосування натрієвої солі 4-(2-оксо-3-метил-2H-[1,2,4]триазино[2,3-с]хіназолін-6-іл)бутанової кислоти, як засобу, спроможного викликати захисну дію на ішемізований мозок. Відомо, що лікувальні засоби, які використовуються в терапії гострих порушень мозкового кровообігу (ГПМК), не завжди задовольняють вимоги клініцистів через недостатню ефективність та наявність побічних ефектів, які обмежують їх застосування [Кавинтон в лечении больных с ишемическими нарушениями мозгового кровообращения / З.А. Суслина, М.М. Танашян, В.Г. Ионова [и др.] // Укр. медичний часопис.-2003. - № 6 (38). - С. 85-89; Суслина З.А. Ишемический инсульт: принципы лечения в острейшем периоде / З.А. Суслина // Нервные болезни.-2004. - № 1. - С. 14-18; Машковский М.Д. Лекарственные средства.-16-е издание, переработанное, исправленное и дополненное. - М.: Новая волна, 2012.-1216 с.]. Наведені дані вказують на те, що однією з пріоритетних задач сучасної нейрофармакології є пошук високоактивних речовин з церебропротекторною дією, придатних для створення на їх основі нових більш ефективних та безпечних лікарських засобів [Дослідження антиоксидантної дії хіназоліл-4-(хінолін-4)-тіо-α(β)-карбонових кислот та їх похідних за умов ініціювання вільно радикальних процесів in vitro та моделюванні ішемії головного мозку / І.Ф. Бєленічев, С.І. Коваленко, О.А. Бражко [та ін.] // Ліки.-2001. - № 5-6. - С. 28-33; Макарова Л.М. Изучение нейропротекторного действия производного аспарагиновой кислоты при реперфузионных повреждениях мозга / Л.М. Макарова, В.Е. Погорелый // Эксперим. и клин, фармакол.-2004. - Т. 67, № 5. - С. 13-16]. В цьому плані нашу увагу привернула натрієва сіль 4-(2-оксо-3-метил-2Н-[1,2,4]триазино[2,3с]хіназолін-6-іл)бутанової кислоти (сполука DSK-38), якій притаманний стимулюючий вплив на кровопостачання головного мозку [Синтез та біологічна активність 6 - заміщених 3-R-2H[1,2,4]триазино[2,3-с]хіназолін-2-онів / Г.Г. Берест, Д.Ю. Скорина, О.Ю. Воскобійник, С.І. Коваленко [та ін.] // Фармація - погляд у майбутнє. VII Національний з'їзд фармацевтів України. Харків, 2010. - Т. 1. - С. 16], що і стало підставою для проведення даного дослідження. В основу корисної моделі поставлено задачу встановити наявність та оцінити ступінь церебропротекторної дії сполуки DSK-38 та охарактеризувати її вплив на інтенсивність нейродеструктивних змін у ішемізованому мозку. Проведено 2 серії експериментів. У першій серії досліди проведено на 40 щурах обох статей, масою тіла 170-210 г, розбитих на 4 групи по 10 тварин у кожній. ГПМК моделювали шляхом перев'язки обох сонних артерій у ненаркотизованих тварин. Лігатури під судини підводили в умовах пропофолового наркозу (60 мг/кг, внутрішньоочеревинно). Оклюзію викликали через 10 хв. після виходу щурів з наркозу. Досліджувану речовину DSK-38 вводили щурам одноразово в/о, в дозі 10 мг/кг (взято емпірично) в профілактичному режимі за 60 хв. до відтворення ГПМК. Препарати зрівняння мексидол (100 мг/кг) та пірацетам (100 мг/кг), взяті в терапевтично ефективних дозах [Антигипоксантное действие фитоновоседа, силимара и мексидола после гипоксической гипоксии крыс / Н.В. Кондакова, Л.Б. Стрелкова, М.Ф. Минева [и др.] // XV Рос. нац. конгресс "Человек и лекарство": материалы. - М., 2006. - С. 639], вводили аналогічним способом. Контрольні тварини отримували еквівалентну кількість 0,9 % розчину NaCl. Спостереження велося протягом 3-х діб. Ефективність оцінювали за показниками летальності (у %) відносно 2 контролю. Статистичну обробку цифрових даних проводили за методом χ [Лапач С.Н., Чубенко А.В., Бабич П.Н. Статистика в науке и бизнесе: Практическое руководство. - К.: Моріон, 2002.640 с.]. У другій серії експериментів досліджено вплив DSK-38 на інтенсивність нейродеструктивних змін в ішемізованому головному мозку. Експерименти виконано на 24 котах-самцях (2,6-5,0 кг) на моделі незворотної каротидної оклюзії, оскільки тільки в умовах аноксії некротичні зміни будуть превалювати над процесами апоптозу [Рациональная нейропротекция / [Беленичев И.Ф., Черний В.И., Колесник Ю.М. и др.] - Донецк: Изд. Дом Заславский, 2009.-261 с.]. Сполуку DSK-38 (10 мг/кг) та препарат-порівняння - вінпоцетин (5 мг/кг), взяті в оптимальних терапевтичних дозах, запозичених з літератури [Степанюк Г.І. Оцінка церебропротекторної дії похідних (3-R-2-оксо-2Н-[1,2,4]тріазино[2,3-с]хіназолін-6-іл)карбонових кислот на моделі гострого порушення мозкового кровообігу у щурів / Г.І. Степанюк, Н.О. Семененко, С.І. Коваленко, Д.Ю. Скорина, С.І. Семененко // Фармакологія та лікарська токсикологія.-2011. - № 6 (25). - С. 22-26], вводили внутрішньовенно (в/в) тричі протягом доби. Перше введення здійснювали через 1 год. після моделювання патології, тобто в межах терапевтичного вікна. Інтенсивність нейродеструктивних процесів некротичного походження визначали за допомогою моніторингу нейронспецифічної енолази (NSE), яка загальновизнано є раннім маркером руйнування мембранних структур нервових клітин. Збільшення її активності свідчить про 1 UA 84257 U 5 10 15 20 25 30 наявність переважно некротичної загибелі нейроцитів [Шведський В.В. Сучасна церебропротекторна терапія гострих порушень мозкового кровообігу при цукровому діабеті та шляхи її оптимізації / В.В. Шведський, С.Ю. Штриголь, О.А. Ходаківський // Клінічна фармація.2011. - Т. 15., № 2. - С. 7-12]. NSE визначали в сироватці венознозної крові імуноферментним методом з використанням стандартних наборів фірми DAI, USA. Активність NSE виражали у нг/мл [Ходаківський О.А. Оцінка впливу експериментальної терапії адемолом на інтенсивність перебігу деструктивних змін в мембранах нейронів у монгольських піщанок в умовах гострої церебральної ішемії / О.А. Ходаківський // Вісник морфології.-2011. - Т.П., № 1. - С. 62-65]. Кров отримували шляхом пункції внутрішньої яремної вени на боці перев'язки сонної артерії. Забір матеріалу здійснювали двічі: перший раз для визначення початкових рівнів активності, потім через 24 год. з моменту відтворення ГПМК. Цифрові дані обробляли методом варіаційної статистики з використанням t-критерію Стьюдента, зміни показників вважали вірогідними при р0,05. Результати дослідження представлено в таблицях 1 та 2. Хід експерименту В ході проведеного експерименту встановлено, що в контрольній групі щурів з ГПМК більше половини (60 %) тварин загинула через 6 год. після відтворення патологічного стану. Тому цей період експерименту можна вважати критичним (див. табл. 1). Превентивне введення щурам з ГПМК натрієвої солі 4-(2-оксо-3-метил-2H[1,2,4]тріазино[2,3-с]хіназолін-6-іл)бутанової кислоти (DSK-38), подібно до мексидолу та пірацетаму, викликало зниження показника летальності тварин, що чітко проявилось в критичний період експерименту. При цьому за ефективністю DSK-38 в дозі 10 мг/кг в/о співставлялась з мексидолом (100 мг/кг в/о), вірогідно перевершуючи дію пірацетаму (100 мг/кг в/о): показник летальності становив відповідно 10, 10 та 30 % проти 60 % у контрольній групі тварин (див. табл. 1). Таку дію сполуки DSK-38, як і референс-препарату можна охарактеризувати як наявність церебропротекторного ефекту. Достатньо виразна захисна дія DSK-38 на ішемізований мозок мала місце і в другій серії дослідів (див. табл. 2). Лікувальна терапія котів з ГПМК сполукою DSK-38 практично в такій же мірі, як і вінпоцетином викликала вірогідне гальмування активності NSE відповідно у 6 та 7,2 рази проти 10,2 рази в контролі. Таблиця 1 Вплив DSK-38, мексидолу та пірацетаму на летальність ненаркотизованих щурів з гострим порушенням мозкового кровообігу (ГПМК), n=10 Умови досліду ГПМК без корекції (контроль) Мексидол + ГПМК Пірацетам + ГПМК DSK-38 (10 мг/кг) Летальність (%] і в різні строки після моделювання ГПМК 4 1 год. 2 год. 3 год. 6 год. 12 год. 24 год. 36 год. 48 год. 60 год. 72 год. год. 20 20 30 40 60 70 70 80 80 80 80 0* 10 0* 0* 10 0* 0* 10 0* 0* 20 0* 10 30 10*# 20*# 40*° 20*#° 40*# 70 40*# 50* 70 50*# 60*# 80° 60*# 70 80 70 70 80 70 Примітки: 1) * - р0,05 відносно контролю, 2) # - р