Завантажити PDF файл.

Формула / Реферат

Спосіб детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів, що містить гейтування, визначення відносної кількості тромбоцитарно-моноцитарних комплексів методом проточної цитометрії, який відрізняється тим, що відносну кількість тромбоцитарно-моноцитарних комплексів визначають використовуючи імунофенотип клітин.

Текст

Реферат: Спосіб детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів містить гейтування, визначення відносної кількості тромбоцитарно-моноцитарних комплексів методом проточної цитометрії. Відносну кількість тромбоцитарно-моноцитарних комплексів визначають використовуючи імунофенотип клітин. UA 91461 U (12) UA 91461 U UA 91461 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до галузі медицини, а більш конкретно до кардіології та гемостазіології і може переважно бути використана в клінічній лабораторній діагностиці. Відомий спосіб детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів, що містить гейтування, визначення відносної кількості тромбоцитарно-моноцитарних комплексів методом проточної цитометрії. При цьому кількість моноцитів визначають використовуючи морфологічні параметри клітин [1]. Однак відомий спосіб має невисоку ефективність детекції тромбоцитарномоноцитарних комплексів, через те, що не забезпечує необхідної точності підрахунку кількості моноцитів, а відповідно і тромбоцитарно-моноцитаних агрегатів. Задачею цієї корисної моделі є вдосконалення відомого способу детекції тромбоцитарномоноцитарних комплексів шляхом застосування таких операцій, у такій послідовності і із застосуванням таких засобів, які б забезпечили більш ефективну детекцію тромбоцитарномоноцитарних комплексів шляхом більш точного підрахунку кількості моноцитів. Поставлена задача вирішується наступним чином. У відомому способі, що включає гейтування, визначення відносної кількості тромбоцитарно-моноцитарних комплексів методом проточної цитометрії, згідно корисної моделі, відносну кількість тромбоцитарно-моноцитарних комплексів визначають, використовуючи імунофенотип клітин. Більш детально суть корисної моделі пояснюється графічними матеріалами. На Фіг. 1 зображена детекція лейкоцитів серед клітин крові. На Фіг. 2 - детекція моноцитів серед лейкоцитів за прототипом. На Фіг. 3 - детекція тромбоцитарно-моноцитарних комплексів. На Фіг. 4 - детекція моноцитів серед лейкоцитів за даною корисною моделлю. Спосіб реалізують наступним чином. Венозну кров для дослідження беруть вранці натщесерце шляхом венепункції ліктьової вени у вакуумні пробірки з антикоагулянтом - 0,109 М цитрат натрію, співвідношення 1:9. Відносний вміст тромбоцитарно-моноцитарних агрегатів визначають методом проточної цитометрії з використанням флуоресцентно-мічених моноклональних антитіл CD61-FITC, CD14-PE і CD45-ECD (Beckman Coulter, США) на проточному цитометрі Coulter Epics XL-MCL. Цитометричне дослідження проводять в цільній венозній крові, розведеній в 10 разів фосфатним буфером (PBS). Для фарбування флуоресцентно-міченими антитілами 50 мкл розведеної цільної крові інкубують з 10 мкл CD61FITC, CD14-PE і CD45-ECD протягом 15 хвилин при кімнатній температурі. Як негативний контроль використовують відповідні ізотипові контролі. Після інкубації додають 500 мкл фіксуючого розчину (PBS містить 1 % параформальдегіду). Зразки аналізують на проточному цитометрі. Послідовність процедури детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів: 1. Детекція популяції лейкоцитів серед клітин крові за допомогою специфічного маркера CD 45-ECD (регіон А-позитивні події - лейкоцити) (Фіг. 1). 2. Детекція моноцитів серед лейкоцитів (Фіг. 2 за прототипом та Фіг. 4 - за даними корисної моделі). Визначення відносної кількості моноцитів за даними морфологічного аналізу (Фіг. 2). Моноцити детектували за допомогою морфологічних маркерів клітин (розмір і гранулярність). Для цього популяцію лейкоцитів (СD45-позитивні клітини) розділили на три субпопуляції (гранулоцити, моноцити, лімфоцити) шляхом детекції сигналів прямого (FS) і бічного (SS) світлорозсіювання (регіон В - моноцити). Події представлені в регіоні В включають як моноцити, так і моноцитарно-тромбоцитарні комплекси. Після гейтування визначали відносну кількість моноцитів. 3. Визначення відносної кількості моноцитів за даними імунофенотипу клітин (Фіг. 4). Популяцію моноцитів виділяли за допомогою специфічного маркера моноцитів (фенотип + + CD45 CD14 ). Моноцити - регіон G2; 4. Детекція тромбоцитарно-моноцитарних комплексів (Фіг. 3). Гейтування за регіоном що містить моноцити. За даними двоколірного аналізу (CD61-FITC та CD14-PE) детектували моноцитарно-тромбоцитарні комплекси (серед моноцитів). Регіон С2моноцитарно-тромбоцитарні комплекси. В даній корисній моделі пропонується використовувати замість графічного виділення популяції моноцитів Фіг. 2 більш специфічний маркер моноцитів (фенотип CD45+CD14+) Фіг. 4. (регіон G2). А оскільки кількість моноцитарно-тромбоцитарних агрегатів обчислюється виходячи з кількості моноцитів, то за рахунок зниження кількості хибнопозитивних подій при визначенні кількості моноцитів досягається більш точний підрахунок моноцитарно-тромбоцитарних комплексів. Джерела інформації прийняті до уваги: 1. Laura Pearson, Jim Thom, Murray Adams, Robert Oostryck, Rom Krueger, Gerald Yong, Ross Baker (2009). A rapid flow cytometric technique for the detection of platelet-monocyte complexes, 1 UA 91461 U activated platelets and platelet-derived microparticles. International Journal of laboratory hematology, 2009 Aug; 31(4):430-9. ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 Спосіб детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів, що містить гейтування, визначення відносної кількості тромбоцитарно-моноцитарних комплексів методом проточної цитометрії, який відрізняється тим, що відносну кількість тромбоцитарно-моноцитарних комплексів визначають використовуючи імунофенотип клітин. 2 UA 91461 U Комп’ютерна верстка А. Крижанівський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 3

Дивитися

Додаткова інформація

Автори англійською

Gnylorybov Andrii Mykhailovych, Barinov Eduard Fedorovych

Автори російською

Гнилорыбов Андрей Михайлович, Баринов Эдуард Федорович

МПК / Мітки

МПК: G01N 33/49

Мітки: комплексів, детекції, тромбоцитарно-моноцитарних, спосіб

Код посилання

<a href="https://ua.patents.su/5-91461-sposib-detekci-trombocitarno-monocitarnikh-kompleksiv.html" target="_blank" rel="follow" title="База патентів України">Спосіб детекції тромбоцитарно-моноцитарних комплексів</a>

Подібні патенти