Лікувальний засіб з антимікробною та протизапальною дією

1. Лікувальний засіб у формі песаріїв з антимікробною та протизапальною дією з вмістом кліндаміцину та формоутворюючої основи, який відрізняється тим, що додатково містить метронідазол, дексаметазон, обліпихову олію при наступному співвідношенні компонентів (мас. %): кліндаміцину фосфат 3,0-3,6 метронідазол 4,5-5,5 дексаметазон 0,75-0,92 обліпихова олія 6,0-7,3 формоутворююча основа решта. 2. Лікувальний засіб за п. 1, який відрізняється тим, що містить компоненти при наступному співвідношенні (г на один песарій): кліндаміцину фосфат 0,09-0,11 метронідазол 0,135-0,165 дексаметазон 0,0225-0,0275 обліпихова олія 0,18-0,22 формоутворююча основа до 3,2. Винахід належить до фармації, зокрема до лікарських засобів у формі вагінальних супозиторіїв (песаріїв) на основі синтетичної та природної сировини для використання у гінекології, і призначений для лікування вульвовагінальних інфекцій, викликаних бактеріями, трихомонадами, грибкових інфекцій, гарднерельозу, ерозії шийки матки. Частота захворювань пацієнтів, які страждають генітальною інфекцією або мають порушення у репродуктивній системі, обумовлені запальними захворюваннями органів малого тазу, неухильно зростає. При цьому відмічається змішаність інфекційних уражень статевих шляхів, хронічний перебіг захворювань, збільшення частоти появи резистентних до антибіотиків штамів мікроорганізмів, недостатня ефективність терапії. Перспективним є створення комбінованих лікарських препаратів, які поєднують ефективність синтетичних засобів з безпечністю рослинних за собів, дозволяючи знизити кількісний вміст у препараті та шкідливу побічну дію компонентів синтетичного походження. Відомий комбінований лікарський засіб синтетичного походження у формі вагінальних супозиторіїв - Макмірор комплекс [Компендиум. Лекарственные препараты 2008. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2008, Т.1, С. Л.-833]. Це комбінований препарат для місцевого застосування у гінекології, дія якого обумовлена ефектами компонентів, які входять до його складу: ніфурателу і ністатину. Ніфурател -хіміотерапевтичний засіб, який являє собою нітрофуранове похідне, яке має виражену антитрихомонадну, антибактеріальну і протигрибкову дію. Ністатин - загальновідомий фунгіцидний (протигрибковий) антибіотик з групи полієнів. Препарат застосовується у терапії вульвовагінальних інфекцій, викликаних чуттєвими до препарату збудниками: бактеріями, трихомона UA (11) 95021 (13) (21) a201003376 (22) 23.03.2010 (24) 25.06.2011 (46) 25.06.2011, Бюл.№ 12, 2011 р. (72) ЯРНИХ ТЕТЯНА ГРИГОРІВНА, ЛЕВАЧКОВА ЮЛІЯ ВАЛЕНТИНІВНА, МАЛОШТАН ЛЮДМИЛА МИКОЛАЇВНА, СТЕПАНОВА КАТЕРИНА ОЛЕКСАНДРІВНА (73) НАЦІОНАЛЬНИЙ ФАРМАЦЕВТИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ (56) RU C1 2329790, 27.07.2008. RU C2 2409368, 10.06.2011. RU C1 2327486, 27.06.2008. RU C1 2314792, 20.01.2008. RU C1 2205011, 27.05.2003. UA C2 87051, 10.06.2009. Компендиум. Лекарственные препараты 2009. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2008, Т. 1, С. Л. - 823-824, 899-900. Компендиум. Лекарственные препараты 2004. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2004, С. Л. - 922 - Л. – 923, C. 180-181, 65-66. C2 2 (19) 1 3 дами, грибами рода Candida, хламідіями. Препарат протипоказаний пацієнтам з підвищеною чутливістю до ністатину й ніфурателу. Побічна дія: можливі алергічні реакції у вигляді шкірного висипу, зуду або болісних відчуттів при застосуванні. Препарат не має вираженої протизапальної дії. Відомий однокомпонентний засіб синтетичного походження - супозиторії вагінальні «Гравагін» [Компендиум. Лекарственные препараты 2004. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2004, С. Л.-922 - Л.-923]. Супозиторна основа - твердий жир. Метронідазол проявляє протимікробну та антипротозойну дію. Супозиторії «Гравагін» призначають при гострому і хронічному трихомоніазі, бактеріальному вагінозі, гарднерельозі, лямбліозі та амебіазі у жінок. Метронідазол викликає негативні побічні ефекти, особливо при пероральному та парентеральному застосуванні: анорексію, нудоту, шкірний свербіж, головний біль, кропивницю і, навіть, може викликати розвиток мікозів вульви. До недоліків "Гравагіну" можна віднести обмеженість фармакологічної дії внаслідок однокомпонентності засобу та відсутність протизапальної активності. Відомий також однокомпонентний засіб рослинного походження - Супозиторії з обліпиховою олією [Компендиум. Лекарственные препараты 2004. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2004, С. Л.-923 - С.-180 - С.-181]. Засіб стимулює репаративні процеси, прискорює загоювання ран, має певну антибактеріальну (бактеріостатичну) дію. У гінекології супозиторії з обліпиховою олією призначають при кольпіті, ендоцервіциті, ерозії шийки матки. Зазначений засіб не має вираженої побічної дії за винятком можливих алергічних реакцій внаслідок індивідуальної переносимості, проте, недоліком супозиторіїв з обліпиховою олією можна вважати обмежену спрямованість фармакологічної дії внаслідок однокомпонентності засобу та недостатню протизапальну активність. За прототип вибрані вагінальні супозиторії «Мілагін» [Компендиум. Лекарственные препараты 2008. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2008, Т. 1, С. Л.-909 - Л.-910], які містять 0,100 г кліндаміцину та ліпофільну супозиторну основу. Кліндаміцин - це напівсинтетичний антибіотик групи лінкозамідів, цю групу ще називають групою лінкоміцину. Він має достатньо вузький спектр антимікробної активності. Активний по відношенню до грампозитивних коків (переважно як препарат другого ряду, тобто, якщо інші антибіотики не можуть з якоїсь причини застосовуватись) і неспороутворюючої анаеробної мікрофлори. Кліндаміцин призупиняє внутрішньоклітинний біосинтез білка бактерій, спричиняючи, таким чином, бактеріостатичну дію. У високих концентраціях по відношенню до високочутливих мікроорганізмів він може виявляти бактерицидний ефект. Супозиторії мають антимікробну дію і призначаються при лікуванні бактеріального вагінозу, обумовленого чутливими до кліндаміцину мікроорганізмами. Протипоказаннями до застосування препарату є чутливість до 95021 4 антибактеріальних препаратів групи лінкозамідів (кліндаміцину і лінкоміцину). Недоліки супозиторіїв «Мілагін» обумовлені, як і у попередніх випадках, однокомпонентністю засобу, що звужує спектр його фармакологічної дії. Засіб також не має вираженої протизапальної дії. Задача винаходу полягає у створенні нового засобу у формі песаріїв з переважно антимікробною та протизапальною дією для лікування інфекційно-запальних гінекологічних захворювань, який завдяки поєднанню в одній лікарській формі компонентів синтетичного (кліндаміцину, метронідазолу, дексаметазону) і рослинного походження (обліпихова олія) дозволяє отримати широкий спектр фармакологічної дії препарату. Поставлена задача вирішується таким чином, що лікувальний засіб у формі песаріїв з антимікробною та протизапальною дією з вмістом кліндаміцину та формоутворюючої основи згідно з винаходом додатково містить метронідазол, дексаметазон, обліпихову олію при наступному співвідношенні компонентів (мас. %): кліндаміцину фосфат 3,0-3,6 метронідазол 4,5-5,5 дексаметазон 0,75-0,92 обліпихова олія 6,0-7,3 Формоутворююча основа решта. У відповідності з винаходом один песарій містить компоненти у кількісному співвідношенні (г): кліндаміцину фосфат 0,09-0,11 метронідазол 0,135-0,165 дексаметазон 0,0225-0,0275 обліпихова олія 0,18-0,22 Формоутворююча основа до 3,2. Дослідним шляхом доведено, що новий засіб має виражену антимікробну та протизапальну дію. Введення до складу заявленого засобу метронідазолу та обліпихової олії обумовлене їх позитивними властивостями, викладеними вище. Додатково як діючу речовину вибрано дексаметазон [Компендиум. Лекарственные препараты 2004. Под ред. В.Н. Коваленко, А.П. Викторова. К.: Морион, 2004, С. С.-65 - С - 66], який є синтетичним фторованим глюкокортикостероїдом з вираженою протизапальною, протиалергічною та імуносупресивною дією, проте засіб не проявляє антимікробної дії. Дексаметазон має досить великий перелік побічних ефектів, тому введений до складу заявленого засобу у мінімальних дозах. При цьому спостерігається наступний неочевидний ефект: при поєднанні чотирьох активних діючих компонентів, троє з яких (кліндаміцин, метронідазол, обліпихова олія) не мають вираженої протизапальної дії, а один (дексаметазон) з протизапальною дією взятий у мінімальній кількості, одержаний комбінований засіб проявляє ефективну протизапальну дію. Такий стан речей можна пояснити неочевидною взаємною потенціюючою дією зазначених компонентів нового засобу. При цьому введення до складу обліпихової олії дозволяє зменшити вміст компонентів з негативною побічною дією (метронідазол, дексаметазон) у порівнянні з відповідними однокомпонентними засобами при збереженні високого рівня фарма 5 кологічної активності заявленого засобу і зниженні його токсичності. Кількісний вміст кліндаміцину, метронідазолу та дексаметазону і обліпихової олії як діючих речовин заявленого засобу визначений експериментальним шляхом і дорівнює по 0,09-0,11, 0,1350,165, 0,0225-0,0275, 0,18-0,22 відповідно на один песарій. При зменшенні кількості діючих речовин від 0,135 г, 0,0225, 0,18 та 0,09 г спостерігається зниження терапевтичної дії засобу. Збільшення вмісту діючих речовин понад 0,165 г, 0,0275, 0,22 і 0,11 г не призводить до суттєвого зростання терапевтичної дії, може викликати зростання небажаної побічної дії і є економічно недоцільним. Найбільш бажаний вміст речовин заявленого засобу дорівнює 0,100 г кліндаміцину, 0,150 г метронідазолу, 0,025 г дексаметазону та 0,200 г обліпихової олії на один песарій. Експериментальним шляхом визначено неочевидний синергізм між діючими речовинами кліндаміцину, метронідазолу, дексаметазону та обліпиховою олією, що дозволило підвищити антимікробну та протизапальну дію препарату у порівнянні з прототипом. Як супозиторна основа може бути використана будь-яка фармацевтично та технологічно прийнятна основа. Проведені авторами дослідження дозволили визначити як найбільш оптимальну основу з вмістом наступних компонентів: поліетиленоксид-400, поліетиленоксид-1500, твін80. Такий склад супозиторної основи забезпечує ефективну терапевтичну дію засобу, сприяє вивільненню і проникненню у тканини активних діючих речовин, дозволяє одержати супозиторії з високими терапевтичними та фізико-хімічними властивостями. До складу заявленого лікарського засобу входять відомі компоненти, проте їх сполучення та кількісний вміст є новим, невідомим з інформаційних джерел, і забезпечує виникнення неочевидного ефекту взаємного потенціювання дії активних речовин засобу. Заявлений засіб одержують наступним чином: відважують супозиторну основу (ПЕО-1500:ПЕО400), розплавляють при температурі 50-55 °C на водяній бані. Задану кількість метронідазолу розтирають у ступці, відсипають на капсулу, залишивши кількість рівну кількості дексаметазону, додають дексаметазон, розтирають і перемішують, потім додають кліндаміцин, решту метронідазолу, розтирають і перемішують. Потім додають обліпихову олію та твін-80, перемішують; одержану масу вводять до розтопленої напівохолодженої супозиторної основи. Потім одержану однорідну супозиторну масу розливають у контурну упаковку з полівінілхлоридної плівки. Одержують песарії світло-жовтого кольору, середньою масою близько 3,2 г. У розрізі песаріїв допускається повітряний стрижень. Винахід ілюструється прикладами. Приклад 1. Розрахункова маса компонентів заявленого засобу без урахування технологічних втрат склала 95021 6 100 г кліндаміцину, 150 г метронідазолу, 25 г дексаметазону, 200 г обліпихової олії, 253 г ПЕО-400, 195 г твіну-80, 2277 г ПЕО-1500. Для виготовлення песаріїв були відважені зазначені інгредієнти зі збільшенням маси на відсоток технологічних втрат. Відважують супозиторну основу (ПЕО-1500 ПЕО-400), розплавляють при температурі 50-55 °C на водяній бані. Задану кількість метронідазолу розтирають у ступці, відсипають на капсулу, залишивши кількість, рівну кількості дексаметазону, додають дексаметазон, розтирають і перемішують, потім додають кліндаміцин, решту метронідазолу, розтирають і перемішують. Потім додають обліпихову олію та твін-80, перемішують; одержану масу вводять до розтопленої напівохолодженої супозиторної основи ПЕО-1500 - ПЕО-400. Однорідну супозиторну масу розлили у контурну упаковку з полівінілхлоридної плівки. Отримали 1000 песаріїв масою 3,2 г зі складом компонентів на 1 песарій, г: кліндаміцину фосфат 0,100 метронідазол 0,150 дексаметазон 0,025 обліпихова олія 0,200 твін-80 0,195 ПЕО-400 0,253 ПЕО-1500 2,278. Зазначений склад заявленого засобу у формі песаріїв є оптимальним за фармакологічними та технологічними властивостями. Приклад 2. Дослідження протизапальної активності заявленого засобу проводили на моделі гострого ексудативного запалення, викликаного субплантарним введенням класичного флогогену - карагеніну. Досліди проводили на білих безпородних щурах масою 200-210 г. До моделювання гострого карагенінового запалення тварин ділили на три групи: перша - контрольна група, друга - група тварин, яким за годину до початку експерименту вводили заявлений засіб у формі супозиторіїв, і третя група - тварини, яким за годину до експерименту вводили препарат порівняння - мілагін. Дози досліджуваних препаратів перераховані для щурів за відомою методикою Риболовлева. Карагеніновий набряк викликали субплантарною ін'єкцією 0,1 мл 1 % розчину флогогену під апоневроз задньої лапки щура. Через 1, 2 і 3 години вимірювали об'єм здорової та ураженої лапки за допомогою механічного онкометра. Величину набряку обчислювали за різницею між об'ємами незапаленої та запаленої кінцівок. Протизапальну активність визначали за ступенем зменшення набряку (антиексудативним ефектом) у дослідних тварин порівняно з контрольними і виражали у відсотках. де ПА - протизапальна активність, %; Vк - об'єм лапи у контролі (у.о.); Vo - об'єм лапи у дослідній групі (у.о.). Отримані результати наведені у таблиці 1: 7 95021 8 Таблиця 1 Протизапальна активність заявленого засобу у порівнянні з мілагіном Група Контроль Песарії, заявлений засіб Песарії, мілагін Через 1 годину 13,8±1,3 10,6±0,55* 13,0±1,58 ПА, % 23,2 5,8 Через 2 години 28,0±2,28 13,6±1,14* 24,8±0,84 ПА, % 51,4 11,4 Через 3 години 33,2±2,59 15,8±0,83* 26,6±2,7* ПА, % 52,4 19,9 Примітка: * - достовірно у порівнянні з контролем Заявлений засіб у формі песаріїв на моделі карагенінового набряку проявив виражений протизапальний ефект. Ступінь вираженості дії засобу на набряк зростає в ході всього експерименту і максимальний ефект 52,4 % спостерігався на третю годину (максимальний час розвитку карагенінового набряку). Досліджуваний засіб за ступенем вираженості протизапальної активності перевершував препарат порівняння «Мілагін» через 1, 2 і 3 години після початку експерименту у 3, 4 і 2 рази відповідно (таблиця 1). Отримані дані свідчать про виражений протизапальний ефект заявленого засобу у формі песаріїв і представляють інтерес для подальших фармакологічних досліджень перспективного протизапального препарату. Приклад 3. Було досліджено антимікробну активність заявленого засобу. У відповідності до рекомендацій ВООЗ з оцінки антимікробної активності препаратів використовували тест-штами Staphylococcus aureus АТСС 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 885/653. З анаеробних мікроорганізмів використовували Peptococcus niger 1, Peptostreptococcus anaerobius 20, Bacteroides fragilis ATCC 13/83, Prevotella melaninogenica 97. Мікробна наважка склала 10 мікробних клітин на 1 мл середовища і визначалась за стандартом каламутності за МакФарлендом. Дифузію препарату в агар проводили за методом «колодязів». Визначення антимікробної активності препаратів проводили на двох шарах щільного живильного середовища, розлитого у чашки Петрі. У нижньому шарі використовували «голодні», не засіяні середовища (агар-агар, вода тощо). Об'єм середовища для верхнього шару змінювався від 14 до 16 мл. Чашки підсушували 30-40 хв. при кімнатній температурі й ставили у термостат на 18-24 години. При оцінці нових антимікробних речовин, а також при вивченні антибіотикорезистентних штамів звичайно застосовують наступні критерії: зони затримки росту мікроорганізмів до 10 мм свідчать про нечутливість мікроорганізму до внесеного у лунку препарату; зони затримки росту діаметром 10-15 мм вказують на низьку чутливість культури мікроорганізмів до випробовуваної концентрації антимікробної речовини; зони затримки росту діаметром 15-25 мм розцінюються як показник чутливості мікроорганізму до випробовуваного засобу. Статистичну обробку результатів проводили згідно вимог Державної фармакопеї України. Результати вивчення антимікробної активності заявленого засобу та препарату порівняння мілагін наведено у табл. 2. Таблиця 2 Мікроорганізми Staphylococcus aureus ATCC 25923 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Escherichia coli ATCC 25922 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Proteus vulgaris ATCC 4636 Streptococcus pyogenes 2432 Candida albicans ATCC 885/653 Антимікробні властивості досліджуваних засобів Діаметри зон затримки росту препаратів, в мм M±m, р