Вакцина

Реферат: Винахід належить до комплекту, що містить принаймні 9 сахаридних кон’югатів, де 2-7 з них включно є кон’югованими з транспортним білком СRM, де вказаний комплект є придатним для застосування у календарі первісного щеплення. Винахід також належить до комбінаційної вакцини, придатної для первісної імунізації, способу імунізації проти хвороб, викликаних UA 99283 C2 (12) UA 99283 C2 Bordetella pertussis, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, вірусом гепатиту В, Haemophilus influenzae типу b, Streptococcus pneumonia та Neisseria meningitidis, із застосуванням комплекту або комбінації вакцин згідно з винаходом. UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Заявлений винахід стосується вакцин та зокрема календарів первісного щеплення, та комплектів для виконання подібних режимів вакцинації. Збільшення числа вакцин, рекомендованих для застосування у звичайних режимах вакцинації дітей, робить застосування комбінаційних вакцин істотним для мінімізування дискомфорту та підтримування високого комплаєнсу. Інкорпорування нещодавно уведених вакцин повинне бути сильно полегшеним, якщо їх можна застосовувати у комбінації з сучасними вакцинами. Однак, комбінація вакцин несе ризик інтерферування антигенів з імунною реакцією на інші антигени вакцини, та подібне співзастосування різних вакцин несе подібний ризик. ВОЗ останнім часом затвердила у Wееklу еріdеmіоlоgісаl rесоrd (№ 12, 23 Маrсh, 2007), що вакцини "не можуть значно інтерферувати з імунною реакцією на інші вакцини, дані одночасно". Тому, в усьому світі визнають важливість моніторингу імунних реакцій у цих ситуаціях та мінімізування ризику імунної інтерференції. СRМ-197 є загальнопоширеним носієм для сахаридних антигенів, та є вже застосованим у календарях первісного щеплення у ліцензованих вакцинах, охоплюючи, наприклад, Рrеvnаr® та Меnіngіtес®. Однак, заявник виявив, що СRМ може мати негативний вплив на імунну реакцію на деякі антигени, котрі є названими тут як чутливі антигени. Заявник також виявив інші нещодавно оцінені шляхи, котрими імунна інтерференція може відбуватися з чутливим антигеном, та способи, котрими це можна зменшувати. Імунізування проти коклюшу, уведене у 1940-их є дуже успішним у зменшенні захворюваності та смертності внаслідок цієї хвороби у малюків та дітей. У країнах із високим охопленням імунізування проти коклюшу у дітей, цей успіх призвів останніми десятиріччями до зміни в епідеміології хвороби для старших вікових груп та для дуже юних дітей, хто має вищий ризик суворих ускладнень. Календарі щеплення, що починаються на 6-8 тижні віку залишають вікно кількох місяців, де неімунізована або частково імунізована дитина може бути уразливою до коклюшу від близьких контактів. Дуже раннє імунізування новонароджених проти коклюшу може бути шляхом для захисту дуже юних дітей, зменшенням періоду, у, котрий вони є уразливими до хвороби. Внаслідок часткової незрілості імунної системи при народженні, імунізування новонародженого загалом не призводить до швидких реакцій антитіл, але може призводити до ефективного імунологічного примування, котре може діяти як основа для майбутніх реакцій (Sіеgrіst СА. Nеоnаtаl аnd еаrlу lіfе vассіnоlоgу. Vассіnе 2001, 19: 3331-3346). Цей підхід досліджували у 60-х, застосовуючи вакцину DТРw, доступну у цей час, що призводило до тимчасового "імунного паралічу", зі зменшеними імунними реакціями у порівнянні з класичним пізнішим календарем щеплення (Рrоvеnzаnо W, Wеttеrlоw LН, Sullіvаn СL. Іmmunіzаtіоn аnd аntіbоdу rеsроnsе іn thе nеwbоrn іnfаnt. 1 - Реrtussіs іnосulаtіоn wіthіn twеntу-fоur hоurs оf bіrth. 1965 NЕJМ; Vоl. 273 Nо. 17: 959-965). Реалістичність підходу, застосовуючи ацелюлярну комбінацію вакцини від коклюшу DТРа було пізніше продемонстровано у доклінічному дослідженні Sіеgrіst аnd grоuр (Rоduіt С, Воzzоttі Р, Міеlсаrеk N, еt аl. Іmmunоgеnісіtу аnd рrоtесtіvе еffісасу оf nеоnаtаl vассіnаtіоn аgаіnst Воrdсtеllа реrtussіs іn а murіnе mоdеl: еvіdеnсе fоr еаrlу соntrоl оf реrtussіs. Іnfесt Іmmun 2002 М;70(7):3521-8). Заявники розробили клінічне дослідження для оцінки реалістичності дози вакцини Ра при народженні для прискорення розвинення реакцій антитіл проти коклюшу. Досліджували вплив реакції антитіл на календар первинного щеплення. Заявник виявив, що надмірне застосування СRМ або інших сильних антигенів (дивись нижченаведені визначення), як наприклад, кон'югований з сахаридом носій, може призводити до імунних реакцій на чутливі антигени, що є зменшеними; несподівано, навіть якщо СRМ не є кон'югованим з чутливим антигеном та навіть якщо чутливий антиген та СRМ не є в одному контейнері, але їх співзастосовують або застосовують почергово протягом первинної вакцинації. Відповідно, в одному втіленні винаходу, запропоновано комплект вакцин, що містить принаймні 9 сахаридних кон'югатів, де 2-7 сахаридних кон'югатів включно є кон'югованими з транспортними білками СRМ, вказаний комплект є придатним для застосування у календарі первинного щеплення, вказаний комплект містить: перший контейнер, що містить a) сахаридний кон'югат Ніb у присутності СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ, але котре не є кон'югованим з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ; b) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, кон'югований з СRМ; та c) як варіант, принаймні один інший сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ, та другий контейнер, що містить 1 UA 99283 C2 5 10 15 20 d) принаймні один сахаридний кон'югат, кон'югований з СRМ; e) як варіант, принаймні один інший сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ, та як варіант, третій контейнер, що, як варіант, містить принаймні один сахаридний кон'югат, де f) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат є кон'югованим з СRМ; g) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат не є кон'югованим з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ. Якщо конкретно не визначено вище, 9 або більше сахаридів можуть бути розподіленими будь-яким чином поміж контейнерів винаходу. Тому, де Ніb (чутливий антиген) є у вакцині у першому контейнері винаходу у присутності похідного DТ (наприклад, вільного DТ у DТР вакцин), він може бути співзастосовуваним з до 7 кон'югатами, що є на СRМ (наприклад, Рrеvnаr® у другому контейнері). Однак, якщо дев'ятий або наступний сахаридний кон'югат додають у схемі первинної вакцинації (наприклад, сахарид Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs як-то МеnС) у першому, другому або третьому контейнері, тоді це повинне бути кон'югованим з транспортними білками, іншими, ніж СRМ. Таким чином, коли СRМ не є присутнім в одному контейнері як Ніb-чутливий антиген, джерелом DТ у першому контейнері може бути вакцина DТР. Нижченаведена таблиця дає приклади вакцин, котрі можна співзастосовувати, застосовуючи комплекти винаходу як ілюстровано у вищенаведеному втіленні. перший контейнер Іnfаnrіх® hеха Іnfаnrіх® hеха/МеnС(Y)-ТТ Іnfаnrіх®-НВ-ІРV/Ніb-МеnС(Y)-ТТ 25 30 35 40 45 50 55 другий контейнер Рrеvnаr® Рrеvnаr® Рrеvnаr® третій контейнер МеnС(Y)-ТТ / / Середня доза СRМ на сахаридний кон'югат, як варіант, не повинна перевищувати припустимої. Тому в одному втіленні винаходу, комплект, який описано вище, містить середню дозу СRМ на СRМ-кон'югований сахаридний кон'югат 1-15 мкг, 1-10 мкг, 1-5 мкг або 1-3 мкг. У наступному втіленні винаходу, комплект, який описано вище, містить загальне завантаження СRМ менше, ніж 35 мкг, наприклад, 2-30 мкг, 5-25 мкг або 10-20 мкг. Звідси, у комплектах винаходу, 3 з 9 (або більше) сахаридів можуть бути кон'югованими з СRМ. З цих 3, один може мати 2 мкг СRМ, один може мати 4 мкг СRМ та один може мати 6 мкг СRМ. У цьому сценарії середнє завантаження СRМ у комплекті є 12 мкг/3=4 мкг. Так само, НВ-поверхневий антиген (НВ), як виявлено, є чутливим антигеном, наприклад, до СRМ, та заявник виявив обмеження застосування СRМ, наприклад, як носія, до сахариду, зверх котрого імунна реакція на чутливий антиген є зменшеною. Відповідно у наступному втіленні винаходу запропоновано комплект вакцин, що містить принаймні 7 сахаридних кон'югатів, де 2-6 сахаридних кон'югатів включно є кон'югованими з транспортними білками СRМ, вказаний комплект є придатним для застосування у календарі первинного щеплення, вказаний комплект містить: перший контейнер, що містить a) НВ у присутності СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ, як варіант, адсорбованого на алюміній фосфат; b) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, кон'югований з СRМ; та c) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ, та другий контейнер, що містить d) принаймні один сахаридний кон'югат, кон'югований з СRМ; e) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ, та як варіант, третій контейнер, що, як варіант, містить принаймні один сахаридний кон'югат де f) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат є кон'югованим з СRМ; як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат не є кон'югованим з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ. Тому, НВ може бути присутньою у першому контейнері у контексті вакцини DТР, як-то Іnfаnrіх® hеха, 7-валентна стрептококова вакцина, де не більше, ніж 6 сахаридів є кон'югованими з СRМ, може бути присутньою у другому контейнері, а МеnС-ТТ може бути присутньою у третій контейнер. 2 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 Середня доза СRМ на сахаридний кон'югат, як варіант, не повинна перевищувати припустимої. Тому в одному втіленні винаходу, комплект, який описано вище, містить середню дозу СRМ на СRМ-кон'югований сахаридний кон'югат 1-9 мкг, 1-6 мкг, 1-5 мкг або 1-3 мкг. У наступному втіленні винаходу, комплект, який описано вище, містить загальне завантаження СRМ менше, ніж 20 мкг, наприклад, 2-18 мкг або 5-15 мкг. Крім того, заявник пропонує шлях, у котрому більше, ніж 7/8 сахаридів відносно НВ/Ніbчутливих антигенів можуть бути кон'югованими з СRМ та застосовуваними з чутливим антигеном, а саме створенням надійного чутливого антигену не є в одному контейнері як СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ-вмісної вакцини, Таким чином, у наступному втіленні винаходу запропоновано комплект вакцин, що містить принаймні 8 сахаридних кон'югатів, кон'югованих з транспортними білками СRМ, придатний для застосування у календарі первинного щеплення, вказаний комплект містить: перший контейнер, що містить a) чутливий антиген не у присутності СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ; та b) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ, та другий контейнер, що містить c) принаймні 7, 8, 10, 11, 13, 14 або 15 сахаридних кон'югатів, кон'югованих з СRМ; d) як варіант, принаймні один інший сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ, та як варіант, третій контейнер, що, як варіант, містить принаймні один сахаридний кон'югат, де e) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат є кон'югованим з СRМ; як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат не є кон'югованим з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ. Цей комплект має вакцину у першому контейнері, котра не є у присутності похідного DТ, наприклад, не у присутності вакцини DТР або СRМ-кон'югованого сахариду, вона повинна тому не бути схильною до СRМ-пов'язаного неспецифічної інтерференції та її можна співзастосовувати з 8 або більше кон'югатами, кон'югованими з СRМ, як-то, 13-валентний пневмококовий сахаридний кон'югат, кон'югований з СRМ, у другому контейнері або Рrеvnаr® + МеnС-СRМ у другому/третьому контейнері. Нижченаведена таблиця дає приклади вакцин, котрі можна співзастосовувати, застосовуючи комплекти винаходу як ілюстровано у вищенаведеному втіленні. Перший контейнер Ніb або НВ Ніb або НВ Ніb або НВ Ніb або НВ Ніb або НВ+МеnС-ТТ Ніb або НВ+МеnС-ТТ Ніb або НВ Ніb або НВ Ніb або НВ 35 40 Другий контейнер Рrеvnаr® (або 9, 10, 11, 13 більше сахаридів на СRМ) Рrеvnаr®+МеnС-СRМ Рrеvnаr®+DТР Рrеvnаr®+МеnС-СRМ + DТР Рrеvnаr® (або 9, 10, 11, 13 більше сахаридів на СRМ) Рrеvnаr®+DТР Рrеvnаr® (або 9, 10, 11, 13 більше сахаридів СRМ)+МеnС-ТТ Рrеvnаr®+DТР Рrеvnаr® (або 9, 10, 11, 13 більше сахаридів СRМ)+МеnС-ТТ+DТР Третій контейнер або DТР DТР МеnС-СRМ / або DТР / або на DТР МеnС-ТТ або на / Крім того, заявник пропонує шлях поліпшення зменшення імунної реакції на чутливий антиген мінімізуванням числа сахаридів, що є кон'югованими з СRМ. Таким чином, у наступному втіленні винаходу запропоновано комплект вакцин, що містить 7 або більше сахаридних кон'югатів, де менше, ніж 7 (наприклад, 6, 5, 4, 3, 2, 1 або 0) сахаридних кон'югатів є кон'югованими з транспортними білками СRМ, вказаний комплект є придатним для застосування у календарі первинного щеплення, вказаний комплект містить: перший контейнер, що містить a) Ніb-сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ; b) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ, 3 UA 99283 C2 5 10 та другий контейнер, що містить як варіант, принаймні 7 сахаридних кон'югатів, де с) менше, ніж 7 (наприклад, 6, 5, 4, 3, 2, 1 або 0) сахаридів, кон'югованих з СRМ, та як варіант, третій контейнер, що містить d) як варіант, принаймні один сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будьяким іншим похідним DТ. Подібний комплект міг би містити Тnfаnrіх® hеха у першому контейнері, Sуnflоrіх© у другому контейнері та вакцину з кон'югатом менінгококового капсульного сахариду у третій контейнер. Нижченаведена таблиця дає приклади вакцин, де жодних антигенів нема на СRМ, котрі можна співзастосовувати, застосовуючи комплекти винаходу як ілюстровано у вищенаведеному втіленні. DТР-Ніb-вмісна вакцина, як-то Іnfаnrіх® hеха Ніb Ніb Ніb Ніb Ніb+МеnС-ТТ НіbМеnС(Y)(АW)-ТТ DТРаНВІРVНіbМеnС(Y)(АW) Sуnflоrіх® Sуnflоrіх®+МеnС-ТТ DТР+Sуnflоrіх® Sуnflоrіх® DТР+Sуnflоrіх®+ МеnС-ТТ Sуnflоrіх® Sуnflоrіх® Sуnflоrіх® Меn(АW)С(Y)-ТТ DТР МеnС-ТТ DТР+МеnС-ТТ / DТР DТРаНВТРV / Нижченаведена таблиця вказує, які вакцини слід та не можна співзастосовувати згідно з втіленнями винаходу: 15 Календарі первинного щеплення Можливий вплив на імунний титр Нехаvас® + Рrеvnаr® Іnfаnrіх® hеха + Рrеvnаr®Реdіасеl® + Рrеvnаr® НВ↓ РS6В↓ РS6В↑ НВ ОК РS6В↓ Іnfаnrіх® hеха + МеnС-СRМ Іnfаnrіх® реntа + МеnС-СRМ Реdіасеl® + МеnС-СRМ Іnfаnrіх®-Ніb + МеnС-СRМ ОК ОК ОК Ніb↓ Нехаvас® + МеnС-ТТ Іnfаnrіх® hеха + МеnС-ТТ Реdіасеl® + МеnС-ТТ Ніb↑ Ніb↑ Ніb↑ Реdіасеl® + Рrеvnаr® + МеnС-СRМ Ніb↓ DТРа + НіbМеnС(Y)-ТТ ОК DТРа(НВ)ІРVНіb+Sуnflоrіх® Іnfаnrіх®-НВ-ІРV/Ніb-МеnС(Y)-ТТ + Sуnflоrіх®* Іnfаnrіх®-НВ-ІРV/Ніb-МеnС(Y)-ТТ + Рrеvnаr®* Ніb↑ ОК Ніb↓ DТРа(НВІРV)Ніb+13v Рrеvnаr Ніb↓ Ра при народженні, тоді Іnfаnrіх® hеха Ніb↓НВ↓ (дивись приклад 3) *Припущення тут, однак, потребують тестування. ↑ та ↓ означають, що реакція на доречний антиген є збільшеною або зменшеною порівняно з тим, що DТР-вмісну вакцину (наприклад, Іnfаnrіх® hеха) застосовують без будь-яких інших додаткових вакцин (тобто, не співзастосовують). У наступному втіленні заявленого винаходу запропоновано комбінацію вакцин, придатну для первинної вакцинації, що містить 9 або більше сахаридних кон'югатів; 4 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 a) де сахаридний кон'югат Ніb є присутнім, але не є кон'югованим з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ; b) де 2-7 сахаридних кон'югатів включно є кон'югованими з СRМ; c) де один або більше інших сахаридних кон'югатів не є кон'югованим з СRМ. Середня доза СRМ на сахаридний кон'югат, як варіант, не повинна перевищувати припустимої. Тому в одному втіленні винаходу, комбінація вакцин, яку описано вище, містить середню дозу СRМ на СRМ-кон'югований сахаридний кон'югат 1-15 мкг, 1-10 мкг, 1-5 мкг або 1-3 мкг. У наступному втіленні винаходу, комбінація, яку описано вище, містить загальне завантаження СRМ менше, ніж 35 мкг, наприклад, 2-30 мкг, 5-25 мкг або 10-20 мкг. У наступному втіленні заявленого винаходу запропоновано комбінацію вакцин, придатну для первинної вакцинації, що містить 7 або більше сахаридів; a) де НВ є присутнім; b) де 2-6 сахаридних кон'югатів включно є кон'югованими з СRМ; c) де один або більше інших сахаридних кон'югатів не є кон'югованими з СRМ. Середня доза СRМ на сахаридний кон'югат, як варіант, не повинна перевищувати припустимої. Тому в одному втіленні винаходу, комбінація вакцин, яку описано вище, містить середню дозу СRМ на СRМ-кон'югований сахаридний кон'югат 1-9 мкг, 1-6 мкг, 1-5 мкг або 1-3 мкг. У наступному втіленні винаходу, комбінація, яку описано вище, містить загальне завантаження СRМ менше, ніж 20 мкг, наприклад, 2-18 мкг або 5-15 мкг. ІРV можна застосовувати разом з чутливим антигеном у комплектах або комбінаційних вакцинах винаходу, оскільки він має позитивний вплив на імунну реакцію на чутливий антиген (тобто, діє як імуномодулятор - дивись визначення). Для подібної позитивної дії є важливим, що ІРV вакцина є в одному контейнері з чутливим антигеном. Рw може діяти так само, як імуномодулятор. Тому, в одному втіленні, запропоновано комплект або комбінацію вакцин винаходу, де контейнер з чутливим антигеном крім того містить ІРV. У наступному втіленні, запропоновано комплект або комбінацію вакцин винаходу, де контейнер з чутливим антигеном крім того містить Рw. У ще одному втіленні запропоновано спосіб застосування комплектів або комбінаційних вакцин винаходу. В одному втіленні заявленого винаходу запропоновано спосіб зменшення неспецифічної інтерференції СRМ у чутливий антиген у календарі первинного щеплення вакцини, що має один або більше з нижченаведених етапів а) зменшення кількості СRМ та/або числа кон'югатів на СRМ у вакцині (наприклад, до 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 або 0); b) у тому числі ІРV у вакцині, що містить чутливий антиген; с) у тому числі Рw у вакцині, що містить чутливий антиген; d) зменшення дози DТ у вакцині, що містить чутливий антиген; е) збільшення дози чутливого антигену; f) якщо Ра є присутнім у вакцині, що містить чутливий антиген, зменшення дози Ра або числа Ра-компонентів; g) видалення СRМ з вакцини, що містить чутливий антиген, або видалення СRМ з комплекту повністю, або видалення СRМ, DТ та похідних DТ з вакцини, що містить чутливий антиген. У наступному втіленні заявленого винаходу запропоновано спосіб зменшення неспецифічної інтерференції з чутливим антигеном при застосуванні комплекту, що містить 8 або більше сахаридних кон'югатів, кон'югованих з СRМ, який містить перший контейнер, що містить а) чутливий антиген у присутності СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ; та другий контейнер, що містить b) 7 або більше сахаридних кон'югатів, кон'югованих з СRМ; c) як варіант, принаймні один інший сахаридний кон'югат, не кон'югований з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ; та як варіант, третій контейнер, що, як варіант, містить принаймні один сахаридний кон'югат, котрий є d) як варіант, кон'югованим з СRМ; e) як варіант, не кон'югованим з СRМ, і має етап видалення усіх СRМ, DТ або будь-якого іншого похідного DТ з контейнеру, що містить чутливий антиген, або зменшення числа сахаридних кон'югатів, кон'югованих з СRМ до не більше, ніж 7 (наприклад, 6, 5, 4, 3, 2, 1 або 0). 5 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 У наступному втіленні заявленого винаходу запропоновано спосіб вакцинації проти хвороб, викликаних Воrdеtеllа реrtussіs, Сlоstrіdіum tеtаnіа Соrуnеbасtеrіum dірhthеrіае, вірус гепатиту В, Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b, Strерtососсus рnеumоnіа та Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs, застосовуючи комплект або комбінацію вакцини винаходу, де a) кожний антиген у комплекті або комбінації вакцин застосовують 2-3 рази у календарі первинного щеплення; b) Ніb не є кон'югованим з СRМ, DТ або будь-яким іншим похідним DТ; c) є 7 або більше кон'югатів капсульних сахаридних антигенів Strерtососсus рnеumоnіа; d) є один або більше кон'югатів капсульних сахаридних антигенів Nеіssеrіа; число антигенів капсульних сахаридів, кон'югованих з СRМ Strерtососсus рnеumоnіа та Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs є менше, ніж 8. У наступному втіленні заявленого винаходу запропоновано спосіб вакцинації проти хвороб, викликаних Воrdеtеllа реrtussіs, Сlоstrіdіum tеtаnі, Соrуnеbасtеrіum dірhthеrіае, вірусом гепатиту В, Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b, Strерtососсus рnеumоnіа та Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs, застосовуючи комплект або комбінацію вакцин винаходу, де a) кожний антиген у комплекті або комбінації вакцин застосовують 2-3 рази у календарі первинного щеплення; b) доза Ра або число Ра-компонентів є зменшеними. Заявник помітив, що Ра-антигени можуть мати негативний вплив на імунну реакцію на чутливі антигени. Тому, в одному втіленні, запропоновано комплект, комбінацію вакцин або спосіб винаходу, де якщо Ра є присутнім, РТ (або похідне РТ) є присутнім у Ра у дозі, що не перевищує 10 мкг, 19, 1,5-8, 2-6, 2,5-5 мкг на дозу 0,5 мл. У наступному втіленні запропоновано комплект, комбінацію вакцин або спосіб винаходу, де якщо Ра є присутнім, FНА є присутнім у Ра у дозі, що не перевищує 10 мкг, 1-9, 1,5-8, 2-6, 2,5-5 мкг на дозу 0,5 мл/дозу. У наступному втіленні запропоновано комплект, комбінацію вакцин або спосіб винаходу, де якщо Ра є присутнім, РRN є присутнім у Ра у дозі, що не перевищує 6 мкг, 0,5-6, 0,8-5, 1-4, 2-3 мкг на дозу 0,5 мл. У наступному втіленні запропоновано комплект, комбінацію вакцин або спосіб винаходу, де якщо Ра є присутнім, РТ є присутнім у Ра у дозі приблизно 2,5 мкг, FНА є присутнім у Ра у дозі приблизно 2,5 мкг та РRN є присутнім у Ра у дозі приблизно 0,8 мкг на дозу 0,5 мл. У наступному втіленні запропоновано комплект, комбінацію вакцин або спосіб винаходу, де якщо Ра є присутнім, РТ є присутнім у Ра у дозі приблизно 5 мкг, FНА є присутнім у Ра у дозі приблизно 5 мкг та РRN є присутнім у Ра у дозі приблизно 2,5 мкг на дозу 0,5 мл. Визначення Приблизно: ±10 % встановленого значення, але повинне бути у згоді з контекстом застосування. Неспецифічна інтерференція: Вплив на імунну реакцію на чутливий антиген (як-то капсульний сахарид Ніb або поверхневий антиген гепатиту В), коли сильні антигени, як-то СRМ197, застосовують разом з чутливими антигенами. Подібну інтерференцію можна помічати навіть якщо сильні та чутливі антигени не застосовують в одному контейнері вакцини, але співзастосовують або застосовують при первіснійі вакцинації почергово. Наприклад, СRМ співзастосовують з композицією, що містить чутливий антиген та DТ. Співзастосування: Застосування двох або більше антигенів в окремих вакцинах, застосовуваних на тих же або різних ділянках, протягом одного візиту до лікаря. Звичайно, кілька вакцин застосовують на різних ділянках, тобто, ділянках, що стосуються різних лімфатичних вузлів, наприклад, різних частин тіла. Однак як варіант, вакцини можна застосовувати на ділянках, що стосуються одного лімфатичного вузла. Комбінована вакцина: Вакцина, що надає захисту проти двох або більше хвороб, застосовуючи дві або більше окремих антигенних частини. СRМ: Будь-який мутант дифтерійного токсину, що детоксифікує токсин природного типу, та котрий не є хімічно детоксифікованим. СRМ-197 є звичайно застосованим мутантом DТ. Інші мутанти DТ можуть також охоплювати СRМ176, СRМ228, СRМ 45 (Uсhіdа еt аl J. Віоl. Сhеm. 218; 3838-3844, 1973); СRМ9, СRМ45, СRМ102, СRМ103 та СRМ107 та інші мутації описані Nісhоlls та Yоulе у Gеnеtісаllу Еngіnееrеd Тохіns, Еd: Frаnkеl, Маесеl Dеkkеr Іnс, 1992; делецію або мутацію Glu-148 до Аsр, Gіn або Sеr та/або Аlа 158 до Glу та інші мутації, розкриті у US 4709017 або US 4950740; мутацію принаймні одного або більше залишків Lуs 516, Lуs 526, Рhе 530 та/або Lуs 534 та інші мутації, розкриті у US 5917017 або US 6455673; або фрагмент, 6 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 розкритий у US 5843711. СRМ не покриває дифтерійного токсину, дифтерійного токсоїду або токсоїдів дифтерійних мутантів. Похідне DТ: Антиген, котрий є будь-яким детоксифікованим мутантом дифтерійного токсину (наприклад, СRМ - дивись вище) або хімічно детоксифікованою формою дифтерійного токсину або СRМ, або будь-якого іншого мутанту або скороченого дифтерійного токсину, котрий залишає функцію виявлюючих антитіл, котрі специфічно зв'язують дифтерійний токсин. Нехаvас®: Комбінована дифтерійно-стовбнячно-ацелюлярно-коклюшно-інактивована поліовакцина – вакцина від гепатиту В Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b (вакцина DТРа-lРV-НВ/Ніb, Sаnоfі-Аvеntіs). Вона містить 201U DТ, 40ІU ТТ, 25 мкг РТ, 25 мкг FНА, 40 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 1, 8 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 2 та 32 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 3, 12 мкг РRР, 5 мкг НВsАg. Ніb: РRР-капсульний сахарид, кон'югований з транспортними білками. Комплекти та комбінаційні вакцини винаходу можуть містити 1-10 мкг сахариду (наприклад, 2-8 мкг, 3-7 мкг, 46 мкг) на дозу, кон'югованого з лінкером або ні, як-то АDН. Прикладом Ніb є антиген, що міститься у відомих вакцинах з кон'югатом Ніb, як-то Ніbеrіх® (GlахоSmіthКlіnе Віоlоgісаls s.а.). Різні транспортні білки можна застосовувати у Ніb винаходу, наприклад, ТТ або NТНі РD (ЕР 0594610). Ще одним можливим транспортними білками у Ніb винаходу є ОМС або ОМР (комплекс зовнішньомембранного білку) з Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs (наприклад, для Ніb-ОМС кон'югат у РеdvахНІВ від Меrсk & Со. Іnс). Імуномодулятор: Антиген, застосовуваний у вакцині, що при застосуванні разом з чутливим антигеном та сильним антигеном, поліпшує імунну реакцію на хворобу, викликану організмом, від котрого чутливий антиген є похідним, порівняно з чутливим антигеном, застосовуваним разом тільки з сильним антигеном. Приклади охоплюють ІРV та Рw. Іnfаnrіх® hеха: Комбінована дифтерійно-стовбнячно-ацелюлярна коклюш-гепатитна Вінактивована поліовакцина - вакцина Q-Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b (DТРа-НВV-ІРV/Ніbвакцина, GlахоSmіthКlіnе). Вона містить принаймні 30 міжнародних одиниць (RJ) DТ, принаймні 40ІU ТТ, 25 мкг РТ, 25 мкг FНА, 8 мкг РRN, 10 мкг, поверхневий антиген гепатиту В (НВsАg), 40 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 1, 8 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 2, 32 Dантигенних одиниць поліовірусу типу 3 та 10 мкг, полірибозил-рибітол-фосфат (РRР), кон'югований з ТТ. Іnfаnrіх® реntа: Комбінована дифтерійно-стовбнячно-ацелюлярна коклюшно-гепатитна Вінактивована поліовакцина - вакцина (DТРа-НВV-ІРV, GlахоSmіthКlіnе). Вона містить принаймні 30 ІU DТ, принаймні 40ІU ТТ, 25 мкг РТ, 25 мкг FНА, 8 мкг РRN, 10 мкг, НВsАg, 40 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 1, 8 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 2 та 32 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 3. Комплект: Вакцини в окремих контейнерах можуть бути упакованими разом з інструкціями їх застосування разом (але не у сенсі змішування вмісту контейнери перед застосуванням). Альтернативно вакцини можуть бути упакованими окремо з інструкціями їх застосування з іншими вакцинами, описаними у комплектах винаходу. Вакцини у комплектах винаходу можуть бути кольоровими або нумерованими для розпізнавання лікарями, які вакцини/контейнери слід застосовувати разом у комплектах винаходу та яким чином та коли їх слід застосовувати (разом чи почергово при первіснійі вакцинації). Ра: Ацелюлярна коклюшна вакцина, що звичайно містить РТ, FНА та РRN, та як варіант, аглютиногени 2 та 3. Реdіасеl®: Комбінована дифтерійно-стовбнячно-ацелюлярна коклюшно-інактивована поліовакцина - вакцина Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b (DТРа-ІРV/Ніb-вакцини, Sаnоfі-Аvеntіs). Вона містить принаймні 30ІU DТ, принаймні 40ІU ТТ, 20 мкг РТ, 20 мкг FНА, 3 мкг РRN, 5 мкг FІМ2 та FІМ3, 40 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 1, 8 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 2 та 32 D-антигенних одиниць поліовірусу типу 3 та 10 мкг РRР, кон'югованого з ТТ. Рrеvnаr®: 7-валентна вакцина Strерtососсus рnеumоnіае, що складається з капсульних сахаридів, похідних від нижченаведених серотипів: 4, 6В, 9V, 14, 18С, 19F, та 23F-кон'югатів, кон'югованих з СRМ-197 (Wуеth). 13-валентна Рrеvnаr: 13-валентна вакцина Strерtососсus рnеumоnіа, що складається з капсульних сахаридів, кон'югованих з СRМ-197 (Wуеth). Первинна вакцинація: Календар щеплення звичайно у перший рік життя, часто охоплював 2 або 3 вакцинацій для кожного антигену, наприклад, протягом 2, 4, 6 місяців або 1, 3, 5 місяців або 2, 3, 4 місяців. Антигени можуть бути співзастосованими (протягом одного візиту, звичайно у різних частинах тіла та таким чином звичайно стосуються різних лімфатичних вузлів) або застосовуваними почергово. Співзастосування є звичайно кращим, внаслідок рідших візитів до лікаря та тому дає кращий комплаєнс. 7 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 РS6В: Кон'югат капсульного полісахариду, похідний від серотипу 6В Strерtососсus рnеumоnіае. РТ-похідне: токсоїдований коклюшний токсин, або альтернативно, мутант, що є детоксифікованим та тому не потребує хімічної детоксифікації. Сахарид: Може позначати полісахарид або олігосахарид. Сахарид часто стосується капсульного сахаридного антигену від патогенних бактерій, наприклад, Наеmорhіlus іnfluеnzае b, Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs, Strерtососсus рnеumоnіае, та може бути полісахаридом повної довжини або може бути бактеріальним "сахаридом певного розміру" та "олігосахаридом" (що у природі мають низьке число повторюваних ланок, або є полісахаридами, зменшеними у розмірі для здійснимості, але є ще здатними індукувати захисну імунну реакцію у хазяїна), що є добре відомими для вакцин (дивись, наприклад, ЕР 497525). Чутливий антиген: Антиген особливо сприйнятливий до імунної інтерференції, зокрема неспецифічної інтерференції у календарі первинного щеплення. Антиген, застосовуваний у вакцині, що при застосуванні разом з сильним антигеном (дивись нижче) дає зменшену імунну реакцію на хворобу, викликану організмом, від котрого антигену є похідним, порівняно з чутливим антигеном, застосовуваним сам по собі. Приклади охоплюють поверхневий антиген гепатиту В, антиген Наеmорhіlus іnfluеnzае b та РS6В. Почергове застосування: Застосування двох або більше антигенів у календарі первинного щеплення в окремих вакцинах при різних візитах до лікаря. Ці застосування є звичайно почерговими протягом 1-4 тижнів або більше. Сильний антиген: Антиген застосовуваний у вакцині, що при застосуванні разом із (або у той ж час) чутливим антигеном дає зменшену імунну реакцію на хворобу, викликану організмом, від котрого чутливий антиген є похідним, порівняно з чутливим антигеном, застосовуваним сам по собі. Приклади охоплюють Ра, СRМ-197. Sуnflоrіх®: 10-валентна вакцина Strерtососсus рnеumоnіае, що складається з нижченаведених кон'югатів: РS1-РD, РS4-РD, РS5-РD, РS6В-РD, РS7F-РD, РS9V-РD, РS14-РD, РS18С-ТТ, РS19F-DТ та кон'югатів РS23F-РD (наприклад, у дозі 1, 3, 1, 1, 1, 1, 1, 3, 3, 1 мкг сахариду, стосовно дози для людини) (GlахоSmіthКlіnе) (дивись, наприклад, WО2007/071707). Антигени у комплектах та комбінаційних вакцинах винаходу повинні бути присутніми у "імунологічно ефективній кількості", тобто, у кількості, що є ефективною для лікування або попередження хвороби. Дозування лікування стосується загальноприйнятих календарів первісного щеплення з повторними дозами при потребі. DТР-компоненти вакцин DТР-вакцини винаходу надають захисту проти хвороб, викликаних Соrуnеbасtеrіum dірhthеrіае, Сlоstrіdіum tеtаnі та Воrdеtеllа реrtussіs. Це звичайно охоплює дифтерійний токсоїд (DТ), токсоїд стовбняку (ТТ) та будь-яку цільну клітину коклюшу (Рw) або ацелюлярний коклюш (Ра), що складається з одного або більше компоненти як описано нижче. Дифтерійним антигеном є звичайно дифтерійний токсоїд. Отримання дифтерійних токсоїдів (DТ) є добре документованим. Будь-який придатний дифтерійний токсоїд можна застосовувати. Наприклад, DТ можна отримувати очисткою токсину від культури Соrуnеbасtеrіum dірhthеrіае, а потім хімічною детоксифікацією, але можна альтернативно отримувати очисткою рекомбінантного або генетично детоксифікованого аналогу токсину (наприклад, СRМ197, або інших мутантів як описано у US 4,709,017, US 5,843,711, US 5,601,827, та US 5,917,017). В одному втіленні, дифтерійний токсоїд винаходу можна адсорбувати на солі алюмінію, як-то алюміній гідроксид. У ще одному втіленні, дифтерійний токсоїд винаходу можна адсорбувати на солі алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні дифтерійний токсоїд можна адсорбувати на суміші алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу звичайно містять DТ у дозі між 10-120 мкг, 50-100 мкг, 70-100 мкг або 80-95 мкг. Стовбнячним антигеном винаходу є звичайно стовбнячний токсоїд. Способи отримання стовбнячних токсоїдів (ТТ) є добре відомими у рівні техніки. В одному втіленні ТТ отримують очисткою токсину від культури Сlоstrіdіum tеtаnі, а потім хімічною детоксифікацією, але можна альтернативно отримувати очисткою рекомбінантного або генетично детоксифікованого аналогу токсину (наприклад, як описано у ЕР 209281). Будь-який придатний стовбнячний токсоїд можна застосовувати. "Стовбнячний токсоїд" може мати в собі імуногенні фрагменти білку повної довжини (наприклад, Фрагмент С - дивись ЕР 478602). В одному втіленні, стовбнячний токсоїд винаходу можна адсорбувати на солі алюмінію, як-то алюміній гідроксид. У ще одному втіленні, дифтерійний токсоїд винаходу можна адсорбувати на солі алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні дифтерійний токсоїд можна адсорбувати на суміші 8 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу звичайно містять ТТ у дозі між 10-60 мкг, 20-50 мкг або 30-48 мкг. Коклюшний компонент винаходу може бути будь-яким ацелюлярним (Ра), де застосовують очищені коклюшні антигени або цільно-клітинним (Рw), де вбиту цільну клітину коклюшу застосовують як коклюшний компонент. Ра винаходу може складатися з одного або більше з нижченаведеного: Коклюшний токсоїд (РТ), волокнистий гемаглютинін (FНА), пертактин (РRN), фімбріальні аглютиногени FІМ2 та FІМ3. Зокрема він може містити РТ, FНА, РRN, FІМ2 або FІМ3, або РТ+FНА, РТ+РRN, РТ+FІМ2, РТ+FІМ3, FНА+РRN, FНА+FІМ2, FНА+FІМ3, РRN+FІМ2, РRN+FІМ3 або FІМ2+FІМ3, або РТ+FНА+РRN, РТ+FНА+FІМ2, РТ+FНА+FІМ3, РТ+РRN+FІМ2, РТ+РRN+FІМ3, РТ+FІМ2+FІМ3, FНА+РRN+FІМ2, FНА+РRN+FІМ3, FНА+FІМ2+FІМ3 або РRN+FІМ2+FІМ3, або РТ+FНА+РRN+FІМ2, РТ+FНА+РRN+FІМ3 або FНА+РRN+FІМ2+FІМ3 або РТ+FНА+РRN+FІМ2+FІМ3. Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть містити РТ, детоксифікований добре відомим способом обробкою формальдегідом або за допомогою мутації (РТ-похідного). Заміщення залишків у субодиниці SІ білку, як виявлено, призводять до білку, котрий залишає свої імунологічні та захисні властивості РТ, але зі зменшеною токсичністю або без неї (ЕР 322533). Подібні мутанти можна застосовувати у дозах, нижчих, ніж 20В одному втіленні винаходу, Ра-компоненти є присутніми у дозах, звичайно застосованих у ліцензованих вакцинах (наприклад, Іnfаnrіх®), як-то приблизно 25 мкг РТ, 25 мкг FНА та 8 мкг РRN. Рw винаходу складається з вбитих цільних клітин коклюшу. Рw можна інактивувати кількома способами, охоплюючи способи без застосування меркурію. Подібні способи можуть охоплювати прогрівання (наприклад, 56 °C, 10 хвилин), інактивацію формальдегідом (наприклад, 0,1 % при 37°, 24 години), глутаральдегід (наприклад, 0,05 % при кімнатній температурі, 10 хвилин), ацетоном-І (наприклад, три обробки при кімнатній температурі) та ацетоном-ІІ (наприклад, три обробки при кімнатній температурі та четверта обробка при 37 °C) (дивись, наприклад, Guрtа еt. аl, 1987, J. Віоl. Stаnd. 15:87; Guрtа еt аl., 1986, Vассіnе, 4:185). Способи отримання вбитого, цільно-клітинного Воrdеtеllа реrtussіs (Рw), придатного для цього винаходу, є розкритими у WО 93/24148, оскільки є придатними способи виготовлення препарату вакцини DТ-ТТ-Рw-НерВ. Тіомерсал застосовано у минулому при отриманні вбитого, цільноклітинного Воrdеtеllа реrtussіs. Однак, в одному втіленні його не застосовують у процесі виготовлення вакцин заявленого винаходу. Доза Рw 5-50 ІОU, 7-40 ІОU, 9-35 ІОU, 11-30 ІОU, 13-25 ІОU, 15-21 ІОU або приблизно або точно 20 ІОU є звичайно застосованою. В одному втіленні, коклюшні компоненти винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, якто алюміній гідроксид. У ще одному втіленні, коклюшний компонент винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні коклюшний компонент можна адсорбувати на суміші алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. Компоненти ІРV-вакцини ІРV винаходу може містити інактивований поліовірус типу 1 (наприклад, Маhоnеу або Вrunhіldе), типу 2 (наприклад, МЕF-1), або типу 3 (наприклад, Sаukеtt), або комбінацію будь-яких двох або усіх трьох з цих типів. Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть складатися з ІРV типу 1 або ІРV типу 2 або ІРV типу 3, або ІРV типів 1 та 2, або ІРV типів 1 та 3, або ІРV типів 2 та 3, або ІРV типів 1, 2 та 3. Способи отримання інактивованого поліовірусу (ІРV) є добре відомими у рівні техніки. В одному втіленні, ІРV повинен містити типи 1, 2 та 3 як є звичайним для вакцині, та може бути поліовакциною Sаlk, котра є інактивованою формальдегідом (дивись наприклад, Suttеr еt а/., 2000, Реdіаtr. Сlіn. Nоrth Аm. 47:287; Zіmmеrmаn & Sраnn 1999, Аm Fаm Рhуsісіаn 59:113; Sаlk еt аl., 1954, Оffісіаl Моnthlу Рublісаtіоn оf Аmеrісаn Рublіс Неаlth Аssосіаtіоn 44(5):563; Неnnеsеn, 1981, Dеvеlор. Віоl. Stаndаrd 47:139; Вudоwskу, 1991, Аdv. Вірус Rеs. 39:255). В одному втіленні ІРV не є адсорбованим (наприклад, перед змішуванням з іншими компонентами). У ще одному втіленні, ІРV-компоненти винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній гідроксид (наприклад, перед або після змішування з іншими компонентами). У ще одному втіленні, ІРV-компоненти винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні ІРV-компоненти можна адсорбувати на суміші алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. При адсорбуванні один або більше ІРVкомпонентів можна адсорбувати окремо або разом як суміш. ІРV можна стабілізувати окремою сушкою, як описано у WО2004/039417. 9 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Поліовірус можна вирощувати у культурі клітин. Культура клітин може бути лінією клітин VЕRО або РМКС, що є постійною лінією клітин, похідною від нирок мавп. Клітини VЕRО можуть бути зручно культивованими мікроносіями. Культура клітин VЕRО перед та протягом вірусної інфекції може залучати застосування похідного від корів матеріал, як-то сироватка теляти, та цей матеріал треба отримувати з джерел, котрі є позбавленими від спонгіозного енцефаліту корів (ВSЕ). Культура може також містити матеріали, як-то гідролізат лактальбуміну. Після вирощування віріони можна очищати, застосовуючи ультрафільтрування, діафільтрування, та хроматографією. Перед застосуванням до пацієнтів віруси треба інактивувати, а цього можна досягти обробкою формальдегідом. Віруси можна вирощувати, очищати та інактивувати індивідуально, та тоді комбінувати для отримання суміші для застосування вакцини ІРV або для додавання до адсорбованого дифтерійного та стовбнячного антигену та коклюшних компонентів для вакцин, що містять DТРw-ІРV або DТРа-ІРV. Стандартні дози поліовакцин сьогодні мають нахил містити 40 антигенних компонентів D інактивованого поліовірусу типу 1, 8 антигенних компонентів D інактивованого поліовірусу типу 2 та 32 антигенних компоненти D інактивованого поліовірусу типу 3 (наприклад, Іnfаnrіх®-ІРV™). В одному втіленні, доза ІРV-вакцини заявленого винаходу може містити 10-36 антигенних компонентів D ІРV типу 1. В одному втіленні, доза ІРV-вакцини заявленого винаходу може містити 2-7 антигенних компонентів D ІРV типу 2. В одному втіленні, доза ІРV-вакцини заявленого винаходу може містити 8-29 антигенних компонентів D ІРV типу 3. Антиген гепатиту В Отримання поверхневого антигену гепатиту В (НВsАg) є добре документованим. Дивись наприклад, Наrtfоrd еt аl., 1983, Dеvеlор. Віоl. Stаndаrt 54:125, Grеgg еt аl.у 1987, Віоtесhnоlоgу 5:479, ЕР0226846, ЕР0299108. Його можна отримувати таким чином. Один спосіб полягає в очищенні антигену у формі частинок від плазми носіїв хронічного гепатиту В, оскільки великі кількості НВsАg синтезуються у печінці та вивільняються у потік крові при інфекції НВV. Ще один спосіб полягає у експресії білку рекомбінантними ДНК-способами. НВsАg можна отримувати експресією у клітинах дріжджів Sассhаwmусеs сеrеvіsіае, комах (наприклад, Ні5) або ссавців. НВsАg можна вставляти у плазміду, та її експресію з плазміди можна контролювати промотером, як-то промотер "GАРDН" (від гена гліцеральдегід-3-фосфат-дегідрогенази). Дріжджі можна культивувати у синтетичному середовищі. НВsАg можна тоді очищати осадженням, іонообмінною хроматографією та ультрафільтруванням. Після очистки НВsАg можна діалізувати (наприклад, з цистеїном). НВsАg можна застосовувати у формі частинок. Як застосовано тут, вираз "поверхневий антиген гепатиту В" або "НВsАg" охоплює будь-який антиген НВsАg або його фрагмент, що виявляють антигенність НВV-поверхневого антигену. Треба розуміти, що на додаток до 226-амінокислотної послідовності S-антигену НВsАg (дивись Тіоllаіs еt аl., 1985, Nаturе 317:489 та посилання звідти) НВsАg, як тут описано, може, якщо потрібно, містити усю або частину до-S послідовності, як описано у вищенаведених посиланнях та у ЕР0278940. Зокрема, НВsАg може містити поліпептид, що містить амінокислотну послідовність, що містить залишки 133-145, а потім залишки 175-400 L-білку НВsАg відносно відкритої рамки зчитування на вірус гепатиту В аd-серотипу (цей поліпептид позначено як L*; дивись ЕР0414374). НВsАg у рамках винаходу можуть також охоплювати поліпептид до-S1-доS2-S, описаний у ЕРО198474 (Еndоtrоnісs) або його аналоги, як-то описані у ЕР0304578 (МсСоrmісk та Jоnеs) НВsАg як тут описано, може також стосуватися мутантів, наприклад, "втікаючого мутанту", описаного у WО 91/14703 або ЕР0511855А1, особливо НВsАg, де амінокислотним заміщенням у позиції 145 є аргінін - гліцин. НВsАg може бути у формі частинок. Частинки можуть містити, наприклад, лише S-білок або можуть бути складеними частинками, наприклад, L*, S), де L* визначено вище, а S означає Sбілок НВsАg. Вказана частинка є переважно у формі, у котрій вона є експресованою у дріжджах. В одному втіленні, НВsАg є антигеном, застосованим у ЕngеrіхВ® (GlахоSmіthКlіnе Віоlоgісаls S.А.), що описано у W093/24148. Поверхневий антиген гепатиту В можна адсорбувати на алюміній фосфаті, що можна зробити перед змішуванням з іншими компонентами (описано у W093/24148). Компонент гепатиту В повинен бути по суті позбавленим від тіомерсалу (спосіб отримання НВsАg без тіомерсалу раніше опубліковано у ЕР1307473). Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть містити НВ у дозі приблизно 10 мкг. Антигени Наеmорhіlus іnfluеnzае b 10 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Вакцини, що містять антигени від Наеmорhіlus іnfluеnzае типу b описані у WО97/00697. Вакцини винаходуможуть застосувати будь-який придатний антиген Ніb. Антигеном може бути капсульний сахарид (РRР) Ніb, кон'югований або змішаний з транспортними білками. Сахаридом є полімер рибози, рибітолу та фосфату. Антиген Ніb можна як варіант, адсорбувати на алюміній фосфат як описано у WО97/00697, або він може бути неадсорбованим, як описано у W002/00249, або може не бути підданим адсорбції. Антиген, що не є "адсорбованим на алюмінієвий ад'ювант", означає, що етапу адсорбції антигену на свіжому алюмінієвому ад'юванті нема у способі формування композиції. Ніb може бути кон'югованим з будь-яким носієм, котрий може забезпечувати принаймні один Т-хелперний епітоп, та може бути стовбнячним токсоїдом, дифтерійним токсоїдом, білком D або N. mеnіngіtіdіs ОМС. Ніb може бути ліофілізованим та може бути відтворюваним для негайного застосування (наприклад, розріджувачем, що, як варіант, містить інші антигенні компоненти вакцин винаходу). В одному втіленні, Ніb є присутнім у низькій дозі (наприклад, 1-6 мкг, 2-4 мкг або приблизно чи точно 2,5 мкг) як описано у WО 02/00249. В одному втіленні, комплекти та комбінаційні вакцини винаходу містять Ніb у дозі приблизно 10 мкг. У ще одному втіленні, комплекти та комбінаційні вакцини винаходу можуть містити Ніb у дозі приблизно 2,5 мкг. Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs типи А, В, С, W-135 або Y антигени Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть містити один або більше капсульних сахаридів бактерії, вибраної з групи: N. mеnіngіtіdіs тип А, N mеnіngіtіdіs типу b, N mеnіngіtіdіs типу С, N. mеnіngіtіdіs типу Y та N. mеnіngіtіdіs типу W-135 (тут позначено як W). Зокрема комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть містити капсульний сахаридний кон'югат Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs від штамів А, В, С, Y або W, або від штамів А+В, А+С, А+Y, А+W, В+С, В+Y, В+W, С+Y, С+W або Y+W, або від штамів А+В+С, А+В+Y, А+В+W, А+С+Y, А+С+W, В+С+Y, В+С+W або С+Y+W, або від штамів А+В+С+Y, А+В+С+Y, А+С+Y+W, В+С+Y+W або від штамів А+В+С+Y+W. В одному втіленні, компоненти Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній гідроксид. У ще одному втіленні, компоненти Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні компоненти Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs можна адсорбувати на суміші алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. В одному втіленні компоненти Nеіssеrіа mеnіngіtіdіs можуть бути неадсорбованими на ад'юванті, наприклад, на алюмінієвому ад'юванті. Strерtососсus рnеumоnіа антигени Комплекти або комбінаційні вакцини винаходу можуть містити вакцину, що надає захисту проти інфекції Strерtососсus рnеumоnіае. Подібна вакцина звичайно охоплює сахариди від 7, 8, 9, 10, 11, 13 або більше серотипів Strерtососсus рnеumоnіае або може складатися з сахаридів від усіх 23 відомих серотипів Strерtососсus рnеumоnіае. Приклади вакцин Strерtососсus рnеumоnіае охоплюють Рrеvnаr® та Sуnflоrіх®, що є вищеописаними. В одному втіленні, компоненти Strерtососсus рnеumоnіае винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній гідроксид. У ще одному втіленні, компоненти Strерtососсus рnеumоnіае винаходу можна адсорбувати на сіль алюмінію, як-то алюміній фосфат. У наступному втіленні компоненти Strерtососсus рnеumоnіае можна адсорбувати на суміші алюміній гідроксиду та алюміній фосфату. В одному втіленні компоненти Strерtососсus рnеumоnіае можуть бути неадсорбованими на ад'юванті, наприклад, на алюмінієвому ад'юванті. Кон'югати Бактеріальні капсульні сахаридні кон'югати винаходу можуть містити будь-який пептид, поліпептид або білок носія, що містить принаймні один Т-хелперний епітоп. Білки носіїв можуть бути вибраними з групи: стовбнячний токсоїд, дифтерійний токсоїд, СRМ (у тому числі СRМ197, СRМ176, СRМ228, СRМ45, СRМ9, СRМ45, СRМ102, СRМ103 та СRМ107), рекомбінантний дифтерійний токсин (як описано у US 4,709,017, WО 93/25210, WО 95/33481, або WО 00/48638), пневмолізин (як варіант, хімічно детоксифікований, або детоксифікований мутант) від S. рnеumоnіае (дивись, наприклад, WО 2004/081515 та посилання звідти), ОМРС від N. mеnіngіtіdіs (ЕР 0372501), та білок D (РD) від Н. іnfluеnzае (ЕР 594610). Інші носії можуть охоплювати синтетичні пептиди (ЕР 0378881; ЕР 0427347), білки теплового шоку (WО 93/17712; WО 94/03208), коклюшні білки (WО 98/58668; ЕР 0471177), цитокіни (WО 91/01146), лімфокіни (WО 91/01146), гормони (WО 91/01146), фактори росту (WО 91/01146), штучні білки, що містять численні СD4 людини: епітопи Т-клітин від різних патоген-похідних антигенів (Fаlugі еt аl., 2001, Еur. J. Іmmunоl. 31:3816), пневмококовий поверхневий білок РsрА (WО 02/091998), білки поглинання феруму (WО 01/72337), токсин А або В від С. dіffісіlе (WО 00/61761), пневмококовий 11 UA 99283 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 РhtD (WО 00/37105), пневмококовий РhtDЕ (наприклад, WО 01/98334 & WО 03/054007), РhtХ, тощо. Сахариди можуть бути на тому ж носії, особливо усі сахариди від певного організму, наприклад, сахариди МеnА, МеnС, МеnW та МеnY можуть бути кон'югованими із ТТ, DТ або СRМ-197. Однак, внаслідок відомого впливу придушення носія може бути кращим, щоб у кожній композиції винаходу сахаридні антигени, що містяться там («n» антигенів), були кон'югованими з більше, ніж одним носієм. Таким чином, (n-1) сахаридів могли б бути (окремо) на одному типі носія, та 1 на відмінному носії, або (n-2) на одному, та 2 на двох різних носіях, тощо. Наприклад, у вакцині, що містить 4 бактеріальні сахаридні кон'югати, 1, 2 або усі чотири могли б бути кон'югованими з різними носіями). Білок D, однак, можна застосовувати для різних (2, 3, 4 або більше) сахаридів у композиції без помітного придушення впливу носія. Ніb може бути присутнім як кон'югат ТТ, DТ або СRМ197, та МеnА, МеnС, МеnY та МеnW можуть бути будь-якими кон'югатами ТТ, DТ, СRМ197 або РD. Vі може бути присутнім як кон'югат ТТ, DТ або СRМ197. Білок D є корисним носієм, оскільки він забезпечує наступний антиген, що може забезпечувати захист проти Н. іnfluеnzае. В одному втіленні, усі сахариди є кон'югованими з одним транспортними білками. Vі може бути кон'югованим з транспортними білками, наприклад, застосовуючи карбодіімід (наприклад, ЕDАС) хімічною конденсацією (за умови, що повторювана субодиниця Vі містить карбоксильні групи). Цього можна було б досягти будь-чим з групи: (і) реакція одного карбодііміду між СООН з Vі та NН2 білку або (іі) двох реакція карбодіімідів, котра може відбуватися між СООН Vі та NН2 гомобіфункціональної лінкерної молекули та СООН білку та NН2 гомобіфункціональної лінкерної молекули, або між СООН з Vі та NН2 гетеробіфункціональної лінкерної молекули та NН2 білку та СООН гетеробіфункціональної лінкерної молекули. Кон'югацію можна застосовувати у сполученні з вільними транспортними білками. В одному втіленні, коли даний транспортний білок є присутнім у вільній та кон'югованій формі у композиції винаходу, некон'югованої форми є не більше, ніж 5 % від загальної кількості композиції транспортного білку, або у ще одному втіленні є присутнім при кількості менше, ніж 2 мас. %. Сахарид можна зв'язувати з транспортними білками будь-яким відомим способом (наприклад, Lіkhіtе, U.S. Раtеnt 4,372,945 та Аrmоr еt аl„ U.S. Раtеnt 4,474,757), будь-яким придатним лінкером, де необхідно. Сахарид повинен звичайно бути активованим або функціоналізованим перед кон'югацією. Активація може застосовувати, наприклад, агенти ціанілування, як-то СDАР (1-ціанодиметиламінопіридиній тетрафлуорборат) (WО 95/08348 & WО 96/29094). Реакцію ціанілування можна проводити у відносно м'яких умовах, котрі запобігають гідролізу чутливих до лугів сахаридів. Цей синтез дозволяє безпосереднє сполучення з транспортним білком. Інші придатні способи застосування карбодіімідів, гідразидів, активних естерів, норборану, п-нітробензойної кислоти, N-гідроксисукциніміду, S-NНS, ЕDС або ТSТU. Зв'язки через лінкер можна робити, застосовуючи будь-який відомий спосіб, наприклад, способи з US 4,882,317 та US 4,695,624. Один тип зв'язку полягає у відновному амінуванні сахариду, сполученні утвореної аміногрупи з одним кінцем лінкеру адипінової кислоти (ЕР 0477508, Роrrо еt аl„ 1985, Моl. Іmmunоl. 22:907, ЕР 0208375), та тоді сполучення білку з іншим кінцем лінкеру адипінової кислоти. Інші лінкери охоплюють В-пропіонамідо (WО 00/10599), нітрофеніл-етиламін (Gеvеr еt аl., 1979, Меd. Місrоbіоl. Іmmunоl. 165:171), галогенацилгалогеніди (US 4,057,685), глікозидні зв'язки (US 4,673,574; US 4,761,283; US 4,808,700), 6-амінокапронову кислоту (US 4,459,286), АDН (US 4,965,338), С4 - С12 частини (US 4,663,160), тощо. Як альтернативу застосуванню лінкеру можна застосовувати безпосередній зв'язок. Безпосередні зв'язки з білком можуть полягати в окисненні сахариду, а потім відновному амінуванні з білком, як описано у, наприклад, у US 4,761,283 та US 4,356,170, або безпосередній-СDАР реакції. Після кон'югації вільні та кон'юговані сахариди можуть бути відокремленими. Є багато придатних способів цього відокремлення, охоплюючи гідрофобну хроматографію, ультрафільтрування, діафільтрування, тощо (дивись також Lеі еt аl., 2000, Dеv Віоl. (Ваsеl). 103:259; WО 00/38711; US 6,146,902). В одному втіленні, якщо вакцина містить даний сахарид у вільній та кон'югованій формі, некон'югованої форми є не більше, ніж 20 мас. % загальної кількості цього сахариду у композиції (наприклад,