Спосіб визначення впливу препаратів з гепатопротекторною дією на показники цитолізу крові щурів при токсичному гепатиті

Реферат: Спосіб визначення впливу препаратів з гепатопротекторною дією на показники цитолізу в сироватці крові щурів при токсичному гепатиті включає дослідження крові, у якому протягом 10 днів усім тваринам дослідних груп вводять 1 раз на добу внутрішньошлунково селеназу в дозі 50 мкг/кг, адеметіонін в дозі 100 мг/кг, епадол в дозі 100 мг/кг, лівонорм в дозі 100 мг/кг, детоксил в дозі 100 мг/кг на тлі токсичного гепатиту. Визначають рівень цитолізу і антицитолітичну активність препаратів. Отримані результати порівнюють з контролем і при зміні показників визначають їх вплив на цитоліз в сироватці крові щурів. UA 103873 U (54) СПОСІБ ВИЗНАЧЕННЯ ВПЛИВУ ПРЕПАРАТІВ З ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЮ ДІЄЮ НА ПОКАЗНИКИ ЦИТОЛІЗУ КРОВІ ЩУРІВ ПРИ ТОКСИЧНОМУ ГЕПАТИТІ UA 103873 U UA 103873 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель, що заявляється, належить до медицини, точніше до фармакології, і може бути використана для визначення впливу препаратів з гепатопротекторною дією на показники цитолізу в сироватці крові щурів при токсичному гепатиті. Відомо, що маркери цитолізу - активність аланін амінотрансферази (АлАТ), аспартатамінотрансферази (АсАТ), лужної фосфатази (ЛФ) є показниками порушень структури і метаболізму життєво-важливих органів, тому при патологічних і екстремальних станах в сироватці крові активність цих показників зростає [1]. Гепато- і ораганопротекторні властивості при різних патологічних станах встановлені у селеназі, адеметіоніні, препаратах напівненасичених жирних кислот омега [12], лівонормі і детоксилі. Попередніми дослідженнями порівнювали гепатопротекторний ефект селенази, препарату омега-3-поліненасичених жирних кислот епадолу, адеметіоніну, лівонорму та детоксилу на підставі їх впливу на енергетичний і прооксидантно-антиоксидантний обмін печінки, міокарда та тканин головного мозку при токсичному дихлоретановому гепатиті. При патології встановлено збільшення в усіх тканинах маркерів окисної модифікації білка - альдегідфенілгідразонів (АФГ), карбоксилфенілгідразонів (КФГ) та показника ацидозу - лактату, при падінні показників антиоксидантного захисту - активності супероксиддисмутази (СОД), глутатіонпероксидази (ГПР), вмісту відновленого глутатіону (ВГ), показників енергетичного обміну - вмісту АТФ, малату, пірувату. При токсичному гепатиті селеназа відновлювала прооксидантноантиоксидантний гомеостаз в усіх органах, енергетичний метаболізм тільки в печінці і міокарді. Епадол не впливав на показники метаболізму в мозковій тканині щурів, нормалізував активність СОД, ГПР, АФГ, КФГ, вміст лактату в печінці, рівень КФГ, АТФ, пірувату, малату, лактату в міокарді. Адеметіонін при токсичному гепатиті відновлював показники енергетичного обміну та прооксидантно-антиоксидантного гомеостазу при токсичному гепатиті в усіх органах. Лівонорм та детоксил реалізували захисну дію на всі показники метаболізму в гепатоцитах, в міокарді відновлювали лише маркери окислювальної модифікації білків і не впливали на показники енергетичного обміну і прооксидантно-антиоксидантного гомеостазу в головному мозку щурів [6, 7]. Тому доцільним було порівняти вплив селенази, епадолу, адеметіоніну, лівонорму і детоксилу за показниками цитолізу відносно їх органопротекторної дії при токсичному гепатиті. Найбільш близьким аналогом за технічною суттю до способу, що заявляється, є спосіб фармакологічної детоксикації, який дозволяє безпосередньо діяти на токсичну речовину або її рецептори і лікувати ряд токсичних ефектів [6]. Задача запропонованого способу полягає у вивчені впливу селенази, епадолу, адеметіоніну, лівонорму і детоксилу на показники цитолізу в сироватці крові щурів при токсичному гепатиті. Технічний результат при вирішенні задачі полягає в покращенні показників цитолізу в сироватці крові щурів при токсичному гепатиті. Поставлена задача вирішується тим, що у відомому способі, який включає дослідження крові, згідно з корисною моделлю, протягом 10 днів усім тваринам дослідних груп вводять 1 раз на добу внутрішньошлунково селеназу в дозі 50 мкг/кг, адеметіонін в дозі 100 мг/кг, епадол в дозі 100 мг/кг, лівонорм в дозі 100 мг/кг, детоксил в дозі 100 мг/кг на тлі токсичного гепатиту, визначають рівень цитолізу і антицитолітичну активність препаратів, отримані результати порівнюють з контролем і при зміні показників визначають їх вплив на цитоліз в сироватці крові щурів Спосіб здійснюють наступним чином. Досліди проведені на 49 нелінійних білих щурах - самцях масою тіла 170-190 г, отриманих з ПП "Біомодельсервіс" м. Київ. Щурів утримували, згідно з Методичними рекомендаціями ДЕЦ МОЗ України [10]. Протягом 20 днів щоденно щурів зважували і оглядали. Для моделювання токсичного гепатиту застосовували дихлоретан, який вводили внутрішньошлунково за допомогою металевого зонда щурам в дозі 500 мг/кг 1 раз на добу протягом 4 днів в суміші з оливковою олією (1:1). Токсичний гепатит, індукований дихлоретаном, супроводжується високим ступенем вільно-радикального окиснення, окисною модифікацією білків, дипривацією глутатіонової ланки тіолдисульфідної системи, порушенням енергетичного обміну, збільшенням об'єму жирової дистрофії і високим рівнем трансаміназ [5]. На 5 день експерименту введення токсичного агента припинялося і протягом 10 днів усім тваринам дослідних груп вводили 1 раз на добу внутрішньошлунково селеназу в дозі 50 мкг/кг, адеметіонін в дозі 100 мг/кг, епадол в дозі 100 мг/кг, лівонорм в дозі 100 мг/кг, детоксил в дозі 100 мг/кг. Препарати, погано розчинні в воді, вводили у вигляді суспензії, стабілізованої Твіном 80. Інтактна і контрольна група отримували внутрішньошлунково в аналогічному обсязі воду з Твіном-80. Біохімічні дослідження проводили на 20-й день експерименту. На цей термін спостереження тварин виводили з експерименту під тіопенталовим наркозом (40 мг/кг), швидко 1 UA 103873 U 5 10 15 20 забирали кров. Ефективність лікування оцінювали за біохімічними показниками сироватки крові (визначали активність АлАТ, АсАТ, ЛФ), встановлюючи рівень цитолізу і антицитолітичну активність препаратів за допомогою біхроматичної фотометричної системи загального призначення STAT FAX 1904 PLUS (Awareness Technology inc, США). Активність АлАТ, АсАТ, ЛФ виражали в ОД/л. Аналіз нормальності розподілу оцінювали за критеріями КолмогороваСмирнова (Д) і Lillifors, а також Shapiro-Wilk (W), якому віддавали перевагу. Дані представлені у вигляді середньої і стандартної помилки репрезентативності вибіркового середнього значення. Результати дослідження оброблені з застосуванням статистичного пакета ліцензійної програми ® STATISTICA for Windows 6.0 (Stat. Soft. Inc. NAXXR 712D 83214 FANS), a також SPSS 16.0 "Microsoft Exel 2003". Для всіх видів аналізу статистично значущими вважали відмінності при р