Спосіб одержання макроциклічних сполук

Изобретение относится к способу получения новых соединений антибиотика. Известно получение антибиотиков 5541, которые можно выделить из продуктов ферментации вида Streptomyces. Антибиотики S541 представляют собой группу родственных соединений, имеющих неполную формулу I Итак, была выявлена дополнительная группа соединений, обладающих антибиотической активностью, которые можно получить посредством химической модификации антибиотиков S541 или путем выделения их из культуры микроорганизмов рода Streptomyces [1-3]. Новые соединения предлагаемого способа обладают антибиотической активностью и/или применяются как промежуточные продукты при получении других активных соединений и/или при выделении или очистке соединений антибиотиков S541. Соединения данного изобретения представляют собой 23-деокси и 23-гидроксил или замещенные гидроксильные аналоги антибиотиков S541, которые имеют гидроксильную или замещенную гидроксильную группу в положении 5. Таким образом, данным изобретением предлагается, в частности, соединения формулы II где R1 - метильная, этильная или изопро-пильная группа; R2 и R - атом водорода, OR4 - гидроксильная группа, метокси, алканоилокси-группа, имеющая С1-С6 - алкильный фрагмент, необязательно замещенный феноксигруппой или группу ОСОО R , где R - С 1-С6-алкил. Как указывалось ранее, соединения предлагаемого изобретения могут применяться в качестве антибиотиков и/или как промежуточные соединения для получения других активных соединений и/или при выделении и очистке соединений антибиотиков S541. В том случае, когда предлагаемые соединения приходится использовать как полупродукты, R2 и/или -OR4 могут быть защищенными гидроксильными группами. Ясно, что такая группа должна иметь минимальное количество дополнительных функциональных групп, чтобы избежать дополнительных реакционных цепей и должна быть такова, чтобы стало возможным избирательно восстанавливать из нее гидроксильную гр уппу. Примеры защитных гидроксильных групп известны и описаны. Заявленные соединения обладают антибиотической активностью, например антигельминтной активностью, например против нематодов, и в частности антиэндопаразитарной и антиэктопаразитарной активностью. Эктопаразиты и эндопаразиты заражают людей и целый ряд животных, и особенно имеют широкое распространение среди сельскохозяйственных животных, таких как свиней, овец, крупного рогатого скота, коз и домашней птицы, лошадей и домашних животных, например собак и кошек. Паразитарная инфекция домашнего скота, приводящая к анемии, недостаточности питания и потери веса, является основной причиной экономических потерь во всем мире. К представителям эндопаразитов, заражающих указанных животных и/или людей относятся Ancylostoma, Ascarlda, Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum, Capillarta, Chabertia, Cooperia, Dlctyocaulus, Dirofilaria, Dracunculus, Entenobius, Haemonchus, Heterahis, Loa, Necator, Nematodlrus.Nimatosplroides (Heligomoroides),Nlppostrongylus, Oesophagostomum, Onchaceroa, Ostertagia, Oxyurls, Parascaris, Strongylus, Strongyloides, Suphacia, Toxascarls, Toxocara, Irlchonema, Irichostrongylus, Irichinella, Irichuris, Unclnarla и Wucharecia. Примерами эктопаразитов, заражающих животных и/или людей, являются членистоногие эктопаразиты, например жалящие насекомые, падальная муха, блохи, вши, клещи, сосущие насекомые, искодовые клещи и другие двукрылые насекомые-вредители. К примерам такого рода эктопаразитов, заражающих животных и/или людей, относятся Ambylomma, Boophilus, Chorioptes, Culllphore, Dernodex, Demallenia, Dermatobia, Gastrophilus, Haematobia, Naematopinus, Naemophysalis, Hyalomma, Hyperderma, Ixodes, Linognathus, Lucilia, Melophagus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psoregates, Psoroptes, Rhiplcephalus, Sarcoptes, Stomoxys и Tabanus. Обнаружено, что предлагаемые соединения эффективно действуют как In vitro, так и in vivo против широкого ряда эндопаразитов и эктопаразитов. В частности, обнаружено, что соединения настоящего изобретения активно действуют против не-матодов таких как Haemonchus coniortus, Ostertagia cireumeineta, Irichostrongylus colubfformis, Dictyocaulus, viviparis, Cooperla, oncophera. Ostertagia, ostertagi, Nematospitoides dubius и Nippostrongylus braziliensis и паразитарных клещей, как например Sarcoptes и Psoroptessp. Таким образом, предлагаемые соединения находят применение при лечении животных и людей с эндопаразитарной и/или эктопаразитарной инфекциями. Виды паразитов меняются в соответствии с хозяином (животным) и доминирующим местонахождением инфекции. Следовательно, например, возбудители Haemochus contortus, Ostertagia cireumeineta и Trichostrongylus culubi Pormis обычно поражают овец и преимущетвенно локализуются в желудке и тонкой кишке, в то время как Dictyocaulus vi vlparus, Cooperia oncophora и Ostertagia ostertagi обычно поражают крупный рогатый скот и локализованы, главным образом в легких, кишечнике или желудке, соответственно. Антибиотическая активность предлагаемых соединений может быть продемонстрирована, например, своей активностью in vitro против свободно живущи х нематодов, например Caenerhabiditis elegans. Кроме того, заявленные соединения имеют применение в качестве противогрибковых веществ, например, против штаммов Candida, как например Candida alblcans и Candida glabrata и против дрожжей, таких как Saccharomyces carlsbergensis. Соединения предлагаемого способа, кроме того, могут найти применение в борьбе с вредителяминасекомыми, клещами и нематодами в сельском хозяйстве, садоводстве, лесоводстве, здравоохранении и хранении продуктов. Ими можно успешно обрабатывать вредителей почвы и сельскохозяйственных культур, включая хлебные злаки, например пшеницу, ячмень, маис, рис, овощи, например, сою, фрукты, например яблоки, виноград и цитрусовые, наряду с корнеплодами, например сахарную свеклу, картофель. Характерными примерами таких вредителей являются фруктовые клещи и тля, например Aphisfabae, Nulacorthum clrcumflexum, Myzus Nersicae, Nephoteltix cineticeps, nilparvata Lugens, Panomychus ulml, Phorodon humuli, Phyllocoptruta olelvora, Tetranychys urtlcae и представители рода Trialeuroldes: нематоды, например представители рода Aphelencoldes, Globodera, Heterodeta, Meloidogyne и Panagreilus: чешуйчатые например Heliothls, Plutella и Spodoptera; долгоносиккаландрина, например Anthonomus grandis и Sitophilus granarius: хр ущаки мучные, например Tribollum castaneum, мухи, например Musea domestlca; муравьи Рихтера; моли-минеры узкокрылые; Pearpsllla; трипсы табачные; таракановые, например Blatella germanica и Periplaneta москитные, например Aedcs aegypti. В соответствии с изобретением предложены соединения формулы II, которые могут быть использованы в качестве антибиотика. В частности, их можно использовать при лечении животных и людей, пораженных эндопаразитарной, энтопаразитарной и/или грибковой инфекциями, и в качестве пестицидов для борьбы с вредителями-насекомыми, клещами и нематодами в сельском хозяйстве, садоводстве, или лесном хозяйстве. Их можно применять, кроме того, обычно в качестве пестицидов в других обстоятельствах, например в хранилищах, зданиях или других общественных местах или местах локализации сельскохозяйственных вредителей. По существу предлагаемые соединения могут быть применены либо к хозяину (животному или человеку), либо к культурным растениям или другой растительности, либо к самим вредителям или месту их расположения. Заявленные соединения могут быть изготовлены для приема в любой удобной форме при использовании в ветеринарии или практической медицине. Таким образом, изобретение содержит в пределах своего объема фармацевтические композиции, содержащие соединение согласно заявлянному способу, пригодное для применения в ветеринации или терапии. Такие композиции могут быть представлены при использовании в традиционной форме с помощью одного или нескольких подходящих носителей или наполнителей. Предлагаемые композиции содержат составы в форме, особенно пригодной для парентерального (в том числе, введение внутрь молочной железы), орального, ректального, местного применения в виде имплантанта, для применения при глазных, ушны х или заболеваниях мочеполовой системы. Подходящими способами, и агентами для приготовления состава соединений данного изобретения, пригодного для использования в ветеринарии или терапии, являются известные способы для соединений антибиотиков S541. Заявленные соединения можно применять в комбинации с другими фармацевтически активными ингредиентами. Суммарная суточная доза предлагаемых соединений, применяемая как в ветеринарии, так и в терапии, будет соответственно в интервале 1-2000 мг/кг веса тела, предпочтительно 50-1000 мг/кг, причем указанные дозировки можно принимать в дробных дозах, например 1-4 раза в день. Заявленные соединения можно составлять в любой удобной форме, пригодной для земледелия или садоводства. Таким образом, изобретение включает в пределах своего объема составы, содержащие соединение, предназначенное для применения в земледелии или садоводстве. Такие рецептуры включают сухие или жидкие формы, например дусты, включая пылевидные субстраты или концентраты, порошки, в том числе растворимые или смачиваемые порошки, гранулы, включая микрогранулы и диспергируемые гранулы, таблетки, текучие вещества, эмульсии, например разбавленные эмульсии или эмульгируемые концентраты, пропиточные составы, например составы для пропитки корней и семян, протравливатели семян, семенные гранулы, масляные концентраты, масляные растворы, инъекции, например, инъекции в ствол, растворы для опрыскивания, дымы и туманы. Подходящие способы и агенты для составления рецептуры предлагаемых соединений для применения в садоводстве или земледелии включают известные для антибиотиков S541. При составлении рецептуры концентрация активного вещества обычно составляет 0,01-99 мас.% и более предпочтительно 0,01-40 мас. %. Промышленные (товарные) продукты обычно приготовлены в виде концентрированных композиций, которые при использовании разбавляют до требуемой концентрации, например 0,001-0,0001 мас.%. При использовании в ветеринарии или в садоводстве и земледелии, и в случае, когда предлагаемые соединения являются продуктами, образуемыми посредством ферментации, желательно использовать весь бродильный бульон в качестве источника активных соединений. Кроме того, может быть пригодным использованием обезвоженного бульона (содержащего мицелий) или мицелия, отделенного из бульона и пастеризованного, или более предпочтительно высушенного. При желании, указанный бульон или мицелий может быть изготовлен в композициях, как указывалось выше, включающих традиционные инертные носители, наполнители или разбавители. Антибиотические соединения предлагаемого изобретения могут вводиться и применяться в комбинации с другими активными ингредиентами. В частности, предлагаемые соединения антибиотика могут использоваться вместе с соединениями антибиотиков S541 или с другими антибиотическими соединениями данного изобретения. Это может возникнуть, например, в случае, когда неочищенные продукты брожения взаимодействуют согласно предлагаемому способу без предшествующего или последующего отделения; указанное сожет быть предпочтительным, например при использовании соединений в земледелии, где важно обеспечить (сохранить) низкую себестоимость продукции. Активность против Nematosp Jrorides dublus. Была определена действенность соединений данного изобретения против Nematospiroides dublus, которым инфицировали мышей. Самку мыши CR/H (18-22 г) заразили личинками 100 L3 larvaed N.dubius и инфекции дали развиться полностью (обычно 3 недели). Затем мышь обработали путем единораэового стоматического приема предлагаемого соединения в дозировке 3/4 титрованной дозы. Соединение вводили в пропилен гликоле. Затем мышь выдержали по крайней мере 3 дня (обычно 5 дней) для того, чтобы убить инфекцию в месте ее развития, и тонкую кишку удалили. Вырезанную часть кишки разрезали ножницами с тупыми концами для того, чтобы освободить от кишечной слизи. Зрелые глисты собрали посредством модифицированного аппарата Baarmanna. Время миграции составляло 5 ч и в течение этого периода мигрирующие глисты были при поддерживающей температуре 37°С. Спустя 5 ч нейлоновую сетку, через которую мигрировали глисты, проверили с помощью лупы, с увеличением в 2 раза. Глисты, собранные на сетке и мигрировавшие, подсчитали для получения общего количества глистов для каждой мыши и сравнили с контрольной группой. Следуя этой методике, было найдено, что при дозе предлагаемых соединений 10 мг/кг общее количество глист для обработанной мыши значительно уменьшилось. Например, соединение примера 3 привело к уменьшению глистов в процентном отношении обработанных мышек к контрольным более чем на 80%. Активность против многообразия экто- и эндопаразитов для различных видов животных. Единственная доза (800 мг/кг) соединения примера 3, принятая внутривенно или введенная подкожно, полностью устраняла глисты у телят, зараженных глистом Cooperia oncophera. В течение 5-дневной обработки кроликов, зараженных личинками Rhlplcephalus appendlculolus с помощью соединения примера 3, эти личинки уничтожались на 97%. Продукт примера 3 проявил абсолютную эффективность, когда его стоматически в дозе 200 мг/кг ввели лошадям, инфицированным Parascaris. Продукт примера 3 был эффективен так же, как инвермектин, когда его вводили стоматически с дозой 200 мг/кг, против личинок и вызревших Namatodirus bonus и взрослых Ostertggia clrcumclncta, Irlchostrongylus axci, Haemonchus contortus, Nematodirus spathiger, Cooperia curtlcei и Trlchostrongylus vltrinus. Продукт примера 3 был абсолютно эффективен, когда его вводили в дозе 150 мг/кг, инфицированным Тохосага. Соединение примера 3, введенное подкожно, проявило эффективность на более чем 98% против Oesophagostomum, которым были заражены свиньи. Оценка действия 23-Дезокси Фактора А (пример 3) на инсектицидную активность. Все концентрации, которые здесь приведены, даны по отношению к активным ингредиентам. Опытные растворы были приготовлены путем растворения активного игредиента в 35%-ном растворе ацетона с водой в концентрации 1000 ч на миллион, затем разбавлены водой, если это необходимо. Tetranychus urticae (P. прямое сопротивление) 2-обозначенным паукообразным клещем. Были отобраны саженцы бобовых растений, которые, развиваясь достигли 7-8 см, их срезали так, что в каждом горшке осталось по одному растению. От листочка, выбранного из всей группы растений, отрезали маленький кусочек и поместили на каждый листок испытуемого растения. Это сделали за два часа до обработки, чтобы позволить клещам передвигаться к испытываемым растениям и откладывать на них яйца. Размер срезанного кусочка изменяется, чтобы получили около 100 клещей на лист. Во время обработки кусочек листа, используемого для переноса клещей, удаляется и выбрасывается. Небольшая доза зараженных растений погружается в опытный раствор на 3 с с перемешиванием и выдерживается под колпачком для высушивания. Растения выдерживают в течение 2 дней, прежде чем делают оценку количества уничтоженных зрелых паразитов, используя для контроля первый листок. Второй листок выдерживают на растении другие 5 дней, прежде чем делают наблюдения за погибшими яйцами и/или вновь появившимися личинками насекомых. Empoasca abrupta, зрелые блошки на листьях картофеля. Листочек бобового растения, лимфской фасоли длиной 5 см, окунули в опытный раствор на 3 с при перемешивании и поместили под колпачок, чтобы высушить. Листок поместили в чашку Петри 10x10 мм, содержащую на дне влажную фильтровальную бумагу. В каждую чашку поместили около 10 зрелых лиственных блошек и провели обработку в течение 3 дней прежде, чем сделали подсчет погибших насекомых. Heliothis virescens. Семядоли хлопка окунули в опытный раствор и высушили под колпачком. После сушки каждую из них разрезали на четвертинки и десять частей поместили отдельно в медицинские пластмассовые чашки объемом 30 мл, содержащие кусочки влажных зубоврачебных тампонов длиной 5-7 мм. Одну третью часть гусениц внесли в каждую чашку и покрыли картонным колпаком Обработку проводили в течение 3 дней, после этого подсчитали число погибших и уменьшение порций повреждений. В соответствии с предлагаемым способом восстановлением соединения формулы IV соединения формулы II может быть получено где R1 и -OR4 имеют указанные значения кроме OR4 - гидроксигруппы; L - группа R OCSO. где R4 - (С1-С6алкил)фенил или фенил, с помощью регенерирующего агента, такого как олово гидрида л кил (например, трин-бу-тилоловогидрида) в присутствии инициатора радикалов, например перекиси, азобисизобутиронитрила или под действием света. Реакцию можно также проводить в соответствующем растворителе, который может быть выбран из группы кетона, например ацетона, простого эфира, например диоксана, углеводорода, например трихлорбензола; или сложного эфира, например этилацетата. Можно также использовать комбинации указанных растворителей либо самых, либо с водой. Указанную реакцию можно проводить при температуре 0-200°С, предпочтительно в интервале 20-130°С. Предлагаемый способ представлен следующими препаратами и примерами. Все температуры приведены при 0°С. Соединения обозначены со ссылкой на исток "Факторы", которые представляют собой перечисленные соединения формулы V и сведены в табл. 2. Факторы А, В, С, D, Е, F можно получить известным способом (см. патент ЮАР № 85/7049). Пример 1. 5-феноксиацетокси-23-{4-метилфенокситиокарбонилокси). Фактор А. 5-феноксиацетокси Фактор А (747 мг) в дихлорметане (10 мл) при 0°С в атмосфере азота обрабатывают пиридином (0,81 мл), а затем 4-метилфенилхлортиоформатом (0,75 г) в дихлорметане (2 мл). Полученный темный раствор тщательно перемешивают в течение 15 мин при температуре 0°С и затем в течение еще 22 ч без охлаждения. Полученную смесь выливают в холодную воду и соляной раствор (рассол) и экстрагируют простым эфиром. Соединившиеся слои простого эфира промывают водой и соляным раствором, высушивают и выпаривают. От-ста ток очищают хроматографией на колонке двуокиси кремния и препаративной жидкостной хроматографией с обратной фазой с получением данного соединения (430 мл), d (ССІ3):3,34 (м, 1Н), 3,58 (м, 1Н), 3,97 (д 10, 1Н), 4,72 (с. 2Н), 5,4 (м, 1Н), 559 (д 6, 1Н), и 6,9 до 7,4 (м, 9Н) ,м/з включает 728, 616,576, 466, 464, 448, 354, 297, 247, 219 и 151. Пример 2. 5-феноксиацетокси-23-де-окси Фактор А. Соединение примера 2 (350 г) и азобисизобутиронитрила (25 мл) в сухом толуоле (20 мл) в атмосфере азота при температуре 120 С обработано по каплям раствором три-н-бути-лоловогидрида (0,5 мл) в сухом толуоле (10 мл), раствор нагревают с обратным холодильником в течение 90 мин, охлаждают и выпаривают. Остаток хроматографируют через двуокись кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (40:1) в качестве растворителя с выходом названного соединения (280 мг), δ (CDCI3): 3,32 (м, 1Н); 3,42 (д 10, 1Н); 3,57 (м, 1Н); 4,71 (с, 2Н); 5,59 (д 6, 1Н) и 6.8-7,4 (м, 5Н), м/з содержит 730, 712, 578, 560. 468, 450, 356, 314, 299, 249, 248, 221 и 151. Пример 3. 23-деокси Фактор А. Соединение примера 2 (240 мг) введено в насыщенный раствор аммония в метаноле (10 мл) при температуре -5°. Полученный раствор перемешивают при температуре 0-10°С в течение 2 ч перед его выпариванием до сухого состояния. Остаток хроматографируют через двуокись кремния, используя смесь дихлорметана с ацетоном (20:1)с получением данного соединения (180 мг), d (CDCl3): 3,27 (м, 1Н); 3,42 (д 9. 1Н): 3.54 (м. 1Н) и 4,29 (mb 6, 1Н), м/з содержит 596, 578, 560,468, 450.356, 314, 299, 249, 248, 221 и 151. Пример 4. 23-Деокси-Фактор А, 5-метилкарбонат (57 мг) [a]D20 + 152° (с 0,6, CHCl3): lmax (Et ОН) 244,5 нм (e28200), n макс (СНВr3) 3530 и 3460 (ОН), 1740 (карбонат) и 1707 см-1 (сложный эфир, d (CDCI3) включает 5.55 (с. 1 Η), 3,82 (с. ЗН), 3.42 (д. МО Гц. 1Н) и 0,69 (д. I 4 Гц, ЗН), из 23-деокси-Фактор А (90 мг) и метилхлорформата (0,3 мл 1 Μ раствора в ди хлорметане). Пример 5. (1) 23-п-Толилокситиокар-бонилокси Фактор В. Фактор В (600 мг) растворители в сухом дихлорметане (5 мл), и к этому раствору добавили сухой пиридин (800 мг) и п-толилхлортионоформат (750 мг). Спустя 24 ч. при температуре окружающей среды смесь вылили в эфир и органический раствор довели до нейтральной среды. В колонку из силикагеля (50 г) загрузили тиокарбонат в дихлорметане, причем колонка работала в том же самом растворителе. Элюирование колонки смесью дихлорметан: эфир (95:5) позволяло выделить основной компонент, который далее очищался препаративно обратимой фазой HP С. Данное соединение было выделено в виде бесцветной пены (417 мн), [a]D203 + 160° (с 0,40. СНСІз), lmaxEtoH 238 нм ( Смаке 35.900. n макс(СНВr3) 3770, 3530 (ОН). 1705 (эфир); δ (CDCI3): 7,18 (д 9 Гц, 2Н), 6,98 (д, 9 Гц, 2Н), 5,49 (кв, 6 Гц, 1Н), 4,02 (д, 5 Гц, 1Н). 3,58 (м, 1Н), 3.31 (м, 1Н), 3,49 (с, ЗН). 2,36 (с, ЗН). 1,81 (с. ЗН), 1,68 (д, 6, ЗН), 1.61 (с, ЗН), 1,53 (с, 3Н). 1,00 (д. 6 Гц, ЗН) и 0,82 (д. 7 Гц, 3Н); m/z = 748 (Μ4). (2) 23+Деокси Фактор В. Температура плавления 184-186°С, [a]D22 + 158°(с 0.40. СНСІ3), lmaxEt oН 238,5 (28,150) и 244,5 нм (emax 30,650) nмакс(CH8r3) , 3450 (ОН) и 1705 см -1 (эфир), d (CDCl3) включая 4,01 (д, 6 Гц), 3,95 (д. 6 Гц, 1Н), 3,49 (с. ЗН),3,29(м. 1Н), 1,80(с.3Н), 1,64 (д. 6 Гц, ЗН), 1.58 (с, 3Н). 1,53 (с, 3Н). 0,93 (д/ 7 Гц, ЗН), и 0,69 (д, 6 Гц, 3Н), т/г = 582 (М"1) из соединения 1 (350 мг) за исключением того, что остаток хроматографировали, используя дихлорметан, затем следовала смесь дихлорметана и эфира (95:5) до получения названного соединения в виде кристаллического твердого вещества при растирании с н-пентаном (по способу примера 2). Пример 6 (1) 5-Ацетокси Фактор С. К раствору Фактора С (338 мг) в сухом пиридине (0,5 мл) добавили уксусный ангидрид (71 мг). Спустя 20 ч, при комнатной температуре смесь вылили в дихлорметан, а раствор обработали до получения нейтрального материала. Полученный таким образом сырой материал очищали с помощью хроматографии над Merck К 60, с размером пор оксида кремния 230-400 меш (28 г). Элюирование колонки раствором дихлорметана и эфира (9:1) привело к получению названного соединения (210 мг), которое было выделено в виде твердого кристаллического вещества с температурой плавления 135°С, [a]D23 = +142° (с 0.64. СНСІ3) l max EtoH 244.5 нм (emax 31.250). nмакс(CHBr3) 3490 (ОН), 1718 (эфир) и 1730 (ацетокси); d (CDCI3). включая 4,03 (д. 6 Гц, 1Н). 3,79 (д, 10 Гц, 1Н), 3.54(д. 10Гц, 1Н),3,31 (м, 1Н).2.14(с.3Н). 1.74 (с, ЗН). 1,66 (д, 7 Гц. 3Н), 1.60 (с. 3Н). 1,52 (с, 3Н). 0,98(д. 6 Гц, 3Н) и 0.78 (д, 7 Гц, 4Н), m/z= = 626 (Μ4). (2) 5-Ацетокси. 23-п-толилокситиокарбо-нилокси Фактор С(430мг), [a]D23+ 133°(с, 0.48, СНСІ3). l max Et oH 237,5 (36,900). 244 (36,900) и 273 нм (emax 2,400), n макс (СНВr3) 3500 (ОН), 1732 (ацетат) и 1710 см-1 (эфир), d CDCl3: 7,17 (д, 8 Гц, 2Н). 6.99 (д, 8,0 Гц. 2Н), 4.04 (д. 6 Гц, 1Н), 3.98 (д, 10 Гц. 1Н), 3,57 (м, 1Н). 3,31 (м, 1Н), 2.34 (с, 3Н), 2,14 (с. 3Н), 1,74 (с. 3Н), 1.66 (д. 6 Гц, 3Н), 1.60 (с. 3Н).1,52 (с, 3Н).0,99 fa, 6 Гц, 3Н) и 0.81 {д, 7 Гц, ЗН), m/z-= 776 (Μ+) из соединения 1 (500 мг) в виде бесцветной пены. (Способ по примеру 7 (1)). (3) 5-Ацетокси, 23-деокси Фактор С (256 мг) с температурой плавления 230°С (с разложением), [a]D23 + 147° (д. 0,32, СНСІ3): lmax Et oH 238,5 (28000). 244,5 нм ( emax30300), n макс(СНВr3) 3440 (ОН),1730 (ацетокси) и 1710 см'1 (эфир). d (СОСІ3): 4.05 Сg , 5 Гц, 1Н), 3,57 (м, 1Н), 3,33 (м. 1Н). 2,15 (с, ЗН), 1,75 (с, ЗН), 1.64(6 Гц, ЗН), 1.59 (С. ЗН). 1,53 (с, ЗН), 0.99 (д. 6 Гц, ЗН) и 0,68 (д, 5 Гц, ЗН). m/z -•610 (Μ4) из соединения 2 (385 мг} после кристаллизации из н-пентана (способ примера 23). (4) 23-Деокси Фактор С (80 мг) [a]D23 + 104° (с 0„56, СНСІз): lmaxEt oH 244,5 нм ( emax28050); n макс(СНВr3) 3540.3450(ОН), 1702 см'1 (эфир), d (CDCl3): 4.28 (m, 6 Гц, 1Н), 3,95 (д, 6 Гц, 1Н), 3,57 (м, 1Н), 3,45 (д, 10 Гц, 1Н). 3,26 (м, 1Н), 1,87 (с, ЗН). 1.65 (д, 7 Гц, ЗН), 1,59 (с, ЗН), 1,53 (с, ЗН), 0,99 (д, 6 Гц. ЗН) и 0,69 (слабо разрешенный дуплет, 5 Гц, ЗН). m/z = 568 (Μ+) из соединений 3 (125 мг) в виде бесцветной пены. Пример 7. Фактор А 5-ацетат и 24-п-толилтионокарбонат. Раствор Фактора А 5-ацетат (4,000 г) в сухом дихлорметане (50 мл) и сухом пиридине (4,9 мл) в токе азота обработали п-толил-хлортионоформатом (3,7 мл) по каплям в течение 10 мин. Полученный темный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 45 ч. Раствор разбавили дихлорметаном (200 мл), промыли последовательно 2 н. соляной кислотой, насыщенным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным рассолом (2 x 200 мл), затем высушили (суль фатом магния), а растворитель испарили и образовалась темно-зеленая пена. Ее вновь растворили в этилацетате (200 мл) и обработали активированным углем. После фильтрования и отпаривания растворителя получали бледно-зеленую пену, которую хроматографировали на диоксиде кремния (Merck Kleselgel 60, с размером частиц 0,040-0,063 мм, размером пор 230-400 меш при атмосферном давлении, с элюиро-ванием смесью гексан-этилацетат (2:1) до получения названного соединения в виде бледно-желтой пены (3,946 Г). lmax(в этаноле) 245 нм (ε34200), n макс СНВг3) 3620-3340 (ОН) 1731 (ацетат), 1710 см -1 (карбонил), d(CDCl3): 6,81 (д, 6 Гц, ЗН), 2,16 (с, ЗН), 2,36 (с. ЗН), 3,34 (м, 1Н), 6,99 (д, 9 Гц, 2Н), 7,20 (д, 9 Гц, 2Н). (2) 23-деокси-Фактор А 5-ацетат. Раствор Фактора А 5-ацетат 23-п-толил-тионокарбонат (10,194 г) в сухом толуоле (100 мл) нагрели до кипения с обратным холодильником в токе азота и обработали a-азо-бис-изобутиронитрилом (509 мг). По каплям добавляли раствор три-н-бутилтин-гидрида (10,25 мл) в сухом толуоле (60 мл) в течение 25 мин, сохраняя при этом кипячение с обратным холодильником. Смесь перемешивали еще 25 мин, затем охладили до комнатной температуры и растворитель испарили до получения желтого масла. Его растворили в ацетонитриле (600 мл) и промыли гексаном. Растворитель испарили до получения белой пены, которую хроматографировали на диоксиде кремния (Merck. Kleselpel 60, с размером частиц 0,040-0,063 мм и диаметром пор 230-400 меш), элюировали смесью гексан-этилацетат (4;1) до получения названного соединения (2,442 г), [a]D22 + 144° (с 0,43 хлороформ), lmax(в этаноле) 245,5 нм( e29650), n макс (СНВr3) 34203340 (ОН). 1732 (ацетат), 1710 см-1 (карбонил), d(CDCl3) включает 0,68 (д, 5 Гц, ЗН), 2,16 (с, ЗН), 3,32 (м, 1Н). Пример 8. (1) 5-Ацетокси Фактор D (923мг) [a]D21 + 143°(с0,9,СНСl3 lmax 239 (28700) и 245 нм (emax 31000) n макс, (СНВr3) 3490 (ОН) 1730 и 1710 (эфир), d(CDCl3) 0,81 (д, 7 Гц, ЗН), 0,9 (д. 7 Гц, ЗН), 1,00 (т, 7 Гц, ЗН). 1,53 (с, ЗН), 1,59 (с, ЗН), 1,75 (с, ЗН), 2,16 (с, ЗН), 3.32 (м, 6Гц, 1Н), 3,65 (м. 1Н), 4,04 (д, 6Гц, 1Н), и 5.53 (м. 2Н), m/z = 640 (Μ4), из Фактора D (205 г) и уксусного ангидрида (0,47 мл). (2) 23-п-толилокситиокарбонилокси Фактор О5-Ацетат(610 мг). [a]D21 + 132° (с 0.4, СНСІ3) lmaxEt oH 238,5 (34800) и 244,5 нм (emax35400). n макс (СНВr3) 359 и 3560 (ОН) и 1730см-1 (эфир); d(CDCl3)0,81 (д,7Гц,ЗН). 0,99 (д, 7 Гц. ЗН), 1,00(m, 7H, ЗН), 1.53 (с, ЗН), 1,6-1 (с. ЗН), 1,75 (с, ЗН), 2.15 (с, ЗН), 2,36 (с, ЗН). 3,33 (м, 1Н), 3.98 (д, 10 Гц, 1Н). 4,04 (д, 6 Гц. 1Н), 5.5-5.6 (м. 2Н). 6.98 Сд. 9 Гц. 2Н) и 7,19 (д, 9 Гц, 2Н), m/z = 790(M+). Изацетокси Фактор D (776 мг) и п-толилхлортионо-формата (0,75 мл) (способ см. пример 7). (3) 5-Ацетокси, 23-деокси Фактор D (367 мг). Часть этого образца перекристаллизовывали из гексана до получения аналитически чистого вещества с помощью HPLC с температурой плавления 222-224°С [a]D21 + 134° (с 0.9, СНСІ3). lmaxЕtoH 245 нм ( emax32400), n макс(СНВr3) 3550, 3460 (Н), 1735 и 1710 см -1 (эфир) d (CDCI3) 0,69 (д. 6 Гц, ЗН), 1,00 (д, 6 Гц, ЗН), 1,00 (т, 7 Гц, ЗН), 1.53 (с, ЗН). 1.59 (с, ЗН), 1,76 (с. ЗН), 2.14 (с, ЗН). 3.31 (м. 1Н), 3,44 (д, 10 Гц, 1Н)), 4.05 (д, 6 Гц, 1Н) и 5,55,6 (м, 2Н), т/г = 624 (М4). Из 5-Ацетокси, 23-п-толилокси-тиокарбонилок-си Фактор D (582 мг) (способ см. пример 7). (4) 23-Цеокси Фактор D (159 мг). [a]D21+ 123° (с 0,5. СНСІ3), lmaxЕt оН 244,6 нм emax28300); nмакс (СНВr3) 3550 и 3460 (ОН) и 1705 см -1 (эфир), d (CDCI3) 0.69 (д, 6 Гц, ЗН), 1,00 (д, 6 Гц, ЗН), 1,00 (6,7 Гц, ЗН). 1,53 (с ,3Н), 1.59 (с, ЗН), 1.87 (с, ЗН), 3,26 (м, 1Н), 3,44 (д, 10 Гц, 1Н). 3.96 (д, 6 Гц, 1Н). и 4.28 (т, 6 Гц, 1Н). m/z - 582 (M+). Из 5-ацетокси, 23-дигидро Фактор D (232 мг).