L-alрha,eрsilon-диамінокапронової кислоти 28-/3-ацетокси-2-метилбутират/есцигенін-3-0-/2′-0-beta-d-ксилопіранозил-4′-0-beta-d-глюкопіранозил/ глюкуронідат

\--а, £ -диаминокапроновой кислоты 28(3-ацетокси-2-метилбутират)-эсцигенин-3-0-(2'-0- /?-О-ксилопиранозил-4Ч)-/ї -D-гпюкопиранозил) глюкуронидат(Ь-лизина эсцинэт) формулы: ю ел о СИ он обладающий антиэкссудативным и анальгетическим действием. Изобретение относится к созданию новых химических соединений, а именно к L- а, є -диаминокапроновой кислоты 28-{3ацетокси-2-метилбутирзт)-эсцигенин-3-0-(2 з 22509 0-/^О-ксилопиранозил-4'-0^-О-глюкопиранозил) глюкуронидоту {L-лизина эсцинату), обладающему антиэкссудативным и анальгетиче ским действием и имеющему следующую структурную формулу. I с - соо (С'М2)4 НО он и который является водорастворимой солью эсцина и аминокислоты - лизина. 20 Арсенал отечественных лекарственных средств антиэкссудативного действия мал, поэтому поиск новых физиологических веществ, обладающих подобным действием и создание на их основе новых высокоэффек- 25 тивных препаратов представляет значительный интерес и является актуальной проблемой Структурным и фармакологическим аналогом заявляемого соединения является эс- 30 цин, представляющий собой терпеновый сапонин, получаемый из плодов каштана конского К недостаткам структурного и фармакологического аналога - эсцина следует отне- 35 сти его малую растворимость, что значительно снижает биодоступность лекарственных средств, в состав которых он входит, что, в свою очередь, приводит к снижению специфической активности. Кроме 40 того, в определенных условиях (большая доза, длительное применение) зсцин может вызывать местное раздражение с развитием грануляционной ткани. В основу изобретения поставлена зада- 45 ча создания нового химического соединения L- а, Е-диаминокапроновой кислоты 28-{3ацето кси-2-метил бути рат}-эсцигени н-3-О-(2 ЧЬ^ЗЧ>ксилопиранозил-4'-Оу?-О-глюкопиранозил) глюкуронидата (L-лизина зсцинатэ), облада- 50 ющего антизкссудативной и анальгетмческой активностью Поставленная задача решается путем вззимодейсівия лизина - основания с эсциноми получение при этом водорастворимой 55 соли. Технический результат, получаемый при осуществлении изобретения выражается в повышении биодоступности нового химического соединения, снижении побочных отрицательных эффектов и расширении арсенала лекарственных препаратов. Изобретение осуществляется следующим образом. П р и м е р 1. Синтез L-a , Е -диаминокапроновой кислоты 28-(3-ацетокси-2-метилбутират}-эсцигенин-3-0-(2'-0-/?-0-ксилопиранозил~4>-0-/?-D-глюкопиранозил) глюкуронидата (L-лизина эсцината) 50,0 г эсцина (10% избыток от теоретически необходимого количества) растворяют в 1500 мл этилового спирта. К этому раствору при работающей мешалке прибавляют по каплям 230 мл концентрата лизина основания, содержащего 76,8 г L-лизина основания, после чего р е а к ц и о н н у ю смесь продолжают перемешивать еще 10 минут. Образовавшийся L-лизина эсцинат в виде осадка отделяют фильтрованием под вакуумом, промывают 300 мл спирта этилового и 200 мл ацетона, сушат в сушильном шкафу под вакуумом при комнатной температуре в течение 24 часов Получают 50 г целевого продукта (выход составляет 90% от теоретически возможного) L-лизина эсцинат представляет собой белый с кремовым оттенком кристаллический порошок, легко растворимый в воде, очень малорастворимый 8 спирте и практически нерастворимый в ацетоне. Температура плавления 232-238° С (с разложением) [a]D208,4° (0,5% раствор в воде). 22509 ИК-спектр: 3390см~1; 1720 см"1; 1620 см' 1 . 1 1410 см"'. Спектр ДОВ: [ M ] D - -104,6°. [М]5по = -192,1°. [ М ] 4 0 0 = -364,0°, [М]зоо = "591.6 ri . М.м. = 1290,5. 5 Элементный состав, теоретически, %; получено, % N С О — ' 2.2 55,8 8,5 2.6 55.6 8.5 Изучение фармакологических свойств Lлизина эсцината проводили сравнительно с исходным веществом - эсцином (структурным аналогом) для выявления преимуществ заявляемого соединения. Для оценки фармакологический активности заявляемого соединения были выбраны разные тесты, способные наиболее полно его охарактеризовать и позволяющие выявить особенности и отличия сравнительно с исходным продуктом. С этой целью проводилось исследование антиэкссудативного эффекта при овальгуминовом воспалении и антиэкссудативного и анальгетического эффекта при травматическом воспалении, а также определялась острая токсичность заявляемого средства. Антиэкссудативный эффект отчетливо реализуется при различных видах острого воспаления, в том числе - при ооальбуминовом отеке стопы крыс. Опыты проводились на 91 нелинейных крысах-самцах. Экссудатианый отек вызывали субплантарным введением в правую заднюю стопу водного раствора стандартного яичного альбумина. Изучаемые препараты вводили внутрибрюшинно. Эффект оценивали по результатам 2-го часа регистрации по степени ингибирования прироста отека стопы на фоне препаратов с р а в н и т е л ь н о с контролем нелеченными животными. Данные исследований представлены в табл.1. Данные, представленные в табл.1, свидетельствуют, что антиэкссудативная активность заявляемого средства при одном из видов острого воспаления .(при овальбуминовом отеке) по уровням значений Э Д 5 0 превосходит действие эсцина при внутрибрюшинном введении. Полученные данные подтверждают более активное всасывание через брюшину L-лизина эксцината по сравнению с эсцином, что свидетельствует о более высоком уровне биодоступности заявляемого соединения. Травматический отек является наиболее адекватной и патогномонической моделью патофизиологических процессов, которыми 10 15 20 25 30 35 40 45 сопровождается травматизация тканей о роальной жизни человека. Вместе с том рчд существенных патогенетических признаков этой патологии весьма близки по своему характеру к островоспалительным явлениям на почве венозной патологии, при которой эсцинсодержащие препараты находят широкое применение. Критериями эффективности лечения служили, антиэкссудативный {противоотечный) и знальгетический эффекты, а также динамика рассасывания постгрэпматической гематомы. Опыты проводились на нелинейных крысах-самцах. Величину антиэкссудативного эффекта определяли по степени ингибирования прироста отека стопы на фоне препаратов с р а в н и т е л ь н о с контролемнелеченными животными. Анальгетический эффект оценивали по изменению порога болевой чувствительности при сдавливании травмированной стопы. Интенсивность регресса посттравматической гематомы оценивали по уменьшению ее синюшности в баллах. Результаты исследований представлены в табл.2. Данные, представленные в табл.2, показывают, что L-лизина эсцинат при внутр и б р ю ш и н н о м введении и н а к о ж н ы х аппликациях существенно ослабляет степень экссудзтивной реакции при травматическом воспалении стопы крыс. Иа фоне лечения L-лілзина эсцинатом отмечаются снижение болевой чувствительности и ускорение регресса поеттравмзтической гематомы, Острую токсичность заявляемого средства изучали на нелинейных мышах обоего пола и крысах самцах. В контрольных опытах определяли также острую токсичность эсцина. В процессе эксперимента использовали различные пути введения сопоставимых доз изучаемых ф и з и о л о г и ч е с к и активных веществ: в желудок, внутрибрюшинно и внутривенно. Учет результатов осуществляли в течение 7-Ю дней, начиная фиксацию данных с первых 2-3 час и опре 50 деляя среднесмертельные дозы. Данные об уровне среднесмертельных доз (ЛДбо) изучаемых физиологически активных веществ представлены в табл.3. 55 Из табл.3 следует, что по уровню Л Д 5 0 при внутрижелудочном и внутрибрюшиином введении заявляемое средство (L-лизина эсцинат) обладает большей биодоступностью и меньшей токсичностью - при внутривенном в сравнениис эсцином. 8 22509 анальгетический эффекты в сравнении с его структурным и фармакологическим аналогом -эсцином. Таким образом, результаты исследований свидетельствуют, что L-лизина эсцинат (водорастворимая соль эсцинэ) проявляет более выраженный антиэкссудативный и Таблицаї Антиэкссудативная активность L-лизина эсцината и эсцина при овальбуминовом отеке стопы крыс • Препараты, путь Доза, мг/кг п Эффект, %(*) введения L-лизина эсци 1.0 ю 2.0 12 21,2 27.7 нат внутрибрюшинно • ' • г 1 : - ' - ' * * ! • : . • ••.'••, - г V Эсцин,внутрибрюшунно СЕ-ЭСЦИН. • 5.0 10.0 30,0 2,0 5.0 15,0 0.5 • • ' ••'. V 1 2 it ю .. v 20 20 20 • " • ' . 5.36 0 39,1 80.4 20 1,0 2.0 ' 70,3 83,0 . 12 12 12 4.0 внутривенно 58,1 ••• ЭД50. МГ/КГ . . 20 40 ; 80 90 п- число животных; (*) - по результатам на втором часу измерений. 8.98 ід •. • Таблица 2 Влияние L-лизина эсцинатз и эсцина на отек, боль и гематому при травматическом воспалении стопы крыс Ингибирующий эффект (%) относительно нелеченнОГО контроля Препараты, путь введения, дозы ': * Сутки • 1 час 1 L-лизина эсцинат, анутрибрюшинно, 2 мг/кг L-лизина эсцинат. внутрибрюшинно, (***) (*) 10(**) 5 мг/кг 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 36,7 63,9 51,5 50,0 53,2 46.9 64,8 58,1 _ 92,5 11,1 59,4 32,1 22,0 44,4 37,1 77,2 36.7 55,2 60,9 66,3 80,3 92,4 100,0 53,6 _ 55,9 21,4 42,3 28,2 10,0 13,6 21,4 77,3 — — 37,9 (*) 9 (**) 2 38,0 38,0 43,4 52,2 50,5 62,0 50,5 54.3 60.0 36,4 40,8 40,2 19,6 13.0 23.1 24,2 49,8 39,9 13,9 1.8 4,4 0 6,0 7,4 4,3 0 16,2 21,7 7,7 6,8 3,0 1,5 0 17,2 1.4 15,9 _ 0 (***) 'Л о СО L-лизина эсцинат, накожно, 7 32,0 . 31,4 200 мг геля Эсцин, внутрибрюшинно, С) * 9 (**) 2 мг/кг