Спосіб одержання 6-бензилоксизаміщених ізопропілових ефірів beta-карболін-3-карбонової кислоти

(ІЗ) (II) (85%) сложного изопропиловото зфира б-беиз^локси^-метоксигле^ил1,2,3,4-тетоагидро-/? -карболин-3-карбонобоновой кислоты с точкой плавления 184 вой кислоты как масло. °С. С) 3,3 г (8,5 ммогсь) сложного Сложный изопропиловый эфир 6-(3ловогс эфира 0-еензилокси-4-н ) 9 тілл-1, 2, 3, 4-тетрзгидро-/? -карбо- 45 болын-3-кэрбоновой кислоты сточкой плавлин-З-карСоновой кислоты растворяют е 150 ления 180-183°С. мл хлористого метилена, смешивает з атСложный изопропиловый эфир 6-(3мосфере аргона с 3,9 ып тризтилзмина и хлорЬеьзияокс1л}-4-мегаксиметил-^ -карбоохлаждают до • >5°С. В этот рзетво1? непреяин-З-карбоноаой кис/юты с точкой рывно закапывают прш этой температуре S плавления 188~170°С. G раствор 3,2 мл (25,6 ммоль}трет6утилгипох~ Изопропиловый офир 6~(3-метоксибенлоридз в 50 мл хлористого метилена. По змлокси)-4-метоксимет!МЛ-^-карболин-3-карокончании добавки 10 мин пе боновой кислоты Т.пл. ^6С смешиваю7 с 2,5 ып пжзтялэммча Изопропиловый эфир &-тают 2 ч npw комнатной температуре. За- '5 локси)-4-мєтоксиметил-уЗ-кзр6о/іин-3-кзрботем концентрируют наполовину и один раз иовой кислоты. Т.пл. 21В-222°С. экстрагиру-от встряхиванием с раэЬааленИзопропилооый эфир 6-(4~г5ромбензи|)ым раствором ЗЕ^миакэ. Органическую фазу сушат, фильтруют и сгущают. Остаток ноеой кислоты. Т.пл WQ-19O°C 13475 Изопропиловый эфир 6-(3-цианобензилокси)-4-метоксиметил-/^карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 194-200°С. Изопропиловый эфир б-(2-цманобензилокси)-4-метоксиметил-/ї-карболин~3-карбо- 5 новой кислоты, т. пл, 168-172°С. Изолропиловый эфир 6-(2-6ромбензилокси)-4-метоксиметил-/?-карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 148-151°С. Сложный изопропиловый эфир 6-(4- 10 фторбензилокси}-4-метоксиметил^? -карболин-3-карбоновой кислоты с точкой плавления 16СЫ63°С. Сложный иэопропиловый эфир 642,4дихлорбензилокси}-4-метоксиметил-/3 -кар- 15 болин-3-карбоновой кислоты с точкой плавления 156-159°С. Сложный иэопропиловый эфир 6-(4-метилбензилокси)-4-метоксиметил- /?-карбо20 лин-3-карбоновой кислоты. Сложный иэопропиловый эфир 6-(3-метилбензилокси}-4-метоксиметилт9 -кзрболин-3-карбоновой кислоты. Сложный изопропиловый эфир 6^2-мвтилбензилокси)-4-метоксиметил-/? -карбо- 25 лин-3-карбоновой кислоты. Циклогексиловый эфир 6-бензилоксиЧметоксиметил-/? -карболинкарбоновой кислоты, т.пл. 177°С. 2-Буплловый эфир 6-(3-фторбензилокси)- 30 4-метоксиметилт5-карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 145 С. Неопентиповый эфир 6-6ензилокси-4метоксиметил- Й-карболин-3-карбоновой 35 кислоты, т.пл. 192 С. Изобуї иловый эфир 6-бензилокси-4-мотоксиметил- ^-карболин-3-карбоновой кислоты, т.пл. 157-161°С. Испытание In vivo проводят следующим 40 образом; Группам мышей иньецируют испытуемое вещество в различных дозировках и как правило интраперитонально. Через 15 мин интрааенозно дают 3Н-флунитразепам. Через 20 мин мышей умерщвляют, удаляют 45 переднюю часть мозга и измеряют подсчетом сцинтилляций связанную на мембране мозга специфическую радиоактивность. ED50 - значение определяют по кривой доза/активность. Камин-тест проводился по 50 методу Polssler yr.et.al. Med, exp, 3, 1960, стр. 81-84. Группам из восьми молодых самок мышей вида NMR1 (25-30 см) на дозу вводят i.p. за 30 мин перед испытанием. Во время теста 55 всякий раз одну мышь помещают в снабженную желобками (пазами) плаксигласовую трубку диаметром 3 см и длиной 30 см и осторожно подталкивают ее сзади палочкой, 8 обернутой ватой, причем трубку о это время поворачивают вертикально к плоскости стола. Таким образом мышь оказывается головой вниз на дне трубки. Если мышь не добирается до верха трубки за 60 CSK, ее считают атаксичной. Вводят около шести доз с дозами и выше, и ниже значения EDso. Значение EDso соответствует дозе, вызывающей атаксию у 50% мышей, рассчдетайной по аналитической программе EDVFP 0189 фирмы ШерингАГ. Известные изопропиловые эфиры $~ карболин-3-карбоновой кислоты по сравнению с соединениями s соответствии с изобретением обладают значительно худшей способностью связывания с бензодиазепиновым рецептором. Тест распространения проводят следующим образом. 0,5 мл суспензии необработанных нежидких полей мозга крыс инкубируют в 25 мм КН2РО4, ОН = 7,1 /5-10 мг ткани /проба/ при 0°С с Н-флунитразепамом (удельная активность 87 CI (ммоль, 1 нм). После инкубации фильтруют суспензию через стеклянный фильтр, остаток дважды промывают колодным буферным раствором и измеряют радиоактивность сцинтиллятором. Опыт затем повторяют, однако таким образом, что перед добавлением радиоактивномеченного бензодиазепина добавляют определенное количество или избыточное количество соединения, проникающую способность которого определяют. На основе полученных значений рассчитыаагат значение YCso. Далее, целевые продукты устойчивы по отношению к эстеразе. Увеличенную длительность измеряют следующим образом. Испытуемое вещество (1 мг/50 мл этанола) добавляют до рН 7,3 с помощью фосфатного буфера Krebs-Hensdeit-Rlnger и соединяют с 750 мл печеночного гомогената при комнатной температуре и перемешивают. 250 мл этой смеси отбирают для определения нулевого значения и смесь инкубируют при 37°С при длительном перемешивании на водяной бане. Аликвотные части к 250 мл отбирают через 30, 60,90 и 120 минут, экстрагируют 3 мл диэтилового эфира после пятиминутного встряхивания, затем центрифугируют 10 ммнут при охлаждении, замораживают, декантируют эфир и сушат в токе сухого азота. Остаток растворяют в 200 мл эфира и раствор анализируют хроматографически. Применяемую печень получают препарацией Xaemangloma, которую сразу охлаж 10 13475 дают до -90°С. Части замороженных печеночныч тканей оттаивают и гомогенизируют в 4 частях 0,25 молярного раствора сахарозы в смесителе Roner-Elvehjem, Гомогенизэт фильтруют через ткань и разбавляют таким же раствором сахарозы 1:10 (йес:объем). Аликвотные части раствора хранят при -18°С. Результаты этого испытания приведены в таблице, причем количество испытуемого 10 вещества указано а % нулевого значения, которое (количество) не разрушено расщепляющим энзимом печени. Таким образом, предложенный способ позволяет получать новые б-бензилоксиэамещенные изопропиловые эфиры /?-карбонил-3-карбоновой кислоты общей формулы I, обладающие ценными фармакологическими свойствами. Таблица 1 СН;О- РХТГО Заместитель в 6- положении R Торможение связывания н флунитразепана in vftro мг/мл 1 2.7 4-СМз 2-а 3.6 4-F 4-ON 3-СНз 0,6 0,59 0,28 1.2 н изопрориловый эфир 5-{Т- /4хлорфеїіил/-згсксм}-4-метоксимвтілл-р-карболин-З-карбоновой кислоты /2/ Таблица 2 ІІ Заместитель в 6-положеним R R % остатка после инкубации гомогенизата печени 6-положение 2-СНз 5-положение 4-F Н -СН/СНз/2 -СН/СНз/2 -СН/СНз/2 76 66 96 5 13475 Упорядник Замовлення Текред М.Моргентал 4120 Коректор 0 Обручзр Тираж Підписне Державне патентне відомство України 254655, ГСП, КиТв-53, Львівська пл., 8 Відкрите акціонерне товариство "Патент", м. Ужгород, вул Гагаріна, 101