Спосіб діагностики раку шлунка

А 61 В 10/00 СПОСІБ ДІАГНОСТИКИ РАКУ ШЛУНКУ Винахід відноситься до медицини, а саме до діагностики і може бути використаний для раннього виявлення злоякісних новоутворень шлунку. Відомі способи діагностики раку шлунку, які грунтуються на гістологічному аналізі ділянок пухлини [1]. Недоліком цих способів є травматичність способу отриманя дослідного матеріалу та тривалий час його підготовки до проведення дослідження. Найбільш близьким до технічної суті пропонованого винаходу і прийнятому за прототип є спосіб діагностики раку шлунку, як ий включає мікроскопічне , морфологічне дослідження мазку із клітин пацієнта, складається із приготування мазку та цитологічного аналізу клітинного матеріалу [2]. Недоліком прототипу є травматичність та низька точність діагностики методу, яка обумовлена низькою вірогідністю наявності в мазку діагностічно значущих клітин, схожістю клітинних реакцій ештелію при онкозахворюванні та реактивних (запальних) станах. Завданням винаходу є розробка такого способу діагностики раку шлунку, який за рахунок узяття клітин бука.іаяого ештелію забезпечує зниження травматичності способу дослідження, а за рахунок використання об'єктивних критеріїв параметрів клітин більшу точність діагностики. Поставлене завдання вирішується тим, що в способі діагностики раку шлунку, який включає мікроскопічне, морфологічне дослідження мазку із клітин пацієнта, згідно з винаходом для приготування мазку використовують клітини букального епітелію і у випадку коли при морфометричному дослідженні отримують слідуючі зміни середніх значень параметрів клітини : зменьшення площі більш ніж у 1,5 рази, збільшення площі ядра та оптичної щільності цитоплазми і ядра більш ніж у 1,5 рази, діагностують рак шлунку. Приготування мазку із клітин букального епітелію різко знижує травматичність забору матеріалу, так як звичайним шпателем беруть зіскоб зі слизової оболонки щоки пацієнта, а проведений морфометричний аналіз: зменьшення середніх значень площі клітин, збільшення площі ядра та оптичної щільності цитоплазми і ядра; дозволяє підвищити точність діагностики, так як використовують об'єктивну оцінку морфометричних параметрів клітин та математичну обробку результатів дослідження. Вказані в формулі винаходу межі зміни параметрів клітин отримані в результаті морфометричного дослідження на 23 хворих. Результати дослідження представлені в таблиці. Спосіб виконують наступним чином. Перед процедурою пацієнт старанно полоще ротову порожнину водою. Потім у ньго шпателем беруть зіскоб букального епітелію, і наносять на предметне скло, фіксують 10 хвилин у 96 % спирті, фарбують 15 хвилин по Романовському та проводять морфометричний аналіз при якому вимірюють середні значення площі та оптичної щільності цитоплазми і ядра у 10 випадково обраних клітин в різних полях зору при збільшенні мікроскопу 400. Подальшу стандартизацію зображення проводять за допомогою аналізатору мікроскопічного зображення, який збільшує розмір клітин до величин придатних для об'єктивного аналізу. Діагностика захворювання базується на порівнянні середніх значень морфометричних параметрів клітин букального епітелію, що характеризують показники пацієнта, які відповідають захворюванням, що діагностуються (рак шлунку і виразка шлунку). Коли при морфометричному дослідженні отримують слідуючі зміни середніх значень параметрів клітини: зменьшення площі більш ніж у 1,5 рази, збільшення площі ядра та оптичної щільності цитоплазми і ядра більш ніж у 1,5 рази, діагностують рак шлунку. Приклад 1. У хворого Р. після старанного полоскання ротової порожнини брали зіскоб букального епітелію, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, який фіксували у 96 % спирті та фарбували 15 хвилин по Романовському. В мікроскопі візуально оцінювали препарат, та за допомогою компьютера, аналізатора мікроскопічного зображення і пакету програм для морфомеіричного аналізу клітин, проводили виміри епітеліоцитів. При цьому середні значення параметрів клітин складали: площі клітін 519,8 ± 14,7 умов, од., площі ядра - 30,0 ± 0,8 умов, од., оптичної щільність цитоплазми 35,8 ± 1,2 умов, од., відповідно ядра - 19,0 ± 0,6 умов, од. (саме світле місце на препараті дорівнює 50,0 умов. од.). Проведений аналіз морфометричного дослідження клітин букального епітелію пацієнта дозволив отримати слідуючі зміни середніх значень параметрів клітини :зменьшення площі більш ніж у 1,5 рази, збільшення площі ядра та оптичної щільності цитоплазми і ядра більш ніж у 1,5 рази, що дозволило встановити діагноз ракового ураження шлунку. Гістологічний та цитологічний аналіз підтвердив діагноз аденокарциноми шлунку. Приклад 2. У хворого С: після старанного полоскання ротової порожнини, брали зіскоб букального епітелію, наносили клітинний матеріал на предметне скло, робили мазок, який фіксували у 96 % спирті та фарбували 15 хвилин по Романовському. В мікроскопі візуально оцінювали препарат та проводили виміри егателіоцитів. При цьому середні значення складали: площі клітін - 913,1 ± 15,0 умов, од., площі ядра - 22,1 ± 0,8 умов, од., оптична щільність цитоплазми 48,1 ± 1,6 умов, од., відповідно ядра - 34,0 ± 0,7 умов, од., що дозволило за результатами представленого морфометричного аналізу клітин букального епітелію встановити відсутність у пацієнта ракового ураження шлунку. Гістологічний та цитологічний аналіз підтвердив діагноз виразкової хвороби шлунку. Запропонований спосіб діагностики застосовано у 23 хворих. Результатами досліджень встановлено діагноз раку шлунку у 14 хворих, у 9 хворих виразкову хворобу шлунку. За результатами перевірки гістологічний аналіз показав, що встановлені ракові діагнози повністю підтвердились, в той час як із 14 хворих, яким був поставлений діагноз раку шлунку, за способом прототипу у 3 хворих діагноз не підтвердився. Таким чином, порівняння з прототипом показує, що застосування пропонованого способу дозволяє знизити травматичність отримання дослідного матеріалу, а також підвищити точність встановлення діагнозу. Таблица Середні морфометричні значення клітин букального ештелію умов. од. (п = 23) груп хворих М ± m (р < 0,05). Щільність Щільність клітин ядра клітин ядра 21,5 + 0,7 45,7+1,3 31,0 ±0,8 15,4 ± 0,5 46;8 ± 0,9 32,3 ± 0,9 774,5 ± 18,9 20,9 + 0,7 47,8 ± 1,4 31,1 ±0,6 758,9 + 15,7 19,9 ±0,9 48,4 + 1,5 30,7 + 0,6 913,8 ±15,0 22,1 ± 0,8 48,1 + 1,6 34,0 ± 0,7 749,6 ±16,4 20,0 ± 0,9 44,0 ± 1,3 33,2 ± 0,8 789,5 ± 17,3 19,2 ± 0,5 47,6 ±1,5 31,7 ±0,7 894,4 + 22,3 23,3 ± 0,7 47,2 ±1,6 33,4 ±1,0 849,6 ± 23,0 М ± m групи Площа 883,4 ± 22,5 хворих Виразка шлунку Площа 878,0 ±21,0 Групи 21,0 ± 0,8 45,2 ±1,6 32,4 + 1,0 831,8 + 20,1 20,1 ±0,9 46,2 + 1,5 31,8 + 0,7 468,4 + 20,2 29,6 + 0,7 34,7 ±1,3 15,4 + 0,5 507,3 ± 17,6 32,2 ± 0,8 36,9+1,2 20,1+0,6 477,3 ± 15,9 30,0 + 0,6 35,6 ±1,3 22,4 + 0,4 524,9 ± 16,4 32,2 ±1,0 34,9 ±1,2 15,8 + 0,4 484,7 ±15,7 31,8 ±0,9 35,3 + 1,4 20,2 + 0,6 542,3 ± 14,9 33,2 + 0,8 34,7+1,1 21,8 + 0,5 536,5 ± 19,5 32,7 + 0,7 36,0 + 1,5 21,8 + 0,6 Рак шлунку 500,0 ± 19,3 35,6 ±1,3 20,5 ± 0,3 496,0 ±18,6 29,9 ± 0,8 34,9 ±1,2 17,3 + 0,3 531,3 + 21,1 32,9 ± 0,7 36,4 ±1,0 22,2 ± 0,5 488,5 ± 15,4 30,5 ±0,5 33,9 ±1,2 16,1 ±0,5 444,9 ± 12,8 29,6 ± 0,6 33,8 ± 1,0 16,9 ±0,4 519,8 ±14,7 30,0 ± 0,8 35,8+1,2 19,0 ±0,6 526,7 ±15,5 M ± m групи 30,7 ± 0,9 33,3 ± 0,7 36,5 ±1,3 21,2 + 0,7 503,4+15,6 30,8 ± 0,8 34,7 ±1,1 19 + 0,7 ДЖЕРЕЛА ІНФОРМАЦІЇ: 1. Fenoglio-Preiser СМ., Latitz P.E., Listrom M.B. e.a. Gfstrointestina! Patology. An atlas and text. -Raven press.-New York 1989.- 892 с 2. Руководство по цитологической диагностике опухолей человека. Под ред. АС.Петровой, М.ГІ.Птохова.- М.- Медицина, 1976. - 304 с- прототип.