Спосіб одержання 10-дезацетил-баккатину ііі ( варіанти )

1. Способ получения 10-дезацетил-баккатина ІІІ из водного экстракта различных частей тиса (Taxus sp.), отличающийся тем , что: 1) измельченные части тиса обрабатывают водой, 2) отделяют водный раствор, содержащий 10дезацетил-баккатин III от суспензии растительной массы, 3) экстрагируют 10-дезацетил-баккатин III из водного раствора с помощью органического растворителя, 4) отделяют органический экстракт, содержащий 10-дезацетил-баккатин III, от водной фазы, 5) удаляют растворитель из полученного таким образом органического экстракта, 6) селективно кристаллизуют 10-дезацетил-баккатин III из полученного таким образом остатка в органическом растворителе, после чего 7) выделяют 10-дезацетил-баккатин III в виде очищенного вещества. 2. Способ получения 10-дезацетил-баккатина III из водного экстракта различных частей тиса (Taxus sp.), отличающийся тем, что: 1) обрабатывают водой измельченные части тиса ( Taxus sp.), 2) отделяют водный раствор, содержащий 10дезацетил-баккатин III, от суспензии растительной массы, 3) адсорбируют водный раствор, содержащий 10дезацетил-баккатин III, на подходящем носителе, 4) десорбируют 10-дезацетил-баккатин III с помощью органического растворителя, 5) удаляют органический растворитель десорбента, 6) селективно кристаллизуют 10-дезацетил-баккатин ІІІ из полученного таким образом в органическом растворителе остатка, 7) выделяют 10-дезацетил-баккатин ІІІ в виде очищенного вещества. 3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что измельченные и, при необходимости, высушенные части тиса перемешивают с водой при температуре, составляющей от 20 до 65 °С. 4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что измельченные, при необходимости, высушенные части тиса получают при операциях измельчения и, при необходимости, высушивания, которые могут предшествовать или следовать за операциями замораживания и размораживания свежих частей растений или входят в операции замораживания и размораживания свежих частей растения. 5. Способ по п. 3, отличающийся тем, что используют от 2 до 10 литров воды на 1 кг измельченных и высушенных частей растения. 6. Способ по любому из пп. 3-5, отличающийся тем, что используют деминерализованную воду. 7. Способ по любому из пп. 3-5, отличающийся тем, что его осуществляют в условиях ультразвука. 8. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем , что водный раствор, содержащий 10-дезацетил-баккатин III, отделяют от суспензии растительной массы путем фильтрования, центрифугирования или отстаивания. 9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что водный раствор, содержащий 10-дезацетил-баккатин III, экстрагируют органическим растворителем, выбранным из простых эфиров и сложных алифатических эфиров. 10. Способ по п. 9, отличающийся тем, что органический растворитель выбран из метил-трет.бутилового эфира, этил-трет.бутилового эфира, метил-нбутилового эфира, метил-н-амилового эфира, этилтрет.амилового эфира, трет.бутилизопропилового эфира, этилизобутилового эфира, трет.бутил-нпропилового эфира, этил-н-гексилового эфира, этилацетата, пропилацетата, изопропилацетата, бутилацетата, трет.бутилацетата, метил-трет.бутилацетата, трет.бутил-пропионата и трет. амилацетата. (19) (21) 95038243 (22) 04.10.1993 (24) 15.08.2001 (31) 92/11745 (32) 05.10.1992 (33) FR (86) PCT/FR93/00971, 04.10.1993 (46) 15.08.2001, Бюл. № 7, 2001 р. (72) Марграфф Родольф, FR (73) РОН-ПУЛЕНК РОРЕР С.А., FR (56) 1. Journal of natural products, 1986, vol. 49, № 4, pp. 665–669. 2. Comptes Rendus de L'academie des Sciences. Serie 11: Mecanique, Physique, Chimie, Sciences de L'univers, Sciences de la Terre, vol. 299, № 15, 21, November 1984, pp. 1039–1043. C2 (54) СПОСІБ ОДЕРЖАННЯ 10-ДЕЗАЦ ЕТИЛ-БАККАТИНУ ІІІ ( ВАРІАНТИ ) 40601 12. Способ по п. 9, отличающийся тем, что используют водный раствор, рН которого ниже 7. 13. Способ по п. 9, отличающийся тем, что рН водного раствора ниже 6. 14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что органический экстракт, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, отделяют от водного раствора путем отстаивания. 15. Способ по п. 1 , отличающийся тем, что растворитель органического экстракта, содержащего 10-дезацетил-баккатин III, промытый водным раствором слабого основания и/или воды, удаляют с помощью дистилляции. 16. Способ по п. 15 отличающийся тем, что удаление растворителя органического экстракта осуществляют путем дистилляции при пониженном давлении. 17. Способ по п. 2, отличающийся тем, что адсорбируют водный раствор путем перколяции на смолу. 18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что смола представляет собой полистиролдивинилбензольную смолу. 19. Способ по п. 2, отличающийся тем, что десорбцию 10-дезацетил-баккатина III со смолы осуществляют с помощью органического растворителя. 20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что органический растворитель выбран среди алифатических спиртов,содержащих от 1 до 3 атомов углерода. 21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что органический растворитель представляет собой метанол. 22. Способ по п. 2, отличающийся тем, что органический раствор, содержащий 10-дезацетилбаккатин III, концентрируют насухо. 23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что концентрирование осуществляют путем дистилляции, возможно при пониженном давлении. 24. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что селективно кристаллизуют 10-дезацетил-баккатин III из остатка, полученного после удаления растворителя, при этом кристаллизацию осуществляют в органическом растворителе или в смеси органических растворителей. 25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что растворитель выбран из алифатических нитрилов, при необходимости смешанный с алифатическим спиртом или алифатическим эфиром или алифатическим кетоном. 26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что нитрилы выбраны из ацетонитрила и пропионитрила. 27. Способ по п. 25, отличающийся тем, что алифатический спирт выбран из метанола, этанола, пропанола, изопропанола и н-бутанола. 28. Способ по п. 25, отличающийся тем, что алифатический сложный эфир выбран из этилацетата, изопропилацетата, н-бутилацетата и трет.бутилацетата. 29. Способ по п. 25, отличающийся тем, что алифатический кетон выбран из ацетона, этилметилкетона, метилпропилкетона, метил-н-бутилкетона и метилизобутилкетона. 30. Способ по п. 25, отличающийся тем, что селективную кристаллизацию осуществляют из ацетонитрила, при необходимости, объединенного с этанолом и/или этилацетатом или н-бутилацетатом и/или ацетоном. 31. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что 10-дезацетил-баккатин III выделяют путем фильтрования, отстаивания или путем центрифугирования. 32. Способ по любому из пп. 1-31, отличающийся тем, что 10-дезацетил-баккатин III экстрагируют из коры, ствола, корней или листьев тиса. 33. Способ по любому из пп. 1-31, отличающийся тем, что 10-дезацетил-баккатин III экстрагируют из листьев тиса. 34. Способ по п. 32 или 33, отличающийся тем, что тис принадлежит к его следующим разновидностям: Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxis cupidata, Taxis floridana, Taxus media или Taxis wallichiana. _______________________ Настоящее изобрете ние касается способа получения промежуточных соединений, используемых для получения полусинтетическими методами таксола, таксоте ра или их аналогов из различных частей растений, содержащи х эти промежуточные соединения. Более конкретно, изобретение касается селективного получения 10-дезацетил баккатина III из коры, ствола, корней или листьев тиса различного ви да. Таксол и таксотер, а также их аналоги соответствуют общей фор муле: и проявляют замечательные противораковые и противолейкемические свойства, являются составной частью химиотерапевтических препаратов, используемых для лечения некоторых ви дов рака, например, рака груди, рака предстательной железы, рака ободочной кишки, рака желудка, рака почки или рака тестикул, а преимущественно рака яичников. При этом в общей формуле (І) Ar представляет собой возможно замещен ный фенил, R может представлять собой атом водорода или ацетил или N-замещенный карбамоил, R’ представляет собой атом водорода или N-замещенный карбамоил, а R1 может представлять собой фенил или остаток R2–O-, где R2 представляет собой алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, циклоалкенил, бициклоалкил, фенил или гете роциклил. Таксол соответствует соединению общей формулы (I), где Ar и R1 представляют собой фенил, а R представляет собой ацетил, а R' предс (І) 2 40601 тавляет собой атом водорода. Таксотер соответствуе т соединению общей формулы (I), где Ar представляет собой фенил, R и R' представляет собой атом водорода, а R1 представляет собой трет.бутокси. Таксол, который нахо дится в естественном состоянии в тисе различного вида, но в незначительном количестве, трудно поддается выделению без полной деструкции этого растения. Например, таксол может быть выделен в соответствии с методикой С.Н.О. HUANG et coll. I. Natl. Prod. 49, 665 (1986), которая заключается в том, что измельченную кору Taxus brevifolia обрабатывают метанолом, экстракт концентрируют, экстрагируют концентрат дихлорметаном, снова концентрируют, диспергируют оста ток в смеси гексан-ацетон (1–1 по объему), растворенную часть очищают п утем хроматографии на колонке Florisil с получением необогащенного таксола, кото рый очищают путем рекристаллизации последова тельной в смесях метанол-вода и гексан-ацетон, затем путем хроматографии и снова путем кристаллизации. Количество та ким образом экстрагированного таксола может составлять от 0,005 до 0,17% от используемой части растения. Таксотер, который не существует в естественном виде, может быть получен путем геми-синтеза из 10-дезацетил-баккатина III формулы: в основном, намного превосхо дит содержание таксола в коре, стволе или в листьях ти са. Из сказанного следует, что особо важно иметь в распоряжении 10-дезацетил-баккатин III, который: является основным продуктом при получении таксола в количествах, значительно превосхо дящи х количество таксола, получаемого прямой экстракцией из тиса: а также является основным продуктом при получении Таксотера. Экстрагируя 10-дезацетил-баккатин III из листьев тиса, не достигают полной деструкции расте ния, листья которого возможно использовать снова после каждого цикла. В основном, известные способы экстрагирования производных таксана, содержащи хся в различных частях тиса (кора, ствол, корни, листья), предусматривают использование продолжительной и дорогостоящей хро матографической технологии, которая не позволяет в полном объеме выделять производные таксана, изначально присутствующие в этом растении. 10-дезацетил-баккатин III может быть получен (с выхо дом, близким 300 мг на кг листьев (Taxus baccata) способом, включающим мацерацию иголок в этаноле, экстракцию с помощью такого органического растворителя, как метиленхлорид, и последовательную хро матографию, согласно способу, описанному в Патенте США № 4814470. Различные производные таксана, присутствующие в различных частях тиса, могут быть также выделены с помощью методов, использующих хроматографию жидкостную "реверс", которые описаны в частности, в Международной заявке РСТ WO 92/07842. Эти способы преимущественно включают разделение необогащенных экстрактов тиса возвратной жидкостной хроматографией, в результате которой на сорбенте фиксируются производные таксана, последующие элюирование этих производных и их выделение. Согласно этому способу, возможно выделить 200 мг 10-дезацетил-баккатина III из 1 кг измельченных и высушенных листьев. Теперь было найдено и это составляет объект настоящего изобретения, что 10-дезацетилбаккатин III может быть очень селективно экстрагирован (с высоким выхо дом) из различных частей тиса, а точнее, из его листьев с помощью простого способа, исключающе го использование хроматографии. Например, возможно экстрагировать примерно 800 мг 10-дезацетил-баккатин III из 1 кг листьев тиса (Taxus baccata). Способ заявляемый в настоящем изобретении, заключается в том, что выделяют 10-дезацетил-баккатин III из водного экстракта листьев тиса. Более конкретно способ, согласно изобретению, включает: 1) обработку во дой измельченных частей тиса (Taxus sp.), 2) отделение водного раствора, содержащего 10-дезацетил-баккатин III, от растительной массы, находящейся в состоянии суспензии, 3) экстрагирование 10-дезацетил-баккатина III из водного раствора с помощью органического растворителя, 4) отделение орга нического экстракта, содержаще го 10-дезацетил-баккатин III, от водной фа зы, (ІІ) в соответствии со способами, описанными, например в американских патентах US4 814 470 или US 4924012 или в материалах международной заявки РСТ WO 92/09589. Кроме того, таксол может быть получен в соответствии со способами, предусматривающими использование 10-дезацетил-баккатин III, включающи ми либо прохождение этого промежуточного для таксотера продук та через условия, указанные в патенте США 4857653, либо осуществление этерификации баккатина III в условиях, описанных в европейских патентах ЕР 400971 или ЕР 428376, либо осуществление этерифи кации 10-дезацетилбаккатина III и ацетилирования в условиях, описанных в американском патенте US 4924011. Различные виды тиса (Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cupidata, Taxus floridana, Taxus media, Taxus wallichiana) содержaт различные производные таксана, основными из которых, в большей части, является таксол и 10-дезацетил-баккатина III, при этом другие производные, представляющие собой, в частности, цефа ломаннин, 10дезацетил-цефа ломаннин или баккатин III в ряде случаев связаны с саха рами. Таксол содержится, в основном, в стволе и коре тиса, в 10-дезацетил-баккатин III преимущественно присутствует в его листьях. Впрочем, содержание 10-дезацетил-баккати на III в листьях, 3 40601 5) удаление органического растворите ля из таким образом отделенного органического экстракта, 6) селективную кристаллизацию 10-дезацетил-баккатина III из остатка, полученного указанным образом в органическом растворителе, 7) выделение 10-дезацетил-баккатина III в виде очищенного соединения, или же 1) обработку во дой измельченных частей тиса (Taxus sp.), 2) отделение водного раствора, содержащего 10-дезацетил-баккатин III, от растительной массы, находящейся в состоянии суспензии, 3) адсорбирование водного раствора, содержащего 10-дезацетил-баккатин III, на подхо дящем носителе, 4) десорбцию 10-дезацетил-баккатина III с помощью органического растворителя, 5) удаление органического растворите ля из десорбированного вещества, 6) селективную кристаллизацию 10-дезацетил-баккатина III из остатка, полученного указанным образом в органическом растворителе, 7) выделение 10-дезацетил-баккатина III в виде очищенного соединения. Способ, предлагаемый в настоящем изобретении, позволяет использовать любую соответствующую часть тиса, например, кору, ствол, корни или листья. Тис, используе мый в соответствии с заявляемым способом, преимущественно принадлежит к его следующим разновидностям: Taxus baccata, Taxus brevifolia, Taxus canadensis, Taxus cupidata, Taxus floridana, Taxus media или Taxus wallichiana. Однако, особо предпочти тельно использовать листья тиса (Taxus baccata, Taxus brevifolia), которые наиболее богаты по содержанию 10-дезацетил-баккати на III. Используемые кусочки названных частей ти са могут иметь размеры, колеблющиеся от 0,5 до нескольких миллиметров. Из соображений удобства осуществления заявляемого способа предпочтительно использовать кусочки, средний размер кото рых менее 1 мм. Измельченные и, возможно, высушенные части тиса могут быть получены в результате осуществления стадии измельчения, возможно, высушивания, которые, возможно предшествуют или осуществляются после стадии замораживания и размораживания свежих частей растения, или которые включаются в стадии замораживания и размораживания свежих частей растений. минерализованную во ду для осуществления этой обработки и проводить ее в условиях ультразвука. С целью повыше ния значения выхо да, целесообразно осуществлять многократную обработку водой растительной массы, чтобы получить водные растворы, из кото рых экстрагируют 10-дезацетил-баккатин III в вы шеуказанных условиях. Полученный водный раствор, содержащий 10-дезацетил-баккатин III, отделяют от растительной массы с помощью обычных методов, например, путем фильтрования, центрифугирования или отстаивания. Полученный водный раствор, возможно охлажденный, может быть подвергнут следующей обработке: 1) 10-дезацетил-баккатин III экстрагируют, один или несколько раз, органическим растворителем. Особо подхо дят органические растворители, выбранные среди следующих: та ких простых эфиров как метил-трет.бути ловый эфир, этил-трет.бутиловый эфир, метил-n-бутиловый эфир, метил-nамиловый эфир, этил-трет.амиловый эфир, трет.бутилизопропиловый эфир, эти лизопропиловый эфир, трет.бутил-n-пропиловый эфир или этил-n-гексиловый эфир, та ких алифати ческих сложных эфиров как этилацетат, пропилацетат, изопропилацетат, n-бутилацетат, метил трет.бутилацетат, трет.бутилпропионат или трет.амилацетат. Осо бый интерес представляют метил-трет.бутиловый эфир, этил-трет.бутиловый эфир, эти лацетат или n-бутилацетат. Экстрагирование с помощью органического растворителя осуществляют в основном из водного раствора, рН которого ниже 7, а предпочтительно ниже 6. Органические экстракты, со держащие 10-дезацетил-баккатин III, отделяют от водной фазы с помощью обычных методик, например, с помощью отстаивания. Органические экстракты в некоторых случаях промывают водными растворами слабых оснований (водный раствор карбоната натрия, например) и/или водой. После высушивания органический растворитель удаляют из продукта экстрагирования в соответствии с обычными методиками, в частности, путем возможной дистилляции, осуществляемой при пониженном давлении, с получением в основном твердого остатка, из которого выделяют 10-дезацетил-баккатин III. 2) водный раствор адсорбируют на подхо дящий носитель для того, что бы зафиксировать на этом носителе 10-дезацетил-баккатин III. В качестве носителя используют адсорбирующие смолы, которые выбирают преимущественно среди полистиролдивинилбензольных смол. Десорбцию 10-дезацетил-баккатина III осуществляют с помощью промывания носителя подхо дящим растворителем. В качестве растворителя предпочти тельно использовать алифа тический спирт, содержащий от 1 до 3 атомов углерода, а более конкретно, метанол. Органическую фа зу отделяют от носите ля, в основном, путем фильтрования, последующей концентрацией досуха, в основном, с помощью дистилляции, осуществляемой, при необхо димости, при пониженном давлении, с получением, в основном, твердого остатка, из которого выделяют 10-дезацетил-баккатин III. Обработка водой измельченных частей тиса осуществляется в соответствии с технологией, известной специалисту в этой области. В частности, водный раствор, содержащий 10-дезацетил-баккатин III, преимущественно получен в результате перемеши вания при температуре, равной от 20 до 65оС, измельченных частей тиса в водной среде в течение от 30 минут до 2 часов. Количество используе мой воды может изменяться в широких пределах, однако, целесообразно использовать воду в количестве, равном от 2 до 10 л на 1 кг измельченных и высушенных частей растений, а предпочтительно, количество используемой воды составляет примерно 5 л на 1 кг обрабатываемых частей растения. Целесообразно использовать де 4 40601 Селективную кристаллизацию необогащенного 10-дезацетил-баккатина III, полученного тем или иным указанным методом, осуществляют из раствора этого остатка в органическом растворителе или в смеси орга нических растворителей. В качестве растворителя, при котором возможна селективная кристаллизация 10-дезацетил-баккатина III, целесообразно использовать такие нитрилы как ацето нитрил, пропионитрил или изобутиронитрил, взятые, возможно, в смеси с алифа тическим спиртом, например, метанолом, этанолом, пропанолом, изопропанолом или n-бутанолом или в смеси с алифа тическим сложным эфиром, например, этилацетатом, изопропилацетатом, n-бутилацетатом или трет.бутилацета том, или в смеси с алифа тическим кетоном, например, ацето ном, метилэтилкето ном, метилпропилкетоном, метил-nбутилкетоном или метилизобутилкетоном. Особо предпочтительно осуществлять селективную кристаллизацию в ацетонитриле, возможно, в присутствии этанола и/или этилацета та или бутила и/или ацетона. Выпавший в осадок 10-дезацетил-баккатин III может быть выделен с помощью фильтрования, отстаивания или центрифугирования. Способ, согласно изобретению, позволяет получать практически чистый 10-дезацетил-баккатин III при значении выхода целевого продукта, значительно превышающем значение выхода, достигнутое при осуществлении прежде известных способов. Способ, согласно изобретению, позволяет экстрагировать почти что полностью 10дезацетил-баккатин III, со держащийся в используемых частях растения, в частности, в его листьях. 10-дезацетил-баккатин III, полученный в соответствии со способом экстрагирования, заявляемым в настоящем изобретении, позволяет получать таксол или таксотеp или их производные в условиях, описанных более конкретно в Патентах ЕР 0 253 738, ЕР 0 253 739, ЕР 0 336 941, ЕР 0 3336 840, WO 92 09589, ЕР 0 400 971 и ЕР 0 428 376. Нижеследующие примеры иллюстрируют способ, заявляемый в настоящем изобретении. Пример 1. К 2,5 л деминерализованной воды, нагретой до 50оС, прибавляют 500 г листьев тиса (Taxus baccata), измельченных и высушенных, средний размер частиц которых менее 1 мм, а содержание в кото рых 10-дезацетил-баккатин III, определенное путем жидкостной хроматографии высокой точности (ЖХВТ), составляет 0,08% (или 400 мг 10-дезацетил-баккатина III в 500 г листьев). Названные компоненты перемеши вают в те чение 1 часа при температуре 50оС, а затем фильтруют. Фильтрат (1,9 л), рН кото рого 5,4, трижды экстрагируют 0,9 л эти лацетата. Органические фазы объединяют (2,7 л), промывают дважды в 1 л 0,1 М-ного раствора карбоната натрия, а затем дважды в 1 л деминерализованной воды, и наконец сушат на сульфа те натрия. После фильтрования и концентрирования насухо получают твердое вещество (3,3 г), которое растворяют в 9 см 3 ацетонитрила при температуре, близкой 70оС. После охлаждения в течение ночи при температуре, близкой +4оС, осадок отделяют фильтрованием. Таким образом получают после высушивания 245 мг кристаллов, со держащих согласно анализу ЖХВТ 75% чисто го 10-дезацетил-баккати на III или 183 мг названного чистого вещества. Ма точные воды согласно анализу ЖХВТ со держат 40 мг 10дезацетил-баккатина III. Растительную массу, содержащую 0,7 л воды, дважды экстрагируют в условиях, аналогичных указанным выше. Собранный водный фильтрат обрабаты вают аналогично указанному выше. Таким образом получают 2,5 г твердого продукта, который растворяют в 5 см 3 ацетонитрила при температуре, близкой 70оС. После охлаждения в течение ночи при температуре близкой +4оС путем фильтрования отделяют 169 мг кристаллов, содержащи х согласно анализу ЖХВТ 75% 10-дезацетил-баккати на III очищенного, что составляет 127 мг. Маточные воды содержат, согласно анализу ЖХВТ, 47 мг 10-дезацетил-баккатина III. Общее количество 10-дезацетил-баккатина III, экстрагированного во дой, составляет 183+40+127+47=397 мг. Выход практически количественный. Пример 2. Нагревают 3 л де минерализованной воды до 50оС, затем прибавляют 500 г измельченных и высушенных листьев, средний диаметр частиц которых составляет 1 мм, а содержание 10-дезацетил-баккатина III, определенного путем жидкостной хроматографии высокой точности (ЖХВТ), составляет 0,08% (или 400 мг 10-дезацетил-баккатина III в 500 г листьев). Компоненты перемешивают в те чение 1 часа при температуре 50оС, затем проводят фильтрование. Фильтрат (1,97 л), рН которого 5,15 изменяют до рН 4,6 путем прибавления концентрированной соляной кислоты, затем фильтруют че рез асбокартонную мембрану фильтра Seitz. По лучают 1,8 л фильтрата. 300 см 3 фильтрата дважды экстрагируют 150 см 3, а затем четырежды 60 см 3 метил-трет.бутилового эфи ра (МТБЭ). Объединенные и сконцентрированные экстракты содержат 620 мг твердых ве ществ, кото рые раство ряют в 3 см 3 ацетонитрила при температуре 70оС. После охлаждения в течение ночи при температуре, равной +4оС, отделяют фильтрованием 28 мг 10-дезацетил-баккатина III в виде кристаллов, что соответствует, согласно анализу ЖХВТ, 90%. Маточные воды содержат 12,8 мг 10-дезацетил-баккатина III (количественный анализ согласно ЖХВТ). Пример 3. Измельчают 1 кг листьев тиса (Taxus baccata), свеже срезанных, содержание воды в которых составляет 69%, а содержание 10-дезацетил-баккатина III составляет 651 мг/кг (определено с помощью ЖХВТ), в миксере объемом 2 л в присутствии воды деминерализованной. Указанное измельчение осуществляют в 10 идентичных этапов, проводимых последовательно друг за другом при использовании каждый раз 100 г листьев и 500 см 3 воды при температуре, близкой 20оС. Полученную смесь фильтруют через хлопковое полотно, а затем через бумагу, промывая водой, общее количество которой составляет 200 см 3. Собирают 5000 см 3 фильтрата или 84,9 объемн. % общего количества воды (воды, использованной при измельчении, и воды, содержащейся в лист 5 40601 рый растворяют в 100 см 3 этилацетата. Путем фильтрования отделяют 8,7 г нерастворимого соединения, затем фильтрат концентрируют до объема в 5 см 3. Прибавляют 30 см 3 ацето нитрила. Получают прозрачный раствор, в котором очень быстро появляются белые кристаллы. После ночи выдержки при температуре 4оС белые кристаллы отделяют фильтрованием и сушат. Таким образом получают 548 мг 10-дезацетил-баккатина III, сольватированного одним молей ацетонитрила, вы ход составляет 92%. ьях). Согласно количественному анализу, осуществленному с помощью ЖХВТ, таким образом полученный раствор содержит 72 г сухи х ве ществ, из которых 550 мг составляет 10-дезацетил-баккатина III, что практически соответствует тео ретическому количеству это го вещества – 552,7 мг (84,9% от 651 мг). Остаток 10-дезацетил-баккатина III со держится в воде, пропитавшей растительный продукт, и может быть рекуперировано путем промывания в воде растительного продук та. Водный раствор (5000 см 3) перколируют через колонку диаметром 5 см, наполненную на высоту 10 см полистирол-дивинилбензольной смолой (Amberchrom CG 161md (Tosohaas, Stuttgart, Allemagne). Смолу промывают во дой, высушивают, затем суспендируют в мета ноле. После фильтрования и концентрирова ния насухо фильтрата, получают остаток (15,5 г), кото Количественный анализ с помощью ЖХВТ при внутрисферной нормализации показал, что эти кристаллы содержат 82% 10-дезацетил-баккатина III. Таким образом, выход – 10-дезацетил-баккатина III – составляет 75,4%. Тираж 50 екз. Відкрите акціонерне товариство «Патент» Україна, 88000, м. Ужгород, вул. Гагаріна, 101 (03122) 3 – 72 – 89 (03122) 2 – 57 – 03 6