Спосіб одержання метіоніну

1 Спосіб одержання аміноаміду метіоніну (або 2-аміно-4-метилтю-бутираміду), який відрізняється тим, що амінонітрил метіоніну піддають гідратації в присутності каталізатора кетонного типу та основної солі в ОН-формі 2 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що використаним кетоном є ацетон 3 Спосіб за пп 1 або 2, який відрізняється тим, що молярна КІЛЬКІСТЬ ацетону, використана по відношенню до амінонітрилу, становить 0,2-6,0 4 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що КІЛЬКІСТЬ основної солі, використаної по відношенню до амінонітрилу, становить 0,10-1,0 гідроксид ного еквівалента, а краще 0,15-0,5 еквівалента 5 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що температура реакції становить 10-40°С, а краще 525°С 6 Спосіб за п 1, який відрізняється тим, що реакцію проводять безперервно, періодично або напівбезперервно 7 Спосіб одержання метіоніну, який відрізняється тим, що в першій стадії амінонітрил метіоніну піддають гідратації до утворення аміноаміду меті Цей винахід стосується способу одержання аміноаміду метіоніну Він стосується також одержання метіоніну без побічного утворення солей, виходячи з водного розчину, що містить по суті амінонітрил метіоніну (або 2-амшо-4 оніну в присутності каталізатора кетонного типу і основної смоли в ОН-формі, в другій стадії аміноамід метіоніну піддають гідролізу до утворення амонійметюнінату ХІМІЧНИМ ШЛЯХОМ при гомогенному каталізі, ХІМІЧНИМ ШЛЯХОМ при гетерогенному каталізі або ферментативним шляхом, в третій стадії метіонін рекуперують із амонійметюнінату, після видалення аміаку 8 Спосіб за п 7, який відрізняється тим, що гідроліз аміноаміду метіоніну здійснюють ХІМІЧНИМ шляхом при гомогенному каталізі в присутності гідроксиду амонію 9 Спосіб за п 7, який відрізняється тим, що гідроліз аміноаміду метіоніну здійснюють ХІМІЧНИМ шляхом при гетерогенному каталізі в присутності оксидів металів або гетерополікислот 10 Спосіб за п 9, який відрізняється тим, що оксиди металів вибирають з дюксиду титану, оксиду цинку, суміші дюксиду титану і пентоксиду ніобію, дюксиду цирконію і пентоксиду ніобію 11 Спосіб за п 7, який відрізняється тим, що гідроліз аміноаміду метіоніну здійснюють ферментативним шляхом при гетерогенному каталізі в присутності амідази 12 Спосіб за п 11, який відрізняється тим, що амідаза походить із мікроорганізмів Rhodococcus або Brevibactenum 13 Спосіб за пп 11 або 12, який відрізняється тим, що використовують генетичну інформацію, яка кодує амідазу, яку експресують в мікроорганізмі-хазяїні 14 Спосіб за одним з пп 11-13, який відрізняється тим, що мікроорганізм-хазяїн вибирають з Eschenchia coh або роду Corynebactenum 15 Спосіб за одним з пп 11-14, який відрізняється тим, що біологічний матеріал, який експресує активну амідазу, є імобілізованим метилтюбутиронітрил, позначений як AMTBN), шляхом одержання на першій стадії аміноаміду, за якою ідуть дві додаткові стадії Спосіб одержання аміноаміду метіоніну (або 2аміно-4-метилтюбутираміду, позначеного як О ю ю 59475 АМТВМ) полягає в гідратації амінонітрилу метіоніну в присутності каталізатора кетонного типу і основної смоли в ОН-формі Ця гідратація дає можливість одержувати розчин, який містить аміноамід метіоніну, повністю позбавлений неорганічних солей Спосіб одержання метіоніну являє собою трьохстадійний спосіб, першою стадією якого є вищезазначена стадія амінонітрил піддають гідратації до утворення аміноаміду метіоніну в присутності каталізатора кетонного типу і основної смоли в ОН-формі, аміноамід метіоніну піддають гідролізу до утворення амонійметюнінату різними можливими шляхами ХІМІЧНИМ шляхом при гомогенному каталізі, таким як, наприклад, гідроліз за допомогою гідроксиду амонію, ХІМІЧНИМ шляхом при гетерогенному каталізі, таким як, наприклад, гідроліз, що каталізується оксидами, ферментативним шляхом, нарешті, метіонін рекуперують, виходячи з амонійметюнінату, після видалення аміаку шляхом відгонки Відомо, наприклад, згідно з Європейськими патентами 84470 або 168282, що гідратація амінонітрилу може здійснюватись на прищепленій полімерній смолі з групами кетонного типу (-(С=О)-) в присутності пдроксил-юнів Здійснення такого способу, при якому використовують сильну основу, яка є похідною лужного металу (гідроксид натрію, гідроксид калію ), для одержання необхідних для каталізу пдроксид-юнів, призводить до одержання аміноаміду, забрудненого ВІДПОВІДНИМ лужним металом З іншого боку, наприклад, згідно з Європейським патентом 228938, відоме одержання метіоніну із аміноаміду метіоніну при використанні сильної основи (наприклад, гідроксидунатрію або іншої основи, яка є похідною лужного металу) для реалізації лужного гідролізу аміду Здійснення такого способу призводить, під час підкислення метюнінату лужного металу, що утворюється за рахунок сильної неорганічної (сірчаної або соляної) кислоти, до побічного утворення неорганічної солі сульфату чи хлориду ВІДПОВІДНОГО лужного металу Удвох вищезазначених способах використання сильної основи, яка є похідною лужного металу, як каталізатора гідратації амінонітрилу і/або як реагенту для гідролізу аміду призводить до побічного утворення неорганічної солі сульфату чи хлориду ВІДПОВІДНОГО лужного металу, яку потім потрібно ВІДДІЛЯТИ від метіоніну, що часто пов'язано з великими труднощами при використанні дорогих способів кристалізації, фільтрування, послідовних концентрувань маточних розчинів Спосіб за винаходом дає можливість уникати використання основи, яка є похідною лужного металу і, таким чином, співіснування в одному і тому ж потоці метіоніну та неорганічної солі, яку потім необхідно ВІДДІЛЯТИ, як описано вище Таким чином, спосіб за винаходом дає можливість одержувати потік метіоніну, який не має неорганічної солі Амінонітрил метіоніну (або 2-амшо-4 метилтюбутиронітрил) можна одержати шляхом взаємодії гідроксиду амонію з ВІДПОВІДНИМ ціангідрином або будь-яким іншим засобом, який не призводить до утворення солі в середовищі Нарешті, запропонований у винаході спосіб одержання аміду при використанні смоли в ОНформі дозволяє під час контакту з цією смолою видаляти залишкові ціаніди/нітрили, які можуть бути при виході із процесу синтезу амінонітрилу і які є згубними у випадку ферментативного гідролізу аміноаміду до утворення амонійметюнінату і, крім того, присутності яких потрібно уникати у кінцевому продукті Для каталізованої гідратації амінонітрилу до утворення аміноаміду смоли вибирають, зокрема, серед основних смол в ОН-формі, таких як смоли, що випускаються фірмою ROHM and HAAS під маркою Ambersep 900 ОН, або фірмою FLUKA Після тривалого використання смолу при необхідності регенерують шляхом обробки в середовищі, яке містить натрій Регенерацію здійснюють переважно за допомогою розчину гідроксиду натрію з масовою концентрацією принаймні 4% NaOH і ВІДПОВІДНО до КІЛЬКОСТІ NaOH 80-150г/літр смоли Даний винахід стосується також промислового способу одержання метіоніну За цим способом метилтюпропюновий альдегід приводять у взаємодію з ціаністоводневою кислотою в присутності основного каталізатора або буфера, який дає можливість підтримувати рН-значеня розчину в межах від 5,5 до 7,5, причому серед цих каталізаторів можна назвати третичні аміни, зокрема, триетиламш або піридин, або цитратний буфер Ціаністоводневу кислоту використовують або у чистому вигляді, або у вигляді суміші з газами, що утворюються при її синтезі, такими як азот, дюксид вуглецю, монооксид вуглецю, вода і метан, зокрема, після видалення аміаку Реакцію проводять переважно при кімнатній температурі і в присутності еквімолярних кількостей кожного із реагентів або злегка підвищених відносно стехіометрії кількостей ціаністоводневої кислоти , як, наприклад, приблизно в 5%-ному надлишку відносно стехіометрії Реакцію можна здійснювати в реакторі з перемішуванням або в трубчатому реакторі, її також можна проводити в газорідинному контактному пристрої для забезпечення можливості протікання реактивної абсорбції, причому це краще тоді, коли використовують газоподібний ціаністий водень Після закінчення стадії ціанування одержують водний розчин 2-ПДРОКСИ-4метилтюбутиронітрилу, позначеного як HMTBN (101) Цей розчин приводять у контакт з аміаком (102) або із сумішшю аміак/вода Молярна КІЛЬКІСТЬ аміаку, що використовується, відносно HMTBN становить переважно від 4 до 7, причому точно вказані вище КІЛЬКОСТІ описані в патенті ФРГ 2645544 Аміак використовують в чистому стані або у вигляді водного розчину, причому водний розчин аміаку використовують переважно в концентрації вище 25мас %, а краще в концентрації вище бОмас % Найкраще використовувати чистий аміак Температура реакції переважно становить 40-80°С, краще 55-70°С Реакцію проводять пере 59475 важно в реаісгорі з перемішуванням або в трубчатому реаісгорі (А) з витіканням, зокрема, поршневого типу Після закінчення реакції одержують водний розчин 2-аміно-4-метилтюбутиронітрилу (106) Після закінчення реакції надлишок аміаку видаляють або ВІДДІЛЯЮТЬ шляхом розширення типу одноразового рівноважного випаровування або шляхом транспортування (виносу) за допомогою інертного газу, такого як, наприклад, азот, водяна пара, в колоні (В) Температура середовища під час стадії відділення становить нижче 60°С і переважно знаходиться в межах 15-50°С Рекуперований аміак (109), який виходить із головної частини колони (В), потім абсорбують в абсорбері (С) Одержаний розчин гідроксиду амонію (415/422) після цього піддають дистиляції (D) Одержаний газоподібний аміак, який виходить із головної частини дистиляційної колони (423), конденсують в (Е), потім, після можливого додавання аміаку (426), переважно знову інжектують у вигляді потоку (427) в реактор для синтезу амінонітрилу Потік аміаку (427), що рециркулює і якого вводять в реактор для синтезу амінонітрилу, містить переважно менше, ніж 5мас % ацетону Суміш (424) із нижньої частини дистиляційної колони (D), яка містить воду, ацетон та аміак, розділяють на два потоки (205) та (410) Менший потік (205) повертають в процес синтезу аміноаміду, а більший потік (410) направляють в абсорбер (С) Амінонітрил, що міститься в потоці (110), який одержується із нижньої частини колони (В) і який містить ще, зокрема, 0,1-1,5моль залишкового аміаку на моль амінонітрилу, піддають гідратації в реакторі (F) в присутності кетону (202 і 205) шляхом введення в контакт з іонообмінною смолою в ОН-формі Із кетонів використовують переважно ацетон Гідратацію амінонітрилу здійснюють в присутності 0,1-1,0, краще 0,2-0,6 еквівалента ацетону на моль AMTBN Гідратацію проводять, зокрема, в присутності такої КІЛЬКОСТІ основної смоли, при якій число пдроксидного еквівалента становить, зокрема, 0,11,0, краще 0,15-0,50 еквівалента на моль AMTBN Температуру реакції встановлюють переважно в діапазоні 10-40°С, а ще краще 15-25°С Реакція може здійснюватись безперервно, періодично або напівбезперервно в системі типу реактора з перемішуванням або трубчатого реактора або, нарешті, в колоні, що містить основну смолу Після закінчення реакції одержують водний розчин (208), який містить аміноамід метіоніну, гідроксид амонію, ацетон, воду і різні органічні сполуки, такі, як для відома, але не вичерпуючі, метіонін або імідазолідінон Одержану суміш (208) піддають, зокрема, дистиляції в колоні (G) Потік (211), що виходить із головної частини колони, піддають конденсації в конденсаторі (Н) з метою рекуперації ацетону, який містить невелику КІЛЬКІСТЬ аміаку (212) Цей потік рециркулюють в процес синтезу аміноаміду Потік (213), який не конденсується і містить по суті аміак, направляють в абсорбер (С) Водну суміш (214), що знаходиться в нижній частині дистиляційної колони, яка після видалення ацетону містить по суті аміноамід метіоніну і різні органічні сполуки, розбавляють (303), потім направляють в зону гідролізу аміноаміду (1) Цей гідроліз можна реалізувати одним із трьох таких шляхів ХІМІЧНИМ шляхом при гомогенному каталізі гідроліз за допомогою гідроксиду амонію Згідно З найкращим варіантом здійснення винаходу використовують переважно молярне співвідношення МНз/АМТВМ, яке становить 225моль/моль Також використовують концентрацію субстрата АМТВМ, яка становить переважно 0,051,0моль/кг Утому, що стосується умов здійснення винаходу, краще використовують температуру 100-180°С, ХІМІЧНИМ шляхом при гетерогенному каталізі Цей гідроліз каталізують, зокрема, за допомогою одного із таких оксидів Т1О2, T1O2/AI2O3, ІЧЬгОб, ІЧЬгОб-АЬОз, ZnO, ZrO2, і гетерополікислот Реакцію проводять переважно при КИПІННІ реакційного середовища (приблизно 100°С), при атмосферному тиску і безперервному барботуванні азоту для видалення аміаку, що виділяється Концентрація субстрату АМТВМ в реакційному середовищі, згідно з найкращим варіантом втілення винаходу, становить 0,1-2,0моль/кг і масове співвідношення каталізатор/субстрат становить 0,5-1,5 Цей останній шлях є особливо вигідним порівняно із способами, описаними в патентах Японії 03093753, 03093754, 03093755 та 03093756, оскільки він дозволяє здійснювати реакцію при більш низьких температурі та тиску, що, в свою чергу, дає можливість уникати термічної деструкції реагентів та продуктів, він дозволяє прямо рекуперувати (при нагріванні) метіонін у вигляді кислоти, без іншої форми підкислення, і, таким чином, без витрат неорганічної кислоти Полегшено розділення твердого каталізатора і солюбілізованого при нагріванні метіоніну, ферментативним шляхом за допомогою амідази Цю амідазу вибирають серед амідаз Rhodococcus 1BN 20 або Вrevibacterium R312 Можна використовувати генетичну інформацію, яка кодує амідазу, і експресувати и в мікроорганізмігосподарі Мікроорганізм-господаря вибирають, зокрема, серед Eschenchia coll або члена роду Corynebactenum Цей біологічний матеріал, який експресує активну амідазу, переважно імобілізованийПотік (305), який виходить із зони гідролізу аміду, обробляють в колоні (J) шляхом розділення за допомогою інертного газу (306), такого, як вибраний, наприклад, серед азоту або водяної пари, в колоні, температуру якої регулюють потоком різних газів, що входить В цій колоні тиск підтримують переважно в діапазоні 105-2-105 Па Із головної частини колони (J) рекуперують аміак і частину води (308), які направляють в абсорбер (С) Суміш із нижньої частини колони (J), яка містить водний розчин метіоніну (311) без аміаку, концентрують в (К) аж до одержання дуже концентрованої кашиці, яку транспортують в процес фі 59475 льтрацм або в будь-яку іншу систему для розділення (L), де и можна повністю висушити аж до порошкового стану Наступні приклади пояснюють здійснення способу за даним винаходом Приклад 1 ПОСЛІДОВНІСТЬ перетворення HMTBN^AMTBN^AMTBM з гідратацією AMTBN при використанні основної смоли Ambersep 900H фірми Rohm et Haas і дегазацією при температурі 67°С (дослід AYP 031) Приклад 1 1 Одержання амінонітрилу метіоніну Завантажують 72г готового розчину гідроксиду амонію Rectapur (30%мас/мас), або 1270ммоль ІЧНз, в реактор-автоклав із нержавіючої сталі з подвійною рубахою, який має у своєму складі перегородки і магнітну мішалку Після закриття реактора розчин нагрівають до температури 67°С опосередковано через подвійну рубаху Тиск стабілізується при значенні 4 абсолютних бара В металеву крапельну лійку завантажують 42г 78,5%мас /мас розчину HMTBN у воді, або 251ммоль HMTBN Вміст металевої лійки швидко вводять в автоклав під тиском завдяки протитиску 6 бар азоту Суміш перемішують впродовж 15 хвилин при температурі 67°С і тиску 6 бар Потім середовище негайно дегазують при температурі 67°С Після відкриття реактора середовище з кінцевою масою 98,6г негайно переносять у заздалегідь охолоджену до температури 10°С колбу Ерленмейера Дослід повторюють вдруге, використовуючи ті ж КІЛЬКОСТІ У цьому випадку рекуперують друге реакційне середовище масою 100,4г Потім обидва реакційні середовища змішують і перемішують при температурі 10°С, одержуючи емульсію Після ЦЬОГО емульсію переносять у ділильну лійку В результаті одержують верхню (світло-жовту) водну фазу масою 165,7г і нижню (темно-жовту) органічну фазу масою 31,7г Хроматографічний аналіз двох фаз дає можливість визначити 177ммоль 2-аміно(4-метилтю)бутиронітрилу (AMTBN) в органічній фазі, 295ммоль AMTBN у водній фазі Загальний вихід рекуперації AMTBN по відношенню до введеного HMTBN становить 94% Приклад 1 2 Одержання аміноаміду метіоніну В скляний реактор з перемішуванням ємністю 1л, обладнаний турбіною Rushton і перегородками, завантажують 60г основної смоли Ambersep 900H фірми Rohm et Haas з 1,5 міліеквівалентами ОН/г (або 90ммоль еквівалента ОН, і, таким чином, 0,19моль основи/моль AMTBN) і 65г води Суспензію перемішують при ПОСТІЙНІЙ температурі 12°С В цю суспензію вводять сукупність двох фаз, одержаних в прикладі 1 1 (або 472ммоль AMTBN), а також 13,9г ацетону (або 239,6ммоль і, таким чином, 0,51 моль ацетону/моль AMTBN), при перемішуванні зі швидкістю 500об/хв Температуру 8 суміші доводять до 20°С і підтримують при цьому значенні Після перемішування впродовж двох годин хроматографічний аналіз показує, що прореагувала вся КІЛЬКІСТЬ AMTBN Середовище витримують при перемішуванні в цілому впродовж 5 годин, потім фільтрують Фільтрат випаровують у вакуумі при температурі 45°С Одержана в'язка рідина жовтого кольору стверджується при кімнатній температурі за ЗО хвилин Тоді рекуперують загальну масу 61,9г цієї твердої речовини ЯМР-аналіз одержаної твердої речовини показує молярну чистоту 96% аміноаміду, 2% імідазолідшону, 0,5% метіоніну і 1,5% різних органічних сполук Аналіз води методом Карла-Фішера дає масовий вміст води 1,4% в розрахунку на рекуперовану тверду речовину Хроматографічний аналіз тієї ж самої твердої речовини дає масовий вміст 93% аміноаміду, 3% імідазолідшону і 0,5% метіоніну та різних органічних сполук Виходи рекуперації подальших продуктів по відношенню до введеного під час другої стадії AMTBN становлять 82,3% аміноаміду, 2,1% імідазолідінону і 0,4% метіоніну Приклад 2 ПОСЛІДОВНІСТЬ перетворення HMTBN^AMTBN^AMTBM з гідратацією AMTBN при використанні основної смоли Ambersep 900H фірми Rohm et Haas і дегазацією при температурі 33°С (дослід AYP 035) Приклад 2 1 Одержання амінонітрилу метіоніну Завантажують 58,6г 78,8%мас /мас розчину HMTBN у воді, або 352ммоль HMTBN, в реакторавтоклав із нержавіючої сталі з подвійною рубахою, який має у своєму складі перегородки і магнітну мішалку Після закриття реактора розчин нагрівають до температури 51,5°С через посередництво подвійної рубахи і термостатованої бані В металеву крапельну лійку, яка знаходиться у сухому льоді і яку заздалегідь вакуумують, вводять із балону 30,8 г газоподібного аміаку (або 1812ммоль NH3) Вміст металевої лійки швидко вводять в автоклав під тиском завдяки протитиску 10 бар азоту Температуру суміші, яку перемішують, встановлюють і підтримують при 67°С за допомогою термостатованої бані Суміш перемішують впродовж 10 хвилин при тиску 12 абсолютних бар Потім закритий реактор охолоджують до температури 33°С за ЗО хвилин, причому тиск знижується до 7 абсолютних бар, після чого дегазують Після відкриття реактора середовище масою 74,3г негайно охолоджують до температури 10°С і переносять в ділильну лійку Одержують верхню (світло-жовту) водну фазу масою 19,79г і нижню (темно-жовту) органічну фазу масою 52,09г Хроматографічний аналіз двох фаз дає можливість визначити 319,5ммоль AMTBN в органічній фазі, 32,6ммоль AMTBN у водній фазі 59475 10 Загальний вихід рекуперації AMTBN по відно23,7г розчину АМТВМ з концентрацією 0,7 шенню до введеного HMTBN становить 100% моль/кг, який одержують шляхом змішування 3,2г одержаного в прикладі 2 2 аміноаміду (або Приклад 2 2 16,8ммоль АМТВМ) і 20,5г води Одержана суміш Одержання аміноаміду метіоніну містить 0,15моль/кг АМТВМ В скляний реактор з перемішуванням ємністю 1л, обладнаний турбіною Rushton і перегородками, Після протікання реакції впродовж 1 години ЗО завантажують 41,9г основної смоли Ambersep хвилин при температурі 150°С досягають виходу 900Н фірми Rohm et Haas з 1,5 міліеквівалентами метіоніну 72% (розрахованого по відношенню до ОН/г (або 62,9ммоль еквівалента ОН) і 88,2г води АМТВМ і початкового імідазолідшону) Суспензію перемішують при ПОСТІЙНІЙ темпеПісля протікання реакції впродовж 7 годин таратурі 15°С ким же чином досягають КІЛЬКІСНОГО виходу метіоніну В цю суспензію вводять 62,5г суміші двох фаз, одержаних в прикладі 2 1 (або ЗОбммоль AMTBN), Приклад 5 а також 9,2г ацетону (або 158,6ммоль), при переГідроліз АМТВМ при використанні каталізатомішуванні зі швидкістю 360об/хв Температуру ра ТЮ2 (дослід ASE 065) суміші доводять до 20°С і підтримують при цьому У скляний реактор з подвійною рубахою завазначенні впродовж 3 годин нтажують 66,2г води та 7,98г заздалегідь подрібненого каталізатора Т1О2 Єдиний вихід із реактора Потім середовище фільтрують Фільтрат виз'єднаний з рядом барботерів, які містять розбавпарюють у вакуумі (1 мм Нд) при температурі лену сірчану (2%мас /мас ) кислоту 30°С Одержана в'язка рідина жовтого кольору ствеСуспензію, яка міститься в реакторі, перемірджується при кімнатній температурі Тоді рекупешують і нагрівають до температури 94°С при циррують загальну масу 43,8г цієї твердої речовини куляції азоту Хроматографічний аналіз тієї ж самої твердої Водний розчин АМТВМ з концентрацією речовини дає масовий вміст 78% аміноаміду, 11% 1,35моль/кг, який одержують шляхом змішування імідазолідшону і 3% метіоніну і різних органічних 10г сирого аміноаміду, одержаного в прикладі 2 2 сполук (або 52,6ммюль АМТВМ), і 29,02г води, вводять в реактор за допомогою насосу Виходи рекуперації подальших продуктів по відношенню до введеного під час другої стадії Одержаний таким чином в реакторі розчин міAMTBN становлять 75,3% аміноаміду, 10,6% ІМІстить 0,5моль/кг АМТВМ Після протікання реакції дазолідшонута 2,9% метіоніну впродовж ЗО хвилин конверсія аміноаміду є повною Одержаний вихід метіоніну становить 85% Приклад З Гідроліз АМТВМ за допомогою гідроксиду Приклад 6 амонію (дослід AYP 036) Гідроліз АМТВМ при використанні каталізатора ТіО2/АІ2О3 (дослід ASE 064) Завантажують 52г готового розчину гідроксиду амонію Rectapur (30% мас/мас), або 918ммоль У цьому прикладі застосовують ту ж саму меІЧНз) в реактор-автоклав із нержавіючої сталі з тодику, що і в прикладі 5, використовуючи подвійною рубахою , який має у своєму складі пе8,0г каталізатора ТЮ2/АІ2О3 з Змас % Ті, регородки і магнітну мішалку Після закриття реак10,94г одержаного в прикладі 2 2 сирого аміду тора розчин нагрівають до температури 134°С (або 57,6ммоль АМТВМ) і в цілому 92,7г води через посередництво подвійної рубахи, при переОдержаний таким чином в реакторі розчин мімішуванні стить 0,56моль/кг АМТВМ, Після протікання реакції впродовж 7 годин конверсія аміноаміду становить В металеву крапельну лійку завантажують приблизно 52% Одержаний вихід метіоніну стано27,2г розчину АМТВМ з концентрацією 1,4моль/кг, вить приблизно 30% який одержують шляхом змішування 7,3г одержаного в прикладі 2 2 аміноаміду (або 38,4ммоль Приклад 7 АМТВМ) і 19,9г води Ферментативний гідроліз АМТВМ за допомоВміст металевої лійки швидко вводять в автогою Corynebactenum glutamicum pYG822 (дослід клав під тиском завдяки протитиску 20 бар азоту GF 571 і 590) Одержана таким чином суміш містить 0,49моль/кг Штамм Corynebactenum glutamicum pYG822, АМТВМ Потім І І перемішують при температурі описаний в патенті Франції 9014853 (28 1190), 150°С під тиском експресує амідазу Rhodococcus IBN 20 Corynebactenum культивують впродовж 24 годин при темпеПісля протікання реакції впродовж 1 години ЗО ратурі 30°С в 1л середовища, яке містить 10г трихвилин досягають виходу метіоніну 53% (розрахоптону, 5г дріжджового екстракту, 5г NaCI і 20мг ваного по відношенню до АМТВМ і початкового канаміцину Клітинний осад рекуперують шляхом імідазолідшону) центрифугування В реактор завантажують клітинПісля протікання реакції впродовж 7 годин таний осад, 0,1л ЮОмМ фосфатного буферу, рН 7,0, ким же чином досягають виходу метіоніну 81% і 2,2г одержаного в прикладі 2 2 АМТВМ Після Приклад 4 протікання реакції впродовж 6 годин при темпераГідроліз АМТВМ за допомогою гідроксиду турі 35°С конверсія аміноаміду становить 100% амонію (дослід AYP 038) У цьому прикладі застоВихід метіоніну становить 100% совують ту ж методику, що і в прикладі 3, використовуючи Приклад 8 88,8г суміші, утвореної 22,8г готового розчину Ферментативний гідроліз АМТВМ за допомогідроксиду амонію Rectapur (30%мас/мас), або гою Eschenchia coll рХІ_1751 (дослід GF 584) 402ммоль NH3, і 66,0г води, Штамм Eschenchia coh pXL1751, описаний в 12 11 59475 Європейському патенті 433117 (91-179908В), ексПорівняльний приклад 1 пресує амідазу Brevibactenum R312 Е coll культиГідроліз АМТВМ при використанні АЬОз (довують впродовж 24 годин при температурі 37°С в слід ASE 063) В цьому прикладі застосовують ту ж 1л середовища М9 (DIFCO), яке містить 4г casсаму методику, що і в прикладі 5, використовуючи амінокислот, 5г дріжджового екстракту і ЮОмг ам8,4г каталізатора АЬОз у вигляді кульок, піциліну Клітинний осад рекуперують шляхом 10,95г одержаного в прикладі 2 2 сирого аміду центрифугування В реактор завантажують клітин(або 57,6ммоль АМТВМ) і в цілому 108г води ний осад, 0,1л ЮОмМ фосфатного буферу, рН 7,0, Одержаний таким чином в реакторі розчин міі 2,2г одержаного в прикладі 2 2 АМТВМ Після стить 0,48моль/кг АМТВМ Після протікання реакції протікання реакції впродовж 6 годин при темперавпродовж 7 годин конверсія аміноаміду і вихід метурі 35°С конверсія аміноаміду становить 100% тіоніну практично нульові Вихід метіоніну становить 100% Комп'ютерна верстка Т Чепелєва Підписано до друку 06 10 2003 Тираж39 прим Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, Львівська площа, 8, м Київ, МСП, 04655, Україна ТОВ "Міжнародний науковий комітет", вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна