2-[3-(2-аміно-4-оксо-4н-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-n-(2-трифторометилфеніл)ацетамід, що виявляє протипухлинну активність

Реферат: 2-[3-(2-Аміно-4-оксо-4Н-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-N-(2трифторометилфеніл)ацетамід формули: O O N N N H F F S O F що виявляє протипухлинну активність. NH2 , UA 69856 U (54) 2-[3-(2-АМІНО-4-ОКСО-4Н-ТІАЗОЛ-5-ІЛІДЕН)-2-ОКСО-2,3-ДИГІДРОІНДОЛ-1-ІЛ]-N-(2ТРИФТОРОМЕТИЛФЕНІЛ)АЦЕТАМІД, ЩО ВИЯВЛЯЄ ПРОТИПУХЛИННУ АКТИВНІСТЬ UA 69856 U UA 69856 U 5 10 15 Корисна модель належить до синтезу нових гетероциклічних сполук і фармації, зокрема одержання біологічно активних сполук, що виявляють протипухлинну активність, і може бути використана в клінічній медицині як онкологічний лікарський засіб. Відомі лікарські засоби з протипухлинною активністю, наприклад темодал [http://compendium.com.Ua/info/l 66818/schering-plough/temodal]. Темодал - протипухлинний препарат з алкілуючою дією, належить до похідних імідазолотетразину. Цей лікарський засіб має необхідні лікувальні властивості, проте при тривалому застосуванні у пацієнтів спостерігаються численні побічні реакції, серед яких часто відзначаються лейкопенія, лімфопенія, тромбоцитопенія, анорексія, кандидоз ротової порожнини, тривога, безсоння, депресії, головокружіння, послаблення слуху тощо. Серед гетерилзаміщених похідних 2-оксо-1H-індолу є ряд протипухлинних агентів, серед яких відомий протипухлинний засіб сутент [http://compendium.com.ua/info/171343/pfizer-inc/sutent], який є фторовмісним похідним 2-оксо-1H-індолу з пірольним фрагментом в молекулі. Тому пошук нових синтетичних протипухлинних засобів із групи похідних 2-оксоіндолу з тіазолідиновим фрагментом є актуальним для сучасної фармацевтичної і медичної хімії. В основу корисної моделі поставлено задачу створення ефективного протипухлинного засобу з низькими побічними явищами. Поставлена задача вирішується тим, що синтезований 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-N-(2трифторометилфеніл)ацетамід формули: O O N N N H F F 20 25 30 35 40 45 50 S O NH2 , F що виявляє протипухлинну активність. Синтезована сполука є оранжевим кристалічним порошком, розчинним у ДМСО і ДМФА, малорозчинним в оцтовій кислоті, нерозчинним в спирті, ацетоні, воді та ефірі. Для доказу складу і структури синтезованої сполуки були використані відомі фізико-хімічні методи, зокрема ЯМР-спектроскопія (*Н), хромато-мас-спектрометрія та елементний аналіз. Одержані результати свідчать про відповідність синтезованої сполуки заявленій. Заявлену сполуку одержують взаємодією 2-аміно-4-тіазолідину з 2-(2,3-діоксо-2,3дигідроіндол-1-іл)-N-(2-трифторофенілметил)ацетамідом в умовах реакції Кньовенагеля. Реакцію проводять в середовищі оцтової кислоти в присутності безводного ацетату натрію як каталізатора. Для визначення активності 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1іл]-N-(2-трифторометилфеніл)ацетаміду попередньо проведено прескринінг протипухлинної -5 активності на 60 лініях ракових клітин людини, діючи на них лише однією дозою препарату (10 моль/л) [А. Monks, D. Scudiero, P. Skehan et al. Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines. J. Nat. Cancer Inst. 1991,83(11), 757-766]. За результатами прескринінгу 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3дигідроіндол-1-іл]-N-(2-трифторометилфеніл)ацетаміду встановлено, що середнє значення відсотку росту клітин відносно контролю становить 58,63% та зазначена сполука характеризується високою специфічністю дії (цитотоксичним ефектом) до окремих ліній недрібноклітинного раку легень (NCI-H460: -60,82%), епітеліального раку (SW-620: -37,70%), меланоми (MDA-MB-435: -12,43%) та раку молочної залози (T-47D: -15,32%). На основі високих результатів прескринінгу проведено ґрунтовний протипухлинний in vitro скринінг [R. Η. Shoemaker. The NCI60 Human Tumour Cell Line Anticancer Drug Screen. Nature Reviews / Cancer, 2006, 6, 813-823], який полягав у тестуванні сполуки, що заявляється, на 60 лініях людських ракових клітин у 5 концентраціях при 10-кратному розведенні. Протиракова активність 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]H-(2-трифторометилфеніл)ацетаміду вивчалась на клітинних лініях лейкемії (Leukemia) (CCRFCEM, HL-60(TB), K-562, MOLT-4, RPMI-8226, SR), недрібноклітинного раку легень (Non-Small Cell Lung Cancer) (A549/ATCC, EKVX, HOP-62, HOP-92, NCI-H23, NCI-H226, NCI-H322M, NCIH460, NCI-H522), епітеліального раку (Colon Cancer) (COLO 205, HCC-2998, HCT-116, HCT-15, 1 UA 69856 U 5 HT-29, KM12, SW-620), раку ЦНС (CNS Cancer) (SF-268, SF-295, SF-539, SNB-19, SNB-75, U251), меланоми (Melanoma) (LOX IMVI, Ml4, MALME-3M, SK-MEL-2, SK-MEL-28, SK-MEL-5, UACC-257, UACC-62), раку яєчників (Ovarian Cancer) (IGROV1, OVCAR-3, OVCAR-4, OVCAR-5, OVCAR-8, NCI/ADR-RES, SK-OV-3), раку нирок (Renal Cancer) (786-0, A498, ACHN, CAKI-1, RXF 393, SN12C, TK-10, UO-31), раку простати (Prostate Cancer) (PC-3, DU-145), раку молочної залози (Breast Cancer) (MCF7, MDA-MB-231/ATCC, HS 578T, MDA-MB-468, BT-549, T-47D). В умовах експерименту 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]N-(2-трифторометилфеніл)ацетамід проявив високу протипухлинну активність при тестуванні на -4 -8 60 лініях пухлинних клітин в інгредієнті концентрацій 10 –10 моль/л, як наведено в таблиці. 10 Таблиця Протипухлинна активність 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3дигідроіндол-1-іл]-N-(2-трифторометилфеніл)ацетаміду Протиракова активність in vitro lg GI50 lg TGI 3 4 -4,83 -4,21 > -4,00 > -4,00 -5,19 > -4,00 > -4,00 > -4,00 > -4,00 > -4,00 -6,23 -5,31 -5,62 -4,94 -4,96 > -4,00 -5,44 -4,85 -5,45 -4,69 -4,98 -4,60 -4,55 > -4,00 -4,72 > -4,00 -5,96 -5,42 -5,35 -4,70 > -4,00 > -4,00 -5,14 > -4,00 -5,87 -5,47 > -4,00 > -4,00 -5,41 > -4,00 -5,61 -4,19 -5,90 -5,45 -5,51 -4,75 -4,90 -4,51 -4,89 -4,12 -5,34 -4,80 -5,45 -4,79 -5,72 -5,19 -5,05 > -4,00 -5,17 -4,25 -4,89 -4,22 -5,87 -5,34 -4,54 -4,02 -5,26 -4,63 > -4,00 > -4,00 > -4,00 > -4,00 -4,85 -4,29 -4,61 > -4,00 -5,73 -5,33 -5,33 > -4,00 -4,52 > -4,00 Лінія клітин раку 1 2 CCRF-CEM HL-60(TB) K-562 Лейкемія (Leukemia) MOLT-4 RPMI-8226 SR A549/ATCC EKVX HOP-62 HOP-92 Недрібноклітинний рак легень NCI-H23 (Non-Small Cell Lung Cancer) NCI-H226 NCI-H322M NCI-H460 NCI-H522 COLO 205 HCC-2998 HCT-116 Епітеліальний рак (Colon cancer) HCT-15 HT-29 KM12 SW-620 SF-268 SF-295 SF-539 Paк ЦНС (CNS Cancer) SNB-19 SNB-75 U251 LOXIMVI M14 MALME-3M MDA-MB-435 Меланома (Melanoma) SK-MEL-2 SK-MEL-28 SK-MEL-5 UACC-257 UACC-62 IGROV1 OVCAR-3 Рак яєчників (Ovarian Cancer) OVCAR-4 OVCAR-5 2 UA 69856 U OVCAR-8 NCI/ADR-RES SK-OV-3 786-0 A498 ACHN CAKI-1 Рак нирок (Renal Cancer) RXF393 SN12C TK-10 UO-31 PC-3 Рак простати (Prostate Cancer) DU-145 MCF7 MDA-MB-231/ATCC Рак молочної залози (Breast HS 578T Cancer) BT-549 MDA-MB-468 T-47D -5,78 > -4,00 -5,35 -5,26 -4,47 -4,57 > -4,00 -4,98 -4,98 -5,06 > -4,00 -5,60 -5,53 -5,69 -4,84 -4,70 -4,58 -5,65 -5,87 -4,99 > -4,00 -4,83 -4,49 > -4,00 > -4,00 > -4,00 -4,59 -4,46 -4,59 > -4,00 -4,52 -4,28 -4,77 -4,37 > -4,00 -4,05 -4,83 -5,84 -4 5 10 15 20 Як видно з отриманих даних, речовина, що заявляється, у концентрації менше 10 моль/л пригнічує ріст пухлинних клітин на 50% на 50 з 60 досліджуваних ліній та створює повне 4 інгібування росту пухлинних клітин у концентрації менше 10" моль/л на 37 з 60 досліджуваних ліній. Таким чином, сполука, що заявляється, проявляє високу протипухлинну активність і є перспективним протираковим засобом. Для розуміння запропонованої корисної моделі нижче наведено приклад одержання 2- [3 (2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-N-(2трифторометилфеніл)ацетаміду. Сполуку синтезують таким чином. Синтез 2-[3-(2-аміно-4-оксо-4H-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-N-(2трифторометилфеніл)ацетаміду. Суміш 0,003 моль 2-аміно-4-тіазолідинону, 0,0033 моль 2-(2,3діоксо-2,3-дигідроіндол-1-іл)-ІУ-(2-трифторофенілметил)ацетаміду, 0,003 моль ацетату натрію в 10 мл оцтової кислоти нагрівають протягом 3 год. в колбі із зворотнім холодильником. Осад, який утворився після повного охолодження реакційної суміші, відфільтровують, промивають оцтовою кислотою, водою, етанолом та ефіром і перекристалізовують з суміші ДМФА-ЕЮН (1:2). Одержують оранжевий порошок з Т топл. 296-298°С, вихід - 73%. Знайдено, %: N 12,36; S 7,42. C20H13F3N4O3S. Вирахувано, %: N 12,55; S 7,18. 1 ЯМР Н, δ, м.ч.: 4,69с (2Н, СН2), 3,74с (3Н, СН3), 6,99д (1Н, J = 7,8 Гц, аром.), 7,12т (1Н, J = 7,5 Гц, аром.), 7,41-7,53м (4Н, аром.), 7,66т (1Н, J = 7,5 Гц, аром.), 7,72д (1Н, J = 7,7 Гц, аром.), + 9.04д, 9,22шс, 9,45шс (1Н, NH2), 9,86с (1Н, NH). ESI-MS m/z 447,8 (М+Н) . ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 25 2-[3-(2-Аміно-4-оксо-4Н-тіазол-5-іліден)-2-оксо-2,3-дигідроіндол-1-іл]-N-(2трифторометилфеніл)ацетамід формули: O O N N N H F F S O NH2 , F що виявляє протипухлинну активність. 3 UA 69856 U Комп’ютерна верстка І. Скворцова Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 4