N-(gamma-амінобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекан-гідрохлорід,що має антиамнестичну,антигіпоксичну та протисудорожну активність

(19) SH (її) 119740? (із) (51) б С 07 D 273/01. А 61 К 31/33 СОЮЗ СОВЕТСКИХ СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУБЛИК ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) (П) К 1 (21)3746258/04 (22)01.0684 (46)27.05.95 Бюа№15 (71) Физико-химический институт АН УССР, Научно-исследовательский институт фармакологии АМН СССР (72) Богатский А.В' Лукьяненко Н Г; Воронина ТА; * Головенко НЯ; Гарибова ТЛ^ Карасева ТД; Тимофеева С.Э: Басок С.С.; Вальдман А.В.; Середенин С.& Александровский ЮА; Любимов БИ. (56) Машковский М Д Лекарственные средства. М Медицина 1978, т.1, с.77. Богатский AR и др. Транквилизаторы, 1,4-бенздиазепиновые и родственные структуры Киев: Наукова Думка, 1980. с160. (54) N 4 У -АМИНОБУТИРИЛМ-АЗА-АМИНОБУТИРИЛЬ1-АЗА-4,7,10,13-ТЕТРАОКСАЦИКЛОПЕНТАДЕКАН-ГИДРОХЛОРИД, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИАМНЕСЇИЧЕСКОЙ, АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ И ПРОТИВОСУДОРОЖНОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) 1197407 Изобретение относится к органической химии, а именно к новому биологически активному соединению- fsHy-аминобутирил)1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекангидрохлориду, обладающему антиамнестической, антигипоксической и противосудорожной активностью, которое может найти применение в медицине. Целью изобретения является выявление новых свойств в ряду 1-зза-4,7,10,13тетраоксациклопентадекана. Получение Ы-{у-зминобутирил)-1-аза4,7,10,13-тетраоксациклопентадекан-гидрохлорида (соединение 1). К раствору 2,8 г (0,012 моль) N-карбобен;юкси~у-аминомасляной кислоты и 2,19 г (0,01 моль) азэ-15-крауна-5 в 5 мл сухого хлористого метилена при охлаждении ледяной водой и энергичном перемешивании прибавляют 2,5 г (0,012 моль) дициклогексилкарбодиимидз. Реакционную смесь выдерживают 12 ч при 20°С, после чего отфильтровывают осадок N.N'-дициклогексилмочевииы. Фильтрат последовательно промывают 1 н. соляной кислотой, 1 н. водным раствором бикарбоната натрия и водой. Растворитель отгоняют в вакууме. Из остатка выделяют І\І-(карбобензокси-у-аминобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекан методом колоночной хроматографии на силикагеле (элюент - ацетон: гексан, 3:1) в виде мэсла. Выход 4,1 г (93,6%). ИК-спектр: 1110 (С~О~С) 1640; 1720 (С=О); 3310-3380 см 1 (NH). Спектр ПМР: 7,22 с(5Н, С 6 Н 5 ); 5,85 с(1 Н, NH); 4,97 с (2Н, СН 2 , СбН5); 3,53 м (22Н, СНгО, CH 2 N, СОСН); 2,28 м (2Н, СОСНг, СН2); 1,78м(2Н,СН2, CH 2 N). Масс-спектр: т / е 438. Найдено, %: С 60,00; Н 7,41; N 6,05. Вычислено, %: С 60,25; Н 7.81; N 6,39. Затем через суспензию 1 г 10%-ного Pd/C а 200 мл метанола при перемешивании магнитной мешалкой пропускают водород в течение 1 ч и вносят раствор 4,1 г полученного Ы-(карбобензокси-у-аминобутирил)-аза-15-крэуна-5 в 50 мл метанола. Реа к ц и о н н у ю смесь п е р е м е ш и в а ю т до прекращения выделения двуокиси углерода. По окончании реакции катализатор отфильтровывают, промывают несколько раз метанолом и к объединенным фильтратам прибавляют 10 мл 10%-ного раствора HCI в метаноле. Растворитель удаляют в вакууме при 40°С. К остатку прибавляют сухой ацетон и отфильтровывают выпавший гидрохлорид ГМ-(у-аминобутирил)-1-эза4,7,10,13-тетрзоксациклопентадекана. Выход 3 г (95%). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 ИК-спектр: 1115 (С-О-С); 1640 (ОО): 3320-3480 см 1 (NH?). Спектр ПМР: 8,25 м (ЗН, NH3); 3,54 м (20Н, СН2О, CH 2 N); 3,04 м(2Н, СОСН2); 2,54 м (2Н, СН 2 СН 2 СН 2 ); 2,04 м (2Н, CH 2 CH 2 N). Масс-спектр: т / е 340. Найдено: С 49,11; Н 8,40; N8,31. Вычислено, %: С 49,33; Н 8,52; N 8,22. Соединение 1 испытывали на белых беспородных мышах-самцах массой 18-24 г и крысах-самцах массой 180-240 г при его внутрибрюшинном введении. Антиамнестическое действие изучали на модели пассивного избегания с использованием электрошока в качестве амнестического агента по обычно применяемой для этой цели методике. Методика состоит в следующем. Животное помещали в освещенный отсек экспериментальной камеры, которая состояла из двух отсеков: небольшого темного с электродным полом и большого освещенного. В течение 2 мин регистрировали время пребывания животного в освещенном и темном отсеках. Затем в темном отсеке животное подвергали болевому воздействию однократного удара электрическим током 0,4 мА, что является приемом обучения. Для получения амнезии использовали максимальный электросудорожный припадок (максимальный электрошок 50 Гц, 0,2 с). Проведение электрошока непосредственно после обучения вызывало стирание памятного следа. Тест на воспроизведение осуществляли через 24 ч после о б у ч е н и я : животное помещали в освещенный отсек камеры и регистрировали время пребывания в освещенном и темном отсеках в течение 2 мин. При воспроизведении рефлекса пассивного избегания животные контрольной группы без амнезии проводили большую часть двухминутного периода в светлой части установки. Электрошок вызывал у животных амнезию, в результате чего мыши оставались большую часть времени в темном отсеке. Синтезированное соединение вводили внутрибрюшинно за 40 мин до начала обучения. Антиамнестическое действие введ е н н о г о вещества в д о з е 50 м г / к г характеризовалось его способностью устранять стирающее действие электрошока на память, в результате чего время нахождения животных в светлой камере увеличивалось по сравнению с контролем. Аналогичное действие пирэиетама проявлялось в дозе 300 мг/кг (см. табл. 1), т.е. по величине эффективной дозы предлагаемое соединение превосходило пирацетам в 6 раз. Кроме то 1197407 го, преимуществом соединения 1 являлась его высокая эффективность воздействия на процесс обучения как до проведения сеанса электрошока, так и непосредственно после 5 амнестического воздействия. Антигипоксическое действие изучали в условиях острой гипобарической гипоксии, гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме, гемической гипоксии с нитритом натрия. Соединение 1 значительно повышало 10 устойчивость организма животных к трем видам кислородного голодания. Антигипоксическое действие в условиях острой гипобарической гипоксии изучали в барокамере при подъеме животных со ско- 15 ростью 50 м/с до площадки 11000 м. Определяли продолжительность жизни мышей на этой высоте. Использованная методика представляла собой жесткую модель острой 20 кислородной недостаточности. Соединение 1 обладало выраженным антигипоксическим эффектом, который значительно повышался с увеличением его дозы. Пирацетам в дозе 300 мг/кг увеличивал продолжительность жизни животных в 2,6 25 раза по сравнению с контролем, в то время как предлагаемое соединение в дозах 10 и 20 мг/кг удлиняло жизнь мышей в 3,3 и 6 раз соответственно (см. табл. 2). Защитное действие синтезированного 30 соединения 1 от гипоксии с гиперкапнией в гермообъеме изучали в термокамере объемом 250 мл и в дозах 10 и 20 мг/кг. Соединение увеличивало выживаемость животных на 20 и 30% соответственно, в то 35 время как такое же действие пирацетам оказывал в дозе 300 мг/кг. Гемическую гипоксию вызывали внутрибрюшинным введением 300 мг/кг нитрита натрия. 40 Соединение вводили в дозе 50 мг/кг, в результате чего время жизни мышей удлинялось на 50% в сравнении с контролем. Противосудорожную активность изучали по тестам антагонизма с коразолом, аре- 45 колином, стрихнином, предупреждения максимального электросудорожного при падка у мышей по общепринятым методикам. Спектр противосудорожного действий предлагаемого соединения в значительной степени был сходен с активностью препаратов бенздиазепинового ряда (см. табл. 3). но имел свои особенности. Следует отметить высокую противосудорожную активность предлагаемого соединения по антагонизму со стрихнином, ареколином, ЭД50 по этим видам действия значительно ниже в сравнении с дифенилгидантоином и на уровне феназепама. Синтезированное соединение проявляло равную активность с феназепамом и по предупреждению судорог, вызванных максимальным электрошоком. Предлагаемое соединение существенно отличалось от препаратов бенздиазепинового ряда отсутствием нежелательного миорелаксантного действия. Преимуществом синтезированного соединения являлся анксиолитический эффект, который изучали на крысах при столкновении питьевого и оборонительного рефлексов в условиях конфликтной ситуации. Соединение обладало мягким анксиолитическим действием: в дозе 20 мг/кг увеличивалось количество взятой воды в 3 раза по сравнению с контролем. Предлагаемое соединение в условиях конфликтной ситуации оказывало сходное с седуксеном действие на двигательную активность (см. табл. 4). Транквилизирующее действие проявлялось также в снижении агрессивности животных в 2 раза по сравнению с контролем в дозе 50 мг/кг [контрольные животные 9,0(7,810,2), опытные 4,4(2,7-6,1)]. Агрессивность оценивали по количеству драк пар мышей по общепринятой методике. Токсичность изучали при постоянной (22°С) температуре окружающей среды на индивидуально содержащихся мышах. Оценку результатов проводили через 24 ч после введения вещества. ЛД50 равно Ь00 мг/кг. Таблицаї Антиамнестическое действие Ы-(х-аминобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекан-гидрохлорида Вещество ЭДБО. Контроль ! мг/кг Время, проведенное в светлом отсеке, с до обучения при воспроизведении после амнезии 25,5(21,7-29,3) 55(42,6-67.4) Латентное время при воспроизведении с амнезией,с 16,8(11.5-22,1) Л 97407 Продолжение табл 1 Вещество ЭД50. мг/кг Время проведенное в светЛатентное лом отсеке, с время при восдо обучения при воспроиз- произведении ведении пос амнезией, с сле амнезии ГЧ-{у-Аминобутирил)-1-аза~4,7,10,13-тетраоксэциклопентадекан-гидрохлорид 50 26,3(22.0-30,6) Пирацетам 300 30,0(27,8-33.2) 101.6(83.4119,8) 82(67.9-96,3) 97,5(61,2133.8) " 71.8(57,5-85 9) Таблица2 Антигипоксическое действие М-(у-амино6утирил)-1-аза-4,7 10,13-тетраоксэциклопентадекан-гидрохлорида Доза, мг/кг Вещество Контроль М-(у-Аминобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекангидрохлорид Пирацетам 10 , _ 20 50 300 Продолжительность жизни Гипобариче- Гипоксия С ГИская гипоксия перкапнией в гермообьеме 100 100 330(310-350) 600 (380-820) 260(160-360) 120(80-160) 130(100-160) 130(100-160) ЖИВОТНЫХ. % Гемическая гипоксия 100 150.9(120-181) 113,4(97-129) ТаблицаЗ Спектр противосудорожных эффектов N-{y-аминобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекан-гидрохлорида Вещество с коразолом ОД50) -1 -азэ-4,7,10,13-тетрэоксациклопентадекангидрохлорид Дифенилгмдантоин Феназепам 20(18,224,8) 149,8(128175) 0,037 Антагонизм со стрихнином ОД50) 32 (22-46.4) 235(221249) 24,0 (10,1-57^6) Предупреж- Нарушение с ареколи- дение судо- координаном рог при ции движемаксимальний ОДБО) ном элект(ЭД50) рошоке (ЭД50) 20(15,224,8) 10 2 (6,2-16.1) 10(8,8-20,5) 12,8(10.815.1) 102 780 (634959) 2.1 (1,5-2,9) 9 1197407 10 Таблица4 Анксиолитическое действие N-( у-аминобутирил)-1-аза-4,7,10.13-тетраоксациклопентадекангидрохлорида Вещество Доза, мг/кг №-(/-Аминобутирил)-1-аза-4,7,10,13-тетраоксациклопентадекангидрохлорид Контроль Пирацетам Седуксен Ф о р м у л а 20 300 2 и з о б р е т е н и я N4 у -АМИН0БУТИРИЛ)-1-АЗА4,7,10,13-ТЕТРАОКСАЦИКЛОПЕНТА-ДЕКАН-ГИДРОХЛОРИД, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИАМНЕСТИЧЕСКОЙ, АНТИГИПОКСИЧЕСКОЙ И ПРОТИВОСУДОРОЖНОЙ АКТИВНОСТЬЮ N-{ у -Аминобутирил) -1-аза-4,7,10,13 Редактор М.Кузнецова Заказ 402 Показатели поведения число взятий подходы к по- двигательная активность воды илке 9.4(8.7-11,1) 3.2(2,3-4,1) 9,5(6.4-12,6) 14,2(6.8-22,4) 12(6.1-17.9) 4.4(1,5-7.3) 18,4(14,2-22,6) 32(27,6-36.4) 25,2(16,9-33.5) 48,7(37.2-60,2) 11,1(3.8-18,6) 7.8(2.8-12,8) тетраоксациклопентадекан - гидрохлорид формулы СИ о СН СН СН NH 'НС1 2 2 2 2 обладающий антиамнестической, антигипоксической и противосудорожной активностью. Техред М.Моргентал Корректор О.Кравцова Подписное Тираж НПО "Поиск" Роспатента 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 і