Спосіб визначення тіаметоксаму, біфентрину, гімексазолу та тираму – діючих речовин препаратів для протруювання насіння круїзер 350 fs т.к.с., семафор 20 st т.к.с., тачигарен з.п., роялфло в.с.к., в протруєному

Спосіб визначення тіаметоксаму, біфентрину, гімексазолу та тираму - діючих речовин препаратів для протруювання насіння Круїзер 350 FS т.к.с, Семафор 20 ST т.к.с., Тачигарен з.п., Роялфло в.с.к., в протруєному насінні цукрових буряків, який 2 C2 1 3 88947 4 ристання: газорідинного хроматографу з електроннозахватним детектором (ДЕЗ). Визначення методом ТШХ передбачає використання тонкошарових пластинок "Silufol"; рухомої фази гесан з ацетоном у співвідношенні 50:1; проявляючого CH3 реагенту: пари йоду - розчин крохмалю [6-10]. Відомі способи визначення гімексазолу в повіO Cl трі, ґрунті, воді методами високоефективної (ВЕРХ) та тонкошарової (ТШХ) хроматографії баCF3 O зуються на кількісній екстракції одним з екстрагентів (метанол, вода, диетиловий ефір, суміш гексаМолекулярна маса 422,9 ну з ацетоном). Подальше визначення методом Тачигарен, з. п. (ф."Санкіо", Японія) - фунгіцид ТШХ передбачає використання: тонкошарових - використовується для обробки насіння цукрових пластинок з силікагелем КСК або "Silufol"; рухомих буряків для захисту від коренеїда з нормою витрафаз: бензол з ацетоном у співвідношенні 1:3 або ти 6,0-15,0кг/т[1]. бензол з оцтовою кислотою - 4:1; проявляючих Діюча речовина - гімексазол, 700г/кг. Хімічна реагентів: бромфенолового синього або комбіноназва - 5-метил-3(2Н)-ізоксазол ваного проявника (послідовно: розчин нітропрусіду Молекулярна формула: C4H5NO2 натрію, розчин нітриту натрію, льодяна оцтова Структурна формула: кислота, розчин аміаку). Визначення методом H3 C ВЕРХ потребує використання складного приладу OH рідинного хроматографа з УФ - детектором [11-13]. O N Існуючі способи визначення тираму в насінні Молекулярна маса 99,15 та олії ріпаку, воді, зернових культурах і рослинРоялфло. в.с.к. (ф.''Кромптон ('Юніроял Кеміному матеріалі, горосі, ґрунті, кукурудзі та кукурукал") Регістрейшнс Лімітед", Велика Британія) дзяній олії, насінні та олії соняшнику методами фунгіцид - використовується для обробки насіння високоефективної (ВЕРХ) та тонкошарової (ТШХ) цукрових буряків для захисту від коренеїда з норхроматографії базуються на кількісній екстракції мою витрати 6,0л/т [1]. одним з екстрагентів (метиленхлорид, хлороформ, Діюча речовина - тирам, 480г/л. Хімічна назва ацетонітрил, суміш гексану з ацетоном); очистці - тетраметилтіурамдисульфід. способом розподільної або адсорбційної хроматоМолекулярна формула: C6H12N2S4 графії. Визначення методом ТШХ проводять із Структурна формула: застосуванням пластинок „Silufol"; рухомих фаз: CH3 сумішей гексану з ацетоном; гексану, бензолу, CH3 ацетону; бензолу з ацетоном; води з ацетоном у N-C-S-S-C-N CH3 різних співвідношеннях; проявляючих реагентів: CH3 реактиву Драгендорфа, водного розчину CuSO4 S S або розчину СuСl2 в етиловому спирті. Визначення методом ВЕРХ проводять з використанням складМолекулярна маса 240,4 ного приладу - рідинного хроматографа з УФ - деВідомі способи визначення тіаметоксаму в петектором. Фотометричний спосіб визначення тирці, баклажанах, томатах, томатному соку, капусті, раму базується на визначенні діючої речовини хмелі, воді, ґрунті, насінні соняшнику, зерні пшепісля її кислотного гідролізу до сірковуглецю і пениці, кукурудзи, соняшниковій і кукурудзяній олії, редбачає застосування складного приладу фотоцукровому буряку (коренеплоди), яблуках, яблучелектроколориметра [14-19]. ному соку, картоплі методом газорідинної хромаОднак відомі способи, вирішуючи завдання витографії (ГРХ) базуються на кількісній екстракції значення кожної діючої речовини окремо, стосуодним з екстрагентів (водний розчин ацетону, воються інших об'єктів і не вирішують завдання видний розчин метанолу, дихлорметан); очистці різзначення тіаметоксаму, біфентрину, гімексазолу та ними способами (колоночна хроматографія з витираму в одній наважці протруєного насіння цуккористанням силікагелю, розподільна з рових буряків та мають ряд недоліків, а саме: використанням гексану). Подальше визначення 1. Визначається тільки одна діюча речовина. методом ГРХ передбачає використання: газорі2. Витрачається значна кількість часу на анадинного хроматографу з електроннозахватним ліз (8-10 етапів). детектором (ДЕЗ) [2-5]. 3. Для проведення аналізу необхідні складні Існуючі способи визначення біфентрину в поприлади (газорідинний хроматограф з детектором вітрі, воді; зерні, насінні кукурудзи і соняшника, по захвату електронів, рідинний хроматограф з УФ кукурудзяній та соняшниковій олії, цукровому бу- детектором та фотоелектроколориметр). ряку, рослинних об'єктах методами газорідинної В основу винаходу поставлено завдання ство(ГРХ) та тонкошарової (ТШХ) хроматографії базурити експресний спосіб визначення чотирьох діюються на кількісній екстракції одним з екстрагентів чих речовин (з високою точністю) за рахунок ско(хлороформ, ацетонітрил, ацетон, суміш метанолу рочення часу виконання робіт; знизити витрати на з ацетонітрилом, гексан, суміш дистильованої вовизначення вмісту діючих речовин за рахунок зниди з ацетонітрилом та метиловим спиртом); очисження витрат реактивів, виключення з аналізу трутці різними способами (колоночна хроматографія з домістких підготовчих робіт та складної апаратури використанням флоризилу або силікагелю). Подальше визначення методом ГРХ передбачає вико 5 88947 6 (газорідинного рідинного хроматографів та фото(0,2г) екстрагують невеликим об'ємом розчинника електроколориметра). (1мл) протягом 1 години. На тонкошарову пластиПоставлене завдання вирішується тим, що у нку наносять мікрооб’єми екстракту і стандартних запропонованому способі визначають тіаметокрозчинів діючих речовин. Змочують нижній край сам, біфентрин, гімексазол та тирам одночасно в пластинки (0,5см) у 10% розчині оцтової кислоти в одній наважці. Спосіб з використанням відомого ацетоні. Хроматографують пластинку у рухомій методу ТШХ у винаході реалізується при викорисфазі (гексан + ацетон у об'ємних співвідношеннях танні пластинок з тонким шаром адсорбенту, на2:1), яка забезпечує чітке розділення хроматогранесеним на алюмінієву підложку „SORBFIL", які на фічних зон чотирьох діючих речовин. Після того як відміну від тих, що використовуються, містять адграниця елюенту підніметься на 10см, пластинку сорбент силікагель СТХ-1А і зв'язуючу речовину виймають з камери для хроматографування, сусиліказоль, а не Silpearl з крохмалем або силікашать на повітрі до повного видалення розчинника. гель КСК з крохмалем, і, за підкислення тонкого Для ідентифікації діючих речовин пластинку вмішару адсорбенту, дають оптимальне розділення щують під лампу ультрафіолетового опромінення речовин; рухомої фази, проявляючого реагенту. на 15 хвилин для активування зон діючих речовин, Ідентифікацію сполук проводять за величиною Rf, потім обробляють 1% розчином нітрату срібла в а кількісне визначення за формулою розрахункоацетоні з аміаком і ще раз вміщують під лампу УФ вим методом. на 1 хвилину. Тіаметоксам, біфентрин, гімексазол Тут і далі терміном : та тирам проявляються у вигляді коричневих плям - „величина Rf'' позначена величина, що харана світлому фоні з Rf = 0,10; 0,90; 0,62; 0,75 відпоктеризує швидкість руху речовини в шарі адсорбевідно. нту і дорівнює відношенню відстаней від лінії наПриклад. несення (старту) розчинів до центру плями (зона Наважку протруєного насіння цукрових буряків локалізації речовини) до відстані від старту до лінії 0,2г вміщують у бюкс, приливають 1мл ацетону, фронту розчинника; щільно закривають притертою кришкою і прово- „рухома фаза" - суміш органічних розчинників дять екстракцію на струшувачі протягом однієї у певному об'ємному співвідношенні; години. Дають екстракту відстоятися, зливають у - „проявляючий реагент" - реактив, що при мірну пробірку на 5мл, промивають пробу невеливзаємодії з діючою речовиною дає забарвлений кою кількістю ацетону і знову зливають у пробірку, продукт і дозволяє визначити зону її локалізації. доводячи об'єм до 1мл. Готують стандартні розчиПослідовне виконання нових суттєвих ознак у ни кожної діючої речовини окремо, які містять: для запропонованому способі, що включає : тіаметоксаму, тираму, гімексазолу 1,0мкг/мкл; для - взяття однієї наважки 0,2г замість 5-50г; біфентрину 0,10мкг/мкл. На трьох пластинках від- використання тільки екстракції ацетоном замічають простим олівцем лінію старту на відстані мість екстракції та очистки з використанням бага20мм від нижнього краю пластинки та лінію фронтьох різних розчинників; ту на відстані 100мм від лінії старту. На лінії старту - визначення на тонкошарових пластинках дівідмічають сім точок. На одну пластинку у перші ючих речовин одночасно в процесі одного аналізу три точки наносять 0,2; 0,5; 1,0мкл проби; поруч замість визначення кожної окремо за різних умов; наносять 0,1; 0,3; 0,5; 0,7мкл стандартного розчидозволило створити спосіб визначення тіамену тіаметоксаму, що містять відповідно 0,1; 0,3; токсаму, біфентрину, гімексазолу та тираму діючих 0,5; 0,7мкг діючої речовини. На другу пластинку в речовин препаратів для протруювання насіння перші три точки наносять 0,5; 1,0; 1,5мкл проби; у Круїзер, 350 FS т.к.с, Семафор 20 ST т.к.с., Тачичетверту точку - 0,1мкл (0,1мкг) тираму та 0,5мкл гарен, з.п., Роялфло, в.с.к., який : (0,5мкг) гімексазолу, у п'яту - 0,5мкл (0,5мкг) тира1) дозволяє визначати чотири діючі речовини му та 1,0мкл (1,0мкг) гімексазолу; у шосту - 0,7мкл в процесі одного аналізу; (0,7мкг) тираму та 1,5мкл (1,5мкг) гімексазолу; у 2) є експресним і дозволяє скоротити більше, сьому 1,0мкл (1,0мкг) тираму. На третю пластинку ніж вдвічі час виконання робіт (замість багатоетау перші три точки наносять 5,0; 10,0; 20,0мкл пропного аналізу проводити аналіз з виключенням би, і поруч - 3,0; 7,0; 10,0; 20,0мкл стандартного трудомістких підготовчих етапів); розчину біфентрину, що містять відповідно 0,3; 3) має незначну відносну похибку, менше 7%; 0,7; 1,0; 2,0мкг діючої речовини. Визначення про4) простий у виконанні, не потребує складної водять в межах лінійної залежності площі зони апаратури (газорідинного або рідинного хроматоглокалізації речовини від їх кількості. Пластинки рафа, фотоелектроколориметра), великої витрати хроматографують і проявляють. Проявлені плями реактивів. тіаметоксаму, біфентрину, гімексазолу та тираму Заявлений спосіб здійснюється таким чином: копіюють на міліметровий папір і визначають їх наважку протруєного насіння цукрових буряків площі, значення яких наведені в табл. 1. 7 88947 8 Таблиця 1 Залежність площ зон локалізації діючих речовин від їх кількості (стандартні розчини) Діюча речовина Тіаметоксам Тирам Гімексазол Біфентрин 0,10/2,02 0,10/8,80 0,50/3,64 0,30/5,74 Кількість, мкг /площа зон, мм2 0,30/3,97 0,50/5,72 0,50/28,70 0,70/37,32 1,00/10,04 1,50/13,90 0,70/8,34 1,00/9,72 0,70/7,00 1,00/45,04 2,00/17,07 2,00/13,52 Примітка. Відносна похибка 7% при n=5, Р=0,95. Розрахунок кількості діючих речовин проводять за відомою формулою : C - C1 (S 2 - S x ) , де Cx = C2 - 2 S 2 - S1 C x і S x - кількість і площа плями речовини, що визначається на пластинці, мкг, мм2; C 2 , C1 і S 2 , S1 - кількість і площі відповідних плям стандартних розчинів з більшим і меншим вмістом діючої речовини [20]. Наприклад, у 0,5мкл проби визначена площа зони тіаметоксаму становить 4,23мм2 (перша пластинка); у 1,0мкл проби площі зон тираму і гімексазолу становлять 30,86 та 6,84мм2 відповідно (друга пластинка); у 10мкл проби площа зони біфентрину становить 9,49мм2 (третя пластинка). Розраховані кількості діючих речовин становлять: Тіаметоксаму 0,5 - 0,3 C x = 0,5 (5,72 - 4,23) = 0,33(мкг) ; 5,72 - 3,97 тираму 0,7 - 0,5 С х = 0,7 (37,32 - 30,86) = 0,55(мкг ) ; 37,32 - 28,70 гімексазолу 10 - 0,5 , С х = 1,0 (10,04 - 6,84) = 0,75(мкг) ; 10,04 - 3,64 біфентрину 1,0 - 0,7 С х = 1,0 (9,72 - 9,49 ) = 0,95(мкг) ; 9,72 - 8,34 Кількість діючих речовин в кг/т обробленого насіння розраховують за формулою : Сх Су = , де Vx ´ Px C у - концентрація діючої речовини, що ви значається (кг/т); Vx , C x - об'єм екстракту, нанесений на пластинку та кількість діючої речовини, визначена в ньому (мкл, мкг); Px - наважка протруєного насіння, г. Розраховані за цією формулою концентрації діючих речовин становлять для : Тіаметоксаму 0,33 Cу = = 3,30(кг m) ; 0,5 ´ 0,2 тираму 0,55 = 2,75(кг m) ; 1,0 ´ 0,2 гімексазолу 0,75 Cу = = 3,75(кг m) ; 1,0 ´ 0,2 біфентрину 0,95 Cу = = 0,48(кг m ) ; 10,0 ´ 0,2 Кількість препарату визначають за формулою: C = C у ´ k , де Cу = С - кількість препарату, що визначається, кг/т; C у - визначена концентрація діючої речовини, кг/т; k - коефіцієнт перерахунку на відповідний препарат: для Круїзеру (тіаметоксам, 350г/л) k = 2,86 ; для Роялфло (тирам, 480г/л) k = 2,08 , для Тачигарену (гімексазол, 700г/кг) k = 1,43 , для Семафору (біфентрин, 200г/л) k = 5,00 . Круїзер,350 FS т.к.с. С =3,30х2,86=9,44кг/т; Роялфло, в.с.к. С =2,75х2,08=5,72кг/т; Тачигарен, з.п. С =3,75х1,43=5,36кг/т; Семафор 20 ST т.к.с. С =0,48х5,00=2,40кг/т Розраховані кількості препаратів відповідають нормі обробки Круїзером,350 FS т.к.с. з нормою витрати 10,0л/т (3,50кг/т тіаметоксаму); Роялфло, в. с. к. з нормою витрати 6,0л/т (2,88кг/т тираму); Тачигареном, з. п. з нормою витрати 6,0кг/т (4,20кг/т гімексазолу); Семафором 20ST т.к.с. з нормою витрати 2,5л/т (0,5кг/т біфентрину). Отримані дані свідчать про високу точність визначення діючих речовин препаратів Круїзер, 350 FS т.к.с, Роялфло, в.с.к. Тачигарен, з. п., Семафор 20 ST т.к.с. у протруєному насінні цукрових буряків відповідно до заявленого способу. Наведені дані підтверджують досягнення технічного результату при здійсненні заявленого методу. Джерела інформації: 1. Пестициди та агрохімікати України / Практ. довід, для фахівців сільського господарства. - Д.: АРТ-ПРЕС, 2006. - 319с. 2. Гиренко Д.Б., Скотенко Н.П., Доля Н.Н., Виповська А.П., Пушков Д.Г. Методичні вказівки з визначення тіаметоксаму у перці, баклажанах, томатах, томатному соку, капусті та хмелі методом газорідинної хроматографії №352-2002 // 36. 9 88947 10 Методичні вказівки з визначення мікрокількостей кормах и внешней среде. - К. - №22(1). - 1995. пестицидів в продуктах харчування, кормах та С.9-15. навколишньому середовищі. - К. - №41 - 2006. 11. Рева H.I., Павленко І.П., Задорожних Т.А. С.212-226. Методичні вказівки з визначення гімексазолу в 3. Гиренко Д.Б., СкотенкоН.П., Кириченко атмосферному повітрі методами високоефективА.В., Виповська А.П. Методичні вказівки з визнаної рідинної та тонкошарової хроматографії чення тіаметоксаму у воді, ґрунті, насінні соняш№362-2002 // Зб. Методичні вказівки з визначеннику, зерні пшениці, кукурудзи, соняшниковій і ня мікрокількостей пестицидів в продуктах харчукукурудзяній олії, цукровому буряку №250-2001 // вання, кормах та навколишньому середовищі. - К. Зб. Методичні вказівки з визначення мікрокілько- №39. - 2004. - С.55-70. стей пестицидів в продуктах харчування, кормах 12. Чмиль В.Д, Соломко Л.А. Методические та навколишньому середовищі. - К. - №37. - 2004. указания по определению остаточных количеств - С.24-29. тачигарена в почве тонкослойной хроматографи4. Гиренко Д.Б., Скотенко Н.П., Виповська ей №2827-83 // Сб. Методические указания по А.П., Кириченко А.В. Методичні вказівки з визнаопределению микроколичеств пестицидов в прочення тіаметоксаму в яблуках, яблучному соку і дуктах питания, кормах и внешней среде. картоплі газохроматографічним методом №251М.,ч.ХУ. - 1984. - С.205-210. 2001 // Зб. Методичні вказівки з визначення мік13. Чмиль В.Д., Безкровный Е.В., Меженной рокількостей пестицидів в продуктах харчування, А.С. Методические указания по определению кормах та навколишньому середовищі. - К. - №37. тачигарена в воде методом тонкослойной хрома– 2004. – С.30-35. тографии №2094-79 // Сб. Методические указа5. Гиренко Д.Б., Виповська А.П., Пушков Д.Г. ния по определению микроколичеств пестицидов Методичні вказівки з виконання вимірювань тіав продуктах питания, кормах и внешней среде. метоксаму в зерні гороху методом газорідинної М.,ч.Х1. - 1981. - С.209-212. хроматографії №280-2001 // Зб. Методичні вказів14. Мурашко С.В., Морару Л.Є. Методичні ки з визначення мікрокількостей пестицидів в вказівки з визначення тираму в насінні та олії продуктах харчування, кормах та навколишньому ріпаку методом високоефективної рідинної хросередовищі. - К. - №37. - 2004. – С.76-80. матографії №395-2003// Зб. Методичні вказівки з 6. Бойко Н.И., Выповская А. П., Пельо И. М. визначення мікрокількостей пестицидів в харчоМетодические указания по хроматографическому вих продуктах, кормах та навколишньому сереизмерению концентраций бифентрина и зетацидовищі. - К. - №43. - 2007. - С.2435-255. перметрина в атмосферном воздухе №67-97 // 15. Клисенко М.А., Тивоненко В.А., Гиренко Сб. Методические указания по определению миД.Б., Морару Л.Г. Методические указания по опкроколичеств пестицидов в продуктах питания, ределению ТМТД и продукта его превращения кормах и внешней среде. - К. - №26. - 2000.,С.63ТМТМ в воде, зерновых культурах и раститель66. ном материале методом тонкослойной хроматог7. Тимина Л.А., Лебедев Д.Л., Пельо И.М., рафии №4334-87 // Сб. Методические указания Гиренко Д.Б Методические указания по опредепо определению микроколичеств пестицидов в лению бифентрина (Талстара) в зерне, семенах продуктах питания, кормах и внешней среде. - К. и масле подсолнечника и кукурузы №66-97 // Сб. - №18(2). - 1995. - С.151-155. Методические указания по определению микро16. Мурашко С. В., Чмиль В. Д., Юрченко В. количеств пестицидов в продуктах питания, корВ., Зульфигаров О. С., Дудинская Т. П., Каширимах и внешней среде. - К. - №29. - 2001. - С.44на Н. В., Морару Л. Е. Методические указания по 48. определению тирама в почве, кукурузе и кукуруз8. Виповська А.П., Бардов В.Г., Омельчук ном масле хроматографическими методами С.Т., Сухомлин Т.О. Методичні вказівки з визна№94-98 // Сб. Методические указания по опредечення біфентрину в цукровому буряку методом лению микроколичеств пестицидов в продуктах газорідинної хроматографії №312-2002 // Зб. Мепитания, кормах и внешней среде. - К. - №27. тодичні вказівки з визначення мікрокількостей 2000. – С.146-151. пестицидів в харчових продуктах, кормах та на17. Мурашко С.В., Чмиль В.Д., Морару Л.Е., вколишньому середовищі. - К. - №41 - 2005. - С.5Юрченко В.В., Зульфигаров О.С. Методические 18. указания по определению тирама в горохе хро9. Петросян М.С., Джагацпанян С.А., Бунятян матографическими методами №93-98 // Сб. МеЮ.А. Методические указания по хроматографитодические указания по определению микрокоческому измерению концентраций бифентрина личеств пестицидов в продуктах питания, кормах (Талстара) в воздухе рабочей зоны №6220-91 // и внешней среде. - К. - №27. - 2000. – С.140-145. Сб. Методические указания по определению ми18. Чмиль В.Д., Давидюк Е.И. Методические кроколичеств пестицидов в продуктах питания, указания по определению тирама в семенах и кормах и внешней среде. - К. - №22(2). - 1995. масле подсолнечника методами тонкослойной С.4-9. хроматографии и фотоэлектрокалориметрии 10. Киселева Н.И., Гнед С.И., Пархомчук Н.И. №188-2000 // Сб. Методические указания по Методические указания по газохроматографичеопределению микроколичеств пестицидов в проскому определению бифентрина (Талстара) в дуктах питания, кормах и внешней среде. - К. растительных объектах, воде, почве №6207-91 // №32 . -2001 - С.24-31. Сб. Методические указания по определению ми19. Бублик Л.И., Федоренко Н.В., Гаврилюк кроколичеств пестицидов в продуктах питания, Л.Л. Методические указания по определению 11 88947 12 смеси карбофурана с беномилом и ТМТД ( предуктах питания, кормах и внешней бреде. - М.: парат «КОМБИ») в растения сахарной свеклы ВО Агропромиздат, 1992. - Т.2. - С.92-100. методом тонкослойной хроматографии// М.А. 20. Клисенко М.А., Александрова Л.Г., ДемЛисенко, А.А.Калинина. К.Ф.Новикова Методы ченко В.Ф., Макарчук Т.Л. Аналітична хімія залиопределения микроколичеств пестицидов в прошкових кількостей пестицидів :Навч. Посібник К.:ЕКОГІНТОКС, 1999. - 238с. Комп’ютерна верстка В. Мацело Підписне Тираж 28 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601