Активна біологічна субстанція “хлорофіліпт актив плюс” (clorophylliptum active plus)

Реферат: Активна біологічна субстанція полягає в наявності: екстракту евкаліпту, бензалконію хлориду та ефірних олій евкаліпту, м'яти, піхти, сосни, лаванди, чайного дерева, розмарину, коріандру, троянди та полині. UA 115034 U (12) UA 115034 U UA 115034 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Корисна модель, що заявляється, належить до активної біологічної або фармацевтичної субстанції, яка має антибактеріальну активність, виявляє бактерицидну, бактеріостатичну та протигрибкову дії. Корисну модель може бути використано для профілактики, і лікування інфекційнозапалювальних захворювань. Також корисну модель може бути використано для пригнічення активності росту штамів: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Basillus subtilis ATCC 6633 та Candida aibicans ATCC 653/885. Корисна модель може бути використана у хімічній, фармацевтичній, косметичній та харчовій промисловості. Відомий рівень техніки Зростання кількості інфекцій, викликаних різного роду мікроорганізмами, які проявляють стійкість до багатьох антимікробних препаратів, вимагає необхідність розширення арсеналу препаратів місцевої дії, що мають антимікробну дію, за які застосовуються синтетичні і напівсинтетичні антибіотики, до яких у більшості мікроорганізмів швидко формується стійкість. Крім того, дані антимікробні препарати мають токсичну дію на органи і системи організму людини і тварин, сприяють розвитку дисбактеріозів, гепатитів тощо. До складу більшості протимікробних препаратів місцевої дії входять антисептики хімічного походження, проте вони є для організму ксенобіотиками і тому на тлі інфекційної інтоксикації обумовлюють додаткове навантаження його метаболізуючих і елімінувальних систем, а отже, є можливою причиною розвитку побічних реакцій, особливо у дітей, вагітних жінок, жінок у період лактації та хворих на хронічні захворювання. У зв'язку з цим стають все поширенішими фітопрепарати, які являють собою препарати місцевої дії, що включають рослинні компоненти (евкаліпт, м'ята, шавлія та інші). У результаті чого фітопрепарати містять комплекси біологічно активних речовин, які близькі метаболітам організму і біологічно сумісні з ними. Іншою перевагою препаратів місцевої дії «фітопрепаратів» є їх нормалізуючий вплив на змінені функції організму при відсутності впливу на інші показники. Зазначені властивості, а також використання невисоких доз рослинних компонентів, дозволяє практично виключити токсичні і побічні ефекти на організм людини під час їх використання. Відомий препарат «Хлорофіліпт» (Clorophylliptum), який отримують з листя евкаліпта кулькового (Eucalyptus globulus L) або евкаліпта прутовидного (Eucaliptus viminalis. L) шляхом екстракції 95% етанолом, який має антибактеріальну активність відносно стафілококів, стрептококів і картопляної палички, (див. А.с № SU1123706). На практиці використовують 0,25 %, 1 % спиртовий або 2 % масляний розчини «Хлорофіліпту». Основними біологічно активними речовинами препарату є ліпофільні речовини: суміш еуглобалей (фенолоальдегідів), терпеноїдів і хлорофілів (Куркин В.А. «Фармакогнозия», Самара, ООО «Офарт», 2004 г., с.327333). Розчин «Хлорофіліпту» (див. А.с. див. № SU 801341) отримують за шляхом екстракції листя евкаліпта прутовидного (Eucaliptus viminalis. L) 96 % етанолом і наступною обробкою отриманого концентрованого екстракту сіллю двовалентної міді, а саме 4 % розчином сірчанокислої міді з подальшим витяганням цільового продукту - суми гідрофобних компонентів, у т.ч. мідних аналогів хлорофілу бензолом. Екстрагування бензолом проводять тричі з перемішуванням кожен раз по 15 хвилин і відстоюванням протягом 5-6 годин. Відстояний бензольний витяг промивають 3 рази очищеною водою і упарюють під вакуумом при температурі 40 °С, а після розчиняють в спирті або в олії. Також відомі інші способи отримання «Хлорофіліпту» та препарати виготовлені на його основі див. SU1123706, RU232Q360, RU2416423, UA39463, UA79383, UA92308. Недоліками Хлорофіліпту та препаратів виготовлених на його основі є те, що його антимікробна дія спрямована переважно на бактерії роду Staphylococcus та не може бути використано проти грибів. Наприклад, у таблиці №1 наведені діаметр затримки росту 1 % екстракту хлорофіліпту. 1 UA 115034 U Таблиця 1 Діаметр зони затримки росту при використанні екстрактів, мм 23 13 14 Мікроорганізм Staphylococcus aureus ATCC 25923 Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Basillus subtilis ATCC 6633 Candida aibicans ATCC 653/885. 5 10 15 20 25 30 35 Суть корисної моделі Задачею корисної моделі є створення активної біологічної субстанції, яка має антибактеріальну активність, виявляє бактерицидну, бактеріостатичну тапротигрибкову дії. Також задачею корисної моделі є пригнічення активності росту штамів: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Basillus subtilis ATCC 6633 та Candida aibicans ATCC 653/885. Інші задачі та переваги корисної моделі будуть розкриті по мірі викладення опису та таблиць. Поставлені вищевказані задачі досягаються у результаті створення активної біологічної субстанції, яка характеризується наявністю екстракту евкаліпту, бензалконію хлориду та ефірних олій евкаліпту, м'яти, піхти, сосни, лаванди, чайного дерева, розмарину, коріандру, троянди та полині при наступному співвідношенні компонентів, ваг. %: екстракт евкаліпту 18,86-55,63 бензалконію хлорид 18,86-44,47 ефірна евкаліптова олія 3,70-22,24 ефірна олія м'яти 3,70-22,24 ефірна олія піхти 0,1-4,42 ефірна олія сосни 0,1-4,42 ефірна олія лаванди 0,1-4,42 ефірна олія чайного дерева 0,1-4,42 ефірна олія розмарину 0,1-4,42 ефірна олія коріандру 0,1-4,42 ефірна олія троянди 1,34-2,24 ефірна олія полині 1,34-2,24. Також відповідно до корисної моделі, вищевказана активна біологічна субстанція додатково містить 1-15 % полівінілпіролідону. Також відповідно до корисної моделі, вищевказана активна біологічна субстанція додатково містить 10-50 % полісорбату 80. Не маючи наміру пов'язувати себе з будь-якою певною теорією, автори корисної моделі вважають, що поєднання активних компонентів екстракту евкаліпту, бензалконію хлориду та комплексу ефірних олій у активній біологічній субстанції здійснює синергізм фармакологічної дії у результаті чого використання отриманої активної біологічної субстанції призводить до пригнічення активності росту штамів: Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Basillus subtilis ATCC 6633 та Candida aibicans ATCC 653/885. Отримана активна біологічна субстанція має антибактеріальну активність, виявляє бактерицидну, бактеріостатичну та протигрибкову дії. Використання у активній біологічній субстанції полівінілпіролідону призводить до того, що забезпечується пролонгація антимікробної та протигрибкової дії, яка полягає у тому, що наявність полівінілпіролідону створює плівку на поверхні органу, який оброблюють, а це призводить до покращення адгезії, що й обумовлює пролонгацію антимікробної та протигрибкової дії. Використання у активній біологічній субстанції полісорбату 80 призводить до того, що підвищується стабільність розчину. Приклад №1 Для приготування активної біологічної субстанції здійснюють змішування активних компонентів: екстракту евкаліпту, бензалконію хлориду та ефірних олій евкаліпту, м'яти, піхти, сосни, лаванди, чайного дерева, розмарину, коріандру, троянди та полині та додаванням додаткових компонентів полівінілпіролідону та полісорбату 80. 2 UA 115034 U 5 У таблиці №2 наведені три отримані зразки біологічної активної субстанції, які здійснюють пригнічення активності росту штамів: Staphylococcus aureus АТСС 25923, Escherichia соlі АТСС 25922, Proteus vulgaris ATCC 4636, Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Basillus subtilis ATCC 6633 ТЭ Candida atbtcans ATCC 653/885. При цьому у колонках С 1, С2, С3 представлено пропорції головних компонентів субстанції без наявності полісорбату 80 та полівінілпіролідону. Як олії м'яти використовували олію м'яти перцевої. Таблиця 2 Зразки біологічно активної субстанції, ваг. % 1 2 3 18,86 55,62 27,03 18,86 33,1 27,03 18,33 3,7 13,52 18,33 3,7 13,52 3,67 0,1 2,71 3,67 0,1 2,71 3,67 0,1 2,7 3,67 0,1 2,7 3,66 0,1 2,7 3,66 0,1 2,7 1,81 1,64 1,34 1,81 1,64 1,34 Склад екстракт евкаліпту бензалконію хлорид ефірна евкаліптова олія ефірна олія м'яти ефірна олія піхти ефірна олія сосни ефірна олія лаванди ефірна олія чайного дерева ефірна олія розмарину ефірна олія коріандру ефірна олія троянди ефірна олія полині 10 15 Отримані зразки активної біологічної субстанції мають колір від зеленого до зеленуватокоричневого, строк придатності 36 місяців, та мають антибактеріальний та протигрибковий ефекти. Приклад №2 На основі отриманого зразка №3 активної біологічної субстанції див. приклад №1 здійснили отримання препарату місцевої дії, для чого змішали очищену воду з гліцерином з наступним додаванням активної біологічної субстанції (зразок №3), у результаті чого отримали три зразки препарату місцевої дії див. таблицю №3. Таблиця 3 Зразки препарату місцевої дії, ваг.% 1 2 3 0,5 0,1 0,97 1 1 1 98,5 98,9 98,03 Склад активна біологічна субстанція гліцерин вода очищена 20 25 30 35 Після чого здійснили визначення антибактеріальної та протигрибкової активності отриманого зразка №3 "Хлорофіліпт актив плюс". Для порівняння результатів взяли контрольний препарат - спрей Хлорофіліпту, який було виготовлено ДНЦЛЗ (Державний науковий центр лікарських засобів). Здійснили приготування мікробної суспензії штамів (мікроорганізмів), яку проводили з використанням приладу Densi-La-Meter (виробництво PLIVA-Lachema, Чехія; довжина хвилі 540 нм). Мікробну суспензію штамів готували згідно з інструкцією, яка додається до приладу, Т9 Інформаційного листа про нововведення в системі охорони здоров'я № 163-2006 "Стандартизація приготування мікробних суспензій", м. Київ. Синхронізацію культур штамів 7 проводили з використанням низької температури (4 °С). Мікробне навантаження складало 10 мікробних клітин на 1 мл середовища і встановлювалося за стандартом McFarland. У роботу брали 18-24 годинну культуру штамів мікроорганізмів. Для досліджень використали агар Мюллера-Хинтона (Виробництво - Індія «HIMediaLaboratories Pvt. Ltd India», термін придатності середовища до ХІ.2016р.). Для Candidaalbicans використали агар Сабуро (Виробництво - Індія, «HIMediaLaboratories Pvt. Ltd India» термін придатності середовища до XI.2016р.). Метод дифузії препарату в агар проводили "колодязями". Визначення активності антибактеріальних препаратів проводили на двох шарах щільного поживного середовища, розлитого в чашки Петрі. У нижньому шарі використали "голодні" не засіяні середовища (агар 3 UA 115034 U 5 10 15 20 агар, води, солі). Нижній шар є підкладкою з 10 мл "голодного агару", на яку строго горизонтально встановлюють 3-6 тонкостінних циліндра з нержавіючої сталі діаметром 8 мм і заввишки 10 мм. Навколо циліндрів заливають верхній шар, що складається з поживного агаризованого середовища, розплавленого і охолодженого до 40 °С у яке вносили відповідний стандарт добової культури тест-штамів. Заздалегідь, верхній шар добре перемішувався до утворення однорідної маси. Після застигання циліндри стерильним пінцетом витягали і в лунки, що утворилися, поміщали випробовувані препарати (Хлорофіліпт, виготовлений ДНЦЛЗ (патент UA 39463) та зразок №3 "Хлорофіліпт актив плюс") з урахуванням його об'єму (0,3 мл). Об'єм середовища для верхнього шару коливався від 14 до 16 мл. Чашки підсушували 30-40 хв. при кімнатній температурі і ставили в термостат на 18-24 годин. При оцінці антимікробних та протигрибкових властивостей препаратів застосовували наступні критерії: - відсутність зон затримки росту штамів навколо лунки, а також зони затримки до 10 мм вказує на те, що штами є не чутливими до внесеного в лунку досліджуваного препарату місцевої дії; - зони затримки росту діаметром 10-15 мм вказують на малу чутливість штамів до препарату місцевої дії; - зони затримки росту діаметром 15-25 мм розцінюються, як показник чутливості штамів до препарату місцевої дії; - зони затримки росту, діаметр яких перевищує 25 мм, свідчить про високу чутливість штамів до препарату місцевої дії. Для отримання достовірних даних для здійснення висновку відносно ефективності препаратів було зроблено три незалежних випробовування (число повторів досліджень). Дані випробувань антибактеріальної та протигрибкової активності викладені у таблиці №4. 25 Таблиця 4 Препарати Хлорофіліпт ДНЦЛЗ Зразок №3 "Хлорофіліпт актив плюс" 30 35 40 45 50 Діаметри зон затримки росту в мм число повторів досліджень n=3 АТСС АТСС АТСС 25923 АТСС 4636 АТСС 27853 АТСС 6633 25922 653/885 15,14,14 15,14, 14 ріст ріст 15,14,14 ріст 22, 23, 23 20,19, 20 14,15,15 16,15,16 25,24,24 17,16,17 Наведені дані таблиці №4 свідчать про те, що корисна модель здійснює активне пригнічення росту штамів: Staphylococcus aureus АТСС 25923, Escherichia coli АТСС 25922, Basillus subtilis АТСС 6633, а також здійснює статичне пригнічення росту штаму грибка Candida aibicans АТСС 653/885. Тобто отриманий препарат місцевої дії, отриманий на основі біологічно активної субстанції, має антибактеріальну активність, виявляє бактерицидну, бактеріостатичну та протигрибкову дії. При цьому слід додатково зазначити, що використання олій додатково забезпечує дезодорування порожнини рота. З наведених даних з таблиці №4 видно, що при концентрації активної біологічної субстанції 0,97 % у препараті місцевої дії, свідчить про високу ефективність цієї активної біологічної субстанції та що її використання не призводить до подразнення, яке викликає велика концентрація етилового спирту у відомому препараті "Хлорофіліпт", що, між іншим, свідчить про те, що препарат місцевої дії може бути ефективно використано проти катару та для профілактики та лікування інфекційно-запальних захворювань верхніх дихальних шляхів. Отриманий препарат місцевої дії може бути використано у вигляді розчину, спрею та аерозолю. Упаковка препарату місцевої дії, являє собою отриманий препарат місцевої дії, який поміщено у флакон з дозуючим пристроєм, за допомогою якого препарат місцевої дії наноситься на порожнину рота. Право на назву корисної моделі Ми, автори корисної моделі, отриману активну біологічну субстанцію, яка має антибактеріальну активність, виявляє бактерицидну, бактеріостатичну та протигрибкову дії назвали: лат. «Clorophylliptum active plus», укр. «Хлорофіліпт актив плюс», рос. «Хлорофиллипт актив плюс». 4 UA 115034 U 5 Повинно бути зрозуміло, що у даному описі надані дані, які необхідні та достатні для ясного розуміння суті корисної моделі. Відомості, які є очевидними для фахівців в даній галузі техніки і які б не сприяли кращому розумінню суті корисної моделі не були наведені в даному описі. Наприклад, зрозуміло, що активна біологічна субстанція може бути використана, як антисептик при подряпинах та опіках. Технічний результат Технічним результатом корисної моделі, є отримання активної біологічної субстанції та препарату місцевої дії на її основі, які мають антибактеріальну активність, виявляють бактерицидну, бактеріостатичну та протигрибкову дії. 10 ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 15 1. Активна біологічна субстанція, яка характеризується наявністю: екстракту евкаліпту, бензалконію хлориду та ефірних олій евкаліпту, м'яти, піхти, сосни, лаванди, чайного дерева, розмарину, коріандру, троянди та полині, при наступному співвідношенні компонентів, ваг. %: екстракт евкаліпту 18,86-55,63 бензалконію хлорид 18,86-44,47 ефірна евкаліптова олія 3,70-22,24 ефірна олія м'яти 3,70-22,24 ефірна олія піхти 0,1-4,42 ефірна олія сосни 0,1-4,42 ефірна олія лаванди 0,1-4,42 ефірна олія чайного дерева 0,1-4,42 ефірна олія розмарину 0,1-4,42 ефірна олія коріандру 0,1-4,42 ефірна олія троянди 1,34-2,24 ефірна олія полині 1,34-2,24. 2. Субстанція за п. 1, яка відрізняється тим, що додатково містить 1-15 % полівінілпіролідону. 3. Субстанція за будь-яким з вищевказаних пунктів 1 або 2, яка відрізняється тим, що додатково містить 10-50 % полісорбату 80. Комп’ютерна верстка А. Крулевський Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 5