Спосіб стимуляції та спосіб інгібування дозрівання шийки матки

1 Спосіб стимуляції дозрівання шийки матки, що включає застосування принаймні одного донора та/або субстрату окису азоту в ефективній КІЛЬКОСТІ, який відрізняється тим, що засіб вводять місцево внутрішньошийково чи внутрішньовапнально 2 Спосіб інгібування дозрівання шийки матки, що включає застосування принаймні одного інгібітору окису азоту в ефективній КІЛЬКОСТІ, ЯКИЙ відрізняється тим, що засіб вводять місцево внутрішньошийково чи внутрішньовапнально при лікуванні недостатності шийки матки чи передчасних пологах 3 Спосіб за пунктом 1, в якому донор і/або субстрат окису азоту використовують у сполученні принаймні з одним із засобів - антипрогестином, простагландином і/або цитокіном 4 Спосіб за пунктом 2, в якому інгібітор окису азоту використовують у сполученні принаймні з одним із засобів - прогестином і/або інгібітором циклооксигенази (інгібітори СОХ-1 і СОХ-2) 5 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції своєчасних пологів 6 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції пологів у зв'язку з патологічною вагітністю 7 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції пологів у зв'язку з внутрішньоматковою загибеллю плоду 8 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції аборту 9 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції передчасних пологів 10 Спосіб за пунктами 1 або 3 для регуляції тривалих пологів 11 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції дозрівання шийки матки неваптних жінок або вагітних жінок при хірургічній або діагностичній процедурі 12 Спосіб за пунктами 1 або 3 для індукції дозрівання шийки матки у жінок, яких піддають штучному (in vitro) заплідненню 13 Спосіб за пунктами 2 або 4 для лікування недостатності шийки матки 14 Спосіб за пунктами 2 або 4 для лікування у випадку загрози передчасних пологів 15 Спосіб за пунктом 1, в якому як субстрат і/або донор окису азоту використовують принаймні одну сполуку, вибрану з L-арпншу, нітропрусиду натрію, нітрогліцерину, гліцерилтринітрату, SIN-1, ізосорбідмононітрату, ізосорбіддинітрату 16 Спосіб за пунктом 2, в якому як інгібітор окису азоту використовують принаймні одну сполуку, вибрану з метилового ефіру NG-HiTpo-L-арпншу (LNAME), NG-MOHoeTHn-L-aprmmy (L-MMA), Nіміноетил-І_-арнггину (L-NIO), І_-монометил-І_арпніну (L-NNMA), L-NG-метиларпншу (L-NMA), Nw-HiTpo-L-арпншу (L-NA) і аміногуанідину 17 Спосіб за пунктом 3, в якому як антипрогестин використовують принаймні одну сполуку, вибрану О з онапристону(11 р -[4-(диметиламшо)феніл]-17(Хпдрокси-17 р -(З-пдроксипропіл)-і 3 (X -естра-4,9дієн-3-ону), RU 486 (11 р-[4-(диметиламшо)феніл]-17р пдрокси-17 (X -(1 -пропеніл)естра-4,9-дієн-3-ону), (Z)-11 p -[4-(диметиламшо)феніл]-17р -пдрокси1 7 а -(З-пдрокси-1 -пропеніл)естра-4-єн-3-ону (ЕР А 0 404 283), 11 р -(4-ацетилфеніл)-17 р -пдрокси-17 (X -(1 пропеніл)естра-4,9-дієн-3-ону (ЕР-А 0 190 759), 4',5'-дипдро-11 р -[4-(диметиламшо)феніл]-6р метилспіро[естра-4,9-дієн-17р ,2'(3'Н)-фуран]-3ону, 4',5'-дипдро-11 р -[4-(диметиламшо)феніл]-7р метилспіро[естра-4,9-дієн-17р ,2'(3'Н)-фуран]-3ону, 11 р -(4-ацетилфеніл)-19,24-дшор-17,23-епокси 17 а -хола-4,9,20-триєн-3-ону, со о 1 Ю 57703 4 19 Спосіб за пунктом 3, в якому як цитокін (E)-11 p -[4-[[(ацетокси)імшо]метил]феніл]-17р використовують інтерлейкш-8 або інтерлейкш-1 р метокси-17а-(метоксиметил)естра-4,9-дієн-3-ону, 20 Спосіб за пунктом 4, в якому як прогестин (E)-11p-[4використовують прогестерон [[[(етоксикарбоніл)окси]іміно]метил]феніл]-17р 21 Спосіб за пунктом 4, в якому як інгібітор циклооксигенази використовують аспірин метокси-17а-(метоксиметил)-естра-4,9-дієн-322 Спосіб за пунктом 4, в якому як інгібітор СОХ-2 ону використовують флусолід 18 Спосіб за пунісгом 3, в якому як простагландин використовують PGE2 або Гемепрост Даний винахід стосується регулювання розкриття та розтягнення шийки матки використанням донорів та/або субстратів оксиду азоту або інгібіторів оксиду азоту Пологи (вихід плоду З матки) вимагають як скорочення мюметрія, гладкого м'язу матки, так і розслаблення з'єднувальної тканини шийки, так щоб вона була розтягнута та розширена достатньо, щоб дозволити плоду вийти Це розслаблення відомо як "дозрівання", У даний час переважним методом дозрівання шийки є використання простагландину Е І Його застосовують як вапнальний гель або таблетки або як гель, що помішують у шийку матки Проблемою, пов'язаною з використанням простагландину Е2, є те, що існує можливість пперстимуляцм матки, яка призводить до виключно сильних скорочень мюметрія до дозрівання шийки та до спокійних та безпечних ПОЛОГІВ Ідеальний препарат повинен розслаблювати та розгладжувати шийку, не викликаючи мюметральних скорочень Це повинно дозволити наступні скорочення (що викликаються, якщо необхідно, невеликою дозою простагландину), щоб дитині народитисьз мінімальним опором Є хороші свідоцтва з експериментів на тваринах, що антипрогестини, такі як RU486, повинні відповідати таким вимогам, але проблема з цим лікарським засобом у тому, що він має супутню антиглюкокортикоідну активність, яка може ушкодити плід Одним з найбільш значних нещодавніх успіхів у біологи та медицині є відкриття того, що оксид азоту продуцюється ендотеліальними клітинами, та що він включається у регулювання судинного тонусу, агрегації тромбоцитів, нейротрансмісм та імунної активації (Фурхготт та Завадський, 1980, Монкада, Палмер та Хігс, 1991, Інгарро, 1991) Оксид азоту є важливим медіатором релаксації гладком'язового м'язу (Монтада, Палмер та Хігс, 1991) та був до цього відомий як EDRF (розлаблюючий фактор, одержаний з ендотеліну) (Фурхготт та Завадський, 1980, Монкада, Палмер таХігс, 1991) Оксид азоту синтезують окислювальним деамшіруванням гуанідинового азоту L-арпншу принаймні різними ізоформами флавінвміщуючого ферменту, синтази оксиду азоту (Монтада, ПалмертаХІгс, 1991) Оксид азоту також можна генерувати, застосовуючи різні донори оксиду азоту, такі як нітропрусид натрію, нітрогліцерин, тринітрат гліцерину, SIN, мононітрат ізосорбіду, дінтрат ізосорбідутощо Було показано, що синтез оксиду азоту повністю інгібується аналогами L-арпншу, метиловим ефіром NG-Hrrpo-L-аргшшу (L-NAME), КО-моноетил-Ь-арпніном (LMMA), Шміноетил-Ьарпніном (L-NIO), Ь-монометил-Ь-арпніном (LNNMA), L-NG-метиларпшном (LNMA), NW-Hirpo-Lарпніном (L-ПА) та аміногуанідином Обробка неваптних морських свинок L-NAME призводить до підвищеної скорочувальної здатності матки Отже, інгібування скорочувальної здатності матки, стимульоване синтазою оксиду азоту, вказує, що тонізуюче виділення оксиду азоту підтримує матку в неактивному стані Подібно до цього обробка вагітних морських свинок L-NAME викликає передчасні пологи З іншого боку, обробка смуги матки пацюків in vitro Lарпніном інгібує скорочення Ці дослідження показують, що вироблення оксиду азоту маткою інгібує скорочувальну здатність матки, а блокування її синтезу призводить до підвищеної скорочувальної здатності у вагітних та неваптних тварин Отже, субстрати та донори оксиду азоту можуть бути використані у терапії для попередження скорочувальної здатності матки, а інгібітори оксиду азоту - для ефективного стимулювання скорочень матки На підставі попередніх вивчень на макакахрезус Дженнінгс та ш (The Journal of Maternal Fetal Medicine 2, 170-175 (1993)) припустили, що оксид азоту може бути важливим для неактивності матки під час вагітності, а акзогенний оксид азоту може бути корисний для контролю передчасних ПОЛОГІВ Активність синтази оксиду азоту (NOS) була продемонстрована Натуцці та ш (Biochem and Byophys Aes Commun 194, N 1, 128 (1993)) у численних структурах матки вагітних пацюків, і вони дійшли висновку, що NOS повинна бути присутня у численних структурах матки вагітних пацюків Зниження активності NOS при пологах передбачає, що NOS може вносити вклад у підтримання скорочувальної СПОКІЙНОСТІ ПІД час вагітності 57703 Також морфологічні вивчення вже показали наявність NOS (NADPH-діафораза, ГІСТОХІМІЧНИЙ метод визначення всіх ізоформ NOS) та ферментів, що метабол Ьують N0, таких як супероксиддісмутаза у шийці матки (Папка та ш , Neuroscience letters 147 (1992), Шиотаніта ш , Acta Histochem Cytochem, 26, 57-64 (1993), Було виявлено, що обробка L-NAME морських свинок підшкірно на 48-49 після контакту (кінцевий день 67+3 дні) веде до зниження розтягнення матки та зниження розширення шийки матки У вагітних пацюків було виявлено підвищене вироблення оксиду азоту (параметр, виділення нітриту або нітрату in vitro) з шийки матки під час пологів порівняно з 18 днем вагітності Напроти, відбувалося зниження вироблення маточного (мюметрального) N0 під час вагітності пацюків Антипрогестин онапристон збільшував вироблення оксиду азоту у шийці матки вагітних пацюків ще більше, але інгібував вироблення N0 у матці (мюметрм) Введення тої ж самої дози онапристону викликало дозрівання матки у пацюків Ці дослідження є свідоцтвом того, що обробка інгібітором оксиду азоту, такого як LNAME, інгібує дозрівання шийки, але стимулює скорочення матки у вагітних морських свинок, вироблення N0, який дає розслаблюючий ефект на мюметрій, зменшується у вагітній матці (мюметрії) під час вагітності, але вона збільшується у шийці матки під час нормальних або викликаємих антипрогестином пологах у пацюків, ефекти, що розходяться, шпбітора оксиду азоту, такого як L-NAME, на скорочувальну здатність матки та шийки матки обумовлені або різними діями N0 системи, або присутністю різних ізоформ ферменту в мюметрм та шийці, та NO-система відіграє важливу роль у регуляції шийки матки, причому вироблення N0 збільшується у процесі дозрівання шийки Отже, можна заключити, що а) місцеве застосування донорів та/або субстратів оксиду азоту може бути використано, щоб викликати дозрівання шийки, або б) місцеве застосування інгібітору оксиду азоту може бути використано, щоб запобігти або інгібувати дозрівання шийки, наприклад, при лікуванні шийкової недостатності (дуже раннього дозрівання шийки) або передчасних пологів Даний винахід стосується застосування донорів та/або субстратів оксиду азоту або інгібіторів оксиду азоту для виробництва лікарського засобу для регулювання розкриття шийки матки та/або розтягнення Даний винахід включає застосування або а) принаймні одного донора та/або субстрату оксиду азоту для виробництва лікарського засобу для місцевого застосування (наприклад, внутрішньом'язово або внутрішньовапнально) для викликання дозрівання матки, або б) принаймні одного інгібітору оксиду азоту для виробництва лікарського засобу для місцевого застосування (наприклад, внутрішньошийково або внутрішньовапнально) для інгібування дозрівання матки при лікуванні шийкової недостатності або передчасних пологів Як (а) донори та/або субстрати оксиду азоту або (б) Інгібітори оксиду азоту у даному винаході використовують всі сполуки, ВІДОМІ професіоналам, як такі, що мають необхідні властивості, сполуки, що зазначені у рівні техніки, є переважними Донори та/або субстрати оксиду азоту (а) можуть бути також використані у комбінації з (і), принаймні, одним антипрогестином, простагландином та/або цитокіном Антипрогестини вибирають з такої групи сполук онапристон (1ір-[4-(діметиліамшо)феншіл]-17а-пдрокси17р-(3-пдро ксипропіл)-1 За-естра-4,9-діен-3-он), RU 486 (11 р-[4-(діметиламшо)феніл]-17рпдрокси-17а-(1 -пропеніл)естрра-4,9-діен-3-он), (2)-1ір-[4-(діметиламшо)феніл]-17р-пдрокси17а-(3-пдрокси-1 -пропеніл)естра-4-ен-3-он(ЕРА0404283), 11 р-(4-ацетилфеніл)-17р-пдрокси-17а-(1 протніл)естра-4,9-діен-3-он (ЕР-А 0 190 759), 4',5'-діпдро-1ір-[4-(діметиламіно)феніл]-брметилспіро-[естра-4,9-діен-17р,2'(ЗН)-фуран]-3-он, 4',5'-діпдро-1ір-[4-(діметиламшо)феніл]-7рметилспіро-[естра-4,9-діен-17р,2'(3'Н)-фуран]-3-он, 11 р-(4-ацетилфеніл)-19,24-дінор-17,23-епокси17а-хола-4,9,20-тріен-3-он, (Е)-1ір-[4-[[(ацетокси)імшо]метил]феніл]-17рметокси-17а-(метоксиметил)естра-4,9-діен-3-он, (Е)-11р-[4[[[(етоксикарбоніл)окси]іміно]метил]феніл]-17рметокси-17а-(метоксиметил)естра-4,9-діен-3-он, та велика КІЛЬКІСТЬ ІНШИХ сполук, що мають конкурентну активність антагонистів прогестерона, і які добре ВІДОМІ професіоналам Простагландши сульпростон (PGE2) або гемепрост можуть бути використані як приклад Найбільш переважними представниками ЦИТОКІНІВ є інтерлейкш-8 або інтерлейкін-ір Використання не обмежено вищенаведеними сполуками Інгібітор (б) оксиду азоту може бути також використаний у комбінації з (м), принаймні, одним прогрестином І/або інгібітором циклооксигенази (наприклад, інгібіторами СОХ-1 і ЄОХ-2), Як прогрестини переважно використовують придатний прогестерон, а також можливо використання одного або декількох відомих синтезованих прогестинів як пероральних контрацептивів, наприклад, левоноргестрел, ципротеронацетат, гастоден, дроспіренон, дезогестрел, 3-кетодезогестрел, діеногесттощо Інгібітором циклооксигенази може бути, наприклад, аспірин (інгібітор СОХ-1 і СОХ-2) Інші приклади інгібіторів СОХ-2 можуть бути взяті з Роберт Асланян, Ніколас 1, Карузерс, Джеймс Дж Камінскі, циклооксигени 2 A Novel Target for Terapeutic Intervention, Exp Opm Invets Drugs, 1994 3(12), 1323-1325, наприклад, сполуки SC58125 (GD Searle), DuP-697, флузолід [6~(2,4діфторфенокси)-5-метилсульфоніламшо-1інданон], Se-57666 (GDSearle), L-745337 (Merck Frosst), N-398 (Monsanto) 57703 У першому аспеїсгі винахід стосується застосування сполук винаходу (а) при народженні або абортах При вагітності шийка матки оброблюється попередньо Гормони протягом вагітності змінюють шийку матки, яка потім схильна відповідати ефективно на ІНШІ стимулятори Далі винахід стосується застосування сполук (а) при хірургічному втручанні або діагностичній процедурі Отже, сполуки (а) винаходу можуть, можливо у комбінації з сполуками, вказаними як (і), бути використані для виробництва лікарських засобів, що застосовуються для A) викликання пологів у КІНЦІ строку (час очікуваного народження при нормальному протіканні вагітності, (препарат) можна комбінувати з наступною обробкою окситоцином або подібними засобами) Б) викликання пологів у зв'язку з патологічною вагітністю (наприклад, порок розвитку плоду), переважно аборт у другий тримісячний строк) B) викликання пологів у зв'язку з внутрішньоматочною загибеллю плоду Г) при абортах (переважно аборту перший тримісячний строк) Д) викликання передчасних пологів Е) при тривалих пологах внаслідок дистоцм, що стосується шийки патології Ж) викликання дозрівання шийки матки неваптної жінки або вагітної жінки, при хірургічній або діагностичній процедурі та 3) викликання дозрівання шийки матки у жінки, що була піддана штучному заплідненню У другому аспекті (б) винахід стосується застосування сполук винаходу у випадках, коли необхідно запобігання надто ранньому дозріванню шийки матки або де шийка повинна підтримуватися жорсткою Отже, сполуки (б) винаходу можуть, можливо у комбінації з сполуками (м), бути використані для одержання лікарських засобів при І) лікуванні шийкової недостатності (шийкова функціональна недостатність) та К) лікування загрози передчасних пологів В основному сполуки можуть бути застосовні для жінок та самок тварин Людські особини є переважною групою для такого лікування Донор та/або субстрат оксиду азоту (а) або інгібітор оксиду азоту (б) можуть бути введені будь-яким шляхом, в якому, прямо або опосередковано, він буде доходити до шийки Отже, він звичайно застосовується штравапнально на шийку, тобто звичайно як гель або крем Він також може бути ініційований у тканину шийки або тупою голкою у канал шийки Він також може бути нанесений екстраамнютично, тобто між стінкою матки та амнютичним мішком, використовуючи катетер Переважною формою є гель або крем, але він також може бути нанесений у вигляді капсул, що розм'якшуються, ліпосом або у складах уповільненого виділення або в якості водного розчину, наприклад, фізіологічного або білоквміщуючого розчину Лікарський засіб може бути одержаний відомими методами При комбінованому застосуванні сполук, 8 вказаних вище як (а) та (і) антипрогестин може бути введений у композицію для системного або місцевого введення Простагландин, як і цитокін, переважно вводять у композицію для місцевого введення При комбінованому застосуванні сполук, зазначених вище як (б) та (м), сполуки (м) можуть бути введені у склад для системного та місцевого введення Композиції, що включають сполуки (і) та (м), одержують відомими методами Сполуки (а) винаходу проявляють фармакологічну активність, викликаючи дозрівання шийки матки та, отже, можуть бути використані як лікарські засоби Сполуки (б) винаходу проявляють фармакологічну активність, попереджуючи дозрівання шийки матки та, отже, можуть бути використані як лікарські засоби Вимірювання дозрівання шийки матки описано у прикладі 1 Нітропрусид натрію та ІНШІ донори впливають на дозрівання шийки матки при концентрації від приблизно О.ОЗмМ - ЮОмМ (1,8мкг - 6 мг/застосування) при локальному веденні вагітним самкам морських свинок У випадках, вказаних раніше від (А) до (3), відповідне дозування буде вимірюватись залежно від, наприклад, використаної сполуки винаходу, хазяїна, способу введення та природи і важкості стану Взагалі, задовільні результати на тваринах, як показано, одержані при концентрації від приблизно 0,03ЮОмМ для місцевого застосування, переважно при концентрації приблизно ЮмМ Сполуки винаходу можуть бути введеш за 6-48 годин до кінцевого дозрівання шийки матки Наступні за дозріванням пологи можуть бути викликані введенням окситоцитної сполуки Сполуки можна вводити у одній або більше дозах, що вводяться послідовно з різницею у декілька годин або один день Сполуки винаходу можуть бути введені будь-яким звичайним шляхом, особливо у формі гелю, мазі або місцевої ін'єкції (при концентрації приблизно 0,03-ЮОмМ) Нітропрусид натрію та ІНШІ донори оксиду азоту впливають на дозрівання шийки матки при концентрації від приблизно 0,03мМ-100мМ (1,8мкг - бмг/застосування) при введенні неваптним самкам морських свинок У випадках, вказаних раніше від (Ж) до (3), відповідне дозування буде змінюватись залежно від, наприклад, використаної сполуки винаходу, хазяїна, способу введення та природи і важкості стану Однак, взагалі, задовільні результати на тваринах, як показано, одержані при концентрації від приблизно О.ОЗмМЮОмМ (1,8мкг - бмг/застосування) переважно при концентрації приблизно ЮмМ Сполуки винаходу можуть бути введені за 24 або 48 годин до остаточного дозрівання шийки матки Сполуки можна вводити в одній або більше дозах, що вводяться послідовно з різницею у декілька годин або один день Сполуки винаходу можуть бути введені будь-яким звичайним шляхом, особливо у формі гелю, мазі або місцевої ін'єкції Прикладами інтервалів дозування для людини типових NO-субстратівта NO донорів є 57703 L-Арпнін 500мг - Юг/день Нітропрусид натрію інтервал 5002000мкг/кг/день Нітрогліцерин 0,5-Юмг/день Ізосорбідмононітрат 10-100мг/день Ізосорбідци нітрат 10-100мг/день Інші донори та субстрати NO використовуються у бюеквівалентних кількостях Прикладами інтервалів дозування типових NO-шпбіторів є L-NAME 1-50мг/кг/день L-N10 1-50мг/кг/день L-NA 1-50мг/кг/день L-MMA 1-50мг/кг/день L-NG 1-50мг/кг/день L-NMA 1-50мг/кг/день Аміногуанідін 0,1-100мг/кг/день Інші NO-шпбітори використовуються у біологічно еквівалентних кількостях Інтервал дозування RU 486 25-600мг/день на унцію Інші антипрогрестини використовуються у біологічно еквівалентних кількостях Дозувальний інтервал для сульпростону 1001000мкг/день внутрішньом'язово або внугрішньовенно Інші простагландини, такі як PGE2 використовуються у біологічно еквівалентних кількостях Простагландини також можна використовувати внутрішньошийково у вигляді гелю, внутрішньовапнально у формі гелю або таблеток Дозувальний інтервал для інгібіторів СОХ-2 0,1-100мг/кг/день, Дозувальний інтервал для IL-8 ЮОнг-500 мкг/день, дозувальний інтервал для EL-1 р ЮОнг500мкг/день БІОЛОГІЧНО еквівалентні КІЛЬКОСТІ ІНШИХ сполук, що відрізняються від вказаних вище, можуть бути визначені методами, викладеними у прикладах, як КІЛЬКОСТІ, що призводять до аналогічних ефектів у шийці матки, що і розкриття КІЛЬКОСТІ при аналогічних умовах Результати винаходу відображені на фігурах, на яких Фігура 1 показує ефект нітропрусиду натрію на дозрівання шийки матки у вагітних морських свинок Тварин обробляють, як описано у Прикладі 1 Верхня панель показує початкове розширення (в мм) під час вимірювання розтягнення, нижня панель демонструє вплив на розтягнення (нахил кривої регресії) Дані представлені у вигляді діаграм Вертикальні лінії представляють інтервал від мінімальної до максимальної КІЛЬКОСТІ Висота стовпця, горизонтальна ЛІНІЯ та зірочка відповідають міжквартильному інтервалу, серединному та середньому значенню, ВІДПОВІДНО Фігура 2 показує вплив L-NAME на шийку матки у вагітних морських свинок Верхня панель показує початкове розширення (у мм) під час вимірювання розтягнення, нижня панель демонструє вплив на розтягнення (нахил кривої регресії (N/мм) Дані представлені у вигляді діаграми, як описано для фігури 1 Фігури 3-5 показують розтягненість шийки матки пацюків після обробки L-NAME (50мг/пацюка) або без обробки Фігура 3 показує 10 розтягненість шийки матки при вагітності у пацюків (значення з, принаймні, одним загальним верхнім індексом не розрізняються при величині р