Спосіб підтримки життєздатності аерококів

Реферат: Спосіб підтримки життєздатності аерококів включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах та їх зберігання у закритих ємностях у холодильній камері при Т° 3-5 °С, причому як закриті ємності застосовують стерильні ампули, які піддаються запаюванню, як поживне середовище - 3-5 % кров'яний агар, при цьому добову культуру аерококів засівають на нього у чашках Петрі, інкубують її при Т° 21-47 °С впродовж 7-12 діб, а сухий залишок подрібнюють до дрібнодисперсного стану та вносять у стерильні ампули перед запаюванням. UA 106478 U (12) UA 106478 U UA 106478 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до мікробіології, насамперед до розмноження, утримування, консервування мікроорганізмів або їхніх композицій, переважно бактерій та живильних середовищ для них, і може бути використаною в лабораторній практиці. Відомий спосіб підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах і їх подальше зберігання у закритих ємностях при заданій Т°С, за умов періодичних пересівань на свіжі агаризовані середовища із заданим інтервалом, залежним від різновиду мікроорганізмів, Т°С зберігання та властивостей поживного середовища. Як закриті ємності застосовують контейнери або пробірки з кришками, гумовими або ватно-марлевими пробками, обгорнуті парафіном. застосування мінімального агаризованого середовища, на відміну від комплексного, уповільнює швидкість метаболізму, ріст бактерій, зменшує частоту пересівів, виключає застосування складних з'єднань для збереження фізіологічних властивостей аерококів. Зберігання аерококів при кімнатній Т°С зменшує висихання культур, а при Т° 5-8 °C у холодильній камері - гальмує швидкість метаболізму. Частоту пересівів визначають експериментальним чином, прагнучи уникнути селекцію варіантів. Для зниження ймовірності селекції мутантів поодинокі колонії у пересівних культурах зазвичай не виділяють. Після кожного з пересівів перевіряють чистоту культури, стан фенотипічних властивостей, а втрату запобігають збереженням дублікатів [1]. За цих умов термін життєздатності аерококів становить 3-5 міс. Процес виключає необхідність застосування дороговартісного устаткування [2, 3]. Основні недоліки аналога - недостатній термін підтримки життєздатності аерококів, технологічні та експлуатаційні зручності, такі як перевитрати часу, трудомісткість, випадки селекції, зміни біологічних властивостей, втрати, забруднення культур, обов'язковість дотримання регламенту, проведення пересівань, застосування зайвих обсягів лабораторного посуду, поживних середовищ, випадкові помилки маркірування, наклеювання етикеток тощо [4-5]. Більш наближеним до дійсної корисної моделі серед об'єктів аналогічного призначення за найбільшою кількістю істотних ознак є спосіб підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах та їх зберігання у закритих ємностях, у холодильній камері при Т° 3-5 °C, у відповідності з котрим, культури аерококів вирощують у пробірках, на скошеному поживному агарі, у товщі агаризованого середовища (стовпчиках) або у рідкому поживному середовищі, вирощені культури аерококів заливають 2 см шаром стерильної мінеральної олії, яку заздалегідь стерилізують у сушильній шафі, при Т° 170 °C впродовж 1-2 год., і контролюють стан їхньої життєздатності впродовж терміну зберігання. Застосування мінеральної олії сприяє захисту культур аерококів від висихання, знижує метаболізм, збільшуючи термін їх життєздатності до 3 років, за умови періодичних пересівань через кожні 6 міс. застосування нестерильних олій недоцільне з причин забруднення та втрати штамів [6]. Недоліками прототипу є недостатній термін життєздатності аерококів, трудомісткість підтримки її довготривалості, технологічні та експлуатаційні незручності, які зумовлені недостатніми поживними властивостями застосовуваних середовищ, фізіологічними та біологічними особливостями мікроорганізмів роду Aerococcus, що вимагає вирощування їх нових колоній [7]. Натомість, перевитрати поживних середовищ, мінеральних олій, лабораторного обладнання, засобів стерилізації, задіяних між пересіваннями, характеризують процес як дороговартісний. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалити спосіб підтримки життєздатності аерококів, застосування котрого сприяло б збільшенню терміну життєздатності аерококів, зниженню трудомісткості, технологічних, експлуатаційних незручностей і собівартості шляхом застосування кров'яного агару як поживного середовища та іммобілізації в нім клітин аерококів. Вищезазначений технічний результат досягається тим, що при використанні у відомому способі підтримки життєздатності аерококів, що включає вирощування культур аерококів на поживних середовищах та їх зберігання у закритих ємностях у холодильній камері при Т° 3-5 °C, відповідно до корисної моделі, як закриті ємності застосовують стерильні ампули, які піддаються запаюванню, як поживне середовище - 3-5 % кров'яний агар, при цьому добову культуру аерококів засівають на нього у чашках Петрі, інкубують її при Т° 27-47 °C впродовж 712 діб, а сухий залишок подрібнюють до дрібнодисперсного стану та вносять у стерильні ампули перед запаюванням. Причинно-наслідковий зв'язок сукупності істотних ознак запропонованого рішення задачі з вищенаведеним технічним результатом полягає в наступному. Застосування стерильних ампул, що піддаються запаюванню, як закритих ємностей, забезпечує не лише стерильні, але й оптимальні мікрокліматичні умови для зберігання мікроорганізмів роду Aerococcus, без втрати їх біологічних і фізіологічних цінностей, властивостей поживного середовища, виключаючи випадки селекції, втрат або забруднення 1 UA 106478 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 культури, потреби у кришках, гумових або ватно-марлевих пробках, зайвому посуді та обладнанні для цього, необхідність збереження дублікатів культури, стерилізації, парафінування та застосування стерильної мінеральної олії, що інформує про зменшення трудомісткості, низки вищенаведених незручностей та собівартості підтримки життєздатності аерококів. Застосування 3-5 % кров'яного агару допускає реалізацію більш високої поживної активності, що, з урахуванням фізіологічних та біологічних властивостей більшості з різновидів мікроорганізмів роду Aerococcus, забезпечує можливість підтримки їх життєздатності впродовж 3-5 років, без пересівань. В експлуатаційному та технологічному аспектах виключаються багатоетапність вирощування, пересіви між ними, скошування агару, заливні, стерилізуючи й дозуючі маніпуляції з мінеральною олією, контролювання стану життєздатності аерококів протягом терміну зберігання, а в економічному вилучається стерилізація мінеральної олії, енергоспоживання сушильною шафою. Застосування