М’який протизапальний засіб з екстрактом capsicum anuum l.

Реферат: Винахід стосується медицини, зокрема м'якого протизапального засобу, лікувальна дія якого обумовлена дією суміші активних речовин рослинного походження, і може використовуватись при лікуванні як гострих, так і хронічних запалень, у тому числі артритів. UA 115575 C2 (12) UA 115575 C2 В основу винаходу поставлена задача розробити м'який протизапальний засіб з екстрактом Capsicum anuum L. на гідрофільній основі, який повинен характеризуватися, окрім високої протизапальної ефективності при лікуванні гострих та хронічних запальних процесів, простотою виготовлення, низькою ціною вихідних компонентів, зручністю у використанні. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно з винаходом, як основу використовують гідрофільну суміш ПЕГ-1500 та ПЕО-400, з наступним співвідношенням вказаних компонентів, мас. %: спиртовий екстракт Capsicum 2-5 anuum L. ПЕГ-1500 30-40 ПЕО-400 60-68. У порівнянні з прототипом, заявлене технічне рішення має наступні переваги: значно менша концентрація діючої речовини, при збереженні високої терапевтичної ефективності, нижча ціна компонентів, що входять до складу засобу та обумовлюють вищу економічну доцільність, простота та зручність використання - легке видалення препарату з поверхні шкіри, усунене розтікання препарату по поверхні шкіри. Новим у заявленому технічному рішенні є використання полімерної суміші з гідрофільними властивостями як м'якої основи розробленого терапевтичного засобу. UA 115575 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Винахід належить до медицини, а саме фармації, зокрема м'якого протизапального засобу, лікувальна дія якого обумовлена властивостями суміші активних речовин рослинного походження і може бути використана при лікуванні гострих та хронічних запалень, які супроводжують більшість патологічних процесів. Відомо, що гострі та хронічні запалення - це пристосувальна реакція організму, який притаманні прояві, що потребують медичної корекції. Для подібної корекції використовують низку протизапальних препаратів стероїдної і нестероїдної природи. Найбільш поширеними нестероїдними протизапальними засобами є речовини, що впливають на активність ферментів циклооксигенази та ліпоксигенази, які беруть участь у біохімічному каскаді арахідонової кислоти. Незважаючи на високу ефективність подібних сполук, сучасна медична практика потребує лікарських засобів, що діють і на інші ланки запального процесу. Одними з таких засобів можуть бути препарати на основі рослинних речовин. Препарати: на основі Capsicum anuum L. (перцю стручкового) використовуються як місцеві протизапальні засоби для зовнішнього застосування, і головним діючим компонентом цих препаратів є група капсаїциноїдних алкалоїдів, найбільш поширеними представниками якої є капсаїцин та дигідрокапсаїцин. Існуючі лікарські засоби включають до свого складу як екстрактивні речовини з Capsicum anuum L., так і синтетичні аналоги різної структури. Аналіз лікарських препаратів показав, що найбільш близькими до заявленого технічного рішення є засоби з екстрактивними речовинами перцю стручкового і препарати з їх синтетичними аналогами. До перших належать спиртові настої з плодів перцю стручкового, перцево-камфорний лінімент та складні спиртові суміші, які містять крім екстракту перцю стручкового інші компоненти [1]. Недоліками усіх вище зазначених препаратів є рідкий стан, що ускладнює їх нанесення та утримання на ділянках шкіри при лікуванні місцевого запального процесу, що значно обмежує кількість препарату, яку можливо нанести за один раз. Відоме застосування препарату на мазевій основі "Капсикам", який виробляється АО "Grindex" (сумісне підприємство країн Латвії, Естонії та Росії) [2], та містить нонівамід синтетичний аналог капсаїцину (0,2 %), димексид, рослинні олії. На відміну від попередньо розглянутих препаратів, "Капсикам" має водорозчинну основу (полісорбат 80, натрію цетостеарилсульфат, спирт цетостеариловий) та легко видаляється з поверхні шкіри. Недоліками препарату є застосування синтетичного капсаїцину, який, як буде показано далі, поступається у протизапальній дії цілісному екстракту перцю стручкового. Крім того, завдяки наявності багатьох компонентів та допоміжних сполук "Капсикам" має високу кінцеву ціну, що обмежує його поширення на фармацевтичному ринку. Найбільш близькими до заявленого технічного рішення є препарат "Еспол", до складу якого крім екстракту перцю входять рослинні масла та димексид, а основою мазі слугують безводний ланолін та вазелін [3]. Як основи препаратів "Капсикам", "Еспол", використовуються моногліцериди, парафіни та вазелін. Недоліками наведених вище засобів є те, що обидва препарати мають ліпофільну основу, яка вкрай ускладнює процес змивання та видалення даних засобів у разі підвищеного подразнення, що може викликати посилену больову реакцію. Димексид, що знаходиться у складі препаратів, сприяє посиленню запалення у разі пошкодження шкіри. Крім того, значна кількість різних компонентів, що входить до їх складу, може призвести також до появи алергічних реакцій, ускладнює виробництво, є економічно лімітуючим чинником. Препарат "Еспол" вибраний за прототип. Прототип та винахід, що заявляється, мають наступні спільні ознаки: - містять основу; - містять екстрактивні речовини перцю стручкового. В основу винаходу поставлена задача розробити м'який протизапальний засіб з екстрактом Capsicum anuum L. на гідрофільній основі, який повинен характеризуватися, окрім високої протизапальної ефективності при лікуванні гострих та хронічних запальних процесів, простотою виготовлення, низькою ціною вихідних компонентів, зручністю у використанні. Поставлена задача вирішується тим, що, згідно з винаходом, як основу використовують гідрофільну суміш поліетиленгліколь-1500 (ПЕГ-1500) та поліетиленоксид (ПЕО-400), з наступним співвідношенням компонентів, мас. %: ПЕГ-1500 30,6-38,8 ПЕО-400 61,2-69,4. Новим у винаході, що заявляється, є те, що як основу використовують гідрофільну суміш ПЕГ-1500 та ПЕО-400, яка була поєднана з сумішшю екстрактивних речовин з плодів Capsicum 1 UA 115575 C2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 anuum L., які мають комплексну протизапальну дію, з наступним співвідношенням вказаних· компонентів, мас. %: спиртовий екстракт Capsicum 2-5 anuum L. ПЕГ-1500 30-38 ПЕО-400 60-68. В м'якому протизапальному засобі з екстрактом Capsicum anuum L. поставлена задача була вирішена за допомогою створення гідрофільної мазі, яка поєднує гідрофільну основу та спиртовий екстракт Capsicum anuum L. і легко видаляється з поверхні шкіри. Заявлений м'який протизапальний засіб виготовляється наступним чином. До гідрофільної основи додавали концентрований спиртовий екстракт плодів Capsicum anuum L., який отримували шляхом концентрування початкового спиртового екстракту в умовах необхідного тиску та температури не вище 30 °C. Початковий екстракт отримували поєднанням 1 частини подрібнених плодів Capsicum annum L. 9 частин 96° етилового спирту. Кількість концентрованого екстракту, що додавали до гідрофільної основи, залежить від вмісту капсаїциноїдів, яка не повинна перевищувати 5 мас%, тому при концентруванні кількість початкового екстракту зменшували ~ у 10 разів, за умови утримання капсаїциноїдів у рослинній сировині не нижче ніж 0,4 мас%. Кінцева частка капсаїцину у препараті складала 0,025 % від загальної маси суміші. Така низька концентрація капсаїцину є відзнакою запропонованої м'якої форми від існуючих аналогів, де концентрація капсаїцину чи його синтетичного аналога ноніваміду коливається від 0,1 до 0,2 % і дозволяє значно скоротити вартість кінцевого продукту. Для уточнення кількості концентрованого екстракту, що потрібно додати до гідрофільної мазевої основи, проводили попереднє визначення кількості капсаїцину у отриманому екстракті. М'який протизапальний засіб готували шляхом змішування 3 частин ПЕГ-1500 з 6 частинами ПЕО-400. Суміш нагрівали до - розплавлення та ретельно перемішували. Після чого добавляли концентрований екстракт з плодів Capsicum anuum L. для отримання концентрації капсаїцину у кінцевій суміші 0,025 %. Визначення кількості капсаїцину в плодах Capsicum anuum L.: подрібнену масу плодів Capsicum anuum L. заливали 96° етиловим спиртом у співвідношенні 1:10. Рідку фазу фільтровали та концентрували на роторному випарювачі. Отриманий залишок вносили до хлороформ-метанольної суміші (1:1). Аліквоту даної суміші наносили на хроматографічні пластинки Сорбфіл "аналітичні", типу ПТСХ-АФ-А. Розділення проводили, в системі. абсолютний метанол: оцтова кислота (49:1). З ділянки пластинки, що містить "пляму" капсаїцину, видаляли адсорбуючий шар та переносили у пробірку, що містила 3 мл 0,05 Μ боратного буферу, рН·= 9,4 та 0,5 мл насиченого розчину 2,6-дихлор-4-хлоріміду (реактив Гіббсу). Отриману суміш струшували та залишали у темному місці на 30 хвилин. Подальше кількісне визначення капсаїцину проводили на фотометрі при довжині хвилі 600 нм, з використанням калібрувальних кривих. Загальна кількість капсаїцину у рослинній сировині повинна бути ≥ 0,4 %. Приклад Оцінка терапевтичної ефективності м'якого протизапального засобу з екстрактом Capsicum annum L. на моделі не специфічного запалення, викликаного введенням повного ад'юванту Фрейнда (Виробництво Sigma) Протизапальну ефективність оцінювали на моделі ад'ювантного артриту, яка є експериментальною формою хронічного запалення неспецифічного типу. Оцінку проводили на молодих безпородних білих щурах-самцях, масою 180-200 г, що утримувались на стандартному раціону віварію, з вільним доступом до їжі та води. Тварини були поділені на дві рівні групи дослідну та контрольну, по 10 тварин у групі. Для індукування запальної реакції під плантарний апоневроз правої кінцівки вводили 0,1 мл повного ад'юванту Фрейнда. На наступну добу в ділянці введення ад'юванту спостерігались виразні ознаки запального процесу-набряк, почервоніння. Тварини не наступали на уражену кінцівку, утримували її підібраною до тулубу. При пальпації відчувалося місцеве підвищення температури, спостерігалась больова поведінкова реакція. Рухливість кінцівки у передплюсновому суглобі значно обмежувалась. Значення об'єму та лінійний розмір набряку кінцівки в ділянці ураження наведені на фіг. 1. Фіг. 1. Значення ширини та об'єму кінцівки в ділянці запалення у щурів при лікуванні хронічного запалення (ад'ювант індукованого) м'якою формою з екстрактом Capsicum annum L. Лікування проводили - шляхом нанесення тонкого шару м'якого протизапального засобу на ділянку запалення один раз на добу, щодобово, лікування починали через 24 години після 2 UA 115575 C2 5 10 15 20 25 введення флогогену. Починаючи вже з четвертої доби лікування помічене значне зменшення набряку. Об'єм та лінійні розміри кінцівки в ділянці запалення в групі тварин що лікувалися, були вірогідно менші, ніж у контрольній групі. Тварини групи лікування починали опиратися на уражену кінцівку при ходьбі. Значно зменшувалась гіперемія. На дев'яту добу лікування клінічні прояви запалення зникали. Порушень рухової активності ураженої кінцівки не спостерігалось. Ширина та об'єм ділянки введення флогогену поверталися до відповідних показників, що були до індукування запального процесу. У контрольній групі тварин, яка не отримувала лікування, набрякові явища спостерігалися протягом всього періоду досліду (20 діб) після введення ад'юванту. Шкіра кінцівки в ділянці стопи та передплюснового суглобу була червоною з синюшним відтінком, болюча при дотику. Рухливість значно порушена. Показники ширини та об'єму ділянки запалення кінцівки в 1,6-1,7 разів перевищували аналогічні показники до запалення. Підрахунок кількості лейкоцитів крові, а також визначення активності сироваткової ацетилхолінестерази та загальної кількості сироваткових серомукоїдів, у дослідних тварин свідчать про значне зниження інтенсивності загального запального процесу у групі лікування, починаючи з 4-9 доби. У контрольній групі виражений лейкоцитоз, підвищена активність ацетилхолінестерази та збільшена кількість серомукоїдів спостерігалися до 20 дня після індукування запалення. Дані щодо загальної кількості лейкоцитів крові, активності ацетилхолінестерази сироватки та кількості сироваткових серомукоїдів наведені у табл. 1-3. У таблиці 1 наведена динаміка змін кількості лейкоцитів крові у щурів при лікуванні неспецифічного запалення м'яким засобом з екстрактом Capsicum annum L. У таблиці 2 надана активність сироваткової ацетилхолінестерази при лікуванні неспецифічного запалення у щурів, мкмоль/с*л. У таблиці 3 наведена концентрація сироваткових серомукоїдів при лікуванні неспецифічного запалення у щурів, од. опт. густ. Таблиця 1 Групи Контрольна група М'яка лікувальна форма 0 10,0 ±1,0 1 21,6 ±4,6 2 22,0 ±4,0 10,0 ±1,0 21,6 ±4,6 22,8 ±2,4 Дні запалення (кількість лейкоцитів, Г/л) 3 4 5 7 9 12 22,0 23,5 24,6 26,6 28,2 34,7 ±2,0 ±4,2 ±3,0 ±2,5 ±2,6 ±3,3 24,7 ±1,6 16,3 ±2,0 16,0 ±1,8 15,5 ±1,0* 13,2 ±1,5* 13,7 ±2* 15 25,3 ±3,0 20 20,5 ±1,0 12,01 ±1,1* * - вірогідна різниця Таблиця 2 Дні 0 1 3 7 9 12 15 20 Контрольна група 31,8±4 97,3±7,2 112,6±9,6 145,7±19,6 139,2±20,6 218,1±15,2 420,2±14 110,4±10,9 * - вірогідна різниця 3 М'яка лікарська форма 31,8±4 97,3±7,2 102±16,9 111±10,6 56,4±4,7* 42±8,1* 37,2±6* UA 115575 C2 Таблиця 3 Дні 0 1 3 7 9 12 15 20 Контрольна група 0,6±0,11 1,22±0,1 1,3±0,18 1,6±0,2 1,55±0,25 2±0,3' 1,8±0,2' 1,1±0,2 М'яка лікарська форма 0,6±0,11 1,22±0,1 0,89±0,09 1,07±0,07 0,73±0,05 * 0,62±0,12* 0,63±0,08* 1 * - вірогідна різниця; - дані отримані з урахуванням двократного розведення 5 10 15 20 25 30 35 40 Отже, використання м'якого протизапального засобу з екстрактом Capsicum annum L. в умовах експериментальної моделі хронічного неспецифічного запалення, що було викликано шляхом введення повного ад'юванту Фрейнда, показало високу лікувально-терапевтичну активність. Приклад 2. Оцінка терапевтичної ефективності м'якого протизапального засобу з екстрактом Capsicum annum L. на моделі гострого запалення. Дослідження терапевтичної дії м'якого протизапального засобу проводили на моделі гострого карагінанового запалення набрякового типу, Оцінку проводили на молодих безпородних білих щурах-самцях, масою 180-200 г, що утримувались на стандартному раціону віварію, з вільним доступом до їжі та води. Тварини були поділені на дві рівні групи - дослідну та контрольну, по 10 тварин у групі. Запальну реакцію викликали введенням 0,2 мл 0,2 % водного розчину карагінану (Виробник Wako Chemicals, Японія). У ділянці введення вже через декілька годин спостерігались виразні ознаки запального процесу - набряк, почервоніння, больова чутливість, порушення функції, яке виражалось у порушенні рухливості кінцівки в передплюсновому суглобі. Особливо яскраво розвивалася набрякова реакція тканин кінцівки. Як фактори оцінки важкості перебігу запального процесу використовували лінійні розміри стопи в місці запалення - ширину та об'єм (див. фіг. 2). Фіг. 2. Значення ширини та об'єму кінцівки в ділянці запалення у щурів при лікуванні гострого набрякового запалення (карагінаніндукованого) м'якою формою з екстрактом Capsicum anuum L. Лікування, як і у випадку ад'ювантіндукованого запалення, проводили шляхом нанесення, шару препарату на уражену ділянку, кінцівки. Режим нанесення мазі кожні 0;5 год., протягом перших трьох годин після введення флогогену, потім один раз на добу, щодобово. Таке лікування дозволило досягнути вірогідного зменшення набрякових явищ вже після першої години лікування. На четверту добу у групі, що отримувала лікування, спостерігалось повернення ширини та об'єму кінцівки у ділянці ураження до показників лінійних розмірів, що були до введення карагінану, у той час, як у контрольній групі ширина кінцівки була в 1,8 разу, а об'єм у 1,6 разу більшими, ніж до введення флогогену. Таким чином, наведені суттєві ознаки дозволяють отримати такий технічній результат у порівнянні з прототипом: отримати м'який протизапальний засіб, простий у виготовленні, зручний у використанні, з низькою ціною вихідних компонентів та високою протизапальною ефективністю при лікуванні гострих та хронічних запальних процесів з екстрактом Capsicum anuum L. Джерела інформації: 1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. Издание двенадцатое, Медицина, Москва, Т. 1, 1998, - С. 351. 2. Компендиум. Под ред. Коваленко В.М., Викторова А.П. "Морион", Киев, 2005 - С. 1389. 3. Компендиум. Под ред. Коваленко В.М., Викторова А.П. "Морион", Киев, 2005 - С. 528. ФОРМУЛА ВИНАХОДУ 45 М'який протизапальний засіб, ще містить основу та діючу речовину - екстракт Capsicum anuum L., який відрізняється тим, що як основу використовують гідрофільну суміш ПЕГ-1500 та ПЕО400, з наступним співвідношенням вказаних компонентів, мас. %: спиртовий екстракт Capsicum2-5 4 UA 115575 C2 anuum L. ПЕГ-1500 ПЕО-400 30-40 60-68. 5 UA 115575 C2 Комп’ютерна верстка В. Мацело Міністерство економічного розвитку і торгівлі України, вул. М. Грушевського, 12/2, м. Київ, 01008, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 6