Спосіб діагностики некрозу при гострій кишковій непрохідності

МПК 6: A 61 N 5/00, 5/06, В 10/00 Спосіб діагностики некрозу при гострій кишкової непрохідності. Вінахід відноситься до медицини, а саме до хірургії і може бути застосований для діагностики некрозу при гострій кишковій непрохідності /ГКН/. Відомий спосіб дослідження життєздатності кишки при непрохідності кишечника /1/. Сутність методу складається в тому, що з метою підвищення інформативности способа при визначенні функціональних порушень в прилеглих до зони некрозу областях, в брижеїчну артерію вводять 38 мл 0.4 - 0.6%-ного розчину димифена блакитного і, при наявності зафарбованості зони, прилеглої до області некрозу, визначають життєздатність кишки, що дозволяє провести діагностику прихованих порушень в кишці. Цей спосіб особливо важливий для визначення некрозу і вибору рівня резекції кишки. Однак, даний метод дозволяє діагностувати некроз кишки лише інтраопераційно і, таким чином, не може впливати на прийняття рішення про операцію. Найбільш близьким до запропонованого винаходу є спосіб визначення життєздатності тканини кишки /2/. Сутність методу полягає в тому, що чотирьохелектродним щупом вимірюють електропровідність нормальної і патологічної ділянок кишки, що проводиться в умовах змінного струму низької частоти і, за зміною питомої електропровідності, визначають її життєздатність.Недоліком даного методу також є його інтраопераш'йне застосування. У основу винаходу поставлена задача удосконалення диференційної діагностики деструктивних і недеструктивних форм гострої кишкової непрохідності на доопераіп'йному етапі. Завдяки можливості визначити внесок в світлорозсіяння різних часток плазми крові хворого з'являється можливість швидкої, недорогої і неінвазивної діагностики некрозу кишки, що знизить частоту розходження діагнозів, знизить післяопераційну летальність, частоту післяопераційних ускладнень і тривалість перебування хворого на ліжку. Поставлена задача вирішується тим, що розведену глюгициром 1: 4 кров із вени хворого центрифугують до отримання плазми, яку після розведення 0.85% розчином хлористого натрію вимірюють лазерним кореляційним спектроскопом, обчислюючи розподіл часток плазми крові за їх гідродинамічними радіусами, а отриману після обробки гістограму порівнюють з усередненими гістограмами хворих деструктивними і недеструктивними формами гострої кишкової непрохідності, проецирують гістограму плазми крові хворого на площинний роздрук класифікаційного аналізу і, за належністю до зони розподілу гістограм хворих з даною патологією, судять про наявність некрозу. Спосіб здійснюється таким чином. Кров для аналізу можна брати як з вени, так і з м'якоті пальця. Працювали з венозною кров'ю. Одноразовою стерильною голкою робили пункцію локтевої вени у локтевому згині. Кров, що витікала самопливом, збирали в пробірку. Дуже важливо не форсувати виділення крові масажем, оскільки це може привести до внутрисудинного руйнування формених елементів крові і грубого спотворення результату аналізу. Вимірювання можна провести в сироватці або плазмі крові. Було вибрано плазму як об'єкт дослідження, оскільки при дослідженні сироватки інформація про розподіл часток різного генезу виявляється неповною: в кров'яний згусток йде фибриноген. Для запобігання згортанню крові і отриманню плазми 1 мл крові збирається в пробірку з 4 мл стабілізуючого розчину "Глюгицир" (в його склад входить натрію гидроцитрат і глюкоза). Розмір часток - компонентів "Глюгицира" менше Інм, що нижче дозволяючої здатності лазерного кореляційного спектрометру. Прилад "не бачить" компонентів "Глюгицира" і розведення не спотворює результату. Розведена "Глюгициром" кров центрифугуєтся 15 хвилин при 3000 об/хв. Отцентрифуговану плазму спеціальним дозатором розливають в сухі пробірки Егшендорфа і відразу ж заморожують в холодильнику при температурі -10 15 градусів Цельсія. У замороженому вигляді матеріал можна зберігати З місяці. Виконані нами попередні досліди показали, що результати дослідження матеріалу після зберігання протягом 90 діб не відрізняються від результатів, отриманих через 1 - 2 доби. Транспортування з місця зберігання в лабораторію здійснюється в побутовому термосі, в якому знаходяться упаковані в поліетиленові мішечки эппендорфи і пересипаний сіллю лід. Необхідно виключити навіть короткочасне розмороження плазми в період зберігання або транспортування. Особливо уважно треба стежити за стабільністю режиму холодильника. Тимчасове його відключення від живлення з подальшим включенням може привести до таяння замороженого зразку і повторного заморожування, що спотворює і дискредитує результат вимірювання. Вімірюваняя виконується за допомогою лазерного кореляційного спектрометру, розробленого у відділі молекулярної і радіаційної біофізики Санкт-Петербурзького інституту ядерної фізики РАН, виготовленого НПО "Прогрес" АН Україні (потужність лазера 8мВт, довжина хвилі випромінювання 0,633 мкм, діапазон розмірів часток, що вимірюються - від 5 нм до 10 000 нм), математична обробка забезпечується персональною ЕОМ типу ТВМ РС286/287. Безпосередньо перед вимірюванням зразки розморожуються в термостаті при температурі +37 градусів Цельсія протягом 30 - 40 хвилин. Після відтаяння зразки центрифугуются при 6000 об/ хв протягом 15 хвилин для осадження пильових часток, що попали в субстрат під час підготовчих процедур. 0,4мл отцентрифугованого зразка відсасують з поверхні і вміщують в кювету спектрометра. У кюветі не повинно бути пухирців. Кювету закривають кришкою для уникання попадання пилу або "паразитного" світла. Вимірювання проводиться відповідно до інструкції і технічного паспорта приладу. Результати вимірювань надходять у пам'ять ЕОМ, де зберігаються у вигляді файла. Процедура вимірювання і обробки даних займає від 7 до 10 хвилин. Спеціально розроблена програма забезпечує рішення ЕОМ зворотньої спектральної задачі, що дозволяє представити результат графічно у вигляді гістограми, на якій в логарифмічному масштабі зображується внесок в світлорозсісяння часток з 32 різними гідродинамічними радіусами. Зіставляючи групу гістограм, об'єднаних загальними ознаками ЕОМ будує усереднену гістограму, яка характеризує групу на основі п - го числа варіантів. Усереднена гістограма групи /п - 50/ донорів /фіг. 1 / відрізняється від групи /п - 66/ хворих ГКН без деструкції кишки /фіг. 2/ своєю бімодальністю. Збільшується внесок часток гідродинамічного радіусу більше 264 нм, що можна пояснити формуванням їмуних комплексів. Усереднена ЛКС - гістограма групи /п - 34/ хворих ГКН з деструкцією кишки /фіг.З/ бімодальна. Підвищується внесок низькомолекулярних часток з гідродинамічним радіусом 2-11 нм. Це можна пояснити смоктуванням низькомолекулярних продуктів розпаду, які образуються у місті деструкції. Спектри, представлені 32 параметрами, важко співставляти на основі візуальних оцінок, знаходити в них схожість і відмінності. Розроблена на основі математичної теорії' груп програма "Класифікатор" дозволяє провести багатопараметрову обробку, після якої кожний спектр залишається в пам'яті ЕОМ у вигляді єдиної крапки, зпроецированої на площину. Виявляється "купне" розміщення на площині спектрів, об'єднаних загальними ознаками. Замкнені овальні лінії обмежують зони дисперсії варіантів в межах ±2Ь. При зіставленні груп виявляються спектри, які створюють зону дисперсії "своєї"" групи. Вони володіють вираженими відмінностями з протилежною групою. Деякі спектри виявляються в зоні дисперсії протилежної групи, або в зоні взаємоперекриття (якщо така є). Це спектри, які виявляють більшу схожість з ознаками протилежної групи, чим своєї, або володіють схожістю з обома групами. Частина спектрів виявляється поза зонами дисперсії, окресленими овальними лініями. Ці спектри володіють ознаками, які відрізняють їх від обох груп. Графічне зображення відмінностей на площинному роздруку дає апроксимироване, наближене уявлення про схожість і відмінності між групами і індивідуальними спектрами. На площинних роздруках класифікаційного аналізу порівняння груп гістограм хворих ГКН без деструкції кишки і донорів /фіг.4/ та хворих ГКН з наявністю деструкції кишки та без неї /фіг.6/ виявляється зона взаємоперекриття. На площинному роздруку класифікаційного аналізу порівняння груп гістограм донорів та хворих ГКН з деструкцією кишки /фіг. 5/ зони взаємноперекриття немає. Точний аналіз схожості і відмінностей отриманих спектрів ЕОМ представляє у вигляді таблиць з цифровою інформацією, на яких вказане абсолютне число та відсоток спектрів, характеристика яких відповідає ознакам "своєГ" групи, протилежної групи, або володіє ознаками, відмінними від обох груп. У таблиці співставлення груп донорів та хворих ГКН з деструкцією кишки помітна відсутність гістограм протилежної групи в зонах розподілу / табл.2/, шо підтверджу61 відсутність зони перекриття елліпсів на площинному роздруку класифікаційного аналізу /фіг.5/. У "своєї" зоні опинилося 92 % хворих ГКН з деструкцією кишки. При співставленим з донорами групи хворих ГКН без деструкції кишки /табл.1/ відсоток гістограм, які опинилися в "своєГ зоні розподілу з'являється нижчим - 85 %. 2% опинилося у зоні протилежної групи. Це є зрозумілим угак як при відсутності некрозу кишки патологічні зміни гомеостазу будуть меньшими. При сшвставленні гр\тт гістограм хворих ГКН з наявністю деструкції кишки та без неї /табл 3/, виявляється, що зони розподіл}' утворили 75 % гістограм хворих без деструкції та 81 % хворих з деструкцією кишки. При накопичені в пам'яті ЕОМ достатнього банку даних відкривається можливість об'єднання груп за більшою кількістю ознак, наприклад з усієї ГКН виділити гр^тш хворих защемленою грижею, мезентеріальним тромбозом, спайковою непрохідністю, шо має значно підвищити чутливість методу. У порівнянні з прототипом спосіб, шо заявляється, дозволяє значно підвищити точність дооперанійної діагностики деструкції стінки кишки при гострій кишковій непрохідності, а також скоротити витрати на проведення способу діагностики. Список літератури. 3. А.с. №3 421308 А1 Бюл. №33' 07.09.88 П.В. Рибаченко, Н.Ф.Фомін, Е.В.Чернов Спосіб дослідження життєздатності кишки при непрохідності кишечника. 2. Ах. №1531993 А1 Бюл. №48 30.12.89 В Т.Соломонов, М. А.Шабанов, А.А. Рибаченко, Ю.В. Пономарьов.Спосіб визначення поразки внутрішних органів людини. Спосіб діагностики некрозу при гострій кишкової непрохідності. Intensity distribution 2-11 11-37 37-95 95-264 264... ft 15.73 32.0В 19.70 29.76 2.73 10 100 1000 Фіг. 1. Усереднена Л КС - гістограма донорів R гідродинамічний радіус часток % - внесок в світлорозсіяння Intensity distribution Н 2-11 11-37 37-95 95-264 264-... В.64 30.90 21.01 27.88 11.57 Фіг. 2. Усереднена ЛКС - гістограма хворих гострою кишковою непрохідністю без деструкції кишки. R - гідродинамічний радіус часток. % ~ внесок в світлорозсіяння. Гешелін Сергій Олександрович Ракул Олександр Юрійович Спосіб діагностики некрозу при гострій кишкової непрохідності. Intensity distribution 2-11 1137 37-95 95-264 264... ft 14.45 31.84 16.35 25.51 П.85 10 100 1000 Фіг. 3. Усереднена ЛКС- грама групи хворих гострою кишковою непрохідністю з деструкцією кишки. R - гідродинамічний радіус часток. % - внесок в світлоразсіяння. Фіг. Площинний роздрук класифікаційного аналізу порівняння групи хворих гострою кишковою непрохідністю без деструкції кишки і групи донорів, о - донори; х - хворі ГКИ без деструкції кишки. Гешелїн Сергій Олександрович Ракул Олександр Юрійович Спосіб діагностики некрозу при гострій кишкової непрохідності. Фіг. 5. Площинний роздрук класифікаційного аналізу порівняння груп гістограм донорів і хворих гострою кишковою непрохідністю з деструкцією кишки. о - гістограми донорів 4 гістограми хворих деструктивною ГКН. Фіг. 6. Площинний роздрук класифікаційного аналізу порівняння груп гістограм хворих гострою кишковою непрохідністю без деструкції кишки і з деструкцією кишки. х - гістограми хворих ГКН без деструкції кишки. + - гістограми хворих ГКН з деструкцією кишки. Тешелін Сергій Олександрович Ракул Олександр Юрійович Спосіб діагностики некрозу при гострій кишкової непрохідності. Таблиця L Результати багатопараметрової класифікації, отримані при зіставленні гістограм плазми крові донорів і хворих гострою кишковою непрохідністю без деструкції кишки. ~------- __32ЦА РОЗСІЯННЯ ГРУПА ^~^--а^шгів Д О С ЛІД Ж Е НИ Х 1(0) ДОНОРИ 2(Х) ГКН БЕЗ ДЕСТРУКЦІЇ 72% а- 3 6 2% а-1 13% п-6 85% п-56 ПОЗА ЗОНАМИ ^—-^_ 1(0) ДОНОРИ п-50 2(Х> ГКН БЕЗ ДЕСТРУКЦІЇ п-66 15% п-8 13% п-9 Таблиця 2. Результати багатопараметрової класифікації, отримані при зіставленні груп гістограм здорових донорів і хворих гострою кишковою непрохідністю з деструкцією стінки кишки. 1(0) ДОНОРИ ~~~~~~~------- __^ ЗОНА РОЗСІ ЯННЯ —^-^_ВАРЇАНТШ ГРУПА ДОСЛІДЖЕНИХ ~~—-^_ 1(0) ДОНОРИ П-50 2(+) ГКН 3 ДЕСТРУКЦІЄЮ п-34 83% п - 42 0% 2(+) ГКН 3 ДЕСТРУКЦІЄЮ 0% 92% п - 31 ПША ЗОНАМИ 17% п -8 8% п - 3 Таблиця 5. Результати багатопараметрової класифікації, отримані при зіставленні гістограм хворих гострою кишковою непрохідністю без деструкції кишки з гістограмами хворих, у яких була деструкція кишки. ~~~—^---__ З О НА РОЗ СІ Я Н Н Я ^^^^ІЗАРІАН ТІВ ГРУПА ДОСЛІДЖЕНИХ ~~ --------------------------------- ~~~ 1(+) ГКН 3 ДЕСТРУКЦІЄЮ К+> ГКН 3 ДЕСТРУКЦІЄЮ п-34 2(Х) ГКН БЕЗ ДЕСТРУКЦІЇ а-66 Гешелін Сергій Олександрович Ракул Олександр Юрійович 81% п-28 7% п-4 2(Х) ГКН БЕЗ ДЕСТРУКЦЙ 4% п- 1 75% п-50 ПОЗА ЗОНАМИ 15% п -5 18% п-12