Спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю

Реферат: Спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю, включає етап екстрагування, фільтрації та упарювання подрібненої рослинної сировини. Як рослинну сировину використовують суху траву чорнобривців, яку заливають спиртом етиловим до утворення "дзеркала" на поверхні. Екстрагують при кімнатній температурі, фільтрують через вакуумний фільтр. Отриманий фільтрат упарюють до густого залишку, а шрот заливають гарячою водою і екстрагують на водяній бані, відфільтровують, з наступним дворазовим екстрагуванням фільтрату кожного разу. Потім водні фільтрати об'єднують та упарюють до одержання густого залишку. Після цього густі спиртовий і водний залишки об'єднують та висушують. UA 93512 U (12) UA 93512 U UA 93512 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить фармації, а саме способів отримання екстракційних препаратів з лікарської рослинної сировини, що характеризуються жовчогінною та гепатопротекторною активністю, і може бути використана у медицині для лікування хворих із захворюваннями печінки. Відомий спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю з сухої трави гороху посівного [1]. За відомим способом подрібнену рослинну сировину трави гороху посівного екстрагують 10-кратною кількістю 49-51 % етилового спирту протягом 11-12 годин з подальшим упарюванням екстракту до водного залишку з наступним очищенням від речовин ліпофільної природи хлористим метиленом, при співвідношенні 3:4 водного залишку до хлористого метилену, з подальшим сушінням водного залишку до сухого. Недоліком відомого способу є недостатня фармакологічна активність, тобто одержаний засіб характеризується вузькоспрямованою фармакологічною дією, а сам технологічний процес потребує надмірних затрат, зокрема на використання розчинника хлористого метилену. Відомий спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю [2]. За відомим способом субстанцію отримують шляхом трикратної екстракції листя винограду 39-41 % етанолом при співвідношенні сировини до екстрагенту 1:12, причому тривалість кожної екстракції складає 12 годин. Загальна тривалість здійснення усього технологічного процесу отримання субстанції складає 36 годин. Недоліком відомого способу є недостатня фармакологічна активність, довготривалість та висока вартість способу в цілому із-за суттєвих витрат на використання розчинника спирту етилового. Отриманий засіб за відомим способом характеризується лише гепатопротекторною властивістю. В основу корисної моделі поставлена задача вдосконалити відомий спосіб, в якому шляхом зміни технологічного прийому, спрямованого на одержання нового високо ефективного засобу, як для профілактики, так і для лікування хворих із захворюваннями печінки у формі рослинного екстракту з максимально збереженим у ньому комплексом біологічно активних речовин (БАР), який характеризується яскраво вираженою гепатопротекторною та жовчогінною дією, досягають не тільки розширення фармакологічної активності лікарського засобу, але і суттєвого зниження енергозбереження та ресурсозбереження способу в цілому. Поставлена задача вирішується тим, що спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю, що включає етап екстрагування, фільтрації та упарювання подрібненої рослинної сировини, згідно з корисною моделлю, як рослинну сировину використовують суху траву чорнобривців, яку заливають 70 % спиртом етиловим до утворення "дзеркала" на поверхні, екстрагують протягом 24 год. при кімнатній температурі, фільтрують через вакуумний фільтр, отриманий фільтрат упарюють до густого залишку, а шрот заливають гарячою водою у співвідношенні 1:10 і екстрагують на водяній бані протягом 2 год., відфільтровують, з наступним дворазовим екстрагуванням фільтрату тривалістю 30-40 хв. кожного разу, потім водні фільтрати об'єднують та упарюють до одержання густого залишку, після чого густі спиртовий і водний залишки об'єднують та висушують. Захворювання печінки займають значне місце серед цілого ряду нозологічних форм уражень печінки. Це обумовлено погіршенням екологічного стану, ураженнями печінки при гострих отруєннях (у тому числі зловживання алкоголем, харчові отруєння) та медикаментозним впливом тощо. Зміни у біохімічних процесах, що протікають в організмі, відображаються на її жовчоутворюючій функції, тобто на кількості та якості жовчі, що виробляється печінкою, вивчення останньої є важливим критерієм пошуку нових жовчогінних та гепатопротекторних засобів для лікування та профілактики захворювань біліарної системи. У зв'язку з цим, постає необхідність створення гепатопротекторних препаратів, які б володіли достатньо вираженою лікувально-профілактичною дію і одночасно не спричиняли негативного впливу на організм при довготривалому їх використанні. Саме тому, інтерес представляють такі рослинні екстракти, які характеризуються вмістом широкого спектра біологічно активних речовин. Запропонована нами рослинна субстанція з жовчогінною та гепатопротекторною активністю, отримана з трави чорнобривців, завдяки використанню саме цієї трави як сировини, що забезпечує специфічну дію як на печінку, так і на весь організм у цілому являє собою якісно новий лікарський засіб з яскраво вираженою фармакологічною активністю. Спосіб отримання рослинної субстанції з жовчогінною та гепатопротекторною активністю здійснюють наступним чином. Подрібненої суху рослинну сировину трави чорнобривців заливають 70 % спиртом етиловим до утворення "дзеркала" на поверхні та екстрагують протягом 24 год. при кімнатній температурі. Потім фільтрують через вакуумний фільтр, відділивши фільтрат від шроту. Одержаний фільтрат 1 UA 93512 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 упарюють до густого залишку, а шрот заливають гарячою водою у співвідношенні 1:10 і піддають екстракції на водяній бані протягом 2 год. з наступним фільтруванням та дворазовим екстрагуванням фільтрату тривалістю 30-40 хв. кожного разу. Водні фільтрати об'єднують та упарюють до одержання густого залишку. Отримані густі спиртовий і водний залишки об'єднують та висушують за допомогою вакуумної сушарки. Приклад 1 Повітряно-суху рослинну сировину трави чорнобривців вагою 338 г подрібнили до такого розміру часток, які проходили через сито з діаметром отворів 5 мм і залили 70 % спиртом етиловим та настояли до утворення "дзеркала" на поверхні з наступним екстрагуванням протягом 24 год. при кімнатній температурі. Потім відфільтрували через вакуумний фільтр. Отриманий фільтрат упарили на вакуумно-ротаційному випарювані при температурі 60-70 °С до густого залишку. Шрот залили гарячою водою у співвідношенні 1:10 і екстрагували на водяній бані протягом 2 год. Шрот відфільтрували через вакуумний фільтр і повторили екстракцію ще 2 рази, тривалість кожного разу складала 30-40 хв. Водні екстракти об'єднали та упарили до густого залишку. Отримані густі спиртовий і водний екстракти об'єднали і висушують до сухого залишку за допомогою вакуумної сушарки. Вихідна вага сухого екстракту склала 110 г, що відповідає 32,74 %. Приклад 2 Дослідження специфічної активності сухого екстракту трави чорнобривців було проведено на білих безпородних щурах самицях масою тіла 220-250 г. До початку експерименту тварин рандомізували на групи залежно від маси їх тіла. Протягом 10 діб тваринам внутрішньошлунково за допомогою металевого зонда вводили сухий екстракт трави чорнобривців один раз на добу в дозі 50 мг/кг маси тварини. При проведенні досліджень використовували аналогічний за фармацевтичною дією препарат як препарат порівняння - таблетки "Аллохол", виробництва ПАТ НВЦ "Борщагівський хіміко-фармацевтичний завод", Україна у дозі 80 мг/кг та капсули "Силібор", виробництва ТОВ "Фармацевтична компанія "Здоров'я", Україна у дозі 100 мг/кг. Обидва препарати порівняння вводили тваринам внутрішньошлунково один раз на добу впродовж десяти діб, причому останнє введення здійснили за 1 годину до тестування жовчогінної дії препаратів. Про функціональну здатність печінки свідчили за інтенсивністю вироблення нею жовчі. Після наркотизації ефіром тварин вивели з експерименту. Потім проводили розтин їх черевної порожнини, знаходили загальну жовчну протоку, у яку одним кінцем вставляли канюлю діаметром 1 мм, другий кінець якої виводили у пробірку, в яку збирали жовч. Забір жовчі здійснювали щогодини, при цьому об'ємну швидкість секреції жовчі розраховували відносно маси тіла тварини. У всіх дослідних тварин визначали показники жовчовиділення, холато- та жовчоутворення: інтенсивність жовчовиділення, вміст жовчних кислот та холестерину в жовчі, як показників синтетичної функції органа. Для визначення вмісту жовчі та холестеролу у виділеній жовчі використовували метод, що ґрунтується на здатності охолодженого розчину заліза хлорного давати забарвленні комплекси з жовчними кислотами та холестеролом. Також визначали літогенні властивості жовчі шляхом розрахунку холато-холестеролового коефіцієнта (ХХК). Для кожної тварини окремо розраховували загальну кількості жовчі, вироблену печінкою протягом усього експерименту. Шляхом лабораторного дослідження жовчі отримали її біохімічні показники. За результатами вивчення жовчогінної дії сухого екстракту трави чорнобривців (дослідного зразка) встановлено, що його введення сприяло помірному стимулюванню виділення жовчі у здорових тварин, але статистично значущих відмінностей за показником об'ємної швидкості секреції жовчі не було відмічено, порівнюючи з контролем, - тварини групи інтактний контроль (дані занесені у таблицю 1). Більш важливою властивістю жовчогінного дії запропонованого засобу, ніж збільшення об'єму виділеної жовчі, вважається збільшення вмісту жовчних кислот у жовчі. Застосування експериментальним тваринам сухого екстракту у дозі 50 мг/кг маси тварини призвело до статистично значущого збільшення у 2,2 рази вмісту жовчних кислот у жовчі порівняно з тваринами групи інтактного контролю, хоча відносний вміст холестеролу майже не змінювався. У 3,5 разу підвищився ХХК, що характеризувало літогенні властивості дослідного зразка. Застосування препарату порівняння "Силібор" у дозі 100 мг/кг здоровим щурам не спричиняло збільшення об'ємної швидкості секреції жовчі та незначною мірою впливало на вміст жовчних кислот у жовчі, хоча призводило до статистично значущого зниження вмісту холестеролу у жовчі. Отримані результати після введення тваринам препарату порівняння 2 UA 93512 U 5 10 15 "Силібор" показали, що даний препарат має переважно гепатопротекторні властивості, але його не можна вважати істинним холеретиком. Препарат порівняння "Аллохол", який рекомендований методичними рекомендаціями, використовувати як еталонний. У своєму складі він містить суху жовч, порошок часнику сушеного, листя кропиви та активоване вугілля. Що стосується використання цього препарату у вітчизняній клінічній практиці, слід відмітити, що він покращує секреторну функцію клітин печінки хворих, характеризується помірним холеретичним ефектом, стимулює синтез жовчних кислот, зменшує вміст холестеролу у печінці, тому, що надлишок холестеролу випадає в осад у вигляді кристалів, які дають початок утворенню жовчних каменів. За результатами даного досліду застосування препарату порівняння "Аллохол" для здорових тварин не впливало значною мірою як на збільшення об'ємної швидкості секреції жовчі, так і на самий вміст у ній жовчних кислот, але статистично значуще знижувало вміст холестеролу у жовчі. Таким чином, проведене дослідження на експериментальних тваринах показало, що сухий екстракт трави чорнобривців виявив властивості, характерні істинним холеретикам. У здорових тварин він також дещо підвищував об'ємну швидкість секреції жовчі та статистично значуще збільшував вміст жовчних кислот у жовчі та ХХК. Таблиця 1 Дія сухого екстракту трави чорнобривців на зміну біохімічних показників функції печінки за умов введення групам тваринам протягом 10-ти діб Об'ємна швидкість секреції Вміст Вміст жовчі, жовчних Вміст Вміст Холатожовчних Експериментальна Доза, мл/100г/3 кислот у холестеролу холестеролу холестероловий n кислот у група мг/кг год. (р жовчі у жовчі у жовчі коефіцієнт жовчі рівень (мг/% (мг/%) (мг/%/100г) (ХХК) (мг/%) значущості /100г) відносно ІК) Інтактний 5 0,82±0,05 255±59 219±57 33±1,9 27±2,1 7,8±2,0 контроль (ІК) Сухий екстракт 5 50 0,99±0,10 568±65* 544±31* 28±7,6 26±6,1 27,8±9,6* чорнобривців "Силібор" 5 100 0,83±0,07 395±74 331±81 11±2,2* 9±1,9* 40,4±6,9* "Аллохол" 3 80 0,95±0,05 280±71 261±54 23±2,2* 22±1,7 12,3±2,9 Примітки: 1. * - відмінності статистично значущі відносно групи інтактного контролю (ІК) (за критерієм МанаУїтні, р