Спосіб отримання ліпосомальної емульсії, що містить водорозчинні протипухлинні препарати

Реферат: Спосіб отримання ліпосомальної емульсії, яка містить водорозчинні протипухлинні препарати, включає розчинення ліпідів в органічному розчиннику, утворення ліпосом шляхом екструзії, ліофілізацію продукту, що містить протипухлинний препарат. Протипухлинний препарат розводять у водному розчиннику, змішують з ліпосомальною фосфатидилхоліновою платформою, піддають ультразвуковій обробці протягом 2-3 хвилин при співвідношенні протипухлинний препарат:фосфатидилхолінова ліпосомальна платформа 1:10-50 при температурі 30-42 °C. UA 112699 U (12) UA 112699 U UA 112699 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 Корисна модель належить до фармації, а саме до способу отримання хіміотерапевтичних протипухлинних препаратів, що представляють собою ліпосомальну композицію, яка містить фосфатидилхолінову ліпосомальну платформу і гідрофільні цитостатичні протипухлинні препарати в певних співвідношеннях вказаних компонентів, а саме: - природний фосфоліпід - фосфатидилхолін в ліпосомальній формі, стерильна, апірогенна ліофілізована форма у флаконі (кріопротектор лактоза). В одному флаконі міститься 500 мг фосфатидилхоліну і 500 мг лактози. Препарат зареєстрований в Україні як готовий лікарський засіб (per. № UA / 3528/01/01) - "Ліпін". - гідрофільні цитостатичні протипухлинні препарати у вигляді розчинів для ін'єкцій. Препарати використовуються в різних схемах хіміотерапії пухлин і зареєстровані в Україні як готові лікарські препарати: антрациклінові антибіотики (доксорубіцину гідрохлорид, епірубіцину гідрохлорид, ідарубіцину гідрохлорид, мітоксантрон і ін.); препарати платини (цисплатин, карбоплатин, оксаліплатин та ін.); фторурацил, етопозид, іринотекан, вінкаалкалоїди (вінкристин, вінбластин і ін.). Актуальність і прагматичний характер проблеми розробки нових способів отримання ефективних протипухлинних препаратів і їх застосування обумовлені високою токсичністю цитостатиків і виникаючими при їх прийомі побічними діями. Протипухлинні препарати здатні пошкоджувати практично всі нормальні тканини організму: в першу чергу пошкоджуються клітини кісткового мозку, що швидко обновлюються, травної системи, волосяних фолікулів і ін. Внаслідок цього створення лікарських цитостатичних препаратів зі зменшеною токсичністю є вельми актуальним. Пропонований спосіб спрямований на створення високоефективних емульсій ліпосомальних лікарських препаратів зі зменшеною токсичністю і їх застосування в клініці. Створення штучних мембран ліпосом є одним з перспективних напрямків сучасної фармації. Сьогодні вже ні в кого не викликає сумнівів перспективність використання ліпосомальних форм лікарських препаратів в клініці (Кулик Г.I., Олейніченко Г.П., Анікусько М.Ф., Краснопольский Ю.М., Чехун В.Ф. Використання ліпосомальних форм хіміопрепаратів у хворих на резистентний до доксорубіціну рак молочної залози / Півнюк В.М., Тимовська Ю.О., Пономарева О.В. та ін. // Онкологія. - 2007. - Т. 9. № 2. - С. 120-124.). Ліпосомальні препарати мають ряд безсумнівних переваг: - захищають клітини організму від токсичної дії лікарських засобів; - пролонгують дію введеного в організм лікарського засобу; - захищають лікарські речовини від деградації; - сприяють прояву націленої специфічності за рахунок селективного проникнення в осередок ураження; - змінюють фармакокінетику лікарських препаратів, підвищуючи їх фармакологічну ефективність. Критерієм ефективності в створенні оптимального способу хіміотерапії онкологічних хворих є зниження токсичності препаратів для нормальних тканин при збереженні специфічної цитотоксичної активності для пухлинної тканини. Крім цього необхідно створення препаратів, що дозволяють боротися з резистентними пухлинами. Резистентність до протипухлинних препаратів включає зниження внутрішньоклітинного накопичення цитостатиків, підвищення активності систем глутатіону, підвищення репарації пошкодженої ДНК і ін. Вкрай важливим є той факт, що введення до складу ліпосомальних протипухлинних препаратів природного фосфатидилхоліну - основного компонента ліпідного матриксу клітинних мембран - дозволяє стабілізувати і відновлювати мембрани клітин людини при введенні цитотоксичних лікарських препаратів. Сьогодні в міжнародній медичній практиці для лікування онкологічних хворих вже використовуються ліпосомальні форми препаратів - цитостатиків. В Україні також зареєстровано низку ліпосомальних лікарських препаратів, що використовуються для лікування онкологічних хворих: "Ліподокс", "Ліолів", "Ліпофлавон", "Келикс" і ін. Відомі способи отримання ліпосомальних лікарських препаратів, що містять цитостатики: доксорубіцину гідрохлориду (Патент України № 64591. 2004., цисплатин (Патент України № 66633) та ін. Способи отримання ліпосомальних композицій, які найбільш часто використовуються для отримання лікарських форм, складаються з послідовного здійснення основних операцій і методів. Спосіб отримання включає деякі операції і методи, які ускладнюють його реалізацію і можуть сприяти відносному зниженню якості ліпосомального продукту. По-перше, це пов'язано з регідратацією ліпосомальної субстанції, під час якої частина продукту може виходити з водного простору ліпосоми і перебувати у вільному стані, що 1 UA 112699 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 призводить до зменшення вмісту лікарського препарату усередині ліпосоми в момент введення. Отримання даних препаратів дозволяє отримувати в складі ліпосоми тільки конкретний цитостатик. У пропонованому способі в ліпосомальній платформі може перебувати будь-який необхідний водорозчинний протипухлинний препарат. Існуючі технології тривалі, відрізняються високою ціною, що робить їх малодоступними для населення. Ціна продукту за пропонованою технологією не відрізняється від загальноприйнятої вартості лікування онкологічних захворювань в Україні. Відомий спосіб (Патент України №6700, МПК 5 А61К 31/685, 1994)включає: висушування фосфатидилхоліну та дифосфатидилгліцерину у вакуумі, емульгування їх у водному середовищі, що містить антибіотик (доксорубіцин або інший антибіотик антрациклінового ряду: фарморубіцин, адріабластин та ін.), з співвідношенням антибіотик: фосфоліпіди 1: (17-20) мас.ч. та глюкозу у кількості 18-22 мас. %, гомогенізацію (диспергування) ліпідної емульсії, стерилізуючу фільтрацію та розлив. Цей спосіб має ряд суттєвих недоліків: присутність у препараті глюкози не дозволяє застосовувати препарат для лікування хворих на цукровий діабет; нестабільність фізикохімічних властивостей у процесі зберігання, що обумовлено присутністю у препараті кислого фосфоліпіду - дифосфатидилгліцерину, утворюючого негативно заряджені домени у ліпідному бішарі ліпосоми; виділення токсичних продуктів у процесі зберігання у зв'язку з вивільненням з ліпосоми антибіотика. Найбільш близьким до пропонованого способу є спосіб отримання ліпосомальних препаратів [Tatsuhiro Ishida, Hiroshi Kiwada (Tokushima, JP) Patent application title: Agent for enhancing anti-timor effect comprising oxaliplatin Liposome preparation, and anti-tumor agent comprising the Liposome preparation. Patent Application number 20100330166, 2010-12-30. IPC8 Class: AA61K9127FI. USPC Class: 424450]. Спосіб здійснюють шляхом розчинення ліпідів в органічному розчиннику, утворення ліпосом шляхом екструзії, ліофілізацію продукту, що містить протипухлинний препарат. Однак спосіб отримання по прототипу має ряд істотних недоліків: до складу продукту входить синтетичні дорогі ліпіди; зазначені ліпіди не описані в складі міжнародних фармакопеї; розмір часток від 100 до 300 нм; в прототипі не проводиться визначення пірогенності продукту. Все це знижує можливість застосування способу прототипу для отримання лікарських препаратів і для їх масового застосування в клініці. В основу корисної моделі поставлено задачу удосконалення способу отримання ліпосомального препарату, в якому за рахунок змішування (регідратація) ліофілізованої маси фосфатидилхоліну з розчином цитостатика для ін'єкції, обробки ультразвуком певний час і при відомій температурі, досягається зниження токсичності препаратів і зниження вартості хіміотерапії. Поставлена задача вирішується тим, що в способі отримання ліпосомальної емульсії з протипухлинною активністю шляхом розчинення ліпідів в органічному розчиннику, утворення ліпосом шляхом екструзії, ліофілізації продукту, що містить протипухлинний препарат, згідно з корисною моделлю, протипухлинний препарат розводять у водному розчиннику, змішують з ліпосомальною фосфатидилхоліновою платформою, піддають ультразвуковій обробці протягом 2-3 хвилин при співвідношенні протипухлинний препарат: фосфатидилхолінова ліпосомальна платформа 1: 10-50 при температурі 30-42 °C. Отримані параметри обробки визначені шляхом проведення експериментальних досліджень. Наводимо конкретні приклади отримання ліпосомальної композиції запропонованим способом. Приклад 1. Ліпосомальна платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин доксорубіцину в співвідношенні 20: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 25 мг антибіотика), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 3 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі лазні 30 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину антрациклінового антибіотика - доксорубіцину і ліпосомальної емульсії, що містить доксорубіцин, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,0-6,3 Приклад 2. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом 2 UA 112699 U 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 проколу голкою гумової пробки вводять розчин цисплатину в співвідношенні 17: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 30 мг препарату платини), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 31 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину препарату платини, наприклад цисплатину і емульсії ліпосом, що містить цисплатин, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,0-6,8. Приклад 3. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин епірубіцину в співвідношенні 25: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 20 мг антибіотика), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2,5 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 32 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину антрациклінового антибіотика - епірубіцину і ліпосомальної емульсії, що містить епірубіцин, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70 140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,0-6,3. Приклад 4. Ліпосомальну платформу фосфатиділхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин етопозиду в співвідношенні 25: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 20 мг етопозиду), нагрітого до 30-43 С. Суміш перемішують протягом 3 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 33 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину етопозиду і ліпосомальної емульсії, що містить етопозид приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,7-7,2. Приклад 5. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин мітоксантрону в співвідношенні 20: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 25 мг антибіотика), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2-3 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 34 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину антрациклінового антибіотика - мітоксантрону і ліпосомальної емульсії, що містить мітоксантрон, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,0-6,6 Приклад 6. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин фторурацилу в співвідношенні 10: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 50 мг фторурацилу), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 35 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину фторурацилу і ліпосомальної емульсії, що містить фторурацил, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 7,8-8,5. Приклад 7. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин вінорельбіну в співвідношенні 20: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 25 мг вінорельбіну), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 2-3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 36 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину вінорельбіну і ліпосомальної 3 UA 112699 U 5 10 15 20 25 30 35 емульсії, що містить вінорельбін, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 6,8-7,5. Приклад 8. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин іринотекану в співвідношенні 25: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 20 мг іринотекану), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2-3 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 37 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину іринотекану і ліпосомальної емульсії, що містить іринотекан, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 5,8-6,4. Приклад 9. Ліпосомальну платформу фосфатидилхоліну (препарат "Ліпін") витримують (зберігання нижче 0 °C) при кімнатній температурі протягом 10-15 хвилин. Потім в умовах асептики (в зоні ламінарного потоку стерильного повітря) у флакон з препаратом шляхом проколу голкою гумової пробки вводять розчин вінкристину в співвідношенні 50: 1 (на 500 мг фосфатидилхоліну 10 мг вінкристину), нагрітого до 30-43 °C. Суміш перемішують протягом 2-3 хвилин. Отриману емульсію у флаконі переносять на ультразвукову баню і піддають обробці протягом 3 хвилин при 22 кГц і температурі бані 37 °C. Отриману ліпосомальну емульсію препарату вводять пацієнтові. Порівняння LD50 вихідного розчину вінкристину і ліпосомальної емульсії, що містить вінкристин, приведено в таблиці 1. Розмір частинок ліпосом після проведеної обробки підтверджує нанорозміри - 70-140 нм, рН емульсії також знаходиться в фізіологічному діапазоні 5,8-6,4. Важливим показником ліпосомальної ліпідної емульсії є розмір частинок і ступінь окислення жирних кислот. Визначення величини частинок проводили на наносайзері "Shimadzu SALD-1 701" методом фотонної кореляційної спектроскопії. Розмір частинок вимірювали за допомогою напівпровідникового лазера при довжині хвилі 375 нм. Визначення індексу окислення проводили УФ - спектроскопією при двох довжинах хвиль: 233 нм / 215 нм, рН визначали потенціометрично. Важливим показником ліпосомальної ліпідної емульсії є розмір частинок і ступінь окислення жирних кислот. Визначення величини частинок проводили на наносайзері "Shimadzu SALD-1 701" методом фотонної кореляційної спектроскопії. Розмір частинок вимірювали за допомогою напівпровідникового лазера при довжині хвилі 375 нм. Визначення індексу окислення проводили У Φ - спектроскопією при двох довжинах хвиль: 233 нм / 215 нм, рН визначали потенціометрично. Таблиця 1 Характеристика токсичності вільної форми цитостатика і цитостатика в ліпосомальній емульсії Найменування препарату Доксорубіцин гідрохлорид Епірубіцин гідрохлорид Мітоксантрон Вінорельбін Фторурацил Вінкристин Етопозид Іринотекан Пісплатин LD50 вільного препарату при введенні внутрішньоочеревинно, миші - мг/кг LD50 А ліпосомальної емульсії препарату при Співвідношення введенні ліпосомальна платформа: внутрішньоочеревинно, протипухлинний препарат миші - мг/кг 11,5±0,8 16,5±0,93 500 мг:25 мг(20:1) 14,5±2,5 18,8±2,12 500 мг:20 (25:1) 18,7±3,8 9,9±0,8 331,5±45,8 2,75±0,22 51,8±2,8 146,2±10,4 5,4±0,4 22,5±2,85 14,75±0,96 11,5±0,8 3,65±0,17 86,3±4,3 203,5±12,6 10,2±1,6 500 мг:25 (20:1) 500 мг:20 (25:1) 500 мг:50 (10:1) 500 мг:10 (50:1) 500 мг:15 (33:1) 500 мг:20 (25:1) 500 мг:30 (17:1) 4 UA 112699 U 5 Результати дослідження (табл. № 1) показують, що використання протипухлинного препарату в ліпосомальній емульсії дозволяє збільшити дозу LD50, що свідчить про зниження токсичності продукту. У таблиці 2 наведені параметри операцій запропонованим способом отримання ліпосомальної емульсії. Таблиця 2 Залежність розміру часток від індексу окислення ліпідів Найменування препарату Доксорубіцин Іринотекан Оксаліплатин Етопозид Епірубіцин Вінкристин Вінорельбін Мітоксантрон Фторурацил 10 15 Час ультразвукової обробки ліпідної емульсії, хв (розмір часток нм/індекс окислення ліпідів в емульсії) 1 2 3 4 5 70-165/0,33 70-140/0,33 70-140/0,33 70-135/0,37 70-135/0,39 90-175/0,33 70-140/0,33 70-145/0,33 70-135/0,36 70-145/0,40 75-165/0,33 70-145/0,33 70-135/0,33 70-135/0,37 70-135/0,38 10070-145/0,34 70-140/0,34 70-135/0,39 70-125/0,41 70-165/0,33 70-145/0,33 70-135/0,33 70-140/0,37 70-125/0,39 90-185/0,33 70-145/0,33 70-140/0,33 70-135/0,38 70-135/0,38 80-175/0,33 70-140/0,33 7070-140/0,39 70-130/0,41 80-165/0,33 70-145/0,33 70-140/0,33 70-125/0,37 70-125/0,37 85-165/0,33 70-145/0,33 70-140/0,33 60-125/0,37 60-110/0,37 Як видно з даних, наведених у таблиці 2, найкращі результати отримані при обробці ультразвуком протягом 2-3 хвилин. При цьому індекс окислення не змінюється, а розмір часток знаходиться в діапазоні від 70 до 140 нм. Обробка менше 2 хвилин призводить до отримання частинок з розміром понад 140 нм, а збільшення часу обробки більше 3 хвилин призводить до підвищення індексу окислення, що свідчить про процес перекісного окислення в ліпідної емульсії. У таблиці 3 наведені залежність розміру часток від температури обробки ультразвуком пропонованим способом отримання ліпосомальної емульсії. Таблиця 3 Залежність розміру часток від температури обробки ультразвуком Найменування препарату Доксорубіцин Іринотекан Оксаліплатин Етопозид Епирубіцин Вінкристин Вінорельбін Мітоксантрон Фторурацил Температура ультразвукової обробки емульсії, °C /розмір, часток в нм/ 24 30 36 42 48 100-185 70-140 70-140 70-135 70-135х 95-175 70-140 70-145 70-135 70-145х 95-165 70-145 70-135 70-135 70-135х 100-175 70-145 70-140 70-135 70-125х 90-185 70-145 70-135 70-140 70-125х 95-185 70-145 70-140 70-135 70-135х 80-175 70-140 70-0,135 70-140 70-130х 95-165 70-145 70-140 70-125 70-125х 90-155 70-140 70-140 70-125 70-125х х - при вказаній температурі в емульсії збільшується індекс окислення жирних кислот фосфоліпідів (0,4-0,44), що свідчить про процеси перекисного окислення 20 Таким чином, з даних таблиці 3 видно, що оптимальною є температура ультразвукової обробки 30-42 °C. Зниження температури збільшує розмір часток, а підвищення температури окисляє подвійні зв'язки жирних кислот, що підтверджується збільшенням значення індексу окислення до величини 0,44. У таблиці 4 наведена залежність між співвідношенням протипухлинних препаратів і ліпідної ліпосомальної платформи на розмір ліпідних і стабільність ліпідної емульсії. 5 UA 112699 U Таблиця 4 Співвідношення компонентів емульсії і її фізико-хімічні властивості Найменування препарату Доксорубіцин Іринотекан Оксаліплатин Етопозид Епірубицин Вінорельбін Мітоксантрон Вінкристин Фторурацил 5 10 15 20 Співвідношення між протипухлинним препаратом і ліпосомальною фосфатидилхоліновою платформою (розмір часток в нм) і стабільністю емульсії 1:5 1:10 1:255 1:50 1:100 80-160, 70-150, 70-140 70-120 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 100-180, 70-145, 70-140 70-140 70-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 70-160, 70-150, 70-140 70-130 60-120 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 85-160, 70-150, 70-140 70-140 45-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 90-170, 70-150, 70-140 70-135 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 100-160, 70-150, 70-140 70-140 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 90-150, 70-150, 70-140 70-125 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 120-170, 70-150, 70-140 70-130 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна 105-160, 70-150, 70-140 70-130 40-100 стабільна стабільна стабільна стабільна не стабільна Як видно з наведених даних, оптимальним є співвідношення протипухлинних препаратів до ліпідної платформи 1:10-50. Збільшення співвідношення до 1:100 призводить до нестабільності ліпідної емульсії, яка починає розшаровуватися, тобто низький вміст ліпідного компонента в емульсії призводить до її нестабільності. Зменшення співвідношення 1:5 призводить до збільшення розміру ліпідних частинок. Крім цього необхідно відзначити, що збільшення співвідношення супроводжується зменшенням розміру частинок. Вивчення токсичності проводили після одноразового внутрішньочеревного введення вільних форм препаратів: доксорубіцину гідрохлорид (Доксолек, "ЗАТ Біолік"), епірубицину гідрохлорид (Епілек, "ЗАТ Біолік"), мітоксантрон (Мітолек, "ЗАТ Біолік"), фторурацилу (Фторолек "ЗАТ Біолік"), етопозиду (Sandoz-Ebewe), вінкристину (Gedeon Richter), вінорельбіну (Sandoz-Ebewe), іринотекану (Teva), цисплатину (Sandoz-Ebewe). Для введення тваринам були використані розчини препаратів в обсягах, які забезпечили необхідне дозування в мг/кг маси тіла (в перерахунку на діючу речовину). Готували розчини препаратів на фізіологічному розчині таким чином, щоб необхідна доза перебувала в обсязі 0,1-0,5 мл. Аналогічно розводили ліпосомальні емульсії протипухлинних препаратів. Проводили підрахунок мишей, які вижили і загинули протягом експерименту. Для кожного препарату використовували 5 концентрацій. Дослідження проводили на 6 тваринах для кожного розведення. Вартість запропонованого продукту складає від 20 до 80 доларів США, а вартість препарату, отриманого за прототипом складає від 165 до 700 доларів США (в перерахунку на 1 ін'єкцію). 6 UA 112699 U ФОРМУЛА КОРИСНОЇ МОДЕЛІ 5 10 Спосіб отримання ліпосомальної емульсії, яка містить водорозчинні протипухлинні препарати, який включає розчинення ліпідів в органічному розчиннику, утворення ліпосом шляхом екструзії, ліофілізацію продукту, що містить протипухлинний препарат, який відрізняється тим, що протипухлинний препарат розводять у водному розчиннику, змішують з ліпосомальною фосфатидилхоліновою платформою, піддають ультразвуковій обробці протягом 2-3 хвилин при співвідношенні протипухлинний препарат:фосфатидилхолінова ліпосомальна платформа 1:1050 при температурі 30-42 °C. Комп’ютерна верстка Л. Ціхановська Державна служба інтелектуальної власності України, вул. Василя Липківського, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут інтелектуальної власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601 7