Похідні азолів з антигрибковою дією для лікування людей і тварин та засіб для лікування

1 Сполуки формули R2 OH R 3 R5 ,N \-А Де Ri означає хлор, фтор або трифторметил, F 2 означає водень, хлор, фтор або трифторметил, ? Z означає СН або N, R3, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень або (С1-С4) алкіл, за умови, що R4 має значення, відмінне від Rs, коли R3 означає водень, X означає О або S, R6 означає (С1-С4) поліфторалкіл, що містить принаймні два атоми фтору і необов'язково атоми іншого галогену, вибраного з хлору і брому, та їх солі з фармацевтично прийнятними кислотами, за винятком сполук, вибраних з групи, що включає 1 -(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдрокси-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси)бутан, 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(2,4-дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2 Даний винахід відноситься до сполук, що мають протигрибкову активність, і призначені для застосування в галузі медицини і ветеринари, зок тетрафторетокси)гексан, 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(4-хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси)бутан і 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(4-хлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси) бутан 2 Сполуки за п 1, де R3, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень, метил або етил 3 Сполуки за п 1 або 2, де значення R6 вибрані з групи, що включає дифторметил, трифторметил, 1,1,2-трифтор-2-хлоретил, 1,1-дифторетил, 2,2,2трифторетил, 1,1,2-трифторетил, 1,1,2,3,3,3гексафторпропіл, 2,2,3,3-тетрафторпропіл, 1,1,2,2тетрафторетил і їх ізомери 4 Сполуки за п 3, де R6 означає 1,1,2,2тетрафторетил 5 Сполуки за п 1, де Ri означає хлор або фтор, R2 означає водень, хлор або фтор, R3 означає метил, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень, метил або етил, Z означає N і R6 означає 1,1,2,2-тетрафторетил 6 Сполуки за п 1, де Ri означає хлор або фтор, R2 означає водень, хлор або фтор, R3 означає метил, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень, метил або етил, Z означає N, R6 означає 1,1,2,2-тетрафторетил і X означає О 7 Засіб для лікування і профілактики захворювань, які визиваються грибами і дріжджами у людини та тварин, з активною основою, який відрізняється тим, що активна основа представлена сполуками формули (II), вибраними з групи, яка включає 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдрокси-2(2,4-дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси)бутан, 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(2,4-дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси)гексан, 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(4-хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси)бутан і 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдрокси-2-(4-хлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси) бутан рема винахід відноситься до азольних сполук, які мають протигрибкову активність і придатні для О о со 00 49830 лікування і профілактики інфекційних захворювань людей і тварин, викликаних грибками і дріжджами Серед відомих з літератури сполук з протигрибковою активністю слід відзначити так звані азопьні ПОХІДНІ, з яких деякі сполуки, такі, як флуконазол (The Merck Index, XI вид , № 4054, crop 645), ітраконазол (The Merck Index, XI вид, No 5131, crop 825) і кетоконазол (The Merck Index, XI вид , № 5181, crop 835) знайшли застосування в терапії Однак за відомостями авторів винаходу жодна з цих сполук не має достатню протигрибкову активність по відношенню до деяких опортуністичних (умовно-патогенних) штамів грибків, що викликають інфекційні захворювання, які інколи призводять до летального кінця у пацієнтів, що страждають імунодепресією Серед азольних похідних, які, як відомо, знайшли застосування як протигрибкові сполуки в медицині та ветеринари, було описано декілька сполук, що відрізняються наявністю третичної спиртової функціональної групи формули R OH R' де Az означає триазольну або імідазольну групу, X переважно означає хлор, фтор або трифторметил, R переважно означає водень, хлор або фтор, R' і R" мають однакові або різні значення і означають водень або алкіл, Y означає S, SO, SO2 або О і А означає алкіл, і які в контексті даного опису позначені поняттям третичні азольні спирти Серед цих третичних азольних спиртів слід назвати, наприклад, сполуки, описані в європейських заявках 54974 (Sumitomo Chemical Company Limited), 61835 (Imperial Chemical Industries PLC), 107392 (Pfizer Limited), No 140154 (Sumitomo Chemical Company Limited), 178533 (Sumitomo Pharmaceutical Company Limited), 435081 (SS Pharmaceutical Co Ltd ) і 473387 (Sankyo Company Limited) У ВІДОМІЙ літературі говориться, що деякі з цих сполук мають виражену протигрибкову активність, в деяких випадках видоспецифічну, як при місцевому, так і при системному застосуванні Однак, як відомо авторам винаходу, було вивчено тільки одну сполуку, відому під назвою генаконазол, тобто (2R, 3R) -а- (2,4-дифторфеніл) -а- [I(метилсульфоніл) етил]-1Н-1, 2,4-триазол-1етанол, описану в європейській заявці 178533 Останнім часом було описано клас маючих протигрибкову активність третичних азольних спиртів (1), в яких R' і R" означають атоми фтору, Y означає простий зв'язок і А означає дифторметильну групу [заявка на японський патент 07/70087 на ім'я Taisho Pharma Co Ltd , цитовано по Chemical Abstracts, том 123, No 228190 (1995)] Було встановлено, що клас азольних похідних формули R2 OH R 3 Г R5 р „ , г*и -у п, (И) Ri означає хлор, фтор або трифторметил, R2 означає водень, хлор, фтор або трифторметил, Z означає СН або N, R3, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень або (С1-С4) алкіл, за умови, що R4 має значення, відмінне від Rs, коли R3 означає водень, X означає О або S, R6 означає (С1-С5) поліфторалкіл, що містить принаймні два атоми фтору і необов'язково атоми іншого галогену, вибраного з хлору та брому, описаних в європейській заявці 315946 (Presidenza del Consigho dei Mimstry-Ufficio del Mimstero per il Coordmamento delle Imziative per la Ricerca Scientifica e Technologica) як сполуки для застосування в сільському господарстві, що мають імунузуючу дію стосовно патогенезу, викликаного грибками, і активністю, яка регулює ріст культурних рослин, виявляють виражену протигрибкову активність по відношенню до широкого спектра патогенних для людини і тварин грибків, а також по відношенню до штамів грибків, стійких до протигрибкових препаратів, що застосовуються в терапії, і по відношенню до опортуністичних патогенних штамів грибків, які викликають інфекційні захворювання у пацієнтів, страждаючих імунодепресією, причому цей клас сполук виявляє активність як при місцевому, так і при системному застосуванні Таким чином, предметом даного винаходу є сполуки формули OH R 3 R5 •N > N Ri означає хлор, фтор або трифторметил, R2 означає водень, хлор, фтор або трифторметил, Z означає СН або N, R3, R4 і R5 мають однакові або різні значення і означають водень або (С1-С4) алкіл, за умови, що R4 має значення, відмінне від Rs, коли R3 означає водень, X означає О або S, R6 означає (С1-С5) поліфторалкіл, що містить принаймні два атоми фтору і необов'язково атоми іншого галогену, вибраного з хлору і брому, та їх солі з фармацевтично прийнятними кислотами, 49830 за винятком сполук, вибраних з групи, яка включає 1 -(Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) гексан, 1-(1Н-1,2,4-тетразоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси) бутан і 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдроксі-2-(4-хлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетокси) бутан Даний винахід далі відноситься до застосування як лікарський засіб таких сполук 1 -(1 Н-1,2,4триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4 дихлорфеніл)-3-метил4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4-дихлорфеніл)-3-метил4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) гексан, 1 -(1 Н-1,2,4тетразоліл)-2-пдроксі-2-(4-хлорфеніл)-3,3диметил-4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) бутан і 1-(1Н1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4-хлорфеніл)-3метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетокси) бутан, описаних в європейській заявці 351946 Для спрощення опису всі сполуки, що є об'єктом даного винаходу, включаючи сполуки, призначені тільки для застосування як лікарські засоби, в контексті даного опису позначені як сполуки формули II Сполуки формули II мають виражену протигрибкову активність по відношенню до широкого спектра патогенних грибків, зокрема по відношенню до штамів Candida spp і Cryptococcus neoformans, стійких до флуконазолу та ітраконазолу, і по відношенню до Candida glabrata, Candida krusei, Aspergillus spp і Fusanum spp , стійких до ітраконазолу, і, як вказано раніше, по відношенню до патогенних штамів, що відповідають за грибкові інфекції у пацієнтів, страждаючих імунодепресією, і можуть використовуватися для лікування і профілактики інфекційних захворювань, що викликаються грибками і дріжджами у людини і тварин Сполуки формули II містять принаймні один хіральний центр, і, отже, вони можуть перебувати в формі стереоізомерів Індивідуальні стереоізомери сполук формули II, а також їх суміші включені в об'єм даного винаходу Під ПОНЯТТЯМ "(С1-С4)алкіл" в позначеннях R3, R4 і Rs розуміють метил, етил, н-пропіл, ізопропіл, н-бутил, ізобутил, втор-бутил і трет-бутил, перевага надається метилу та етилу Під ПОНЯТТЯМ "(С1-С5) поліфторалкіл, що містить принаймні два атоми фтору", переважно розуміють дифторметил, трифторметил, 1,1,2трифтор-2-хлоретил, 1,1-дифторетил, 2,2,2трифторетил, 1,1,2-трифторетил, 1,1,2,3,3,3гексафторпропіл, 2,2,3,3-тетрафторпропіл, 1,1,2,2тетрафторетил і їх ізомери, найбільша перевага надається 1,1,2,2-тетрафторетилу Солі сполуки формули II є солями з фармацевтично прийнятними органічними або неорганічними кислотами, такими, як соляна, бромистоводнева, йодистоводнева, сірчана, азотна, фосфорна, оцтова, щавлева, малеїнова, бензойна, бензосульфонова, 4-метилбензолсульфонова, фумарова, молочна, винна, лимонна і глюконова кислота Більш прийнятними сполуками формули II є сполуки, в яких Ri означає хлор або фтор, R2 означає водень, хлор або фтор, R3 означає метил, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень, метил або етил, Z означає N і R6 означає 1,1,2,2-тетрафторетил Ще більш переважними сполуками формули II є сполуки, в яких Ri означає хлор або фтор, R2 означає водень, хлор або фтор, R3 означає метил, R4 і Rs мають однакові або різні значення і означають водень, метил або етил, Z означає N, R6 означає 1,1,2,2-тетрафторетил і X означає О Конкретними прикладами сполук, яким надається перевага, формули II є такі 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3-метил-4-( 1, 1 ,2,2-тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4фторфеніл )-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4фторфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4фторфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4фторфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетоксі) гексан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) гексан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2-тетрафторетоксі) гексан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3-метил-4-(1,1,2,2 49830 тетрафторетилтю) гексан, 1 -(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан, 1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетилтю) бутан Сполуки формули II можуть бути одержані засобами синтезу, описаними в зазначеній вище європейській заявці 315946 Альтернативний спосіб одержання сполук формули II, в яких X означає О і RO означає трифторметильну групу, полягає в обробці спиртового проміжного продукту формули R 2 ОН R 3 &5 » • і —С— СН-ХН CH2R4 Z \\ (Ш) де R-i, R2, R3, R4, Rs і Z мають зазначені вище значення і X означає О, сірковуглецем і метилйодидом в лужному середовищі і в наступному фторуванні метилдитюкарбонату, що утворився Поділ стереоізомерів формули II можна здійснювати за допомогою загальноприйнятих засобів, таких, як фракціонована кристалізація і хроматографія Солі сполук формули II можуть бути отримані у ВІДПОВІДНОСТІ з загальноприйнятими засобами, наприклад, шляхом змішування в розчині еквімолярних кількостей сполук формули II і відповідної кислоти і виділення солі осадженням та фільтрацією або шляхом випарювання розчинника Сполуки формули II та їх солі є протигрибковими сполуками, корисними для лікування та профілактики інфекційних захворювань, що викликаються у людини і тварин грибками та дріжджами Було встановлено, що сполуки формули II за винаходом мають протигрибкову активність по відношенню до дріжджів, гіфоміцетів, дерматофітним і диморфним грибків Протигрибкову активність оцінювали in vitro за значеннями ICso і МІК (мінімальна інгібуюча концентрація) по відношенню до численних штамів, таких, як, наприклад, Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Tnchophyton mentagrophytes, Aspergillus fumigatus, Candida parapsilosis, Candida lusitamae, Candida kefur, Candida tropicahs, Candida krusei, Candida glabrata, Aspergillus mger і Fusanum spp Слід підкреслити, що сполуки формули II виявили активність по отношению до всіх вивчених штамів Candida spp I Cryptococcus neoformans, включаючи такі, які є стійкими до флуконазолу, ітраконазолу і генаконазолу Особливо значна протигрибкова активність також виявлена по відношенню до штамів Candida glabrata і Fusanum spp , стійких до ітраконазолу і генаконазолу, і по відношенню до стійких до флуконазолу і генаконазолу штамів Candida krusei і Aspergillus fumigatus, причому всі ці патогенні штами є відповідальними за інфекційні захворювання у пацієнтів, що страждають іммунодепресі 8 ЄЮ Протигрибкову активність in vivo оцінювали при внутрибрюшному і оральному введені на моделі інфекції, експериментально викликаної у миші збудником з роду Candida, по відношенню до штамів Candida albicans, чутливих до флуконазолу та ітраконазолу На основі експериментів in vivo також була визначена середня захисна доза (PDso) сполук формули II і було встановлено, що вона принаймні співвідносна з такою для сполук-еталонів Таким чином, сполуки формули II за винаходом мають активність по відношенню до широкого спектру збудників глибоких МІКОЗІВ, зокрема по відношенню до оппортуністичних патогенів, відповідальних за інфекційні захворювання у пациєнтів, що страждають іммунодепресією, при місцевому, оральному і парентеральному застосуванні та мають гарний терапевтичнтй індекс Крім того, сполуки формули II можуть використовуватися в терапії людини і тварини для лікування і профілактики системних інфекцій і захворювань слизових оболонок, що викликаються грибками і дріжджами Значна фармакологічна активність сполук формули II, яка, як вже було вказано, також виявляється по відношенню до штамів, стійких до протигрибкових ЛІКІВ, що застосовуються в терапії, і по відношенню до нещодавно виділених штамів, відповідальних за інфекційні захворювання у пацієнтів, що страждають іммунодепресією, є особливо неочікуваною для тих сполук, що описані в європейській заявці 315946 як сполуки, придатні тільки для застосування в області сільського господарства і мають іммунізуючий вплив по відношенню до патогенезу, що викликаний грибками, і активністю, що регулює ріст корисних рослин Фармакологічна активність сполук формули II є ще більш неочікуваною, якщо взяти до уваги, що такі сполуки, маючи певні структурні характеристики, СПІЛЬНІ з такими третичних азольних спиртів, описаних в літературі, відрізняються наявністю ланцюга з двома атомами вуглецю між атомом вуглецю, що несуть пдроксільну групу, і атомом кисня або сірки і наявністю поліфторированого алкілу в ефірній або тюефірній функції За даними авторів винаходу ці структурні особливості в поєднанні один з одним ніколи не були описані в літературі серед сполук з класу третичних азольних спиртів, що мають протигрибкову активність У зв'язку з цим особливість структурних характеристик сполук формули II за винаходом представляється особливо неочікуваною, зважаючи на те, що сполуки, що мають дуже близькі структурні характеристики, наприклад, сполуки, позначені як Ri і R2, а саме, 1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2(2,4-дифторфеніл)-3,3-диметил-4-етоксибутан і 1(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4Дифторфеніл)-3-(2,2,3,3-тетрафторпропоксі) бутан, практично неактивні у порівнянні з сполуками формули II При використанні в області медицини або ветеринари сполуки формули II можуть застосовуватися в поєднанні з придатним носієм в залежності від способу введеня 49830 Отже, фармацевтичні композиції, що містять сполуки формули II і фармацевтичне прийнятний носій, є ще одним об'єктом даного винаходу Сполуки формули II або їх солі можуть вводитися орально в формі таблеток, капсул, розчинів або суспензій Для парентерального ведення, наприклад, при внутрішньовенному, внутрішньо м'язовому або підшкірному введенні, сполуки формули II або їх солі можуть застосовуватися в формі стерильних водних розчинів Альтернативно цьому сполуки формули II або їх солі можуть застосовуватися в формі суппозитормв або пессармв Для місцевого застосування препаративні форми сполук формули II або їх солей більш прийнятне слід виробляти у вигляді кремів або порошків Для орального або парентерального введення добова доза сполуки формули II звичайно може складати від 0,1 до 50мг/кг, краще від 1 до 20мг/кг, і може застосовуватися у вигляді однієї загальної дози або може бути поділена на декілька окремих доз Нижче винахід більш докладно проілюстрований на прикладах Приклад 1 Наступні сполуки одержували у ВІДПОВІДНОСТІ ЗІ способом, описаним в європейській заявці 315946 (±)-1 (1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-(1,1,2 2тетрафторетоксі) бутан (сполука 1), (±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дихлорфеніл)-3-метил-4-( 1,1,2,2тетрафторетоксі) гексан (сполука 2), (±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2 2тетрафторетоксі) бутан (сполука 3), (±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(4хлорфеніл)-3-метил-4-( 1,1,2,2-тетрафторетокси) бутан (сполука 4) Приклад 2 Отримання ± -1 -(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдроксі-2-(2,4-дифторфеніл)-3,3-диметил-4(1,1,2,2-тетрафторетоксі) бутану (сполука 5) Порошок пдроксіду калію (5 ЗЗмг, 9,50моля) додавали при перемішуванні при -5°С до розчину, що містить(±)-3-(2,4-дифторфеніл)-2,2-диметил-4(1Н-1,2,4-триазоліл)-1,3-бутандюл (5г, 16,8моля) і д и мети л сульфоксид (8мл) в толуол (60мл) Реакційну атмосферу насичували тетрафторетиленом і суміш витримували при перемішуванні при -5°С протягом 90хв Після додавання води (120мл) органічну фазу промивали 5%-ною соляною кислотою (80мл) і обробляли при перемішуванні протягом ЗОхв безводним бікарбонатом натрію (6,5г) Рідку фазу фільтрували і розчинник випарювали при пониженому тиску, одержуючи маслянистий залишок, що очищували швидкою хроматографією (елюент гексан і етил ацетат = 6 4) Таким чином одержували сполуку 5 (5,7г, вихід 85%) у вигляді білої твердої речовини tm81-82,5°C 1 Н-ЯМР(СОСІ3) 8,01 (d, 1 Н,СН-трет ),7,69( s,1H, СН-кат), 7,63 - 6,56 (m, 3H, Аг), 5,70 (tt, 1H, JHF=53,4I~4, CHF2, 5,33 (bs, 1Н, ОН), 5,29-4,41 (т, 2Н, СН2-триазол), АВ-Система VA=4,19, VB=3,75, 10 \, CH2O, 1,06 (d, ЗН, JHF=2,4I~4, CH3), 0,98 (s, ЗН, СНз) За аналогічною методикою одержували наступні сполуки (±)-1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2 - (2 4дифторфеніл)-3-метил-4 (1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан (сполука 6) (вихід 88%) WI12-114°C 1 Н-ЯМР (СОСІз) 7,81 і 7,74 (2s, 2H, тре), 7,366,64 ( т , ЗН, Аг), 5,73 (tt, 1Н, JHF=52,9I~4, CHF2), 4,99 (bs, 1Н, ОН), 4,95-4,53 (т, 2Н, СН2-триазол), АВ-частина в АВХ-системі VA=4,46, VB= 3,94, JAB=10,2ri_(, JAX=7,3fL(, JBX=4,9fL(, CH2O, 2,632,45 (m, 1H, СНСНз), 0,75 (d, ЗН, СН3СН) Нітрат(±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2(2,4-дифторфеніл)-3-етил-4-( 1, 1,2,2тетрафторетоксі) бутану (сполука 7) (вихід 80%) t m 144-145°C (ацетонітрил-ізопропіловий ефір) 1 Н-ЯМР (СОСІз) 9,58 (s, 1H, СН-триазол), 8,05 (s, 1Н, СН-триазол), 7,37-6,67 ( т , ЗН, Аг), 6,08 (bs, Н+), 5,80 (tt, 1Н, JHF=52,6I~4, CHF2), АВ-система VA=5,11, VB=4,87, JAB=14,2rq, СН2-триазол, АВчастина в АВ-системі VA=4, 42, VB=4, 21, JAB=II, 1 Гц, иАХ=7,7Гц, иВХ=2,6Гц, СН20, 2,41-2,30 (m, 1H, CHCH2, 1,32-1,18 (m,2H, CH-CH2), 0,83 (t,3H, J11_||_|-— , II гЦ,і Г*\-\ ~\ rin I7 л . ^/Пз) (±)-1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-(2,4дихлорфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,2тетрафторетоксі) бутан (сполука 8) (вихід 67%) t m 102,5-104,5°С (гексан-ізопропіловий ефір) 1 Н-ЯМР (CDCI3) 8,23 і 7,71 (2s, 2Н, триазол), 7,86-7,12 (т, ЗН, Аг), 5,57 (tt, 1Н, JHF=53r4, CHF2), 5,86 (s, 1Н, ОН), АВ-система VA=5,86, VB=4,45, JAB=14,3n_(, СН2-триазол, АВ-система VA=4,23, VB=3,80, JAB=9,8I~4-, CH2O, 1,13 і 1,02 (2s, 6H, 2CH3) (±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,4дифторфеніл)-3,3-диметил-4-(1,1,2,3,3,3гексафтор-1 -пропіл) бутан (сполука 9) (вихід 18%) Шляхом заміни тетрафторетилену на 1,1,2,3,3,3-гексафторпропен t m 84 - 85°С (гексан) 1 Н-ЯМР (СОСІз) 8,00 (d, 1Н, СН-трет), 7,69 (s, 1Н, СН-кат), 7,63-6,56 ( т , ЗН, Аг), 5,84 (bs, 1H, ОН), 5,78-4,38 ( т , 2Н, СН2-триазол), 5,00-4,60 ( т , 1Н, CHF), 4,35-3,73 ( т , 2Н, ОСН2), 1,071,00(т,6Н,2СН3) Приклад З Отримання етилового ефіру 3-(2,4дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2-диметил масляної кислоти Розчин етилового ефіру ізомасляної кислоти (1,88г, Юмолей) в тетрапдрофурані (Юмл) додавали по краплям при -78°С до розчину дизопропіламіду ЛІТІЮ (отриманого з 6,8мл, 2,5М розчину нбутиллітію в гексані та дизопропіламші, 2,38мл, 1,72г, 17молей) в тетрапдрофурані (Юмл) Через ЗОхв , підтримуючи температуру нижче -70°С, по краплям додавали розчин 1 -(2,4-дифторфеніл)-2брометанону (4,0г, 17 молей) в тетрапдрофурані (Юмл) Реакційну суміш витримували при перемішуванні протягом 90хв і давали температурі піднятися до-30°С Додавали насичений водний розчин хлориду амонію, фази поділяли і водну фазу екстрагували етилацетатом (2 х 25мл) Зібрані 12 11 49830 органічні фази промивали 5%-ним водним розчинатрію (625мг, 80%, 21 моль) в диметилформаміді ном бікарбонату натрію (25мл) і водою (25мл), (5мл) Суміш витримували при перемішуванні і при сушили над сульфатом натрію і упарювали при кімнатній температурі протягом 1 год Після охопониженому тиску, одержуючи етиловий ефір 3лодження до -8°С додавали розчин трифтормети(2,4-дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2-диметил масляної лсульфонілового ефіру 3-(2,4-дифторфеніл)-3,4кислоти (4,2г, вихід 96%) у вигляді світло-жовтого епоксі-2,2-диметил-1-бутанолу (Зг, 8,3моля), отримасла маного згідно прикладу 5, в диметилформаміді 1 (5мл) Реакційну суміш витримували при переміН-ЯМР (СОСІз) 7,41-6,67 (m, 3H, Аг), 4,11 (q, шуванні протягом б год при 0°С, а після цього 2Н, СООСН2), 3,26-2,71 (т,2Н,СН2О), 1,22 (t, ЗН, зливали на воду (200мл) і екстрагували етиловим СН3СН2), 1,20 (s, 6Н, 2СН3) ефіром (4 х 25мл) Органічні фази сушили над суПриклад 4 льфатом натрію і упарювали при пониженому тисОтримання 3-(2,4-дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2ку, одержуючи маслянистий залишок (1,58г), який диметил-1-бутанолу очищували за допомогою колоночної хроматограБоропдрид ЛІТІЮ (120мг, 5,5моля) додавали до фії на силікагелі (елюент гексан етилацетат=99 1), розчину етилового ефіру 3-(2,4-дифторфеніл)-3,4одержуючи 2-(2,4-дифторфеніл)-2-[2-(2,2,3,3епоксі-2,2-диметилмасляноі кислоти (1г, 3,7моля), тетрафторпропоксі)-1,1-диметилетил] оксиран отриманого згідно прикладу 3, в етиловому ефірі (1,2г, вихід 42%) у вигляді безбарвного масла (Юмл) Після охолодження до+10°С по краплям 1 при перемішуванні додавали метанол (0,22мл, Н-ЯМР (CDCI3) 7,42-6,70 (m, ЗН, Аг), 5,88 (т, 3,5моля) і реакційну суміш витримували при пере2Н, OCHF), 3,72 ( т , 2Н, OCH2CF2), 3,32-3,20 ( т , мішуванні при +10° С протягом 2год Після цього 2Н, CH2OCH2CF2), 3,12-2,64 ( т , 2Н, СН2О), 0,98 і по краплям додавали 5%-ний розчин соляної кис0,97 (2s, 6Н, 2СН3С) лоти (15мл), фази поділяли і водну фазу екстрагуЗа аналогічною методикою одержували настували етилацетатом (2 х 15мл) Зібрані органічні пну сполуку фази промивали 5%-ним водним розчином бікар2-(2,4-дифторфеніл)-2-[2-(2,2,2бонату натрію (20мл) і соляним розчином (20мл), трифторетоксі)-1,1 -диметилетил] оксиран у висушили над сульфатом натрію і упарювали при гляді безбарвного масла (вихід 44%) пониженому тиску, одержуючи маслянистий зали^Н-ЯМР (СВСІз) 7,42-6,70 ( т , ЗН, Аг), 3,82шок (0,8г), який очищували за допомогою колоноч3,69 (т, 2Н, OCH2CF3), 3,41-3,25 ( т , 2Н, ноі хроматографії на силікагелі (елюент гексан CH2OCH2CF3), 3,19-2,64 ( т , 2Н, СН20), 0,98 і 0,97 етилацетат=8 2), одержуючи 3-(2,4-дифторфеніл)(2s, 6Н, 2СН3С) 3,4-епоксі-2,2-диметил-1-бутанол (823мг, вихід Приклад 7 65%) у вигляді світло-жовтого масла Отримання (±)-1 -(1Н-1,2,4-триазоліл )-2{ пдроксі-2-(2,4-дифторфеніл)-3,3-диметил-4-(2,2, Н-ЯМР (CDCI3) 7,47-6,70 (m, ЗН, Аг), 3,503,29 (т, 2Н,СН2ОН), 3,31-2,72 (т, 2Н, СН2О), 1,00 3,3-тетрафторпропоксі) бутану (сполука 10) (s, ЗН, СН3С), 0,93 (s, ЗН, СН3С) Суміш, що містить 2-(2,4-дифторфеніл)-2-[2(2,2,3,3-тетрафторпропоксі)-1,1-диметилетил] окПриклад 5 сиран (1,2г, 3,5моля), 1,2,4-триазол (480мг, Отримання трифторметилсульфонілового 7молей) і карбонат калию (970мг, молей) в димеефіру 3-(2,4-дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2 тилформаміді (12мл), витримували при перемішудиметил-1 -бутанолу ванні і при 105°С протягом 8 год Суміш охолоджуТрифторметансульфоновий ангідрид (22мл, вали, осадок фільтрували і розчин концентрували 131 моль) додавали по краплям до розчину 3-(2,4при пониженому тиску Маслянистий залишок дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2-диметил-1-бутанолу (1,5г) очищували за допомогою колоночної хрома(10г, 44моля), отриманого згідно прикладу 4, і пітографії на силікагелі (елюент гексан етилацеридину (20,1г, 263моля) в метиленхлориді (70мл) татів 2), одержуючи сполуки 10(1,1г, вихід 76%) у при -20°С, підтримуючи температуру нижче-10°С вигляді білої твердої речовини Реакційну суміш витримували при перемішуванні і при 0°С протягом ЗОхв , а після цього додавали tm84-86°C 1 10%-ний водний розчин лимонної кислоти (50мл) Н-ЯМР (СОСІз) 8,01 (bs, 1Н, триазол), 7,69 (s, Фази поділяли, водну фазу екстрагували метилен1Н,триазол), 7,62-7,65 хлоридом (50мл) і зібрану органічну фазу проми( т , ЗН, Аг), 5,87 (tt, 1Н, JHF=53,5I~4, CHF2), вали водою (50мл), сушили над сульфатом натрію 5,38-4,42 ( т , 2Н, СН2-триазол), 5,22 (s, 1H, ОН), і упарювали при пониженому тиску при 15°С Та3,88-3,75 ( т , 2Н, CH2CF2), АВ-система VA=3,63, ким чином одержували трифторметил сульфоніVB=3,28, JAB=9,3I~4, СН2О, 1,01-0,96 (m, 6H, ловий ефір 3-(2,4-дифторфеніл)-3,4-епоксі-2,2OHgOOHg) диметил-1-бутанолу (13г, вихід 81%) у вигляді чеЗа аналогічною методикою одержували настурвонуватого масла, що безпосередньо використопну сполуку вували на наступних стадіях (±)-1 -(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі-2-(2,41 дифторфеніл)-33-диметил-4-(2,2,2-трифторетоксі) Н-ЯМР (СОСІ3) 7,41-6,75 ( т , ЗН, Аг), 4,25 (s, бутан (сполука II) (вихід 55%) 2Н, CH2OSO2), 3,19-2,71 ( т , 2Н, СН2О), 1,07 (s, 6H, 2СН3С) 1 Приклад 6 Н-ЯМР (CDCI3) 8,01-8,00 (m, 1Н, СНтриазол), 7,68 (s, 1Н, СН-триазол), 7,62-6,55 ( т , Отримання 2-(2,4-дифторфеніл)-2-[2-(2,2,3,3ЗН, Аг), 5,39-4,45 (т, 2Н, СН2-триазол), 5,23 (s, 1H, тетрафторпропоксі)-1,1 -диметилетил] оксирану ОН), АВ-система VA=3,84, VB=3,77, JAB=8,7I~4, 2,2,3,3-тетрафторпропанол (2,25мл, 25молей) доССН2О, АВ-система VA=3,70, VB=3,30, давали по краплям при 0°С до суспензії гідриду 13 49830 JAB=8,8I~4, CH2CF3, 1,00-0,96 (m, 6H, CH3CCH3) Приклад 8 Отримання О-[3-(2,4-дифторфеніл)-3-пдроксі2,2-диметил-4-(1Н-1,2,4-триазоліл)1бутил-3метилдитюкарбонату До розчину (±)-3-(2,4-дифторфеніл)-2,2диметил-4-(1 Н-1,2,4-триазоліл)-1,3-бутандюлу (818мг, 2,75моля) в сіровуглеці (Юмл) і метиленхлориді (15мл) додавали 50%-ний водний розчин пдроксіду натрію (25мл) і бісульфату тетрабутиламмонію (8мг) При перемішуванні і при 10°С додавали метил йодид (430мг, 3,02моля) і витримували при перемішуванні і при 10°С протягом 1год Фази поділяли, водну фазу екстрагували метиленхлоридом (25мл), зібрані органічні фази промивали водою (25мл), сушили над сульфатом натрію і упарювали, одержуючи твердий залишок жовтого кольору (1,35г), який очищували за допомогою колоночної хроматографії на силікагелі (елюент етилацетат гексан=7 3), одержуючи 0-[3-(2,4дифторфеніл)-3-пдроксі-2,2-диметил-4-(1 Н-1,2,4триазоліл)] бутил-8-метилдитюкарбонат (950мг, вихід 89%) у вигляді твердої речовини світложовтого кольору t m 113-115°C 1 Н-ЯМР (СВСІз) 8,01 (d, 1Н, СН-трет), 7,70 (s, 1Н, СН-терт), 7,66-6,52 (m, 3H, Аг), 5,25-4,41 ( т , 2Н, СН2-триазол), 4,71-4,40 (т, 2Н, СН2О), 2,55 (s, ЗН, CH3S), 1,11 і 1,09 (2s, 6Н, 2СН3С) Приклад 9 Отримання(±)-1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі2-(2,4-дифторфеніл)-3,3-диметил трифторметоксибутану (сполука 12) До розчину 1,3-дибром-5,5-диметилпдантошу (1,14г, 4,02моля) в метиленхлориді (Юмл) при70°С додавали комплекс фтористоводневої кислота-піридин [(HF)g/mpHflHH, 2,67мл, 11,79моля], а після цього О-[3-(2,4-дифторфеніл)-3-пдроксі-2,2диметил-4-(1 Н-1,2,4-триазоліл)] бутил-8метилдитюкарбонат (520мг, 1,34моля), отриманий згідно прикладу 8 і розчинений в метиленхлориді (2мл) Температурі давали піднятися до-20°С і реакційну суміш витримували при перемішуванні протягом 2год Суміш зливали в 5%-ний водний розчин бісульфіту натрію (25мл) і значення рН суміші доводили до 14 за допомогою 33%-ного пдроксіду натрію Фази поділяли, водну фазу екстрагували метиленхлоридом (25мл) і органічні фази сушили над сульфатом натрію, упарювали при пониженому тиску і маслянистий залишок (480мл) очищували за допомогою колоночної хроматографії на силікагелі (елюент етилацетат гексан=6 4), одержуючи сполуку 12 (120мг, вихід 25%) у вигляді білої твердої речовини tm96-98°C 1 Н-ЯМР (СВСІз) 8,02 (d, 1Н, JHH=2,9I~4, CHтриазол), 7,70 (s, 1H, СН-триазол), 7,63-7,57 т , ЗН, Аг), 5,37(s, 1H.OH), АВ-частина АВХсистеми VA=5,26, JAB=13,96I~4, JAX=3,0l~4, иВХ=2,2Гц, СН2-триазол, АВ-система VA=4,20, VB=3,71, JAB=9,5I~4, CH2OCF3, 1,09 (d, ЗН, JHF=2,4I~4, СН3), 0,98 (s, ЗН, СН3) Порівняльний приклад А Отримання (±)-1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2пдроксі-2-(2,4-дифторфеніл )-3,3-диметил-4етоксибутану (сполука R|) 14 Аналогічно прикладу 6, але використовуючи етанол замість 2,2,3,3-тетрафторпропанолу, одержували наступну сполуку 2-(2,4-дифторфеніл)-2-(2-етоксі-1,1-диметил) етилоксиран (вихід 20%) у вигляді безбарвного масла 1 Н-ЯМР (CDCI3) 7,45-6,70 (m, ЗН, Аг), 3,38 (q, 2Н, СН2СН3), 3,20-2,60 (m, 2H, СН 2 епоксид), 3,173,02 ( т , 2Н, СН2ОСН2СН3), 0,98 (s, ЗН, СН3С), 0,97 (s, ЗН, СНзС) Аналогічно прикладу 7, обробляючи 2-(2,4дифторфеніл)-2-(2-етоксі-1,1-диметил) етилоксиран 1,2,4-триазолом, одержували сполуки R1 у вигляді твердої речовини білого кольору Вихід 35% 1 Н-ЯМР (СВСІз) 8,07 (bs, 1H, СН-триазол), 7,68 (s, 1Н, СН-триазол), 7,60-6,57 ( т , ЗН, Аг), 5,47 (bs, 1Н, ОН), 5,32-4,48 (т, 2Н, СН2-триазол), 3,45 (q, 2H, JHH=6,9I~4, СН2СН3), АВ-система VA=3,30, VB=3,22, JAB=9,5I~4, СН2ОСН2СН3), 1,21 (t, ЗН, СН3СН2), 1,02 (d, ЗН, J=2,3I~4, СН3С), 0,94 (d, ЗН, и=І,5Гц, СНзС) Порівняльний приклад Б Отримання(±)-1-(1Н-1,2,4-триазоліл)-2-пдроксі2-(2,4-дифторфеніл)-3-(2,2,3,3-тетрафторпропоксі) бутану (сполука R2) До суспензії гідриду натрію (625мг, 80%, 21 моль) в диметилформаміді (5мл) по краплям при 0°С додавали 2,2,3,3-тетрафторпропанол (2,25мл, 25молей) Суміш витримували при перемішуванні при кімнатній температурі протягом 1год , а після цього додавали 3-(2,4-дифторфеніл)4-(1 Н-1,2,4-триазоліл)-2,3-епоксибутан (1,25г, 5молей), отриманий згідно Bull Chem Soc Jap , 67 (1994), 1427-1433, і розчинений в диметилформаміді (1мл), і реакційну суміш витримували при 105°С протягом Згод Суміш зливали у воду (50мл) і екстрагували етиловим ефіром (4 х 15мл) Органічні фази сушили над сульфатом натрію, упарювали при пониженому тиску з отриманням залишку у вигляді масла (1,40г), який очищували за допомогою колоночної хроматографії на силікагелі (елюент етилацетат гексан=6 4), одержуючи сполуку R2 (385мг, вихід 20%) у вигляді твердої речовини білого кольору W7,0-78,5°C 1 Н-ЯМР (CDCI3) 7,85 і 7,72 (2s, 2H, 2СНтриазол), 7,48-6,66 (ш, ЗН, Аг), 5,91 (tt, 1H, JHF=54,0l~4, CHF2), 4,93-4,63 (m, 2Н, СН2-триазол), 4,31 (bs, 1Н, ОН), 4,17-3,75 (т, ЗН, СНОСН2), 1 05 (d, ЗН, JHH=8,2I~4, СН3СН) Приклад 10 Аналіз протигрибкової активності in vitro Визначення активності інгібування росту грибків здійснювали за допомогою макрометода східчастих розбавлень живильного середовища в геометричній прогресії (М R McGmms і М G Rmaldi, "Antifugal drugs mechanisms of action, drug resistance, susceptibility testing and assay of activity in biological fluids", в Antibiotics in Laboratory Medicine, ред V Lonan, Baltimora 1991) Як живильне середовище для дріжджів і плісені використовували ВІДПОВІДНО бульйон Yeast Nitrogen Base (YNB) і бульйон Sabouraud Dextrose (SDB) 15 49830 Результати, отримані з використанням SDB (після інкубації при 28°С протягом 7 днів), виражали у вигляді мінімальних концентраций, інгібуючих ріст грибків (МІК), а результати, отримані з використанням YNB (після інкубації при 35°С протягом 48год), виражали у вигляді концентрацій, здатних на 50% інгібувати ріст дріжджів (1Cso) Як еталони використали такі сполуки, як флу 16 коназол, ітраконазол і генаконазол В наступних таблицях представлені дані про протигрибкову активність in vitro деяких репрезентативних сполук формули II по відношенню до різних штамів Candida spp , Aspergillus spp , Fusanum spp , Cryptococcus neoformans і Tnchophyton mentagrophytes Таблиця 1 Протигрибкова активність in vitro сполук 1 - 10, 12 та еталонного сполучення флуконазолу по відношенню до С Albicans С Neoformans T mentagrophytes і A fumigatus Сполуки ІС50(мкг/мл) С albicans 1040 С 0,0156 0,0312 0,0625 0,0312 0,0156 0,0312 0,0312 0,0312 0,0156 0,0156 0,0156 0,5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 12 Флуконазол МІК(мкг/мл) T mentagrophytes А Fumigatus 0,125 8 2 4 1 >128 4 >128 0,25 8 0,5 16 0,5 16 0,25 >4 2 >128 0,5 8 0,125 4 16 >128 neoformans 0,004 0,125 0 0625 0,5 0,0156 0,0625 0,125 0,0156 0,125 0,0156 0,0156 2 Таблиця 2 Протигрибкова активність in vitro сполук 1, 3, 5 і еталонних сполук флуконазолу ітраконазолу та генаконазолу по відношенню до Candida spp Cryptococcus neoformans та інших нещодавно виділених штамів (Trichosporon spp , В capitatus Fusanumspp) Сполука 1 Штами N 0 С albicans С spp* С tropicahs С krusei С g lab rat a С neoformans Trichosporon spp В capitatus Fusanum spp MIK50 MIKgo Сполука З MIK50 MIKgo (7) (5) (2) (2) (2) 0,06