Антиоксидант для профілактики та лікування захворювань, пов’язаних із окислювальним стресом, що містить комплекс катіона металу з рутином та аскорбіновою кислотою

1. Антиоксидант для лікування і профілактики захворювань, пов'язаних з окислювальним стресом і нестачею кисню в організмі, що є комплексом катіона металу, вибраного з групи залізо, мідь, цинк або марганець, з рутином і аскорбіновою або дигідроаскорбіновою кислотою загальної формули (І): MemRu(AA)r(DGAA)p Xn (І), де Me - катіон заліза, міді, цинку або марганцю; Ru рутин; АА - аскорбінова кислота; DGAA - дигідроаскорбінова кислота; X - SO4-2, СН3С(О)О-2, ООС-СН2-С(ОН)(СОО-)-СН2СОО-; m від 1,0 до 3; n від 0,7 до 9; р/(r+р) від 0 до 1. 2. Спосіб отримання антиоксиданту для лікування і профілактики захворювань, пов'язаних з окислю C2 2 UA 1 3 мітний (якщо не вирішальний) вплив на патогенез хвороби. Окислювальний стрес - це результат нерегульованого утворення активних форм кисню (АФК), до яких відносять перекис водню, супероксид аніон-радикал, високо активний гідроксильний радикал, пероксинітрит. Високий рівень поглинання кисню і низький антиоксидантний статус разом із недостатньою здатністю організму до регенерації тканин створюють підвищений рівень чутливості до окислювальних пошкоджень. Ліпідне пероксидірованіє - результат атаки радикальних активних форм кисню по подвійних зв'язках ненасичених жирних кислот, таких як ліноленікова і арахидонова кислоти. При цьому генеруються активні перокси-радикали, що ініціюють ланцюгові реакції та включають подальшу атаку по С=С-зв'язкам ненасичених жирних кислот. У результаті утворюються такі продукти розщеплювання, як 4-гідрокси-2,3-ноненаль, акролеїн, малондіальдегід. Підвищений рівень 4-гідрокси-2,3-ноненаля виявлений в тканинах пацієнтів з хворобами Альцгеймера і Паркінсона. При хворобі Альцгеймера в мозку підвищені також рівні акролеїну, похідних, що утворюються з малондіальдегіда, а при хворобі Паркінсона - рівень малондіальдегіда. Всі чотири основи ДНК чутливі до окислювальних пошкоджень, включаючи гідроксилювання, утворення карбонільних груп і нітрацію (у мозку при хворобі Альцгеймера). Підвищені рівні 8-гідроксигуаніна і 8-гідрокси2-дезоксигуанозіна (за рахунок атаки радикалів гідроксилу) характерні для мозку хворих паркінсонізмом. Клітини мають власні захисні механізми проти окислювального стресу і зміни, які спостерігаються в їхніх діях, - теж хороші маркери наявності цього стресового стану. Так, у мозку людей, у яких точно встановлено наявність хвороби Альцгеймера, активність антиоксидантних білків, таких як каталаза, супероксид дисмутазу (СОД), глутатіон пероксидазу і глутатіон редуктазу, що беруть активну участь в метаболічних процесах, помітно підвищена в гіпокампі і мигдалинах. Хоча головне місце окислення жирних кислот у клітинах тварин - це мітохондріальний матрикс, в інших компартаментах клітин також містяться ферменти, здатні перетворювати жирні кислоти на ацетил-SKoA подібним шляхом, (але не ідентичним) тому, що здійснюється в мітохондріях. Окислювальний стрес (тобто окислення ліпідів, білків і ДНК) викликає пошкодження клітинних функцій і утворення токсичних з'єднань, таких як перекиси, спирти, альдегіди, кетони, окис холестерину. Остання токсична для лімфоцитів і макрофагів кровоносних судин. Акролеїн порушує зворотній захват глюкози і глутамату з клітинних культур, 4-гідрокси-2,3-ноненаль інгібірує нейрональний транспортер глюкози, а також транспортери глутамату і Na+ K+-АТФази. Модифікація білків приводить до пошкодження таких ферментів, як глутамат синтазу, СОД, а окислювальні взаємодії з ДНК ведуть до мутацій. Порушення внутрішньоклітинної кальцієвої сигналізації - АФК- індукований ви 92959 4 кид кальцію приводить до активації глутаматних рецепторів і в числі інших відхилень веде до стимуляції апоптозного каскаду і, відповідно, програмованої загибелі клітин. Раніше вже зазначалося, що генерація АФК часто викликається взаємодією молекулярного кисню з редокс-активними металами (в основному, Сu+ і Fe2+), хоча є й інші шляхи - прикладом є утворення пероксинітриту з оксиду азоту і супероксид-аніон-радикалу. На сьогодні вважають, що головними джерелами окислювального стресу і вільно - радикальної продукції, і, відповідно, хвороби Альцгеймера є комплекси перехідних металів з амілоїдними β -пептидами, що знаходяться у мозку. Всі дефекти, що виникають в організмі, і достовірно пов'язані з наявністю активних форм кисню ще точно не встановлені, але є підстави вважати, що саме вони в тій або іншій мірі відповідальні за процеси старіння, утворення катаракти кришталика, інфаркт міокарду та ін. Відоме (патент США №6,280,742 від 28 серпня 2001) використання хелатних комплексів хітозану з цинком, міддю, залізом і нікелем. У патенті США №4,810,695 США від 7 березня 1989 року пропонується використання комплексних з'єднань заліза у вигляді хелатних комплексів із хітозаном. На сьогоднішній день все більше уваги приділяється флавоноїдам (поліфенольним антиоксидантам), а саме вітамінам групи Р, рутину, кверцетину. Відомий зв'язок антиоксидантного статусу і комплексів рутину із залізом, цинком, міддю. (Biol Trance Elem Res. 2002 Sep; 88(3) 271-9). Відомо, що вітаміни групи Р, наприклад рутин, володіють антиоксидантними властивостями. Одним із популярних активних антиоксидантів є відомий вітамінний комплекс аскорутин, якому характерна мембраностабілізуюча дія, основана на його здатності брати участь в окислювально-відновлювальних процесах (М.Д. Машковський, «Лікарські засоби» Москва, «Новая Волна», 2001, ст.86-87). Проте більшість з існуючих антиоксидантів достатньо погано розчиняються у воді і володіють надзвичайно низькою біодоступністю (див. там же, ст.86). Задачею даного винаходу є створення нового антиоксиданту для профілактики і лікування захворювань, пов'язаних з окислювальним стресом і недоліком кисню в організмі, здатного підвищувати антиоксидантний статус, збільшувати парціальний тиск кисню в тканинах, коректувати біологічний вік людини із притаманною високою біодоступністю, а також розроблення способу отримання і створення на його основі грануляту й ефективної препаратної форми у таблетках або капсулах. Відповідно до винаходу описується антиоксидант для профілактики і лікування захворювань, пов'язаних із окислювальним стресом і недоліком кисню в організмі, що є комплексом катіону металу, вибраного з групи залізо, мідь, цинк або марганець, з рутином і аскорбіновою і/або дигідроаскорбіновою кислотою загальної формули (І): MemRu(AA)r(DGAA)p-Xn (I) де Me - катіон заліза, міді, цинку чи марганцю; 5 Ru - рутин; АА - аскорбінова кислота; DGAA - дигідроаскорбінова кислота; X - SO4"2, СН3С(О)О", ООС-СН2-С(ОН)(СОО)" СН2-СОО ; m від 1,0 до 3; n від 0,7 до 9; р/(r+р) від 0 до 1. Окрім того, об'єктом цього винаходу є розробка простого і технологічного способу отримання вище вказаного антиоксиданту загальної формули (І), який полягає в тому, що аскорбінову кислоту піддають взаємодії зі спиртовим розчином солі металу із подальшою обробкою реакційної суміші рутином при температурі від кімнатної до температури кипіння розчинника. Процес бажано проводити при мольному співвідношенні солі металу і аскорбінової кислоти від 20 до 3. В разі використання солі металу сильних кислот для зниження кислотності отримуваного продукту реакційну суміш після обробки рутином додатково обробляють сіллю лужного металу слабкої кислоти. Об'єктом винаходу є також гранулят для виготовлення лікарських і профілактичних засобів для лікування і профілактики захворювань, пов'язаних із окислювальним стресом і недоліком кисню в організмі, що включає антиоксидант формули (І) і, необов'язково, еудрагіт і полівінілпіролідон при наступному співвідношенні компонентів % мас: полівінілпіролідон 0-5,0; еудрагіт 0-11; антиоксидант ф-ли (І) інше. Наступним об'єктом винаходу є препаратна форма у таблетках або капсулах для лікування і профілактики захворювань, пов'язаних з окислювальним стресом і недоліком кисню в організмі, така, що містить вказаний вище гранулят, що включає антиоксидант формули (І) і, необов'язково, полівінілпіролідон і еудрагіт, і як допоміжні речовини мікрокристалічну целюлозу, стеарат кальцію або магнію і тальк, при вмісті допоміжних речовин 15-50% мас. Описується антиоксидант, що є комплексом катіону металу, вибраного з групи залізо, мідь, цинк або марганець, з рутином і аскорбіновою і/або дигідроаскорбіновою кислотою загальної формули (І): MemRu(AA)r(DGAA)p-Xn (I) де Me - катіон заліза, міді, цинку чи марганцю; Ru - рутин; АА - аскорбінова кислота; DGAA дигідроаскорбінова кислота; X - SO4"2, СН3С(О)О", ООС-СН2-С(ОН)(СОО)СН2-СОО"; m від 1,0 до 3; n від 0,7 до 9; р/(r+р) від 0 до 1. Переважним є комплекс, що містить рутин, залізо і дигідроаскорбінову і/або аскорбінову кислоту, загальної формули: Fem Ru(AA)r(DGAA)p Xn m - число атомів заліза у степені окислення 3, m набуває значення від 1,5 до 3, n від 0,7 до 9, р/(r+р) від 0 до 1. Переважним є також комплекс, що містить рутин, мідь і дигідроаскорбінову і/або аскорбінову кислоту, загальної формули: Cum Ru(AA)r(DGAA)p Xn, де m набуває значення від 1,0 до 3, n від 0,7 до 6, р/(r+р) від 0 до 1. 92959 6 Описується також комплекс, що містить рутин, цинк і дигідроаскорбінову і/або аскорбінову кислоту, загальної формули: Znm Ru(AA)r(DGAA)p Xn , де m набуває значення від 1,0 до 3, n від 0,7 до 6, р/(r+р) від 0 до 1. Описується комплекс, що містить рутин, марганець і дигідроаскорбінову і/або аскорбінову кислоту, загальної формули: Mnm Ru(AA)r(DGAA)p Xn , де m набуває значення від 1,0 до 3, n від 0,7 до 6, р/(r+р) від 0 до 1. Описується також спосіб отримання вище вказаного антиоксиданту загальної формули (І), який полягає в тому, що аскорбінову кислоту піддають взаємодії із спиртовим розчином солі металу з подальшою обробкою реакційної суміші рутином при температурі від кімнатної до температури кипіння розчинника. Процес бажано вести при мольному співвідношенні солі металу і аскорбінової кислоти від 20 до 3. В разі використання солі металу сильних кислот для зниження кислотності отримуваного продукту реакційну суміш після обробки рутином додатково обробляють сіллю лужного металу слабкої кислоти. В процесі взаємодії солі металу з аскорбіновою кислотою відбувається часткове відновлення Fe+3 до Fe+2 і часткове окислення аскорбінової кислоти до дигідроаскорбінової кислоти. У результаті отриманий антиоксидант містить Fe+3, Fe+2, або Cu+2, Cu+1, або Zn+2, або Μn +2 і аскорбінову кислоту, дигідроаскорбінову кислоту і рутин, які утворюють комплекс з перенесенням заряду формули (І). Описується також гранулят для виготовлення лікарських і профілактичних засобів для зниження окислювального стресу і лікування та профілактики захворювань, пов'язаних з окислювальним стресом та недостатністю кисню в організмі, що включає антиоксидант формули (І) і, необов'язково, еудрагіт і полівінілпіролідон при наступному співвідношенні компонентів % мас: полівінілпіролідон 0-5,0; еудрагіт 0-11; антиоксидант ф-ли (І) інше. Описується також препаратна форма у таблетках або капсулах, що містить вказаний вище гранулят і, необов'язково, полівінілпіролідон і еудрагіт, і як допоміжні речовини мікрокристалічну целюлозу, стеарат кальцію або магнію і тальк, при вмісті допоміжних речовин 15-50% мас. Нижче наведено приклади, які ілюструють даний винахід. Приклад 1 До спиртового (етанол) розчину тривалентного заліза, що містить (m) 3гмоля заліза (3) у вигляді ацетату заліза (705г), додають (r+р) 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 5 хвилин; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 60 хвилин. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1445г. Вміст заліза 11%. р/(r+р)=0,3±_0,1m=3n=9. Співвідношення залізо (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль) =6 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. 7 Приклад 2 До спиртового (ізопропанол) розчину тривалентного заліза, що містить 1,5гмоля залоза (3) у вигляді сульфату заліза (603г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і 60 хвилин перемішують при кипінні розчину із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 60 хвилин. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1340г. Вміст заліза 6%. р/(r+р)=0,1+0,05m=1,5n=2,25. Співвідношення залізо (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=3 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=1,5. Приклад 3 До спиртового (метанол) розчину тривалентного заліза, що містить 2гмоля заліза (3) у вигляді цитрату заліза (486г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 30 хвилин; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутина (650г). Процес перемішування продовжують 60 хвилин. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1220г. Вміст заліза 8,9%. р/(r+р)=0,2±_0,05m=2n=2. Співвідношення залізо (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутін(гмоль)=2. Приклад 4 До водного розчину тривалентного заліза, що містить 3гмоля заліза (3) у вигляді хлориду заліза (483г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні розчину із зворотнім холодильником; потім при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутина (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють ацетатом натрію (246г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1460г. Вміст заліза 11%. р/(r+р)=0,3±_0,1m=3n=9. Співвідношення заліза (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=6 Співвідношення заліза (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. Приклад 5 До розчину тривалентного заліза, що містить 2гмоля заліза (3) у вигляді хлориду заліза (322г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють ацетатом натрію (600г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1660г. Вміст заліза 6,5%. р/(r+р)=0,2+0,05m=2n=6. Співвідношення заліза (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення заліза (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 6 До розчину тривалентного заліза, що містить 1,5гмоля заліза (3) у вигляді хлориду заліза (240г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні 92959 8 із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (318г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1290г. Вміст заліза 6,2%. р/(r+-р)=0,1+0,05m=1,5n=1,5. Співвідношення заліза (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення заліза (гмоль)/Рутин (гмоль)=1,5. Приклад 7 До розчину тривалентного заліза, що містить 3гмоль заліза (3) у вигляді хлориду заліза(483г) додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутина (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (636г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1850г. Вміст заліза 8,7%. р/(r+р)=0,3±_0,1m=3n=3. Співвідношення заліза (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=6 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. Приклад 8 До розчину тривалентного заліза, що містить 4,5гмоля заліза (3) у вигляді хлориду заліза(729г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (954г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 2420г. Вміст заліза 10%. р/(r+р)=0,5±_0,1m=4,5n=4,5. Співвідношення заліза (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=9 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=4,5. Приклад 9 До розчину тривалентного заліза, що містить 10гмолей заліза (3) у вигляді хлориду заліза (1620г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (2220г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 4580г. Вміст заліза 11,7%. р/(r+р)=1+0,1m=10n=1. Співвідношення залізо (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=20 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=10. Приклад 10 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного заліза, що містить 2гмоля заліза (2) у вигляді хлориду заліза (250г) додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім 9 холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (296г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1286г. Вміст заліза 8,4%. р/(r+р)=0+0,05m=2n=1,33. Співвідношення залізо (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення залізо (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 11 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентної міді, що містить 2гмоля мідь (2) у вигляді хлориду міді (270г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (296г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1306г. Вміст міді 9,8%. р/(r+р)=0,3+0,1m=2n=1,33. Співвідношення мідь (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення мідь (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 12 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентної міді, що містить 1гмоль мідь (2) у вигляді хлориду міді (135г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (148г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1023г. Вміст міді 6,3%. р/(r+р)=0,15+0,1m=1n=0,7. Співвідношення мідь (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=2 Співвідношення мідь (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 13 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентної мідь, що містить 3гмоля мідь (2) у вигляді хлориду міді (405г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутина (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (444г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1589г. Вміст міді 12,1%. р/(r+р)=0,5+0,1m=3n=2. Співвідношення мідь (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=6 Співвідношення мідь (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. Приклад 14 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного цинку, що містить 2гмоля цинку (2) у вигляді хлориду цинку (272г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім 92959 10 холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутина (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (296г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1308г. Вміст цинку 9,9%. р/(r+р)=0±0,05m=2n=1,33. Співвідношення цинк (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення цинк (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 15 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного цинку, що містить 1гмоль цинку (2) у вигляді хлориду цинку (136г) додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (148г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1024г. Вміст цинку 6,3%. р/(r+р)=0,0±0,05m=1n=0,7. Співвідношення цинк (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=2 Співвідношення цинк (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 16 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного цинку, що містить 3гмоля цинку (2) у вигляді хлориду цинку (408г) додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (444г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1592г. Вміст цинку 12,1%. р/(r+р)=0,0+0,05m=3n=2. Співвідношення цинк (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=6 Співвідношення цинк (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. Приклад 17 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного марганцю, що містить 2гмоля марганцю (2) у вигляді хлориду марганцю (252г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (296г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1288г. Вміст марганцю 8,5%. р/(r+р)=0+0,05m=2n=1,33. Співвідношення марганець (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=4 Співвідношення марганець (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 18 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного марганцю, що містить 1гмоль марганцю (2) 11 у вигляді хлориду марганцю (126г) додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (148г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1014г. Вміст цинку 5,4%. р/(r+р)=0,0+0,05m=1n=0,7. Співвідношення марганець ((гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=2 Співвідношення марганець (гмоль)/Рутин (гмоль)=2. Приклад 19 До спиртового (етанол 95%) розчину двовалентного марганцю, що містить 3гмоля марганцю (2) у вигляді хлориду марганцю (378г), додають 0,5гмоля аскорбінової кислоти (90г) і витримують при перемішуванні 90 хвилин при кипінні із зворотнім холодильником; при постійному перемішуванні додають 1гмоль рутину (650г). Процес перемішування продовжують 120 хвилин. Розчин, що утворюється, обробляють цитратом натрію (444г) і відфільтровують хлористий натрій, що утворився. Розчин висушують до утворення однорідного порошку. Вихід 1562г. Вміст марганцю 10,6%. р/(r+р)=0,0+0,05m=3n=2. Співвідношення марганець (гмоль)/аскорбінова кислота (гмоль)=6 Співвідношення марганець (гмоль)/Рутин (гмоль)=3. 92959 12 На основі описаних комплексів готують грануляти, використовуючи як допоміжні речовини полівінілпіролідон (ПВП) і еудрагіт. Процес проводять із використанням звичайного устаткування для отримання гранулятів, такого як, розпилювальна сушильна установка, сушарка-гранулятор з киплячим шаром, дражирувальний казан і так далі. Отримані грануляти використовують при виготовленні пігулок або капсул, застосовуючи як допоміжні речовини мікрокристалічну целюлозу (МКЦ), стеарат кальцію, тальк. На основі описаних комплексів готують також водно-спиртові розчини. Виготовлення грануляту Приклад 20 100г комплексу, отриманого за прикладом 1 поміщають у дражирувальний казан, нагрітий до 50°С, і при постійному обертанні зрошують з розпилювача 60-ю мл 5% (вагових) водного розчину полівінілпіролідону (ПВП). Обдування дражирувального казана здійснюють нагрітим до 60°С повітрям з інтенсивністю не вище за віднесення речовини з дражирувального казана. Потім при постійному обертанні зрошують із розпилювача 30мл 30% водної суспензії еудрагіту; кількість суспензії, достатня для створення повного покриття поверхні, складає 30% (вагових) від кількості комплексу. Після остаточного висушування гранулят виймають із дражирувального казана. Вага отриманого грануляту 112г, вміст заліза 10%. Далі в таблицях 1 і 2 наведені приклади виготовлення комплексів грануляту отриманих за прикладами 1-7, 10-19. Таблиця 1 № прикладу № прикладу Температура Концентрація Кількість су- Концентрація Кількість Температура виготовлення отримання дражируванного суспензії спензії еуд- розчину ПВП розчину обдуву,°С грануляту комплексу казану, °C еудрагіту, % рагіту (мл) % ПВП (мл) 20 1 40 60 30 30 5 100 21 2 50 60 20 20 10 20 22 3 40 70 10 30 5 20 23 4 40 40 30 40 0 0 24 5 50 60 20 60 0 0 25 6 50 60 30 35 0 0 26 7 50 60 30 25 5 40 27 10 40 60 0 0 5 100 28 11 50 60 20 20 10 20 29 12 40 70 10 30 5 20 30 13 40 40 30 40 0 0 31 14 50 60 0 0 5 100 32 15 40 60 20 20 10 20 33 16 50 60 10 30 5 20 34 17 40 70 30 40 0 0 35 18 40 40 0 0 5 100 36 19 50 60 20 20 10 20 В таблиці 2 наведено склад отриманих гранулятів. 13 92959 14 Таблиця 2 № прикла- Кількість Процентне № прикладу Вміст ПВП Вміст ПВП Вміст Вміст Вміст ду отри- суспензії співвідношення Вміст виготовлення у грануляті у грануляті заліза марганцю цинку мання еудрагіту еудрагіту у міді % грануляту (г) % % % % комплексу (г) грануляті % 20 1 9 7.9 5 4.4 10 21 2 4 3.8 2 1.9 5.6 22 3 3 2.9 1 1.0 8.4 23 4 12 10.7 0 0 10 24 5 12 10.7 0 0 5.9 25 6 10.5 9.5 0 0 5.9 26 7 7 6.4 2 1.8 7.9 27 10 0 0 5 4.8 8.0 28 11 4 3.8 2 1.9 9.2 29 12 3 2.9 1 0.9 6.1 30 13 12 0 0 10.8 31 14 0 0 5 4.8 9.4 32 15 4 3.8 2 1.9 6.0 33 16 3 2.9 1 0.9 11.6 34 17 12 10.7 0 0 7.6 35 18 0 0 5 4.8 5.1 36 19 4 3.8 2 1.9 10.0 Отримання готових таблеток або капсул. Приклад 37 100г грануляту, отриманого за прикладом 20, поміщають в планетарний змішувач, додають 2г стеарату кальцію, 2г тальку, 96г МКЦ. Загальна кількість допоміжних речовин складає 100г. Перемішують протягом 60 хвилин. Із готової суміші пресують пігулки масою 100мг або розсипають в жорсткі желатинові капсули (50% допоміжних речовин). Вміст заліза в пігулці/капсулі складає 5мг. Приклад 38 187г грануляту, отриманого за прикладом 21, поміщають в планетарний змішувач, додають 2г стеарату кальцію, 2г тальку, 19г МКЦ. Загальна кількість допоміжних речовин складає 100г (11% допоміжних речовин). Перемішують протягом 60 хвилин. Із готової суміші пресують пігулки масою 100мг або розсипають в жорсткі желатинові капсули. Вміст заліза в пігулці/капсулі складає 5мг. Приклади 39-24 виконані аналогічним способом і наведені в таблиці 3. Таблиця 3 № прикладу Вміст заліза Вміст міді № прикКількість Кількість виготовлення (мг) у пігулці (мг)у пігулці ладу грануляту (г) МКЦ (г) гранулят (100мг) (100мг) 37 100 20 96 5 38 187 21 19 5 39 100 26 54 5 40 10 28 170 0.5 41 50 31 63 42 20 34 128 Приготування водно-спиртових розчинів. Приклад 43 20 грам комплексу, отриманого за прикладом №6, розчиняють в 1000мл водно-спиртового розчину (30% етилового спирту), фільтрують через фільтр 0,2 мікрона і ампулірують в ампули по 5мл. Вміст заліза в одній ампулі 6,5мг. Приклад 44. 20 грам комплексу, отриманого за прикладом 6, розчиняють в 1000мл водно-спиртового розчину (30% етилового спирту), фільтрують через фільтр 0,2 мікрона і ампулірують у флакони по 15мл. Вміст заліза в одному флаконі 20 міліграм. Вміст цинку (мг)у пігулці (100мг) Вміст марганцю (мг) у пігулці (100мг) 4.0 1.0 Оцінка впливу отриманих комплексів у вигляді пігулок або капсул на ступінь оксигенації здорової м'язової тканини тварин. Дослідження проводилися на мишах - гібридах Fi(Cbaxc57bl/6j), самці масою 25-27г. Препарат за прикладом 38 одноразово вводили в дозі 200мг/кг. Через дві години після вживання препарату відмічено зростання парціального тиску кисню у здоровій м'язовій тканині мишей на 40%±15. Радіопротекторні властивості. Радіопротекторні властивості досліджувалися на мишах гібридах C57/black6 вагою 18-22г. Три групи мишей по 10 в кожній отримали дозу гамма опромінення 8 Грей кожна. Випробовувана група отримала преорально по 10мг препарату за прик 15 ладом 37 за чотири години до опромінення. У групі позитивного контролю зроблені ін'єкції 0,15мг препарату CBLB502 (Cleveland BioLabs Inc). В контрольній групі на момент припинення спостережень втрати склали 5 мишей, у випробовуваній групі 2, а у групі позитивного контролю 1 миш. Корекція біологічного віку людини. Було вивчено вплив описаних комплексів на зниження біологічного віку людини. Використовували спосіб визначення біологічного віку людини, коли у людини після нічного відпочинку беруть на пробу клітини букального епітелію, проводять їх мікроелектрофорез, обчислюють відношення кількості електронегативних клітинних ядер (ЕОЯ%) до загальної кількості досліджених клітин і по його величині порівняно з середньостатистичним значенням цього показника визначають біологічний вік людини (Авторське свідоцтво СРСР 1169614, А61В10/00, 1981). По таблиці стандартних показників ЕОЯ визначали біологічний вік людини. I група: Жінки, паспортний вік (ПВ) 40-50 років, середній біологічний вік (БВ) до початку прийому 55 років. Прийом препарату 1 капсула на 2 дні. Після прийому протягом 40 днів біологічний вік (БВ) склав 38 років. 92959 16 II група: Жінки, паспортний вік (ПА) 40-50 років, середній біологічний вік (БВ) до початку прийому 58 років. Прийом препарату 1 капсула на день. Після прийому протягом 40 днів біологічний вік (БВ) склав 44 роки. III група: Чоловіки, паспортний вік (ПА) 45-50 років, середній біологічний вік (БВ) до початку прийому 61 рік. Прийом препарату 1 капсула на день. Після прийому протягом 40 днів біологічний вік (БВ) склав 42 роки. Хвороба Паркінсона Група добровольців 10 чоловік (початкова стадія захворювання) розділена випадково на дві групи по п'ять добровольців у кожній. У піддослідній групі поряд із звичайним лікуванням (Леводопа, Бромкріптін, Інгібітори МАО) піддослідні приймали препарат за прикладом 18. Порівняння з групою контролю проводили по наступних, наведених в Таблиці 6, симптомам, відштовхуючись від 100% шкали. Спостереження формувалося протягом трьох місяців. Розвиток симптому оцінювався виходячи з початкового значення 100%. У таблиці 4 наведені результати початкових (на момент початку прийому пігулок за прикладом №39) і кінцевих симптомів захворювання. Таблиця 4 Симптом Інволюційний тремор Досліджувана група 100/100; 100/101; 100/100; 100/100; 100/101 М'язова ригідність 100/101; 100/101; 100/100; 100/100; 100/101 Брадикінезія (повільна невпев- 100/100; 100/101; 100/100; нена хода) 100/101; 100/101 Брадифренія (уповільнення 100/101; 100/101; 100/100; процесів мислення, мовлення, 100/100; 100/101 емоцій) Постуральна нестабільність (по- 100/100; 100/101; 100/101; рушення координації тіла) 100/100; 100/101 Дані показують тенденцію до зниження розвитку симптомів захворювання. Хвороба Альцгеймера Група добровольців 10 чоловік (початкова стадія захворювання) розділена випадково на дві групи по п'ять добровольців у кожній. У піддослідній групі поряд із звичайним лікуванням (Кавінтон (калан), Дигідроерготамін мезілат, Гомопантетанат кальцію, Амантадін, Біфоме Контроль 100/103; 100/102; 100/105; 100/101; 100/104 100/103; 100/103; 100/104; 100/101; 100/103 100/103; 100/102; 100/102; 100/104; 100/104 100/103; 100/102; 100/105; 100/102; 100/101 Співвідношення 100.4/103 100/103; 100/101; 100/103; 100/102; 100/104 100.6/102.6 100.6/102.9 100.6/103 100.6/102.6 лан, Ацетил-L-карнітин, Індолаксозин. Пірацетам) піддослідні приймали препарат за прикладом 39. Порівняння з групою контролю проводили по наступних, наведених в таблиці 5, симптомам, виходячи з 100% шкали. Спостереження формувалося протягом трьох місяців. Розвиток симптому оцінювався виходячи з початкового значення 100%. У таблиці наведені результати початкових (на момент початку прийому пігулок за прикладом 39) і кінцевих симптомів захворювання. Таблиця 5 Симптом Досліджувана група Контроль Агнозия (зниження здібності до 100/100; 100/101; 100/100; 100/103; 100/101; 100/103; пізнання) 100/100; 100/101 100/102; 100/104 Порушення орієнтації у часі та 100/101; 100/101; 100/100; 100/103; 100/103; 100/104; просторі 100/100; 100/101 100/101; 100/103 Брадикінезія (повільна невпев- 100/100; 100/101; 100/100; 100/103; 100/102; 100/102; нена хода) 100/101; 100/101 100/104; 100/104 Співвідношення 100.4/102.6 100.6/102.9 100.6/103 17 92959 18 Продовження таблиці 5 Брадифренія (уповільнення 100/101; 100/101; 100/100; 100/103; 100/102; 100/105; процесів мислення, мовлення, 100/100; 100/101 100/102; 100/101 емоцій) Порушення інтелектуально- 100/100; 100/101; 100/101; 100/103; 100/102; 100/105; мнестичних функцій (пам'ять, 100/100; 100/101 100/101; 100/104 увага, судження, узагальнення) Комп’ютерна верстка Т. Чепелева Підписне 100.6/102.6 100.6/103 Тираж 26 прим. Міністерство освіти і науки України Державний департамент інтелектуальної власності, вул. Урицького, 45, м. Київ, МСП, 03680, Україна ДП “Український інститут промислової власності”, вул. Глазунова, 1, м. Київ – 42, 01601