42-оксими та гідроксиламіни рапаміцину, проміжні сполуки і спосіб їх отримання, фармацевтична композиція і спосіб лікування захворювань

1 42-Оксимы и гидроксиламины рапамицина общей формулы I „он в которой X-Y представляет C=NOR1 или 2 CHNHOR , в которых R1 представляет водород, алкил с 1 - 6 атомами углерода, алкенил с 2 - 7 атомами углерода, алкинил с 2 - 7 атомами углерода, группа формулы -(CbbJmAr, в которой Аг представляет фенил или пиридинил и m = 1 - 6, R2 представляет водород или радикал формулы (CH2)mAr, в которой Аг представляет пиридинил, или их формацевтически приемлемые соли 2 Соединение по п 1, в котором X-Y представляет C=NOR1, или его фармацевтически приемле мая соль 3 Соединение по п 1, в котором X-Y является 2 группой CHNHOR , или его фармацевтически приемлемая соль 4 Соединение по п 1, которое является 42деоксо-42-(гидроксиимино)рапамицином или его фармацевтически приемлемой солью 5 Соединение по п 1, которое является 42деоксо-42-(гидроксиамино)рапамицином или его фармацевтически приемлемой солью 6 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-О-карбамоилоксимом или его фармацевтически приемлемой солью 7 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-[О-(пиридин-2илметил)]-оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 8 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-[О-(пиридин-4илметил)]-оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 9 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-[О-(трет-бутил)]оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 10 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-[О-(фенилметил)]оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 11 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-(О-аллил)-оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 12 Соединение по п 1, которое является 42деокси-42-оксорапамицин-42-[О-(проп-2-инил)]оксимом или его фармацевтически приемлемой солью 13 Соединение по п 1, которое является 2деоксо-42-[О-(пиридин-4-илметил)]-гидрокси аминорапамицином или его фармацевтически приемлемой солью 14 Способ лечения заболевания, выбранного из группы, состоящей из отторжения трансплантата или болезни "трансплантат против хозяина" и ревматоидного артрита, у млекопитающего, нуждающегося в лечении, который включает введение указанному млекопитающему эффективного про О Ю 00 З 49815 тив заболевания количества соединения, имеюпредставляет водород, алкил с 1 - 6 атомами углерода, алкенил с 2 - 7 атомами углерода, алкищего структуру нил с 2 - 7 атомами углерода, группу формулы (CH2)mAr, в которой Аг представляет фенил или пиридинил и m = 1 - 6, R2 представляет водород или радикал формулы -(CbbJmAr, в которой Аг представляет пиридинил, или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтический носитель 16 Соединение структуры в которой X-Y является группой C=NOR1 или CHNHOR2, R1 представляет водород, алкил с 1 - 6 атомами углерода, алкенил с 2 - 7 атомами углерода, алкинил с 2 - 7 атомами углерода, группу формулы -(CH2)mAr, в которой Аг представляет фенил или пиридинил и m - 1 - 6, R2 представляет водород или радикал формулы -(CbbJmAr, в которой Аг представляет пиридинил, или его фармацевтически приемлемой соли 15 Фармацевтическая композиция, проявляющая иммуносупрессивную активность, которая включает соединение структуры в которой R является группой SiR R R , в которой каждый R7, R8 и R9 представляет независимо алкил с 1 - 8 атомами углерода 17 Соединение по п 16, которое является 31-0(три-этилсилил)-42-оксорапамицином 18 Способ получения соединений формулы I, охарактеризованных в п 1, который включает взаимодействие 42-оксорапамицина (необязательно защищенного по гидроксильной функциональной группе в положении 31 силильной группой формулы R6, определенной в п 16 с гидроксиламином формулы bbNOR1, в которой R имеет указанные выше значения, с образованием соответствующего оксима формулы I, в котором X-Y является группой C=NOR1, и удаление указанной защитной группы R6 в которой X-Y является C=NOR1 или CHNHOR2, R1 Цей винахід стосується 42-оксимів та пдроксиламінів рапаміцину і способу їх використання для індукування імуносупресм та у лікуванні відторгнення трансплантата, реакції "трансплантат проти живителя", аутоімунних захворювань, запальних захворювань, Т-клітинного лейкозу/лімфоми у дорослих, твердих пухлин, МІКОЗІВ або грибкових інфекцій та гіперпроліферативних судинних порушень Рапаміцин є макроциклічним триєновим антибіотиком, що його продукує Streptomyces hygroscopicus, у якого було виявлено протигрибкове діяння, зокрема, проти Candida albicans, як in vitro так і in vivo [С Vezma et al, J Antibiot 28, 721 (1975), S N Sehgaletal, J Antibiot 28,727(1975), H A Baker et al, J Antibiot 31, 539 (1978), Патент США 3929992, та Патент США 3993749] Було показано, що рапаміцин, який використовується один (однокомпонентно) (Патент США 4885171) або у поєднанні (комбінації) з піцибанілом (Патент США 4401653), виявляє протипухлинну активність Р Мартелташ (R Mattel et al) [Can J Physiol Pharmacol 55, 48 (1977)] виявили, що рапаміцин є ефективним при використанні на екс 49815 периментальній моделі алергічного енцефаломієліту, моделі множинного склерозу, моделі ад'ювантного артриту, моделі ревматоїдного артриту та ефективно інгібує або пригнічує утворення імуноглобуліну Е-подібних антитіл Імуносупресивну (імунодепресивну) дію рапаміцину було описано в FASEB 3, 3411 (1989) Було також показано, що циклоспорин А та ФК-506, ІНШІ макроциклічні молекули є ефективними як імуносупресивні засоби, і, таким чином, є корисними для запобігання відторгненню трансплантату [FASEB 3, 3411 (1989), FASEB 3, 5256 (1989), R Y Calne et al, Lancet 1183 (1978), Патент США 5100899] Також було показано, що рапаміцин є ефективним у відвертанні або лікуванні системного червоного вовчака (Патент США 5078999), запалення легенів (Патент США 5080899), інсулінозалежного цукрового діабету [Fifth Int Conf Inflamm Res Assoc 121 (Abstract), (1990)], проліферації клітин гладких м'язів І стовщення інтими після судинних травм [Morns, R J Heart Lung Transplant 11 (pt 2) 197 (1992)], Т-клітинного лейкозу/лімфоми [європейська заявка на патент 525960 А1] та запалення очей (європейська заявка на патент 532862 А1) Було показано, що моно- діациловані ПОХІДНІ рапаміцину (етеріфіковані у позиціях 28 та 43) є ефективними як протигрибкові препарати (Патент США 4316885), і їх можна використовувати для отримання водорозчинних аміноацилованих проліків рапаміцину (Патент США 4650803) Нещодавно було змінено угоду про нумерацію для рапаміцину, тому, згідно з номенклатурою Chemical abstracts, слід вважати, що утворення описаних вище складних ефірів має місце у позиціях 31 та 42, У Патенті США 5023263 описано отримання і використання 42-оксорапаміцину, а у Патенті США 5023264 описано отримання і використання 27-оксимів рапаміцину Опис Винахід стосується похідних рапаміцину, що можуть використовуватися як імунодепресивні, протизапальні, протигрибкові, антипроліферативні та протипухлинні засоби, що мають структуру Де X-Y означає C=NOR 1 або CHNHOR 2 , Кожний з R1 і R2 незалежно означає водень, алкіл з 1-6 атомами вуглецю, алкеніл з 2-7 атомами вуглецю, алкініл з 2-7 атомами вуглецю, аміноалкіл з 1-6 атомами вуглецю, алкіламіноалкіл з 1-6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі, діалкі ламіноалкіл з 1-6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі, циклоалкіл з 3-8 атомами вуглецю, алкілокси з 1-6 атомами вуглецю, алкоксиалкіл з 16 атомами вуглецю у кожній алкільній групі, циклоалкіламіноалкіл з 4-14 атомами вуглецю, ціаноалкіл з 2-7 атомами вуглецю, фторалкіл з 1-6 атомами вуглецю, трифторметилалкіл з 2-7 атомами вуглецю, трифторметил, ArO -, -(CH2) m Ar або COR 3 , R3 означає алкіл з 1-6 атомами вуглецю, -NH2, -NHR 4 , -NR 4 R 5 , -OR 4 або Аг Кожний з R4 і R5 незалежно означає алкіл з 1-6 атомами вуглецю, Аг, або, у разі наявності обох, вони можуть бути взяті разом з утворенням 4-7членного кільця, Аг означає арильний або гетероарильний радикал, що може бути необов'язково моно- ді- або тризаміщеним групою, вибраною з-поміж алкілу з 1-6 атомами вуглецю, алкенілу з 2-7 атомами вуглецю, алкінілу з 2-7 атомами вуглецю, арилалкілу з 7-10 атомами вуглецю, алкокси з 1-6 атомами вуглецю, ціано, галогену, гідрокси, нітро, карбалкокси з 2-7 атомами вуглецю, трифторметил у, трифторметокси, аміно, діалкіламшо з 1-6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі, діалкіламіноалкілу з 3-12 атомами вуглецю, пдроксиалкілу з 1-6 атомами вуглецю, алкоксиалкілу з 2-12 атомами вуглецю, алкілтю з 1-6 атомами вуглецю,-SO3H та -СОзН, і т = 0 - 6 , або їх фармацевтично прийнятні солі Фармацевтичне прийнятними солями є солі, утворені з таких неорганічних катіонів, як натрій, калій тощо, органічних основ таких, як моно-, ді- та триалкіламіни з 1-6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі і моно-, ді- та трипдроксиалкіламіни з 1-6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі тощо, й органічних та неорганічних кислот, таких як оцтова, молочна, лимона, винна, янтарна, малеїнова, малонова, глюконова, соляна, бромистоводнева, фосфорна, азотна, сірчана кислоти, метансульфокислота та ІНШІ, також ВІДОМІ прийнятні кислоти Терміни алкіл з 1-6 атомами вуглецю, алкеніл з 2-7 атомами вуглецю і алкініл з 2-7 атомами вуглецю включають як нерозгалужений ланцюг, так і розгалужені вуглецеві ланцюги Зразками алкілу як групи або частини групи, наприклад, арилалкілу, алкокси або карбалкокси, є нерозгалужені або розгалужені ланцюги з 1-6 атомами вуглецю, більш прийнятно з 1-4 атомами вуглецю, наприклад метил, етил, пропил, ізопропил та н-бутил Завдяки наявності подвійного зв'язку, оксими ВІДПОВІДНО до цього винаходу мають цис-транс ізомерію, тому цей винахід охоплює не тільки суміші геометричних ізомерів, але й індивідуальні Е та Z ізомери, що їх можна розділити у способи, ВІДОМІ фахівцям у цій галузі Аналогічно, пдроксиламіни ВІДПОВІДНО до цього винаходу складаються з суміші епімерів при С-42, і тому цей винахід охоплює не тільки суміші ізомерів, але й індивідуальні ізомери, що їх можна розділити у такі способи, які ВІДОМІ фахівцям у цій галузі Термін "арил" як група або частина групи, наприклад, арилалкілу, містить будь-яку моно- або бікарбоциклічну ароматичну групу з 6 10 атомами вуглецю Термін "гетероарил" включає будь-який моно- або біциклічний гетероциклічний 49815 ароматичний радикал, що складається з 5 - 10 атомів у гетероциклі, з яких до трьох атомів у гетероциклі, однакових або різних, є гетероатомами, вибраними з атомів кисню, азоту та сірки Арильними і гетероарильними радикалами Аг є, більш прийнятне, феніл, піридил, фурил, піролил, тюфеніл, імідазолил, оксазолил аботіазолил, що необов'язково можуть бути моно- ді- або тризаміщеними групою, вибраною з алкілу з 1 - 6 атомами вуглецю, алкенілу з 2 - 7 атомами вуглецю, алкінілу з 2 - 7 атомами вуглецю, арилалкілу з 7 10 атомами вуглецю, алкокси з 1 - 6 атомами вуглецю, ціано, галогену, гідрокси, нітро, карбалкокси з 2 - 7 атомами вуглецю, трифторметилу, трифторметокси, аміно, діалкіламшо з 1 - 6 атомами вуглецю у кожній алкільній групі, діалкіламіноалкілу з 3 - 1 2 атомами вуглецю, пдроксиалкілу з 1 - 6 атомами вуглецю, алкоксиалкілу з 2-12 атомами вуглецю, алкілтю з 1 - 6 атомами вуглецю,-SO3H та СО2Н Якщо R3 означає -NR4R5, то групи R4 і R5 можуть бути однаковими чи різними (як було визначено вище) або можуть об'єднуватися з утворенням насиченого гетероциклу, що складається з 4 7 атомів, у КІЛЬЦІ якого 1 атом є азотом, а 0 - 2 інших атомів у гетероциклі можуть бути атомами азоту, кисню чи сірки У тому випадку, коли R4 та R5 взяті разом, більш прийнятним є те, щоб R4R5 являв собою вуглецевий ланцюг, який утворює азетидинове, піролідинове, піперидинове або гомопіперидинове кільце Більш прийнятними сполуками ВІДПОВІДНО ДО цього винаходу є сполуки, де X-Y означає C=NOR1, сполучення, де X-Y означає C=NOR1, та R1 означає водень, алкіл з 1-6 атомами вуглецю, алкеніл з 2-7 атомами вуглецю, алкініл з 2-7 атомами вуглецю, алкілокси з 1-6 атомами вуглецю, (CbbJmAr, або -COR3, сполучення, де X-Y означає CHNHOR2, сполучення, де X-Y означає CHNHOR2, 2 та R2 означає водень або -( У цьому винаході також описано способи отримання сполук рапаміцину ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винаходу Зокрема, у цьому винаході описано способи отримання 42-оксимів та пдроксиламінових похідних рапаміцину, що включають один з таким способів а) взаємодія 42-оксорапаміцину (необов'язково захищеного у гідроксильній функціональній групі у позиції 31 силільною групою формули R6, що її визначено нижче) із пдроксиламіном формули H2NOR1, де R1 має наведене вище значення, окрім частин, що містять карбоніл, з утворенням ВІДПОВІДНОГО оксиму формули І, де X-Y означає C=NOR , та вилучення означеної захисної групи R6, або б) відновлення оксиму формули І (необов'язково захищеного у гідроксильній функціональній групі в позиції 31 силільною групою формули R6, що її визначено нижче), де X-Y означає C=NOR1, де R1 має наведене вище значення, за винятком радикалів, що містять карбоніл, з утворенням пдроксиламшу формули І, де X-Y означає CHNHOR , або в) взаємодія сполуки формули І (необов'язково захищеної у гідроксильній функціональній групі в позиції 31 силільною групою формули R6, що її 8 визначено нижче), де Х-У означає C=NOR1, де R1 означає водень, з ціанатом, наприклад, ціанатом лужного металу, таким як ціанат натрію, з утворенням сполучення формули І, де X-Y означає C=NOR1, де R1 означає -CONH2, або г) взаємодія сполуки формули І, де Х-У означає C=NOR1 або CHNHOR2, де R1 та R2 є воднем (коли X-Y означає C=NOR1, необов'язково захищений у гідроксильній функціональній групі у позиції 31 силільною групою формули R6, що и визначено нижче), з ізоціанатом або галогенациламіном формули R4NCO, R4NCOhal або R4R5NCOhal, де паї означає галоген, такий як хлор, з утворенням відповідної сполуки, що має формулу І, в якій R1 або R2 означає COR3, і R3 означає NHR4 або NR4R5, або д) взаємодія сполуки, що має формулу І, де XY означає C=NOH або CHNHOH (коли X-Y означає C=NOH, необов'язково захищений по 31 -їй гідроксильній функціональній групі силільною групою формули R , що її визначено нижче), з алкіл- або арилхлорформіатом з отриманням карбонату формули І, де R1 або R2 означає COR3, де R3 означає алкіл чи арил Сполуки ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть бути отримані з 42-оксорапаміцину, який можна отримати з помірним виходом шляхом вибірного (селективного) окислення рапаміцину в 42-позицм за допомогою окислення, опосередкованого рутенієм, як стверджується в Патенті США 5023263, вказаному тут для довідки Альтернативно, приблизно 50%-вий вихід 42-оксорапаміцину можна дістати, якщо використати суміш перугенат тетрапропиламонію/^оксиду N-метилморфолшу, як зазначено Холтом у Публікації РСТ США 93/0668, Після ЦЬОГО 42-оксорапаміцин можна обробити у ВІДПОВІДНИЙ спосіб заміщеним пдроксиламіном та отримати суміш 42- (Е) та (Z) оксимів (X-Y є C=NOR1), яку можна розділити за стандартною методикою Далі 42-оксими можуть вступати у реакцію з ВІДПОВІДНИМ відновником, наприклад, зі сумішшю ціаноборводень натріюЛТФ/дюксан/рН 3,5 з утворенням пдроксиамінів ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винаходу (Х-У є CHNHOR2) Сполучення ВІДПОВІДНО до цього винаходу, де Х-У означає C=NOR1, та R1 означає частину молекули,що містить карбоніл, можуть бути отримані з 42-оксиму рапаміцину (X-Y є C=NOR1, та R1 є воднем Наприклад, 42-оксим рапаміцину може вступати у реакцію з ціанатом натрію з утворенням сполуки, де R1 означає COR3, та R3 означає NH2, Аналогічно, 42-оксим рапаміцину можна обробити, у придатний спосіб, заміщеним ізоціанатом або галогенациламіном (наприклад, R4R5NC(O)CI) щоб отримати сполуки, де R1 означає -COR3, та R означає -NR4R5, У аналогічний спосіб можна отримати сполуки, де R1 є -COR3 та R3 є -NHR4, Крім того, обробка 42-оксиму рапаміцину ВІДПОВІДНИМ алкіл- або арилхлорформіатом у піридині й такому розчиннику, як метиленхлорид, дає змогу отримати карбонати оксиму, де R1 є -COR3, і R3 є алкілом або Аг Аналогічної функціоналізації можна досягнути, коли X-Y є CHNHOR2, з використанням вихідного сполучення, де R1 є воднем (що його отримано 49815 10 шляхом відновлення 42-оксиму рапаміцину ціаноРеагенти, що використовуються для отриманборводнем) ня сполук ВІДПОВІДНО до цього винаходу, можуть бути або придбані, або одержані за допомогою Як альтернативу окислювальному способу стандартних засобів, описаних у літературі отримання 42-оксорапаміцину з використанням рутенію, цей винахід описує також синтетичний Імуносупресивну активність типових сполучень шлях отримання оксимів і пдроксиламінів ВІДПОВІВІДПОВІДНО до цього винаходу оцінювали за допоДНО до цього винаходу, окисленням перюдинаном могою стандартної методики фармакологічних Десс-Мартина 31-О-захищеного рапаміцину Завипробувань in vitro, де вимірюється ступінь прихист 31 -позиції рапаміцину було описано у Патенті гнічення проліферації лімфоцитів (фактору актиСША 5120842, що його включено тут для довідки вації лімфоцитів/LAF/), та двох стандартних проНаприклад, обробка рапаміцину підхожим захисцедур фармакологічного випробування in vivo За ним реагентом, таким як суміш триетилсиліл тридопомогою процедури випробувань з використанфлат/2,6-лутидин/метиленхлорид, а потім оцтовою ням клаптика шкірного трансплантата вимірюють кислотоюЛТФ/ водою забезпечує КІЛЬКІСНИЙ ВИХІД імуносупресивну активність сполучення, що його 31-О-триетилсиліл рапаміцину Окислення перітестують, а також спроможність сполучення, що од инаном Десс-Мартина забезпечує приблизно його тестують, гальмувати (інгібувати) або лікува65%-вий вихід 31-О-триетилсиліл-42-оксорапати відторгнення трансплантата За допомогою міцину, що його можна піддати подальшій обробці процедури стандартного фармакологічного випропідхожим пдроксиламіном (з подальшим отриманбування з використанням ад'ювантного артриту ням похідних), ЯК описано вище Для оксимів ВІДвимірюють спроможність сполучення, що його тесПОВІДНО до цього винаходу триетилсилільну захистують, інгібувати імуноопосередковане запалення ну групу може бути усунуто за умов слабкої Випробування із використанням ад'ювантного арткислотності (оцтова кислотаЛТФ/вода), як це опириту являє собою стандартну методику фармакосано у Патенті США 5120842 При використанні логічного випробування ревматоїдного артриту цього способу пдроксиламіни ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО Процедури цих стандартних методів фармакологівинаходу можуть бути також отримані з ВІДПОВІДчного випробування описано нижче НИХ ОКСИМІВ шляхом відновлення ціаноборводнем Процедуру проліферації тимоцитів, викликаної у кислому середовищі з одночасним вилученням комітогенами (LAF), використовували для оцінки силільної захисної групи імуносупресивної дії типових сполучень in vitro Коротко, клітки тимуса нормальних мишів лінії На основі описаної вище методики ДессBALB/c культивували протягом 72 годин з ФГА та Мартина із застосуванням перюдинана наведені штерлейкином-1 і піддавали імпульсному впливу сполуки є проміжними продуктами, корисними для міченого тритієм тимідину протягом останніх шесприготування оксимів ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винахоти годин Клітини культивують як з різноманітними ДУ концентраціями рапаміцину, циклоспорину або сполучення, яке тестують, так і без них Здійснюють збір клітин і визначають включену радіоактивність Пригнічення лімфопроліферацм оцінюють як процентну зміну КІЛЬКОСТІ імпульсів на хвилину, у порівнянні з контрольними групами, які не одержували лікарський засіб 3 метою порівняння паралельно з оцінкою дії кожного сполучення оцінюваOR* ли також дію рапаміцину Показник ICso було отримано як для кожного сполучення, що його тесО тували, так і для рапаміцину При ОЦІНЦІ рапаміцину як речовини для порівняння з типовими сполученнями ВІДПОВІДНО до цього винаходу його показник ІС50 знаходився у діапазоні від 0,5 до З.Знмоль Отримані результати представлено показником ІС50 та процентним вираженням інгібування проліферації Т-клітин при 0,1мкмоль Результати, отримані для типових сполук ВІДПОВІДНО де R означає -SiR R R , 7 Я Q до цього винаходу, виражали також як відношені кожен з R , R та R незалежно означає алкіл ня, у порівнянні з рапаміцином Позитивне відноз 1-8 атомами вуглецю, алкеніл з 1-8 атомами вугшення свідчить про наявність імуносупресивної лецю, фенілалкіл з 7-10 атомами вуглецю, трифеактивності Якщо величина відношення більша за нілметил або феніл одиницю, це означає, що при використанні сполуСполучення Прикладу 1 є більш прийнятним чення, яке тестують, міра інгібування проліферації проміжним продуктом з описаних вище проміжних тимоцитів була вищою, ніж при використанні рапродуктів ВІДПОВІДНО, цей винахід представляє паміцину Розрахунок відношення показано нижче спосіб отримання проміжного продукту формули II, описаної вище, що полягає в окисленні 31 -Озахищеного рапаміцину (в якому захисною групою ІС5о Рапаміцину є R6, що його визначено вище) в умовах, підхожих ІС50сполучення яке тестують для проведення окислення Десс-Мартина періодинаном і, при бажанні, вилученні вищезазначеТипові сполучення ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винаної захисної групи 12 11 49815 ходу оцінювали також за методикою випробувань щурів контрольної групи in vivo, призначеною для визначення часу вижиРезультати, отримані у цих стандартних фарвання (життя) клаптиків шкірних трансплантатів, макологічних випробуваннях, представлено після які було пересаджено від донорів-самців лінії опису методики отримання специфічних сполуBALA/c самцям, що одержували СзН(Н-2К) Цей чень, які було випробувано спосіб було узято з Bilhngham R Т and Medawar P Результати в цих стандартних фармакологічВ, J Ехр ВюІ 28 385-402, (1951) Коротко, шкірних випробуваннях свідчать про імуносупресивну ний трансплантат у вигляді клаптиків, отриманий дію сполук ВІДПОВІДНО до цього винаходу як in vivo, від донора, пересаджували на спину реципієнта як так і in vitro Результати, отримані в LAF-тесті, вкааллотрансплантат, а ізотрансплантат використозують на пригнічення проліферації Т-клітин, що вували для контролю в тій самій області Реципієсвідчить, таким чином, про імуносупресивну актинтам вводили внутрішньочеревно або перорально вність сполук ВІДПОВІДНО до цього винаходу Ефекрізні концентрації сполучень, які тестували Рапативність сполучень ВІДПОВІДНО до цього винаходу міцин використовували для контролю Реципієнти, як імунодепресивних речовин була далі доведена які не отримали сполучень, що тестували, служили результатами, отриманими у стандартних фармадля контролю на відторгнення Здійснювали щокологічних тестах з використанням шкірних трансденний моніторинг трансплантата, і дані спостеплантатів та ад'ювантного артриту Крім того, рережень реєстрували аж доки, трансплантат не зультати, отримані у тесті з використанням висихав й не перетворювався на почорнілу кірку шкірного трансплантата, також свідчать про спроЦей момент вважали за день відторгнення Сереможність цих сполук повністю відвертати або гадній час життєздатності трансплантата (КІЛЬКІСТЬ льмувати відторгнення трансплантата РезультаДНІВ ± стандартне відхилення) в групі, що одержути, отримані у стандартному фармакологічному вала тест-сполучення, порівнювали з аналогічним тесті з використанням ад'ювантного артриту, також показником для контрольної групи Результати свідчать про спроможність сполучень ВІДПОВІДНО було виражено як середній час життєздатності до цього винаходу виліковувати ревматоїдний артрансплантата у днях Клаптикові шкірні трансплатрит або затримувати його прогресування нтати у групі, яка не отримувала тест-сполучення На підставі результатів цих стандартних фар(контрольній групі), як правило відторгались промакологічних тестів можна зробити висновок, що тягом 6 - 7 днів Сполучення досліджувалися при означені сполуки є ефективними в лікуванні або дозі 4мг/кг, яку вводили внутрішньочеревно При пригніченні відторгнення трансплантатів, таких як внутрішньочеревному введенні рапаміцину в дозі нирка, серце, печінка, легені, кістковий мозок, під4мг/кг час життєздатності трансплантата сягнув шлункова залоза (острівкові клітини), рогівка, тон11,67 ± 0,63 днів ка кишка, а також шкірних аллотрансплантатів і ксенотрансплантатів клапанів серця, у лікуванні та У стандартному фармакологічному випробупригніченні "трансплантат хвороби проти живитеванні із використанням ад'ювантного артриту оціля", у лікуванні та пригніченні аутоімунних захвонюють спроможність сполучень, що тестуються, рювань, наприклад, вовчака, ревматоїдного артзапобігати імуноопосередкованому запаленню і риту, цукрового діабету, міастенії gravis та пригнічувати або виліковувати ревматоїдний артрозсіяного склерозу, а також запальних захворюрит Нижче стисло описано методику випробуванвань, наприклад, псоріазу, дерматиту, екземи, сеня, що використовується Сполучення спочатку бореї, запальних захворювань кишечнику, запавводили групі щурів (інбредних щурів-самців лінії лення легенів (включаючи ядуху, хронічне Вістар Льюіс) для випробування (за 1 годину до обструктивне захворювання легенів, емфізему, введення антигену), а після цього у праву задню гострий респіраторний дистрес-синдром, бронхіт лапку цих щурів впорскували повний ад'ювант та ІНШІ подібні захворювання) і увеїту Фрейнда (FCA) для індукування артриту Після цього, певні дози вводили щурам перорально за Завдяки виявленому профілю дії, сполучення схемою введення препарату щопонеділка, щосеВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть розглядатиреди та щоп'ятниці з 0 по 14 день при загальній ся як такі, що проявляють протипухлинну, протиКІЛЬКОСТІ 7 доз Обидві задні лапки вимірювали у грибкову та антипроліферативну активність Звід16-й, 23-й й 30-й дні Визначали різницю в об'ємі си випливає, що сполучення ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО лапок (мл) від 16 до 0 дня та розраховували провинаходу також можуть використовуватись при центну зміну у порівнянні з контролем Запалення лікуванні твердих пухлин, Т-клітинного лейколівої задньої лапки (що и не піддавали інфекції") зу/лімфоми у дорослих, МІКОЗІВ і пперпроліфераспричинене запаленням, опосередкованим Ттивних судинних захворювань таких, як рестеноз і клітинами, і реєструється як процентна зміна поріатеросклероз У разі використання при лікуванні вняно з контролем 3 іншого боку, запалення прарестенозу, сполучення ВІДПОВІДНО до цього винавої задньої лапки спричинене неспецифічним заходу, більш прийнятно, застосовують для лікуванпаленням Сполучення випробовували при дозі у ня рестенозу, що виникає після пластичної опера2мг/кг Результати наведено у вигляді процентної ції на судинах У разі використання з цією метою, зміни в лапці, що и не піддавали інфекції, на 16-й сполуки ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть вводень у порівнянні з контролем, чим більша негатидитися до операції, під час операції, після операції вна процентна зміна, тим ефективнішим є сполуабо при будь-якій комбінації вищезазначених чення Введення рапаміцину забезпечило - 70%-ву умов зміну порівняно з контролем Це означає, що у При використанні для лікування або гальмущурів, які отримали рапаміцин, спостерігалося на вання вищезазначених захворювань сполучення 70% менше імуноопосередковане запалення, ніж у ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть вводитися 13 49815 14 ссавцю перорально, парентерально, штраназальречовини, що змінюють смак і запах препарату, но, внутрішньо-бронхіально, крізь шкіру, локально, суспендуючі речовини, загусники, барвники, регуштравапнально або ректально лятори в'язкості, стабілізатори або осморегулятоПрипускається, що в тих випадках, коли спори До прийнятних рідких носив для перорального лучення ВІДПОВІДНО до цього винаходу застосовуабо парентерального введення можна віднести ються як імунодепресивні або протизапальні засоводу (що частково містить вищезазначені добавки, би, вони можуть вводитися у комбінації з іншими такі як ПОХІДНІ целюлози, більш прийнятне, розчин (однім ЧИ декількома) імунорегуляторними агентанатрійкарбоксиметилцелюлози), спирти (включаюми До таких імунорегуляторних агентів належать чи одноатомні спирти та багатоатомні спирти, на(але не вичерпують можливого переліку) азатюпприклад, ГЛІКОЛІ) І їх ПОХІДНІ, лецитіни й олп (напририн, кортикостероїди, такі як преднізон та метилклад, фракціонована кокосова олія та арахісова преднізолон, циклофосфамід, рапаміцин, циклосолія) ДЛЯ парентерального введення носієм може порин А, ФК-506, ОКТ-3 та АТГ (антитимоцитний також служити олійний ефір, такий як етилолеат й глобулін) Якщо сполучення ВІДПОВІДНО до цього ізопропилмиристат Стерильні рідкі носи можуть винаходу застосовуються у комбінації з подібними застосовуватись для приготування стерильних іншими лікарськими засобами або агентами для рідких форм композицій для парентерального індукування імуносупресії або лікування запальних введення Як рідкий носій для композицій, що пестанів, для досягнення бажаного ефекту потрібні ребувають під тиском, може використовуватися менші КІЛЬКОСТІ кожного з цих засобів Обгрунтугалогенований вуглеводень або інший фармацеввання такої комбінаторної терапії надав Степковтичне прийнятний газ-витискач ський (Stepkowski), результати досліджень якого РІДКІ фармацевтичні композиції в вигляді степоказали, що застосування комбінації рапаміцину рильних розчинів або суспензій можуть вводитися та циклоспорину А в субтерапевтичних дозах знашляхом, наприклад, внутрішньом'язової, внутрішчно подовжує час життєздатності аллотранспланньочеревної або підшкірної ін'єкції Стерильні розтата серця [Transplantation Ргос 23 507(1991)] чини можуть також вводитися внутрішньовенне Сполучення ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть бути приготовані у чистому вигляді з фармацевтичним носієм для ссавців, що потребують них Фармацевтичний носій може бути твердим або рідким У разі приготування пероральної форми було виявлено, що 0,01% Твин 80/Tween 80/ у ФОСАЛ ПГ-50 /PHOSAL PG-50/ (фосфоліпідний концентрат з 1,2-пропиленгліколем, A Nattermann & Сіє GmbH) забезпечує прийнятну пероральну форму препарату Твердий носій може містити одну або декілька речовин, що можуть також виконувати функцію коригентів, речовин, що змащують, речовин, що підвищують розчинність, суспендуючих речовин, наповнювачів, сковзких речовин, засобів, що покращують пресування, речовин, що зв'язують або дезштегрують таблетку, він також може бути інкапсулюючим матеріалом В порошках носієм є тонко подрібнена тверда речовина, що знаходиться у суміші з тонко здрібненим активним інгредієнтом У таблетках активний інгредієнт змішано в необхідній пропорції з носієм, що має необхідні компресійні властивості, та спресовано у потрібну форму необхідного розміру Більш прийнятно, порошки й таблетки містять до 99% активного інгредієнта До ВІДПОВІДНИХ твердих носив належать, наприклад, фосфат кальцію, стеарат магнію, тальк, цукри, лактоза, декстрин, крохмаль, желатин, целюлоза, метилцелюлоза, натрійкарбоксиметилцелюлоза, полівшілпіролідин, низькоплавкий віск та іонообмінні смоли РІДКІ НОСИ використовують для приготування розчинів, суспензій, емульсій, сиропів, еліксирів та композицій, що перебувають під тиском Активний інгредієнт може бути розчинено або суспендовано у фармацевтичне прийнятному рідкому носи, такому як вода, органічний розчинник, їх суміш або фармацевтичне прийнятні олії чи жири Рідкий носій може містити ІНШІ прийнятні фармацевтичні добавки, наприклад, солюбілізатори, емульгатори, буфери, консерванти, підсолоджуючи речовини та Рідка або тверда лікарська форма сполучення може також вводитися перорально Сполучення ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть вводитися ректально у формі звичайного супозиторію Для введення методом штраназальноі або штрабронхіальної інгаляції або інсуфляцп сполучення ВІДПОВІДНО до цього винаходу можна готувати в формі водних або частково водних розчинів, що після цього можуть використовуватися в формі аерозолю Сполучення ВІДПОВІДНО ДО ЦЬОГО винаходу можуть також вводитися крізь шкіру, використовуючи крізьшкірний пластир, що містить активне сполучення і носій, інертний по відношенню до активного сполучення, нетоксичний по відношенню до шкіри і такий, що забезпечує системну абсорбцію препарату в кровотік крізь шкіру Носій може набувати будь-якої з численних форм, наприклад, форму кремів та мазей, паст, гелів і оклюзивних приєднань Креми та мазі можуть бути в'язкими, рідкими або напівтвердими емульсіями типу "олія у ВОДІ" або типу "вода в олм" Також можуть використовуватися пасти, які складаються з абсорбуючих порошків, що їх дисперговано у вазеліні або гідрофільному вазеліні, який містить активний інгредієнт Існують різноманітні варіанти оклюзивних пристроїв, що можуть використовуватися для виділення активногоінгредієнта у кровотік, наприклад, напівпроникна мембрана, яка покриває резервуар, що містить активний інгредієнт з носієм або без носія, або матрикс, який містить активний інгредієнт 3 літератури ВІДОМІ Й ІНШІ ОКЛЮЗИВНІ пристрої Крім того, сполуки ВІДПОВІДНО до цього винаходу можуть використовуватися у вигляді розчину, крему або лосьйону, що мають у своєму складі фармацевтично прийнятні носи, які містять 0,1-5%, бажано 2%, активного сполучення, що можуть наноситися на місце, вражене грибком Вимоги до дозування варіюються залежно від конкретних засобів, що використовуються, способу введення, тяжкості наявних симптомів та конкрет 16 15 49815 ного об'єісгу лікування Згідно з результатами, ний матеріал спочатку абсорбували на колонці з отриманими у стандартних фармакологічних висилікагелем Merck-60 та миттєво випарювали з пробуваннях, передбачувані добові дози активного гексан-етил ацетатом 95 5 й 7 2, отримуючи чистий сполучення повинні бути 0,1мкг/кг - 100мг/кг, більш продукт, означений в заголовку, з 64%-вим вихоприйнятно, між 0,001 - 25мг/кг, і ще більш прийнядом 1 тно, між 0,01 - 5мг/кг Як правило, лікування почиН ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 0,42-0,48 (м, 9Н), нають з введення низьких доз, менших за оптима0,80-0,83 (м, 6Н), 1,61 (ЗН, 6-СН3С=С), 1,77 (ЗН, льну дозу сполучення 3 цього моменту дозу 30-СН3С=С), 3,04 (ЗН, 41-ОСНз), 3,16 (ЗН, 7збільшують, доки не досягається оптимальний ОСНз), 3,28 (ЗН, 32-СНзО), 3,90 (м, 1Н, 41-СН) ефект, можливий за даних умов, точні дози для МС (негативи, іон FAB, m/z) 1025,3 [М] перорального, парентерального, назального або Приклад 2 внутрішньобронхіального введення визначаються 42-деоксо-42-(пдроксиімшо) рапаміцин лікуючим на підставі досвіду лікування індивідуаСпосіб отримання А льного пацієнта Фармацевтична композиція, Суміш 42-оксорапаміцину (0,183г, 0,22ммоль), більш прийнятно, набуває форми одиничних доз, отриманого у спосіб, описаний в Патенті США наприклад, таблеток або капсул В такій формі 5023263), пдрохлориду пдроксиламшу (0,0143г, композицію поділено на одиничні дози, що містять 0,22ммоль) та ацетату натрію (0,025г, О.Зммоль) в потрібну КІЛЬКІСТЬ активного інгредієнта, формами метанолі (5мл) перемішували в атмосфері азоту одиничних доз можуть бути композиції в упаковпротягом 15 хвилин Суміш упарювали досуха і ках, наприклад, порошки в пакетиках, ампули, гозалишок очищали за допомогою флештові заповнені шприці або пакети-саше, що містять хроматографм (на силікагелі Merck 60, елюент 50% рідину Лікарською формою одиничної дози може ТГФ в гексані) Чисті фракції об'єднували, випарюбути, наприклад, сама капсула чи таблетка, або це вали, і отриману олію перекристалізовували з суможе бути відповідна КІЛЬКІСТЬ будь-якої з таких міші ізопропиловий ефір/циклогексан при співвідкомпозицій в упакованій формі ношенні 20 80, з отриманням означеного в заголовку продукту у вигляді суміші E/Z ізомерів Наведені далі приклади ілюструють отримання (0,075г, 40%-вий вихід) та біологічні активності типових сполук ВІДПОВІДНО 1 до цього винаходу Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 1,65 (ЗН, 6Приклад 1 СН3С=С), 1,75 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,13 (ЗН, 4131-0 - (Триетилсиліл)-42-оксорапаміцин ОСНз), 3,34 (ЗН, 7-ОСНз), 3,41 (ЗН, 32-ОСН3) 13 Стадія А 31-0 - (Триетилсиліл) рапаміцин С ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 215,28, 208,17, До розчину рапаміцину (15,39г, 16,84ммоль) та 169,26, 166,72, 158,83, 140,60, 140,07, 135,95, 2,6-лютидину (7,65г, 75,76мл) у діхлорметані 135,67, 133,56, 130,18, 129,47, 126,62, 126,43, (100мл) при 0°С додавали краплями триетилсилі98,48, 86,33, 83,73, 84,30, 78,90, 67,17, 59,29, лтрифторметансульфонат (10г, 37,88ммоль) про59,13, 57,51, 55,93, 55,88, 51,234, 46,58, 46,04, тягом ЗО хвилин Отриману суміш перемішували 44,19, 41,47, 40,65, 40,19, 38,93, 38,41, 37,41, при 0°С протягом ще 90 хвилин та фільтрували 35,08, 33,78, 33,24, 32,05, 32,00, 31,82, 31,21, Фільтрат розбавляли етилацетатом (500мл), про30,92, 27,21, 27,05, 26,89, 25,27, 22,84, 21,97, мивали водою (3 х 250мл) й розсолом (1 х ЮОмл), 21,62, 21,46, 20,64, 16,32, 16,22, 16,09, 15,99, висушували (MgSO4) та випарювали досуха 14,74, 13,60, 13,18, 13,10, 10,33, 10,15, Отриманий матеріал повторно розчиняли в безвоМС (негативи, іон FAB, m/z) 926 [М], 590, 334 дному ТГФ (40мл), охолоджували до 0°С й обробАналіз Розраховано для C51H78NO13 C, 66,07, ляли крижаною оцтовою кислотою, охолодженою Н 8,48, N 3,02, до температури льоду, (150мл) та водою (80мл) Знайдено С 66,25, Н 8,67, N 3,03, Суміш перемішували протягом 3 годин при теСпосіб отримання Б мпературі 0°С, розбавляли етилацетатом (500мл) і Стадія А 31 -О-(Триетилсиліл)-42-деоксо-42обережно доводили до рН 7-8 ЫаНСОз при 0°С (пдроксиімшо)рапаміцин Органічний шар промивали водою (2 х 250мл), За безводних умов суміш 31-О-(триетилсиліл)розсолом (1 х ЮОмл), сушили (MgSO4) та випарю42-оксорапаміцину з Прикладу 1 (0,105г, вали досуха з отриманням продукту, означеного в 0,102ммоль), пдрохлориду пдроксиламшу (7,6мг, заголовку з КІЛЬКІСНИМ ВИХОДОМ 0,109ммоль) та ацетату натрію (12,5мг, 1 Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 1,66 (ЗН, 60,153ммоль) у безводному метанолі (5мл) переміСН3С=С), 1,75 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,14 (ЗН, 41шували протягом ЗО хвилин Суміш фільтрували і ОСНз), 3,27 (ЗН, 7-СНзО), 3,40 (ЗН, 32-СН3О), 4,12 отриманий фільтрат упарювали досуха Залишок (м, 1Н, 31-СН) повторно розчинювали в етилацетаті (50мл), промивали водою (2 х 50мл) та розсолом (1 х 50мл), МС (негативи, іон FAB, m/z) 1027,4 [М]-, 589,3 висушували (MgSO4) й випарювали досуха з отриСтадія Б 31-О-(Триетилсиліл)-42-оксораманням означеного в заголовку продукту у вигляді паміцин суміші E/Z ізомерів (0,114г, 94%-вий вихід) Розчин 31-О-(триетилсиліл)рапаміцину 1 (17,32г, 16,84ммоль) і перюдинана Десс-Мартина Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 0,47-0,55 (м, 9Н), (8,65г, 20,35ммоль) у безводному діхлорметані 0,84-0,88 (м, 6Н), 1,65 (ЗН, 6-СН3С=С), 1,75 (ЗН, (150мл) перемішували в атмосфері азоту протягом 30-СН3С=С), 3,14 (ЗН, 41-ОСНз), 3,26 (ЗН, 75 годин Отриману суміш фільтрували, фільтрат ОСНз), 3,44 (ЗН, 32-СНзО) розбавляли етилацетатом (500мл), промивали МС (негативи, іон FAB, m/z) 1040,7 [М] водою (3 х 250мл) й розсолом (1 х ЮОмл), висуСтадія Б 42-деоксо-42-(пдроксиімшо) рапамішували (MgSO4) і випарювали досуха Неочищецин 49815 18 17 1 Розчин 31-О-(триетилсиліл)-42-деоксо-42Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 1,66 (ЗН, 6(пдроксиїміно) рапаміцину (1г, 0,974ммоль) в 20мл СН3С=С), 1,75 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,14 (ЗН, 4110% розчину п-толуолсульфокислоти в метанолі ОСНз), 3,33 (ЗН, 7-ОСНз), 3,43 (ЗН, 32-ОСН3) 13 перемішували протягом однієї години в присутносС ЯМР (CDCI3, 400МГц) d 215,17, 208,11, ті азоту при 0°С Розчин розбавляли етилацетатом 169,67, 169,30, 166,73, 164,31, 164,25, 156,37, і гасили 5% водним ЫаНСОз, Органічний шар про140,05, 138,34, 137,28, 136,07, 135,78, 135,09, мивали водою, розсолом, сушили (MgSO4) та ви133,51, 133,25, 132,17, 130,61, 130,22, 130,05, парювали досуха, з отриманням означеного в за129,40, 127,33, 126,81, 126,66, 126,57, 126,44, головку продукту, ідентичного матеріалу, що його 125,76, 125,50, 125,22, 98,70, 98,50, 84,73, 84,34, описано у способі отримання А (0,812г, вихід 84,28, 82,70, 78,92, 68,91, 67,21, 59,29, 57,93, 89,9%) 57.82, 56,34, 56,31, 56,16, 56,09, 55,85, 55,56, Результати, отримані в стандартних фармако52,00, 51,25, 46,55, 46,06, 45,68, 44,54, 44,18, логічних тестах 41,92, 41,83, 41,48, 41,40, 41,26, 41,14, 41,01, 40,88, 40,57, 40,42, 40,35, 40,19, 39,77, 39,30, LAF ІС50 3,88нмоль LAF відношення 0,85 39.17, 38,97, 38,83, 38,66, 38,59, 37,98, 37,45, Час життєздатності шкірного трансплантата 37,26, 35,53, 35,13, 34,88, 34,79, 34,72, 34,57, 10,8 ±0,4 33.83, 33,49, 33,37, 33,31, 33,24, 32,19, 32,03, Приклад З 31,98, 31,85, 31,70, 31,64, 31,20, 27,35, 27,21, 42-деоксо-42-(пдроксиамшо)рапаміцин 27,03, 26,80, 25,23, 25,04, 24,45, 24,31, 21,62, До розчину 31-О-(триетилсиліл)-42-деоксо-4221,51, 21,37, 20,99, 20,74, 20,63, 16,69, 16,30, (пдроксиімшо)рапаміцину Прикладу 2, Способу 16.18, 15,95, 15,80, 15,71, 15,03, 14,57, 13,88, отримання Б, стадії А (2,08г, 2ммоль) в безводно13,64, 13,18, 13,13, 13,07, 10,16, му метанолі (75мл) в атмосфері азоту при 0°С одМС (негативи, іон FAB, m/z) 969,8 [М], 925,8 ночасно додавали протягом ЗО хвилин 1 н розчин [M-CONH2]-, 590,6, ціанобороводню натрію в тетрапдрофурані (2мл) і Результати, отримані в стандартних фармако4 н розчин НС1 в діоксані так, щоб підтримувати логічних випробуваннях рН на рівні 3,5 Суміш перемішували протягом ЗО LAF ІС50 2,00нмоль хвилин, розбавляли ЕЮ Ас, і промивали 2,5% NaLAF відношення 0,25 НСОз (ЮОмл), водою (2 х 250мл) та розсолом (1 х Час життєздатності шкірного трансплантата 250мл), висушували (MgSC^) і випарювали досуха 9,5 ±1,1 з отриманням означеного в заголовку продукту у Приклад 5 вигляді суміші ізомерів (0,763г, 41%-вий вихід) 42-[О-(Піридин-2-ілметил)]-оксим 42-деокси1 Н ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 1,60 і 1,63 (ЗН, 642-оксорапаміцину СН3С=С), 1,72 і 1,74 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,09 і 3,11 Сполучення, означене в заголовку, одержува(ЗН, 41-ОСНз), 3,28, 3,32, 3,34, 3,36 (6Н, 7- і 32ли у спосіб отримання Б Прикладу 2, за винятком ОСНз) заміни пдрохлориду гідроксил аміну пдрохлоридом О-(піридин-2-ілметил)-пдроксиламшу (вихід МС (негативи, іон FAB, m/z) 928,4 [М], 590,3, 71,1%) 336,6 1 Аналіз Розраховано для C51H80N2O13 C 65,92, Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) д 1,654 (ЗН, 6Н8.68, N3,01, СН3С=С), 1,751 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,138 (ЗН, 41ОСНз), 3,334 (ЗН, 7-ОСНз), 3,338 (ЗН, 32-ОСН3), Знайдено С 65,36, Н 8,53, І 2,82, 7,17-8,58 (мм, 4Н, Harom) Результати, отримані в стандартних фармако13 логічних випробуваннях СЯМР(СОСІ 3 , 400МГц) 5 1,58, 96 (42-C=NOLAF ІС50 5,60нмоль ) LAF відношення 0,18 МС (негативи, іон FAB, m/z) 1017,5 [М], 590,4, Час життєздатності шкірного трансплантата 425,3, 9,6 ±0,0 Результати, отримані в стандартних фармакоПроцентна зміна в групі з ад'ювантним артрилогічних випробуваннях том у порівнянні з контрольною групою -84% LAF ІС50 1,50нмоль Приклад 4 LAF відношення 0,40 42-деокси-42-оксорапаміцин-42-ОЧас життєздатності шкірного трансплантата карбамоілоксим 7,8 ±0,8 Суміш 42-деоксо-42-(оксиімшо)рапаміцину Процентна зміна в групі з ад'ювантним артриПрикладу 2 (0,813г, 0,876ммоль), ціанату натрію том в порівнянні з контрольною групою -53% (0,228г, 3,5), крижаної оцтової кислоти (8мл) і води Приклад 6 (8мл) перемішували протягом 1,5 годин в атмос42-[О-(Піридин-4-ілметил)]-оксим 42-деоксифері азоту Суміш розбавляли етилацетатом 42-оксорапаміцину (100мл) та гасили водним ЫаНСОз Органічний Сполучення, означене в заголовку, одержувашар промивали водою, розсолом, сушили (MgSO4) ли у Спосіб отримання Б Прикладу 2, за винятком і випарювали досуха Неочищений продукт розчизаміни пдрохлориду пдроксиламшу діпдрохлориняли в діхлорметані, попередньо абсорбували на дом О-(піридин-4-ілметил)-пдроксиламшу (вихід силікагелі Merck 60 і очищали за допомогою 34,5%) 1 флеш-хроматографм ступінчатий градієнт від 50% Н ЯМР (CDCI3, 400МГц) 5 1,653 (ЗН, 6етилацетату в гексані до чистого етилацетату з СН3С=С), 1,753 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,153 (ЗН, 41отриманням означеного в заголовку продукту у ОСНз), 3,29 (2хЗН, 7-ОСНз і 32-ОСН3), 7,2 (м, 2Н, вигляді суміші E/Z ізомерів (0,289г, 34%-вий вихід) Harom), 8,52 (m, 2H, Harom) 20 19 49815 МС (негативи, юн FAB, m/z) 1017,2 [M], 590,2, Сполучення, означене в заголовку, одержува425,1, ли ВІДПОВІДНО до Способу отримання Б Прикладу 2, за винятком заміни пдрохлориду пдроксиламшу Результати, отримані в стандартних фармакопдрохлоридом О-(алліл)-пдроксиламшу (вихід логічних випробуваннях 57,1%) LAF ІС50 1,80нмоль 1 LAF співвідношення 0,31 Н ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 1,655 (ЗН, 6СН3С=С), 1,751 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,139 (ЗН, 41Час життєздатності шкірного трансплантата ОСНз), 3,336 (ЗН, 7-ОСНз), 3,395 (ЗН, 32-ОСН3), 8,0 ±0,9 4,60 (м, 2Н, =NOCH2C=, при С-42), 5,17-5,31 (м, Приклад 7 2Н, -С=СН2, при С-42) 5,94-6,03 (м, 1Н, -ССН=С -, 42-[О-(трет-бутил)]-оксим 42-деокси-42-оксопри С-42) рапаміцину 13 Сполучення, означене в заголовку, отримуваС ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 158,1 (42-C=N-O-) ли ВІДПОВІДНО до Способу отримання Б Прикладу МС (негативи, іон FAB, m/z) 996,5 [М], 590,3, 2, за винятком заміни пдрохлориду пдроксиламшу 374,2, пдрохлоридом О-(трет-бутил)-пдроксиламшу (виРезультати отримані в стандартних фармакохід 26,6%) логічних випробуваннях 1 Н ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 1,28 (9Н, третLAF 43%-ве пригнічення при 0,1мкмоль бутил), 1,654 (ЗН, 6-СН3С=С), Приклад 10 1,75 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,136 (ЗН, 41-ОСН3), 42-[О-(проп-2-иніл)]-оксим 42-деокси-42-оксо3,336 (ЗН, 7-ОСНз), 3,37 (ЗН, 32-ОСН3) рапаміцину 13 Сполучення, означене в заголовку, одержуваС ЯМР (CDCI3l 400МГц), 5 155,89 (42-C=NO-) ли ВІДПОВІДНО до Способу отримання Б Прикладу МС (негативи, іон FAB, m/z) 982,5 [М], 590,3, 2, за винятком заміни пдрохлориду пдроксиламшу 390,2, пдрохлоридом О-(проп-2-иніл)-пдроксиламіну (виРезультати, отримані в стандартних фармакохід 35,4%) логічних випробуваннях 1 Н ЯМР (CDCIg, 400МГц) 5 1,66 (ЗН, 6LAF 49%-ве пригнічення при 0,1мкмоль СН3С=С), 1,75 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,13 (ЗН, 41Приклад 8 ОСНз), 3,33 (ЗН, 7-ОСНз), 3,415 (ЗН, 32-ОСН3), 42-[О-(фенілметил)]-оксим 42-деокси-42-оксо4,69 (2Н, =NOCH2C, приС-42) рапаміцину 13 Сполучення, означене в заголовку, отримуваС ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 159,5 (42-C=NO-) ли ВІДПОВІДНО до способу отримання Б Прикладу 2, МС (негативи, іон FAB, m/z) 964,2 [М], 590,2, за винятком заміни пдрохлориду гідроксил аміну 372,1, пдрохлоридом О-(фенілметил)-пдроксиламшу Результати, отримані в стандартних фармако(вихід 29,9%) логічних випробуваннях 1 Н ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 1,652 (ЗН, 6LAF ІС50 8,13нмоль СН3С=С), 1,747 (ЗН, 30-СН3С=С), 3,136 (ЗН, 41LAF відношення 0,08 ОСНз), 3,332 (ЗН, 7-ОСНз), 3,35 (ЗН, 32-ОСН3), Час життєздатності шкірного трансплантата 5,134 (2H,=NOCH2-, при С-42), 7,27-7,37 (м, 5Н, 8,0 ±1,1 На гот) Приклад 11 13 42-деоксо-42-[О-(піридин-4-ілметил)]-пдроксиС ЯМР (CDCI3l 400МГц) 5 158,48 (42-C=NO-) амшорапаміцин МС (негативи, іон FAB, m/z) 1016,2 [М], 590,2, Сполучення, означене в заголовку, одержува424,1, ли ВІДПОВІДНО до Прикладу 3, за винятком заміни Результати, отримані в стандартних фармако31-О-(триетилсиліл)-42-деоксо-42логічних тестах пдроксиїмшорапаміцину 42-[О-(піридин-4-ілмеLAF ІС50 21,67нмоль тил)]-оксимом 42-деоксо-42-оксорапаміцину ПриLAF відношення 0,03 кладу 6, Приклад 9 МС (негативи, іон FAB, m/z) 1019,5 [М] 42-[О-(алліл)]-оксим 42-деокси-42-оксорапаміцину ДП «Український інститут промислової власності» (Укрпатент) вул Сім'ї Хохлових, 15, м Київ, 04119, Україна ( 0 4 4 ) 4 5 6 - 2 0 - 90 ТОВ "Міжнародний науковий комітет" вул Артема, 77, м Київ, 04050, Україна (044)216-32-71