Застосування n-(3-метокси-5-метилпіразин-2-іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2-іл]феніл)піридин-3-сульфонаміду для лікування злоякісного новоутворення та болю, пов’язаного з ним

1. Застосування N-(3-метокси-5-метилпіразин2-іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2-іл]феніл)піридин-3сульфонаміду або його фармацевтичнo прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування для лікування злоякісного новоутворення у теплокровної тварини, такої як людина. 2. Застосування сполуки за п. 1 або її фармацевтичнo прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування для зменшення атипової проліферації злоякісних клітин або індукування диференціації злоякісних клітин у теплокровної тварини, такої як людина. 3. Застосування сполуки за п. 1 або її фармацевтичнo прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування для індукування апоптозу в злоякісних клітинах у теплокровної тварини, такої як людина. 2 (19) 1 3 82071 4 нирки, щитовидної залози, легені, молочної залози запобігання метастазам у кістках у теплокровної або передміхурової залози, який утворює тварини, такої як людина. метастази в кістковому мозку. 20. Застосування сполуки за п. 1 або її 17. Застосування сполуки за п. 1 або її фармацевтичнo прийнятної солі для приготування фармацевтичнo прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування для лікарського засобу для застосування як інгібітора лікування метастазів у кістках у теплокровної метастазів у кістках і інгібітора інвазії у тварини, такої як людина. теплокровної тварини, такої як людина. 21. Застосування N-(3-метокси-5-метилпіразин-218. Застосування сполуки за п. 1 або її іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2-іл]феніл)піридин-3фармацевтично прийнятної солі для приготування сульфонаміду або його фармацевтичнo лікарського засобу для застосування як інгібітора прийнятної солі для приготування лікарського метастазів у кістках у теплокровної тварини, такої засобу для застосування для запобігання або як людина. лікування болю, пов'язаного з злоякісним 19. Застосування сполуки за п. 1 або її новоутворенням у теплокровної тварини, такої як фармацевтичнo прийнятної солі для приготування людина. лікарського засобу для застосування для Дана заявка стосується N-(3-метокси-5метилпіразин-2-іл)-2-(4-[1,3,4-оксадіазол-2іл]феніл)піридин-3-сульфонаміду або його фармацевтично прийнятної солі, надалі "сполука (І)", і його застосування для лікування злоякісного новоутворення в теплокровної тварини, такої як людина. Винахід також стосується застосування фармацевтичних композицій, які містять сполуку (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, у способі лікування злоякісного новоутворення в теплокровної тварини, такої як людина, і застосування сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування в способі лікування злоякісного новоутворення в теплокровної тварини, такої як людина. Винахід також стосується застосування фармацевтичних композицій, які містять сполуку (І) або її фармацевтично прийнятну сіль, у способі лікування болю в теплокровної тварини, такої як людина, і застосування сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі для приготування лікарського засобу для застосування для лікування болю в теплокровної тварини, такої як людина. Від злоякісних новоутворень, за приблизними підрахунками, страждають 10млн. людей в усьому світі. Ці дані включають захворюваність, поширення і смертність. В Азії виявлено понад 4,4млн. випадків злоякісних пухлин, включаючи 2,5млн. випадків в Східній Азії, яка є регіоном світу з найвищим коефіцієнтом захворюваності. Для порівняння, у Європі виявлено 2,8млн. випадків, у Північній Америці 1,4млн. випадків і в Африці - 627 тисяч випадків. Наприклад, у Великобританії й у США більш ніж в однієї людини з трьох розвивається злоякісне новоутворення протягом життя. У США злоякісні новоутворення викликають смерть, відповідно до підрахунків, близько 600 тисяч людей у рік і є причиною смертності в одному з чотирьох випадків, займаючи друге місце за рівнем смертності після серцевих захворювань, а також є другою причиною смертності дітей у віці від 1 до 14 років. В даний час у США щорічно виявляється близько 1млн. 380 тисяч нових випадків захворювань, за винятком близько 900 тисяч випадків немеланомних новоутворень шкіри (базальних і сквамозних клітин). Рак також є основною причиною захворюваності у Великобританії, і в 1997 році було зареєстровано близько 260 тисяч нових випадків (крім немеланомного раку шкіри). Злоякісні пухлини є захворюванням, яке уражує переважно людей літнього віку, близько 65% випадків захворювання виявляється в людей, старше 65. Оскільки очікується збільшення середньої тривалості життя у Великобританії майже в два рази в порівнянні із серединою дев'ятнадцятого століття, то ризик захворювання населення на рак зростає. Коефіцієнт смертності від інших за хворювань, які викликають смерть, таких як захворювання серця, в останні роки знижується, тоді як смертність від злоякісних новоутворень залишається відносно постійною. Це приведе до того, що в однієї людини з трьох протягом життя буде діагностовано злоякісне новоутворення і одна з чотирьох людей помре від раку. У людей до 75 років смертність від злоякісних новоутворень чисельно перевершує смертність від захворювань серцево-судинної системи, включаючи ішемічну хворобу серця й удар. У 2000 році було зареєстровано 151 тисяч 200 смертей від раку. Більше однієї п'ятої (22%) цих смертей було викликано раком легень і четверта частина (26%) - раком ободової кишки, молочної залози і передміхурової залози. В усьому світі захворюваність і смертність внаслідок певних типів злоякісних новоутворень (шлунка, молочної залози, передміхурової залози, шкіри і т.д.) характеризуються значними територіальними відмінностями, які пояснюють расовими, культурними впливами і, особливо, впливом довкілля. Виявлено понад 200 різних типів злоякісних новоутворень, але чотири основні типи, а саме легень, молочної залози, передміхурової залози і прямої кишки, складають більше половини всіх діагностованих випадків раку 5 82071 6 у Великобританії і США. Рак передміхурової захворювань медичних станів, включаючи залози займає четверте місце за поширеність "гіпертонію, легеневу гіпертонію, серцево-судинне серед злоякісних захворювань у чоловіків в усьому захворювання або порушення мозкового світі і щорічно діагностується 400 тисяч нових кровообігу і захворювання нирок". Заявлений випадків захворюваності, що становить 3,9% усіх перелік включає наступні хворобливі стани: нових виявлених випадків раку. "гіпертонію, легеневу гіпертонію, застійну серцеву Зараз для лікування злоякісних новоутворень недостатність, дисліпідемію, атеросклероз, застосовують хірургічне видалення, променеву рестеноз, гостру і хронічну ниркову недостатність, терапію з зовнішнім опроміненням і/або системну ішемічний удар, субарахноїдальний крововилив, хіміотерапію. При одних видах раку вони є значно переміжну кульгавість, загрозливу ішемію кінцівки, ефективними, однак при інших видах вони не астму або недостатність органа після загального ефективні. Існує очевидна потреба в новому хірургічного втручання або трансплантації11. терапевтичному лікуванні. Немає ні натяку чи припущення в [WO 96/40681], Нестероїдні протизапальні лікарські засоби що ця сполука може мати значну корисну (НПЗЗ) і опіати є основними класами лікарських ефективність, метаболічні і токсикологічні профілі, засобів для послаблення болю. Однак обидва ці що робить її е фективним протираковим засобом. У класи мають небажані побічні дії. Відомо, що НПЗЗ дійсності, винахідники даного винаходу викликають подразнення шлунково-кишкового несподівано виявили, що сполука (І) є тракту, а опіати викликають залежність. Таким специфічним антагоністом ендотеліну-А (ЕТА) і не чином, також існує очевидна потреба в новому виявляє вимірної активності стосовно ендотелінулікуванні для усунення і лікування болю. В (ЕТВ). Останнім часом антагоністи рецептора Було показано, що рецептор ЕТA за ендотеліну А були ідентифіковані як ефективні допомогою різних механізмів є більш важливим засоби при лікуванні злоякісних новоутворень патологічним рецептором із двох ідентифікованих [Cancer Research, 56, 663-668, 15-е лютого, 1996 і рецепторів ендотеліну в онкології: при зниженні Nature Medicine, том 1, №9, вересень 1999, 944проліферації атипових клітин [Bagnato і ін., (1995), 949]. Clin Cancer Res 1, 1059-1066]; як Ендотеліни являють собою сімейство антиапоптотичний засіб [Wu Wang і ін., (1997), ендогенних пептидів, які складаються з 21 Biochem J,. 328, 733-737]; як антиангіогенний засіб амінокислоти, яке включає три ізоформи: [Spinella і ін., (2002), J. Biol. Chem, 227(31), 27850ендотелін-1 (ЕТ-1), ендотелін-2 і ендотелін-3. 27855]; і як інгібітор метастаз у кістках [Guise і ін., Ендотеліни утворюються шляхом розщеплення ASCO (2000) реферат 331 і Nelson, і ін., (1999), ендотелінперетворювальним ферментом зв'язку Urology 53,1063-1069], і крім того, при Trp21-Val22 їх відповідних проендотелінів. опосередкуванні болю, який звичайно Ендотеліни є одними з найбільш відомих супроводжує злоякісне новоутворення. Було ефективних судинозвужувальних засобів і показано [Dahlof і ін., (1990), J Hypertens, 8, 811характеризуються значною тривалістю дії. Також 817], що високі дози ендотеліну-1 викликають біль вони мають багато інших дій, включаючи дію на і больову сенсибілізацію, але ця дія може проліферацію клітин, мітоз, транссудацію і інгібуватися антагоністом ЕТА [напр., Davar і ін., хемотаксис, а також взаємодіють з багатьма (1998), Neuroreport 9, 2279-2283 і De Mello і ін., іншими вазоактивними засобами. (1998), Pain, 77, 261-269]. Отже, в іншому варіанті Ендотеліни секретуються багатьма тканинами здійснення винаходу, сполука (І) вводиться для і клітинами, включаючи ендотелій судин, судини запобігання або лікування болю, гладеньких м'язів, нирки, печінку, матку, ди хальні опосередкованого ендотеліновою системою, шляхи, кишечник і лейкоцити. Секреція може особливо зв'язаного з підвищеними рівнями стимулюватися гіпоксією, вібраційним стресом, ендотеліну-1. фізичною травмою і багатьма гормонами та Навпаки, несподівано виявлені дані [напр., цитокінами. Підвищені рівні ендотеліну були Cattaruzza і ін., (2002), FASEB J. 14(7), 991-998 і виявлені при багатьох хворобливих станах у Okazawa і ін., (1998), J Biol Chem, 273, 12581людей, включаючи злоякісні новоутворення. 12592], що рецептор ЕТВ задіяний у передачу Даний винахід стосується несподіваного апоптотичного сигналу. Блокування виявлення того факту, що сполука (І) є проапоптотичних метаболічних шляхів при надзвичайно ефективним протираковим засобом. лікуванні злоякісного новоутворення може бути Сполука (І) описана як антагоніст рецептора небажаним, отже, сполука, яка специфічно ендотеліну в [WO 96/40681], і хоча з [WO 96/40681] націлена на рецептор ЕТA, у той час як не діє на відомо, що підвищені рівні ендотеліну виявлені рецептор ЕТВ, є надзвичайно корисною при при багатьох хворобливих станах у людей, лікуванні злоякісного новоутворення. Сполука (І) є включаючи певні види злоякісних новоутворень, такою сполукою. не було натяку чи припущення, що сполука може Сполука (І), яка специфічно діє на рецептор мати значну корисну ефективність, метаболічні і ЕТA, має багато переваг в порівнянні з токсикологічні профілі, що робить її ефективним антагоністами ендотеліну, які мають також вимірну протираковим засобом. У [WO 96/40681] дію на ЕТВ. Наприклад, сполука (І) може вводитися заявляється, що описані рецептори ендотеліну пацієнту без адміністратора або розпорядження застосовні тільки для серцево-судинних лікуючого лікаря, що здійснює необхідне захворювань. Наприклад, у вступі вказується, що титрування дози сполуки (І) залежно від симптомів ці сполуки придатні для лікування або активності ЕТВ, що виявляються, (наприклад 7 82071 8 набряку). Більш того, потенційно можуть фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з вводитися великі дози, оскільки не виявляється фармацевтично прийнятним розріджувачем або побічних дій, зв'язаних з ЕТВ. носієм для застосування для зменшення атипової Іншим недоліком інгібування ЕТВ є те, що воно проліферації злоякісних клітин або індукування викликає підвищення концентрації ендотеліну в диференціації злоякісних клітин у теплокровної плазмі. Потенційно протягом курсу лікування для тварини, такої як людина. змішаного ЕТA/ЕТВ інгібітора або сполуки, яка В іншому варіанті здійснення винаходу селективно націлена на рецептор ЕТA, однак усезабезпечується застосування сполуки (І) або її таки має вимірну активність відносно ЕТВ, може фармацевтично прийнятної солі для індукування виникати необхідність у збільшенні великих доз апоптозу в злоякісних клітинах у теплокровної інгібітора для досягнення такої ж корисної дії тварини, такої як людина. відносно ЕТA. Специфічний інгібітор ЕТА дозволяє В іншому варіанті здійснення винаходу уникнути цієї проблеми. забезпечується застосування сполуки (І) або її Таким чином, відповідно до даного винаходу фармацевтично прийнятної солі для приготування забезпечується сполука (І) або її фармацевтично лікарського засобу для застосування для прийнятна сіль для застосування для лікування індукування апоптозу в злоякісних клітинах у злоякісного новоутворення в теплокровної теплокровної тварини, такої як людина. тварини, такої як людина. В іншому варіанті здійснення винаходу В одному варіанті здійснення, посилання на забезпечується спосіб індукування апоптозу в сполуку (І) або її фармацевтично прийнятну сіль злоякісних клітинах, який передбачає введення стосуються лише однієї сполуки. В іншому варіанті ефективної кількості сполуки (І) або її здійснення це посилання стосується фармацевтично прийнятної солі теплокровній фармацевтично прийнятної солі сполуки (І). тварині, такій як людина. Відповідно до подальшого варіанта здійснення Відповідно до подальшого варіанта здійснення даного винаходу, забезпечується сполука (І) або її винаходу забезпечується фармацевтична фармацевтично прийнятна сіль для приготування композиція, яка містить сполуку (І) або її лікарського засобу для застосування для фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з лікування злоякісного новоутворення в фармацевтично прийнятним розріджувачем або теплокровної тварини, такої як людина. носієм для застосування для індукування апоптозу Відповідно до подальшого варіанта здійснення в злоякісних клітинах у теплокровної тварини, винаходу забезпечується спосіб лікування такої як людина. злоякісного новоутворення, який передбачає В іншому варіанті здійснення винаходу введення ефективної кількості сполуки (І) або її забезпечується застосування сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі теплокровній фармацевтично прийнятної солі як тварині, такій як людина. антиангіогенного засобу і засобу, націленого на Відповідно до подальшого варіанта здійснення судини, у кровоносних судинах, які винаходу забезпечується фармацевтична кровопостачають злоякісні клітини, у теплокровної композиція, яка містить сполуку (І) або її тварини, такої як людина. фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятним розріджувачем або забезпечується застосування сполуки (І) або її носієм для застосування для лікування злоякісного фармацевтично прийнятної солі для приготування новоутворення в теплокровної тварини, такої як лікарського засобу для застосування як людина. антиангіогенного засобу і засобу, націленого на В іншому варіанті здійснення винаходу судини, у кровоносних судинах, які забезпечується застосування сполуки (І) або її кровопостачають злоякісні клітини, у теплокровної фармацевтично прийнятної солі для зменшення тварини, такої як людина. атипової проліферації злоякісних клітин або В іншому варіанті здійснення винаходу індукування диференціації злоякісних клітин у забезпечується спосіб антиангіогенної дії і засобу, теплокровної тварини, такої як людина. націленого на судини, у кровоносних судинах, які В іншому варіанті здійснення винаходу кровопостачають злоякісні клітини, який забезпечується застосування сполуки (І) або її передбачає введення ефективної кількості фармацевтично прийнятної солі для приготування сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі лікарського засобу для застосування для теплокровній тварині, такій як людина. зменшення атипової проліферації злоякісних Відповідно до подальшого варіанта здійснення клітин або індукування диференціації злоякісних винаходу забезпечується фармацевтична клітин у теплокровної тварини, такої як людина. композиція, яка містить сполуку (І) або її В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з забезпечується спосіб зменшення атипової фармацевтично прийнятним розріджувачем або проліферації злоякісних клітин або індукування носієм для застосування як антиангіогенного диференціації злоякісних клітин, який передбачає засобу і засобу, націленого на судини, у введення ефективної кількості сполуки (І) або її кровоносних судинах, які кровопостачають фармацевтично прийнятної солі теплокровній злоякісні клітини, у теплокровної тварини, такої як тварині, такій як людина. людина. Відповідно до подальшого варіанта здійснення Під терміном "засіб, націлений на судини", винаходу забезпечується фармацевтична мають на увазі, що місце дії сполуки (І) скоріше композиція, яка містить сполуку (І) або її 9 82071 10 буде знаходиться в самій судинній мережі, ніж у прийнятної солі теплокровній тварині, такій як пухлині. людина. В іншому варіанті здійснення винаходу Відповідно до подальшого варіанта здійснення забезпечується застосування сполуки (І) або її винаходу забезпечується фармацевтична фармацевтично прийнятної солі як композиція, яка містить сполуку (І) або її антиангіогенного засобу в теплокровної тварини, фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з такої як людина. фармацевтично прийнятним розріджувачем або В іншому варіанті здійснення винаходу носієм для застосування як інгібітора метастаз у забезпечується застосування сполуки (І) або її кістках у теплокровної тварини, такої як людина. фармацевтично прийнятної солі для приготування В іншому варіанті здійснення винаходу лікарського засобу для застосування як забезпечується застосування сполуки (І) або її антиангіогенного засобу в теплокровної тварини, фармацевтично прийнятної солі для запобігання такої як людина. метастаз у кістках у теплокровної тварини, такої як В іншому варіанті здійснення винаходу людина. забезпечується спосіб антиангіогенної дії, який В іншому варіанті здійснення винаходу передбачає введення ефективної кількості забезпечується застосування сполуки (І) або її сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі фармацевтично прийнятної солі для приготування теплокровній тварині, такій як людина. лікарського засобу для застосування для Відповідно до подальшого варіанта здійснення запобігання метастаз у кістках у теплокровної винаходу забезпечується фармацевтична тварини, такої як людина. композиція, яка містить сполуку (І) або її В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з забезпечується спосіб запобігання метастаз у фармацевтично прийнятним розріджувачем або кістках, який передбачає введення ефективної носієм для застосування як антиангіогенного кількості сполуки (І) або її фармацевтично засобу в теплокровної тварини, такої як людина. прийнятної солі теплокровній тварині, такій як В іншому варіанті здійснення винаходу людина. забезпечується застосування сполуки (І) або її Відповідно до подальшого варіанта здійснення фармацевтично прийнятної солі як інгібітора винаходу забезпечується фармацевтична метастаз у кістках і інгібітора інвазії в теплокровної композиція, яка містить сполуку (І) або її тварини, такої як людина. фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятним розріджувачем або забезпечується застосування сполуки (І) або її носієм для застосування для запобігання метастаз фармацевтично прийнятної солі для приготування у кістках у теплокровної тварини, такої як людина. лікарського засобу для застосування як інгібітора В іншому варіанті здійснення винаходу метастаз у кістках і інгібітора інвазії в теплокровної забезпечується застосування сполуки (І) або її тварини, такої як людина. фармацевтично прийнятної солі для лікування В іншому варіанті здійснення винаходу метастаз у кістках у теплокровної тварини, такої як забезпечується спосіб інгібування метастаз у людина. кістках і інгібування інвазії, який передбачає В іншому варіанті здійснення винаходу введення ефективної кількості сполуки (І) або її забезпечується застосування сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі теплокровній фармацевтично прийнятної солі для приготування тварині, такій як людина. лікарського засобу для застосування для Відповідно до подальшого варіанта здійснення лікування метастаз у кістках у теплокровної винаходу забезпечується фармацевтична тварини, такої як людина. композиція, яка містить сполуку (І) або її В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятну сіль в сполученні з забезпечується спосіб лікування метастаз у фармацевтично прийнятним розріджувачем або кістках, який передбачає введення ефективної носієм для застосування як інгібітора метастаз у кількості сполуки (І) або її фармацевтично кістках і інгібітора інвазії в теплокровної тварини, прийнятної солі теплокровній тварині, такій як такої як людина. людина. В іншому варіанті здійснення винаходу Відповідно до подальшого варіанта здійснення забезпечується застосування сполуки (І) або її винаходу забезпечується фармацевтична фармацевтично прийнятної солі як інгібітора композиція, яка містить сполуку (І) або її метастаз у кістках у теплокровної тварини, такої як фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з людина. фармацевтично прийнятним розріджувачем або В іншому варіанті здійснення винаходу носієм для застосування для лікування метастаз у забезпечується застосування сполуки (І) або її кістках у теплокровної тварини, такої як людина. фармацевтично прийнятної солі для приготування В подальшому варіанті здійснення винаходу лікарського засобу для застосування як інгібітора забезпечується інгібування, лікування і/або метастаз у кістках у теплокровної тварини, такої як запобігання метастаз у кістках, як описано в людина. даному винаході, де метастази в кістках В іншому варіанті здійснення винаходу виникають наслідок раку нирки, щитовидної забезпечується спосіб інгібування метастаз у залози, легень, молочної залози або кістках, який передбачає введення ефективної передміхурової залози. кількості сполуки (І) або її фармацевтично В іншому варіанті здійснення винаходу забезпечується застосування сполуки (І) або її 11 82071 12 фармацевтично прийнятної солі для запобігання яєчників, раку молочної залози, раку прямої кишки, або лікування болю, зв'язаного з підвищеним раку передміхурової залози, раку сечового міхура, виробленням ендотеліну-1 у теплокровної меланоми, раку легені - недрібноклітинного раку тварини, такої як людина. легені (NSCLC) і дрібноклітинного раку легені В іншому варіанті здійснення винаходу (SCLC), раку шлунка, раку голови і шиї, раку нирки, забезпечується застосування сполуки (І) або її лімфоми і лейкозу. Більш переважно воно фармацевтично прийнятної солі для приготування стосується раку передміхурової залози. Крім того, лікарського засобу для застосування для воно переважно стосується SCLC, NSCLC, раку запобігання або лікування болю, зв'язаного з прямої кишки, раку яєчників і/або раку молочної підвищеним виробленням ендотеліну-1 у залози. Крім того, воно більш переважно теплокровної тварини, такої як людина. стосується SCLC. Крім того, воно більш переважно В іншому варіанті здійснення винаходу стосується NSCLC. Крім того, воно більш забезпечується спосіб лікування болю, зв'язаного переважно стосується раку прямої кишки. Крім з підвищеним виробленням ендотеліну-1, який того, воно більш переважно стосується раку передбачає введення ефективної кількості яєчників. Крім того, воно переважно стосується сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі раку молочної залози. Також воно більш теплокровній тварині, такій як людина. переважно стосується раку сечового міхура, раку Відповідно до подальшого варіанта здійснення стравоходу, раку шлунка, меланоми, раку шийки винаходу забезпечується фармацевтична матки і/або раку нирки. Додатково воно стосується композиція, яка містить сполуку (І) або її раку ендометрію, печінки, шлунка, щитовидної фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з залози, прямої кишки і/або головного мозку. В фармацевтично прийнятним розріджувачем або іншому варіанті здійснення винаходу, злоякісне носієм для застосування для запобігання або утворення не являє собою меланому. В іншому лікування болю, зв'язаного з підвищеним варіанті здійснення винаходу переважно злоякісне виробленням ендотеліну-1 у теплокровної новоутворення знаходиться на метастатичній тварини, такої як людина. стадії і більш переважно рак утворює метастази в В іншому варіанті здійснення винаходу кістках. В подальшому варіанті здійснення забезпечується застосування сполуки (І) або її винаходу переважно злоякісне новоутворення фармацевтично прийнятної солі для запобігання знаходиться на метастатичній стадії і більш або лікування болю в теплокровної тварини, такої переважно рак утворює метастази в шкірі. В як людина. подальшому варіанті здійснення винаходу В іншому варіанті здійснення винаходу переважно злоякісне новоутворення знаходиться забезпечується застосування сполуки (І) або її на метастатичній стадії і більш переважно рак фармацевтично прийнятної солі для приготування утворює метастази в лімфатичній системі. В лікарського засобу для застосування для подальшому варіанті здійснення винаходу запобігання або лікування болю в теплокровної злоякісне новоутворення знаходиться на тварини, такої як людина. неметастатичній стадії. В іншому варіанті здійснення винаходу Мається на увазі, що якщо злоякісне забезпечується спосіб лікування болю, який новоутворення знаходиться на метастатичній передбачає введення ефективної кількості стадії, то сполука (І) діє як на первинну пухлину, сполуки (І) або її фармацевтично прийнятної солі так і на метастази. Сполука (І) як запобігає теплокровній тварині, такій як людина. метастазам, а також їх лікує і інгібує. В іншому варіанті здійснення винаходу В одному варіанті здійснення винаходу, якщо забезпечується застосування сполуки (І) або її присутнє посилання на біль, то цей біль зв'язаний фармацевтично прийнятної солі для запобігання з підвищеними рівнями ендотеліну-1. В іншому або лікування болю, зв'язаного зі стимуляцією варіанті здійснення винаходу він являє собою біль, рецептора ЕТА, у теплокровної тварини, такої як зв'язаний із стимуляцією рецептора ЕТA, яка є людина. наслідком того, що інгібування ЕТВ приводить до В іншому варіанті здійснення винаходу атипової стимуляції ЕТA і/або підвищенню рівнів забезпечується застосування сполуки (І) або її ендотеліну-1. Переважно цей біль зв'язаний зі фармацевтично прийнятної солі для приготування злоякісним новоутворенням. Більш переважно, лікарського засобу для застосування для цей біль зв'язаний з раком передміхурової залози. запобігання або лікування болю, зв'язаного зі Відповідно до подальшого варіанта здійснення стимуляцією рецептора ЕТA, у теплокровної винаходу забезпечується фармацевтична тварини, такої як людина. композиція, яка містить сполуку (І) або її В іншому варіанті здійснення винаходу фармацевтично прийнятну сіль у сполученні з забезпечується спосіб лікування болю, зв'язаного фармацевтично прийнятним розріджувачем або зі стимуляцією рецептора ЕТA, який передбачає носієм для застосування для запобігання або введення ефективної кількості сполуки (І) або її лікування болю, зв'язаного зі стимуляцією фармацевтично прийнятної солі теплокровній рецептора ЕТA, у теплокровної тварини, такої як тварині, такій як людина. людина. Посилання на злоякісне новоутворення Додатково, сполука (І), як вважають, є переважно стосується раку стравоходу, мієломи, придатною для лікування і/або профілактики болю печінково-клітинного раку, раку підшлункової різного походження і причин, включаючи гострі, а залози, раку шийки матки, дифузійної ендотеліоми також хронічні больові стани. Прикладами є болі, кісток, нейробластоми, саркоми Капоши, раку викликані хімічними, механічними, променевими 13 82071 14 (включаючи сонячні), термічними (включаючи СБС: середовище без сироватки опіки), інфекційними або запальними тканинними Фігура 2: На цій фігурі графічно показане пошкодженнями або злоякісним новоутворенням, інгібування сполукою (і) індукованого ЕТ-1 післяопераційні болі, післяпологові болі, болі, фосфорилювання МАРК у клітинній лінії зв'язані з захворюваннями суглобів (такими як остеобластів MC3T3.E1/J1 також з дослідження 2. ревматоїдний артрит і остеоартрит), болю, зв'язані Наступні дослідження в умовах in vi vo і in vitro з захворюваннями зубів (такими як карієс зубів і можуть застосовуватися для визначення гінгівіт), міофасціальні болі і болі в нижніх ділянках ефективності сполуки (І) в онкології. спини, болі, зв'язані з захворюваннями кісток 1) Дослідження зв'язування рецептора (такими як остеопороз, злоякісна гіперкальціємія і ендотеліну людини деформуюча остеодистрофія) і болі, зв'язані із Рекомбінантні рецептори ЕТА або ЕТВ спортивними травмами і розтягненням. експресували в клітинах еритролейкозу мишей Також неврологічні больові стани (MEL) і підготовляли мембрани для дослідження центрального і периферичного походження конкурентного зв'язування, використовуючи ЕТ-1, можуть піддаватися лікуванню або запобіганню за мічений 125І, як радіоактивний ліганд. Інкубації допомогою сполуки (І). Прикладами таких здійснювали в трьох повторах у присутності больових станів є біль, зв'язаний з невралгією сполуки (І), 10-10-104Μ зі збільшенням концентрації трійчастого нерва, біль, зв'язаний з з напівлогарифмічним інтервалом і інгібування постгерпетичною невралгією (PHN), біль, зв'язування ЕТ-1 виражали як середнє зв'язаний з діабетичною моно/полі невропатією, геометричне значення pIC50 з 95% границями біль, зв'язаний із травмою нерва, біль, зв'язаний із довірчого інтервалу. травмою спинного мозку, біль, зв'язаний з Результати ушкодженням центрального штифта, біль, рІС50 (негативний логарифм концентрації зв'язаний з розсіяним склерозом, і біль, зв'язаний сполуки, необхідної для 50% витиснення ліганду) із хворобою Паркінсона. для сполуки (І) у рецепторі ЕТA становить 8,27 Інші больові стани вісцерального походження, [8,23-8,32] (n=4). Криві витиснення є стандартними такі як, викликані виразкою, дисменореєю, з подібними кутами нахилу. Сполука (І) не має ендометріозом, синдромом подразненої товстої вимірної спорідненість до рецептора ЕТВ при кишки, диспепсією, болями в ділянці таза і т.д. значеннях витиснення 1,2±0,7% (n=3) при також можуть піддаватися лікуванню або концентрації 10-4М, як випливає з фігури в межах запобіганню за допомогою сполуки (І). чутливості дослідження. Додатково, сполука (І), як вважають, буде Висновок придатною для лікування і/або профілактики Сполука (І) є лігандом із сильною додаткових видів болю, наприклад, комплексного спорідненістю для рецептора ЕТA людини і регіонарного больового синдрому, болю при специфічна до ЕТА, не маючи істотної звуженні судин/ішемічних болів (наприклад, спорідненості до рецептора ЕТВ. синдром Раунауда) і болю в кістках. 2) Сполука (І) для лікування метастатичного В подальшому варіанті здійснення винаходу раку: Дослідження остеобластів - інгібування забезпечується застосування сполуки (І) для сполукою (І) індукованої ЕТ-1 стимуляції МАРК перорального лікування невропатичного болю або Сполука (І) дійсно може бути корисною для больових станів центрального походження. лікування не лише первинних пухлин, але також і Придатні фармацевтично прийнятні солі метастатичних пухлин і патологічного утворення включають, наприклад, солі з лужним металом нових кісток у метастазі і навколо нього. Далі (таким як натрій, калій або літій), описане експериментальне підтвердження лужноземельними металами (такими як кальцій корисності сполуки (І) при лікуванні патології або магній), солі амонію і солі з органічними остеобластів у кістках. основами, які утворюють фізіологічно прийнятні Значна клінічна патологія спостерігається в катіони, такі як солі з метиламіном, метастатичних ділянках у кістках хворих із диметиламіном, триметиламіном, піперидином і прогресуючим раком передміхурової залози, які морфоліном. Крім того, придатні фармацевтично представлені у вигляді невідповідної стимуляції прийнятні солі включають фармацевтично остеобластів, тобто присутність метастаз пухлини прийнятні кислото-адитивні солі з галогенідами передміхурової залози в кістках приводить до водню, сірчаною кислотою, фосфорною кислотою утворення сітчастої структури нової кістки й у й органічними кислотами, такими як лимонна підсумку до підвищення щільності кістки навколо кислота, малеїнова кислота, метансульфонова метастазу [див. огляд у Cancer Metastasis Rev. кислота і п-толуолсульфонова кислота. 2001; 20(3-4): 333-49]. Можливий механізм, який Підписи на фігурах лежить в основі цієї патології, полягає у Фігура 1: Показане інгібування сполукою (І) вивільненні ЕТ-1 з метастатичної клітини індукованого ЕТ-1 фосфорилювання МАРК у передміхурової залози на початку утворення клітинній лінії остеобластів MC3T3.E1/J1 з вторинної пухлини в кістці. дослідження 2, описаного нижче, при вестернСтимуляція ЕТ-1 остеобластів описана як блотингу. Білки розганяли в гелі, потім переносили ключовий етап у патологічному утворенні нової на нітроцелюлозну мембрану, де їх досліджували кістки при метастазах раку передміхурової залози з первинними і вторинними антитілами. в кістках [Invest New Drugs. 2002; 20(2): 173-82]. Використані наступні скорочення: Показано, що ЕТ-1 діє безпосередньо, індукуючи CMC: середовище, яке містить сироватку проліферацію і диференціацію остеобласта, а 15 82071 16 також стимулює остеобласт до вироблення інших факторів росту за допомогою стимуляції Інгібування сполукою (І) індукованого рецептора ЕТA і наступного фосфорилювання ЕТ-1 фосфорилювання МАРК у клітинній лінії МАР кінази [Bone. 1999; 24(4): 315-20 і J Bone остеобластів MC3T3.E1/J1 Miner Res. 2002; 17(10): 1774-84]. При такому шляху стимуляції рецептора ЕТA викликається як Навколишнє середовище Середнє ріст кістки, так і виживання і ріст метастатичних Повне середовище 151,70 пухлинних клітин шляхом вивільнення факторів Середовище без сироватки 100,00 росту в локальне навколишнє середовище. Отже, ЕТ-1 100нМ 312,78 пухлинні клітини і клітини остеобластів у метастазі ЕТ-1 100нМ 369,85 беруть участь у "де фектному циклі", при якому їх + сполука (І) 20мкМ 109,18 проліферативні відповіді підтримують одна одну, + сполука (1) 10мкМ 105,15 долаючи при цьому нормальні регуляторні + сполука (1) 1мкМ 157,41 механізми, які контролюють і обмежують + сполука (1) 0,1мкМ 422,11 утворення кістки [Nat Rev Cancer. 2002; 2(8): 58493]. В експериментах, описаних нижче, автори даного винаходу, по-перше, підтверджують здатність ЕТ-1 стимулювати МАР кіназу в клітинах остеобластів. Ця стимуляція сприяє проліферації клітин і активує метаболічні шляхи, які, як відомо, є важливими для вивільнення факторів росту з остеобластів. Потім винахідники підтверджують, що сполука (І), ЕТА антагоніст, є ефективним антагоністом такої стимуляції ЕТ-1. Спосіб Клітинну лінію MC3T3. E1/J1 виділяли з батьківської клітинної лінії MC3T3-Е1 (доступної з Invitrogen), яка, у свою чергу, була отримана з C57BL/6 склепіння черепа новонароджених мишей. Лінія MC3T3 E1/J1 описана як лінія остеобластів. Для початку експериментів, описаних нижче, клітини MC3T3.E1/J1 поміщали в планшети при щільності 2,4х104 клітин/лунку (24 лунковий планшет) у середовище, яке містить сироватку, і інкубували протягом 48 годин. Клітини двічі промивали в PBS і повторно інкубували приблизно протягом 17 годин у середовищі, збідненому сироваткою. На цій стадії потім клітини інкубували зі сполукою (І) або без неї протягом 30 хвилин і після цього стимулювали фактором росту (PDGF або ЕТ-1) протягом 3 хвилин. Потім усе середовище видаляли і клітини лізували і зберігали при -20°С для електрофорезу/вестерн-блотингу, при яких локалізували проби, фосфориловані МАРК і фосфориловані Akt з анти-фосфо-р44/42 МАРК (Thr 202/204) і анти-фосфо АКТ (Ser 473) антитілами (обидва комерційно доступні від Cell Signalling Technology). Білкові смуги кількісно визначали шляхом денситометрії і виражали у вигляді довільних денситометричних одиниць. Рівні фосфорилованої МАРК нормували до загального рівня МАРК. Результати Стимуляція клітин ЕТ-1 протягом 3 хвилин приводить до підвищення фосфорилювання МАРК у клітинній лінії остеобластів MC3T3.E1/J1. Стимуляція клітин звичайним фактором росту, PDGF, також приводить до підвищення фосфорилювання МАРК. Сполука (І) інгібує індуковане ЕТ-1 фосфорилювання МАРК в остеобластах. Таблиця 1 Ці дані представлені на фігурах 1 і 2. Примітка: Вищеописаний експеримент не залежить від застосування, зокрема, клітинної лінії MC3T3.E1/J1, його можна здійснювати, наприклад, використовуючи комерційно доступну батьківську лінію MC3T3-Е1. 3) Сполука (І) як інгібітор ангіогенезу Активація рецептора ЕТA за допомогою ЕТ-1 вносить вклад у ріст пухлини і прогресування, опосередковані різними механізмами, і в літературі передбачається, що специфічне інгібування ЕТA буде забезпечувати сприятливий вплив на первинні пухлини, повністю відокремлюючи його дію на метастазування в кістках. Ці механізми включають анти-апоптоз, пряме і непряме стимулювання росту і стимулювання рухли вості клітин [Nat Rev Cancer. 2003; 3(2): 110-6]. Останнім часом зростає інтерес до ролі ЕТ-1, опосередкованої рецептором ЕТA, як основних учасників ангіогенезу (розвитку кровоносних судин) пухлини [J Cardiovasc Pharmacol. 2000; 36: S135-9]. В даний час при вивченні цих механізмом було показано, що рецептор ЕТА є важливим для вироблення сильнодіючого ангіогенного фактора VEGF [Life Sci. 1998; 63(6): 477-84] шляхом безпосередньої індукції фактора HIF-1a, викликаного гіпоксією [J Biol Chem. 2002; 277: 27850-5]. Значні літературні дані, які підтверджують роль ендотеліну й ЕТA рецептора в ангіогенезі пухлини, узагальнені в недавньому огляді Bagnato і Spinella [Trends Endocrinol Metab. 2003; 14(1): 44-50]. У дослідженні, описаному нижче, нами було показана на тваринних моделях дія сполуки (І) на ангіогенез, індукований новоствореними пухлинами після прищеплювання пухлинних клітин людини. Спосіб Пухлинні клітини прищеплювали внутрішньошкірно голим мишам, і їм один раз на добу перорально вводили 25 або 50мг/кг сполуки (І) або наповнювач, першу дозу вводили на наступний день після імплантації клітин і через 5 днів мишей забивали. Досліджували ділянку площею 1см 2 у центрі пухлини і підраховували кількість кровоносних судин, які розгалужуються в цій ділянці, які кровопостачають пухлину. Порівнювали кількість судин, які кровопостачають пухлину, у тварин, яким вводили тестований 17 82071 18 лікарський засіб і наповнювач і дію сполуки (І) судинозвужувального засобу опосередковується розраховували у вигляді відсотка зменшення рецепторами ендотеліну в ендотелії судин і в підрахованих кровоносних судин. суп утніх гладеньких м'язах. Результати Спосіб Сполука (І) викликає зменшення щільності Дослідження проводили для вивчення кровоносних судин навколо пухлин в оброблених здатності сполуки (І) протидіяти тварин у порівнянні з контрольними тваринами, судинозвужувальній дії ЕТ-1 за допомогою яким вводили наповнювач. Зменшення кількості рецепторів ендотеліну на цій моделі в здорових підрахованих кровоносних судин сполукою (І) чоловіків у віці від 18 до 65 років. Вісім суб'єктів спостерігається навколо пухлин, індукованих як одержували перорально однократну дозу 10 мг клітинними лініями ободової кишки, так і сполуки (І), 30мг сполуки (І) і плацебо в клітинними лініями передміхурової залози, у рандомізованному подвійному сліпому п'ятьох дослідженнях в умовах in vi vo. дослідженні принаймні впродовж 7 днів окремо. Звуження судин передпліччя у відповідь на дію ЕТ1 оцінювали між 2 і 4 годинами після введення Таблиця 2 сполуки (І). Інгібування ангіогенезу в первинних пухлинах, викликане сполукою (І) Результати У цілому, сполука (І) викликає статистично значимеІнгібування кількості кровоносних судин 1 у зменшення кровотоку в передпліччі Лінія клітин Тип пухлини Доза сполуки (I) (мг/кг) відповідь на введення ЕТ-1 у порівнянні з плацебо LOVO ободова кишка 50 20% (Р=0,001) (p=0,0210) залежно дози в межах LOVO ободова кишка 50 28%від (Р